CC BY
162
НАУЧНЫЕ ОБЗОРЫ
УДК 579.6: 616.9
03.02.00 - Общая биология 14.01.00 - Клиническая медицина 14.03.00 - Медико-биологические науки
О А.В. Алешкин, В.А. Алешкин, С.С. Афанасьев, Х.М. Галимзянов, О.В. Рубальский, Д.Л. Теплый, А.Х. Ахминеева, И.А. Киселева, С.С. Бочкарева, Е.Е. Рубальская, Е.О. Рубальский, К.Н. Смирнова, Э.Р. Зулькарнеев, А.Д. Теплый, 2016.
БАКТЕРИОФАГИ В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ. ЧАСТЬ I: ИСТОРИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ ДО ШИРОКОГО ПРИМЕНЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ
Алешкин Андрей Владимирович, доктор биологических наук, руководитель лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотреб-надзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: ava@gabri.ru.
Алешкин Владимир Андрианович, доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации, директор, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: info@gabrich.ru.
Афанасьев Станислав Степанович, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заместитель директора, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: afanasievss409.4@bk.ru.
Галимзянов Хал ил Мингалиевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Рубальский Олег Васильевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии и вирусологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-35-99, e-mail: rubalsky.innovation@gmail.com.
Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заслуженный работник высшей школы Российской Федерации, заведующий кафедрой физиологии, морфологии, генетики и биомедицины, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, каб. 217, тел.: (8512) 52-49-95 (доб. Ill), e-mail: dima.tepliy@yandex.ru.
Ахминеева Азиза Халиловна, доктор медицинских наук, доцент кафедры факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом последипломного образования, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-36-55, e-mail: asmafordec@mail.ru.
Киселева Ирина Анатольевна, научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: irina6804@mail.ru.
Бочкарева Светлана Сергеевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунобиологических препаратов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: cipl989@gmail.com.
Рубальская Елена Евгеньевна, заведующая лабораторией клинической лабораторной диагностики научно-исследовательского Института краевой инфекционной патологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: 8-908-616-90-66, e-mail: e.e.rubalskaya@gmail.com.
Рубальский Евгений Олегович, специалист по инновационной работе Центра поддержки технологий и инноваций, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121; младший научный сотрудник лаборатории прикладной иммунохимии, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: 8-961-798-37-53, e-mail: e.o.rubalsky@gmail.com.
Смирнова Камила Николаевна, магистрант кафедры физиологии, морфологии, генетики и биомедицины, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, каб. 217, тел.: (8512) 52-49-95 (доб. Ill), e-mail: kamila. smirnova@mail.ru.
Зулькарнеев Эльдар Ринатович, младший научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10; аспирант кафедры микробиологии и вирусологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: elzz89@mail.ru.
Теплый Александр Давидович, аспирант кафедры микробиологии и вирусологии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-35-99, e-mail: tkleon@mail.ru.
Представлен исторический опыт использования бактериофагов отечественными и зарубежными специалистами в лечении и профилактике инфекционной патологии бактериального генеза. Отмечается, что возрождение интереса клиницистов к бактериофагам связано, прежде всего, с широким распространением антибиоти-корезистентных штаммов бактерий в медицинской практике. Принимая во внимание столетний опыт использования бактериофагов при инфекционных заболеваниях (в том числе у новорожденных и детей раннего возраста), а также способность вирулентных фагов лизировать бактерии, не поддающиеся элиминации современными антибактериальными средствами, представляется целесообразным использовать обобщенные результаты многочисленных клинических исследований для повышения качества оказания медицинской помощи инфекционным больным.
Ключевые слова: бактериофаги, фаготерапия, фагопрофилактика, острые кишечные инфекции, гной-но-воспалителъные заболевания, инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи.
BACTERIOPHAGES IN INFECTIOUS PATHOLOGY.
PART I: THE HISTORY OF STUDIES BEFORE THE WIDESPREAD USE OF ANTIBIOTICS
Aleshkin Andrey K, Dr. Sci. (Biol.), Head of Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of Bacteriophages, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel: (495) 452-18-16, e-mail: ava@gabri.ru.
Aleshkin Vladimir A., Dr. Sci. (Biol.), Professor, Honored Scientist of the Russian Federation, Director, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel: (495) 452-18-16, e-mail: info@gabrich.ru.
Afanasjev Stanislav S., Dr. Sci. (Med.), Professor, Honored Scientist of the Russian Federation, Deputy Director, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel: 8-903-667-20-68, e-mail: afanasievss409.4@bk.ru.
Galimzyanov Khalil M., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Rubalsky Oleg K, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head, Department of Microbiology and Virology, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-35-99, e-mail: rubalsky.innovation@gmail.com.
Teplyi David L., Dr. Sci. (Biol.), Professor, Honorary Figure of Russian Higher Education, Head, Department of Physiology, Morphology, Genetics and Biomedicine, Astrakhan State University, 1 Shaum-yan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-49-95 (add. Ill), e-mail: dima.tepliy@yandex.ru.
Akhmineeva Aziza Eh., Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Astrakhan State Medical Academy, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) (8512) 52-36-55, e-mail: asmafordec@mail.ru.
Kiseleva Irina A., Research Associate, Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of Bacteriophages, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel.: (495) 452-18-16, e-mail: irina6804@mail.ru.
Bochkareva Svetlana S., Cand. Sci. (Biol.), Senior Research Associate, Laboratory of Immuno-biological Preparations, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel.: (495) 452-18-16, e-mail: cipl989@gmail.com.
Rubalskaya Elena E., Head, Laboratory of Clinical Laboratory Diagnostics, Research Institute of Regional Infectious Pathology, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: 8-908-616-90-66, e-mail: e.e.rubalskaya@gmail.com.
Rubalskii Evgenii O., Specialist in Innovations, Technology and Innovation Support Center, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia; Junior Research Associate, Laboratory of Applied Immunochemistry, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel: 8-961-798-37-53, e-mail: e.o.rubalsky@gmail.com.
Smirnova Kamila N., Graduate Student, Department of Physiology, Morphology, Genetics and Bio-medicine, Astrakhan State University, 1 Shaumyan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-49-95 (add. Ill), e-mail: kamila.smirnova@mail.ru.
Zul'karneev El'dar R., Post-graduate Student, Department of Microbiology and Virology, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia; Junior Research Associate, Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of Bacteriophages, G.N. Gabrichevsky Moscow Research Institute for Epidemiology and Microbiology, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel.: (495) 452-18-16, e-mail: elzz89@mail.ru.
Teplyi Aleksandr D., Post-graduate Student, Department of Microbiology and Virology, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-35-99, e-mail: tkleon@mail.ru.
The review presents Russian and world data about the history of using and present-day use of bacteriophage preparations in treatment and prevention of infectious diseases of bacterial etiology. It's noted that the rebirth of interest of clinicians to bacteriophages is primarily associated with the significant growth in the number of antibiotic-resistant bacterial strains in clinical practice. Taking into account the fact that phages have been used to treat infectious diseases (including in newborns and young children) for almost a century, as well as the ability of virulent phages to kill bacteria that cannot be eliminated by modern antibiotics, the use of generalized results of numerous clinical studies to improve the quality of healthcare for patients with infectious diseases seems reasonable.
Key words: bacteriophages, phage therapy, phage prophylaxis, acute intestinal infections, suppurative-inflammatory diseases, healthcare-associated infections.
Терапия бактериальных инфекций по-прежнему остается одной из актуальных задач здравоохранения во всех без исключения странах мира. В современной клинической практике прослеживается отчетливая тенденция к изменению спектра возбудителей инфекционных заболеваний, увеличению количества штаммов микроорганизмов, резистентных к антибактериальной терапии, а также возникновению атипичных, стертых форм течения болезни на фоне вторичного иммунодефицита и развития сопутствующей грибковой инфекции.
Типичные ошибки при проведении антибактериальной терапии заключаются в неправильном выборе препарата, неверном пути введения и выборе дозы, преждевременном прекращении или нарушении схемы приема антибиотика [13]. Самолечение и нередко необоснованное назначение антибактериальных препаратов специалистами первичного звена приводят к формированию у пациентов анти-биотикорезистентных штаммов микроорганизмов, что, в свою очередь, увеличивает вероятность хро-низации острого процесса и развития грозных осложнений. Перечисленные обстоятельства крайне отрицательно сказываются на эффективности антибактериального лечения инфекционных заболеваний.
Возможной альтернативой антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам представляются вирулентные (в англоязычной литературе применяется термин «литические») бактериофаги с широким спектром антимикробной активности, подавляющие как чувствительные к антибиотикам, так и лекарственно-устойчивые штаммы бактерий. Бактериофаги - это вирусы, характеризующиеся специфической способностью к избирательному инфицированию бактериальных клеток, принадлежащих к одному штамму, или антигенно-гомологичным штаммам одного вида или рода с последующим лизисом (после внутриклеточной репликации) клетки-хозяина - вирулентные фаги, или интегрированием
в бактериальный геном с образованием лизогенов - умеренные фаги [1]. Они относятся к старейшим (около 3 млрд лет) и наиболее распространенным (общее количество фаговых частиц оценивается в 1030-Ю32) из всех известных на Земле микроорганизмов.
Вирусы бактерий, активные в отношении возбудителей кишечных, респираторных, урогени-тальных и ряда других инфекций, известны с начала XX в. Так, еще во время Первой мировой войны среди ученых-микробиологов распространилась сенсационная новость, что Ф. д'Эрелль открыл вирусы, «пожирающие бактерии», и что ему удалось разработать фаговые препараты для лечения солдат, заразившихся дизентерией [21]. В опубликованном сообщении указывалось на безопасность бактериофагов для людей и животных и возможность их успешного использования в качестве терапевтического средства [25].
В действительности история бактериофагов началась задолго до этого сообщения (табл.). В 1896 г. английский бактериолог Э.Х. Хэнкин попытался подсчитать число бактерий Vibrio cholera в 1 мл воды, взятой из реки Ганг. Забор образцов производился в двух местах: где река входила в город Агра и где выходила из него. К своему удивлению, Э.Х. Хэнкин обнаружил, что в 1 мл воды на входе в город содержится 100 ООО бактерий, в то время как на выходе из города их число уменьшилось до 90 бактерий. Странное самоочищение воды в Ганге в то время не нашло своего объяснения и получило название «феномен Хэнкина» [16].
В конце XIX в. Н.Ф. Гамалея опубликовал статью, в которой описал внезапное разрушение Bacillus antracis в дистиллированной воде, после чего эта жидкость приобретала способность лизиро-вать свежие культуры сибиреязвенной бациллы [4]. Ученый предположил, что бактерии при распаде образуют бактериолизин, который специфически действует на такие же бактерии, вызывая их лизис.
В 1915 г. журнал «The Lancet» опубликовал статью Ф. Творта о передающемся лизисе бактерий. В публикации были приведены наблюдения о «съеденных краях колоний Staphylococcus» [27]. Однако Ф. Творт не смог объяснить наблюдаемое явление, а лишь привел его описание. В 1917 г. молодой грузинский ученый Г.Г. Элиава, так же как Э.Х. Хэнкин в Индии, наблюдал таинственное исчезновение клеток V. cholera в воде из реки Мтквари [5].
Величайшая заслуга Ф. д'Эрелля состояла в том, что он выдвинул идею использования бактериофагов для лечения болезней, причиной которых у людей и животных являются бактерии. За эту идею он заслужил Нобелевскую премию, на получение которой его выдвигали 8 раз, каждый год, начиная с 1925 г., хотя она так никогда и не была ему присуждена [21]. Д'Эрелль первый применил бактериофаги для лечения дизентерии в детской больнице в Париже в 1919 г. под руководством профессора В.-А. Ютинеля. Предварительно фаговый препарат был перорально введен Ф. д'Эреллю, В.-А. Ютинелю и нескольким интернам этой больницы для того, чтобы подтвердить его безопасность перед применением у трех братьев: 3, 7 и 12 лет. Симптомы заболевания прекратились у пациентов в течение 24 часов после однократного введения противодизентерийного бактериофага, через несколько дней их выписали из клиники [26].
Таблица
Исследователи Название публикации Год публикации
на языке оригинала на английском языке
1 2 3 4
Frankland Р. Ueber das Verhalten des Typhusbacillus und des Bacillus coli communis im Trinkwasser On the behavior of the typhoid bacillus and the common Bacillus coli in drinking water 1895
Hankin М.Е. L'action bactéricide des eaux de la Jumma et du Gange sur le vibrion du choléra The bactericidal action of waters of Jumna and Ganges on the cholera microbe 1896
Gamaleya N.F. Бактериолизины — ферменты, разрушающее бактерш Bacteriolysins - ferments destroying bacteria 1898
Klein А. Die physiologische Bakteriologie des Darmkanals The physiological bacteriology of the intestinal canal 1902
Krencker Е. Über Baktericidie von Bakterienfiltraten On the bactericidal activity of bacterial filtrates 1903
Lode А. Experimentelle Untersuchungen über Bakterienantagonismus Experimental studies on bacterial antagonists 1903
Eijkman С. Ueber thermolabile Stoffwechselprodukte als Ursache der natürlichen Wachstumshemmung der Mikroorganismen On the thermolabile metabolites as a cause of the natural growth inhibition of microorganisms 1904
1 2 3 4
Conradi H., Kurpjuweit О. Ueber spontane Wachstumshemmung der Bakterien infolge Selbstvergiftung On the spontaneous growth inhibition of bacteria due to self poisoning 1905
Kantorowicz А. Bakterien-Antifermente und Bakteriolyse Bacterial fermentation inhibitors and bacterial lysis 1909
de Waele H. Protéolase et antiprotéolase dans les cultures microbiennes Proteolytic enzymes and enzyme inhibitors in microbe cultures 1909
Twort F.W. An investigation on the nature of ultra-microscopic viruses An investigation on the nature of ultra-microscopic viruses 1915
Р. Брюноже и Д. Мэйсин в 1921 г. впервые использовали бактериофаги для лечения стафилококковой инфекции кожи. Авторы сообщали, что бактериофаги, введенные непосредственно в открытые хирургические раны, инициировали процесс выздоровления через 24—48 часов [17].
По рекомендации одного из первых последователей Ф. д'Эрелля в молодой Советской республике Г.Г. Элиавы родоначальник фаготерапии был приглашен правительством Советского Союза для создания центров по исследованию и производству лечебных бактериофаговых препаратов на базе бактериологического института в Тбилиси, а также в Киеве и Харькове. Г.Г. Элиава познакомился с Ф. д'Эреллем в Париже в начале 1920-х гг. во время одной из своих первых командировок в Институт Пастера и был сразу же заинтересован идеей по лечебному использованию бактериофагов. В СССР первые совместные попытки применения бактериофагов для профилактики и лечения инфекционных заболеваний были сделаны этими учеными в 1931 г. в отношении холеры [7]. После чего Тбилисский НИИ вакцин и сывороток первым в СССР начал производить коммерческий фаговый препарат против холеры, который успешно использовался для борьбы с этой инфекцией, особенно на юго-восточных территориях СССР.
В то же время при участии Ф. д'Эрелля создаются еще два промышленных центра. В Индии это сделано для производства противохолерных бактериофагов, применение которых в этой стране позволило сократить смертность от холеры до 10 %. А также коммерческая лаборатория в Париже, где вплоть до Второй мировой войны изготавливались 5 наименований фаговых препаратов против различных бактериальных инфекций: Bacte'-coli-phage, Bacte'-rhino-phage, Bacte'-intesti-phage, Bacte'-pyo-phage, Bacte'-staphy-phage. Эти препараты на рынок поставляла французская компания «L'Oréal».
Немногим ранее, в 1924 г., Институт Освальдо Крус в Рио-де-Жанейро (Бразилия) начал производство противодизентерийных бактериофагов в целях их использования в борьбе с этой инфекцией в странах Латинской Америки [6]. В 1940-е гг. 7 лечебных бактериофаговых препаратов против стафилококков, стрептококков, кишечной палочки и других патогенных бактерий также производились в США фирмой «Eli Lilly & Со». Их использовали для лечения различных инфекций, в том числе абсцессов, гнойных ран, вагинитов, мастоидитов, острых и хронических инфекций верхних дыхательных путей [25].
A. Gratia первым использовал внутривенное введение бактериофага для лечения стафилококковых септицемий, позднее L.O. Dutton, A. Raiga и E.W. Schultz получили хорошие результаты подобного применения для стрептококковых септицемий [20, 22, 24]. В 1936 г. S. Morrison и R.E. Gardner опубликовали клинический пример лечения бактериофагами легочной инфекции, вызванной предшествовавшей аппендэктомией. Фаговый препарат использовали для промывания плевральной полости и орошения раны. После нескольких подобных процедур общее состояние пациентки заметно улучшилось, через 6 недель она смогла выписаться из больницы [23].
Несмотря на представленные объективно положительные результаты научных исследований, в целом клинические данные по эффективности бактериофаговых препаратов, производимых указанными предприятиями, были противоречивыми. Это было вызвано как низкой концентрацией или полным отсутствием фаговых частиц в готовых препаратах, так и узким спектром их литической активности. В результате коммерческое производство лечебных фагов прекратилось в большинстве стран Западной Европы и Америки, невзирая на предварительные многообещающие результаты фаготерапии [26].
В Советском Союзе этого не произошло. Наоборот, зародившееся в Тбилисском бактериологическом институте (позднее - Тбилисский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток -Тбилисский НИИВС), организованном Ф. д'Эреллем и Г.Г. Элиавой, массовое производство бактериофагов получило свое развитие на других научно-исследовательских площадках СССР.
В.А. Крестовникова впервые в мире отработала технологию промышленного изготовления бактериофагов, включающую в себя: одномоментный засев бактериальной культуры и фага на минимальном количестве питательной среды, введение в готовый препарат в качестве консерванта хинозола в дозе 1:10 ООО, стандартизацию контрольных процедур по определению титра фага в серийной продукции по методу Аппельмана и т.д. [10]. В Москве в начале 1930-х гг. В.А. Крестовниковой удалось наладить крупномасштабный выпуск бактериофагов на базе Научно-исследовательского института эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней им. И.И. Мечникова - впоследствии головной Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова или Центрнальный научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова (НИИВС им. И.И. Мечникова). При ее участии из московских штаммов в Ленинградском научно-исследовательском институте вакцин и сывороток (Ленинградском НИИВС) было запущено производство противодизентерийного и ряда других бактериофаговых препаратов. Позднее серийный выпуск фагов, активных против стафилококка, стрептококка, синегнойной палочки, протея и ряда других энтеропатогенных бактерий, появился в Уфе, Нижнем Новгороде, Хабаровске и Перми, где были задействованы сотни специалистов, выпускавших по несколько тонн жидких фаговых препаратов в день.
Широкомасштабные испытания, связанные с фаговой терапией, активно проводились в 1930-1940-е гг. на территории бывших республик Советского Союза (Грузии, России, Украины, Белоруссии, Азербайджана). Одно из испытаний по оценке лечебного эффекта дизентерийных фагов было проведено И.Б. Сапиром [12], описавшим более 1 ООО случаев лечения дизентерии бактериофагами в двух больницах Москвы. Группа пациентов включала в себя лиц обоего пола (767 мужчин и 297 женщин) в возрасте от новорожденных до 79 лет. В каждой возрастной группе применялась стандартная фаготерапия (20 мл в сутки для взрослых и 10 мл для детей) с использованием дизентерийного бактериофагового препарата, разработанного НИИВС им. И.И. Мечникова (титр по Аппельману составлял 10~9-10~и). И.Б. Сапир отмечал, что после первого дня лечения фагами количество пациентов с кровавым стулом уменьшилось со 100 до 74 человек; на 5 день фаготерапии только 4 пациента продолжали страдать этим синдромом, а через неделю - 95 % пациентов не обнаруживали патологических симптомов и могли быть выписаны из больницы.
В 1937 г. оценку возможности профилактического применения дизентерийного поливалентного бактериофага (50 % Shiga, 25 % Hiss и 25 % Flexner), изготовленного из штаммов НИИВС им. И.И. Мечникова, в ходе не менее масштабных испытаний провел И.М. Аншелес в Ленинграде [2]. В течение 4 месяцев под наблюдением специалистов находилось 4 района города с общим населением более 500 000 человек. В опытном районе было профилактически фагировано около 14 тысяч человек (детей и взрослых), что позволило в 2 раза снизить заболеваемость дизентерией на данной территории по отношению к 3 контрольным районам. В этом исследовании дети с 3 лет и взрослые получали per os по 10 мл препарата с титром по Аппельману Ю~10 вместе с раствором соды 3 раза в сутки с интервалом между приемами в 5-7 дней.
Г.В. Голубцов описал проведенное в 1939 г. сравнительное исследование по оценке эффективности серо- и фаготерапии у детей в возрасте от 2 до 5 лет, страдающих от дизентерии [19]. Пациенты были разделены на две группы: I группа состояла из 22 детей, получавших антидизентерийную сыворотку, а во II группу вошли 18 детей, которым назначали специфический дизентерийный бактериофаг в дозе 1,0-2,0 мл в день. Суммируя полученные данные, Г.В. Голубцов пришел к выводу о том, что серотерапия значительно снижала выраженность интоксикационного синдрома, в то время как фаготерапия лучше купировала патологические изменения в толстом кишечнике (например, повреждение слизистой слоя).
Летом 1939 г. в Сталинграде были проведены клинические испытания по оценке профилактической эффективности поливалентного дизентерийного фага Тбилисского НИИВС у детей в возрасте от 1 года до 3 лет. Всего в исследовании приняли участие 1 750 детей из 35 яслей, расположенных в 6 районах города, из них бактериофаг назначали 1 208 детям, а 542 ребенка составили контрольную группу. Препарат давали натощак в дозе 2-6 мл 2 раза в сутки с промежутком между приемами 6-7 дней в период с 28 мая по 10 июня. В итоге заболеваемость дизентерией в период с июня по сентябрь в группе детей, получавших бактериофаг, была зафиксирована в 2,9 раза ниже, чем среди детей контрольной группы [3].
В этот же период экспериментальные серии фаговых препаратов против бактерий, относящихся к родам Staphylococcus, Streptococcus, Proteus и виду Escherichia coli, прошли испытания в хирургических и гинекологических клиниках Москвы. Исследования были проведены Г.А. Кокиным и его
коллегами, а затем доложены на конференциях, проходивших в 1940 г., и описаны в статье «Применение бактериофагов в хирургии» [9]. Это привело к разработке «Инструкции по применению бактериофага при лечении ран», включавшей в себя орошение поверхности раны, внутриполостное, подкожное, внутримышечное и внутривенное применение фагов. Последнее было особенно необходимо в случаях терапии системной инфекции, развивавшейся как последствие хирургических вмешательств и боевых ранений. Эти методы были одобрены Главным санитарным управлением Красной Армии и применялись для лечения солдат в ходе советско-финской кампании 1939-1940 гг. и Великой Отечественной войны [11].
B.А. Крестовникова в 1947 г. обобщила данные, полученные независимыми бригадами военных врачей, установив, что профилактическая обработка ран фаговыми смесями против анаэробных бактерий снижала в среднем на 30 % число случаев газовой гангрены у раненых солдат [10].
В 1938 г. видный советский хирург Н.Н. Бурденко также рекомендовал использовать бактериофаги против гнойных инфекций [15].
Война и потребность в антибактериальных препаратах заставила советских врачей проводить все новые испытания с фагами и разрабатывать эффективные методы их применения. Так, в 1941 г. А. Цулукидзе, обобщая результаты, полученные во время финской кампании, по использованию у раненых солдат смеси фагов, активных против стрептококка, стафилококка и Clostridium perfringens, предложил стратегию борьбы с анаэробными инфекциями, заключавшуюся в совместном применении фаготерапии и противогангренозной сыворотки. А. Цулукидзе предположил, что фаги лизируют бактерии, вызывающие инфекцию, а сыворотка нейтрализует их токсины [14].
А.С. Каплан в 1941 г. в экспериментальных условиях занималась разработкой стратегии фаготерапии и фагопрофилактики при пероральном приеме препаратов. На модели лабораторных мышей исследователем был подтвержден высокий профилактический эффект перорального приема сальмонел-лезных бактериофагов [8].
C.Ф. Шишенко (1938 г.) продемонстрировал возможность внутриполостного использования бактериофагов в детской хирургии. В соответствии с его наблюдениями применение бактериофагов у новорожденных и младенцев в высоких дозах (3,0-5,0 мл в одной инъекции в плевральную полость или вокруг абсцессов, 3-5 инъекций) не приводило к побочным эффектам (повышение температуры, развитие инфильтратов в местах инъекции и т.д.). С.Ф. Шишенко рекомендовал уделить особое внимание применению фаготерапии для лечения гнойного плеврита, поскольку это заболевание превалировало у новорожденных и являлось смертельным в 90 % случаев. Он утверждал, что введение бактериофагов путем легочной пункции непосредственно в очаг инфекции приводило к тому, что дальнейшего хирургического вмешательства не потребовалось [18].
Таким образом, еще до открытия и широкого использования антибиотиков бактериофаги были предложены Ф. д'Эреллем, исследовались и использовались в различных странах как эффективные средства борьбы с бактериальными инфекциями. Однако наиболее активные и продолжительные исследования бактериофагов в этом направлении велись в республиках, входивших в то время в Советский Союз.
Список литературы
1. Алешкин, А. В. Возможности применения бактериофагов в качестве пробиотических средств деконта-минации в области питания / А. В. Алешкин, М. В. Зейгарник // Вопросы диетологии. — 2012. — № 4. — С. 24—34.
2. Аншелес, И. М. Опыт раннего лечебного и противоочагового применения дизентерийного бактериофага в Ленинграде в 1937 г. / И. М. Аншелес // Бактериофаг. Применение его для профилактики и лечения дизентерии : Сб. трудов сотрудников / 2-й ленингр. мед. ин-т. - Л., 1939. - С. 168-183.
3. Беликова, М. А. Опыт фагопрофилактики дизентерии детей раннего возраста в Сталинграде / М. А. Беликова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1941. — № 5—6. — С. 142.
4. Гамалея, Н. Ф. Бактериолизины - ферменты, разрушающие бактерии / Н. Ф. Гамалея // Русский архив патологии. - 1898. - № 6. - С. 607-613.
5. Георгадзе, И. А. Георгий Элиава / И. А. Георгадзе, Е. Г. Макашвили // Грузинская советская энциклопедия : в 12 т. — Тбилиси : Комбинат печати Государственного Комитета Совета Министров Грузинской ССР по делам издательств, полиграфии и книжной торговли, 1979. — Т. 4. — С. 125.
6. Д'Эрелль, Ф. Бактериофаг и феномен выздоровления / Ф. д'Эрелль. - Тифлис : Тифлисский государственный университет, 1935. — 262 с.
7. Кажал, Н. Из истории борьбы против микробов и вирусов / Н. Кажал, Р. Ифтимович. - Бухарест : Научное издательство, 1968. - 404 с.
8. Каплан, А. С. Распределение и сохранение дизентерийного поливалентного бактериофага в организме белых мышей после однократного кормления / А. С. Каплан // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1941. - № 5-6. - С. 162.
9. Кокин, Г. А. Применение бактериофагов в хирургии / Г. А. Кокин // Советская медицина. - 1941. -№9.-С. 15-18.
10. Крестовникова, В. А. Фаготерапия и фагопрофилактика и их обоснование в работах советских исследователей / В. А. Крестовникова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1947. — №11.-С. 56-65.
11. Покровская, М. П. Лечение ран бактериофагом / М. П. Покровская, Л. С. Каганова, М. А. Морозенко, А. Г. Булгакова, Е. Е. Скаценко. - М. : Медгиз, 1942. - 60 с.
12. Сапир, И. Б. Наблюдения и замечания по поводу лечения дизентерии бактериофагом / И. Б. Сапир // Труды Московского областного института инфекционных болезней. — М. : Московский областной институт инфекционных болезней, 1939.-С. 135-151.
13. Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система) / под ред. А. Г. Чучалина, Ю. Б. Белоусова, В. В. Яснецова. - М. : Эхо, 2006. - Вып. VII. - С. 659-667.
14. Цулукидзе, А. П. К методике применения бактериофага в хирургической практике / А. П. Цулукидзе // Вестник хирургии. - 1941. - № 6. - С. 679-685.
15. Шкроб, О. С. Академик Николай Нилович Бурденко (к 125-летию со дня рождения) / О. С. Шкроб // Хирургия. - 2001. - № 5. - С. 61-63.
16. Adhya, S. The road to phage therapy / S. Adhya, C. Merril // Nature. - 2006. - Vol. 443. - P. 754-755.
17. Bruynoghe, R. Essais de thérapeutique au moyen du bacteriophage du staphylocoque / R. Bruynoghe, J. Maisin // Compt. Rend. Soc. Biol. - 1921. - Vol. 85. -P. 1120-1121.
18. Chanishvili, N. A Literature Review of the Practical Application of Bacteriophage Research / N. Chanish-vili. - Hauppauge, New York : Nova Science Publishers, 2012. - 283 p.
19. Chanishvili, N. Phage therapy - history from Twort and d'Herelle through Soviet experience to current approaches / N. Chanishvili // Adv. Virus Res. - 2012. - Vol. 83. - P. 3^0.
20. Dutton, L. O. The probable role of the bacteriophage in streptococcus infections / L. O. Dutton // Jour. Lab. and Clin. Med. - 1926. - Vol. 11. - P. 763.
21. Hausler, T. Viruses vs. Superbugs : a solution to the antibiotics crisis? / T. Hausler. - New York : MacMil-lan, 2008. - 292 p.
22. Kuchmen, A. The Forgotten Cure : The Past and Future of Phage Therapy / A. Kuchmen. - New York : Springer Science & Business Media, 2011. - 131 p.
23. Morrison, S. The treatment of a lung abscess due to Bacillus coli with a lytic filtrate / S. Morrison, R E. Gardner // J. Am. Med. Assoc. - 1936. - Vol. 107. - P. 33-34.
24. Raiga, A. Le bactériophage de d'Hérelle. Agent naturel et thérapeutique de la guérison des infections / A. Raiga, J. Voitot // Hôp Paris. - 1952. - Vol. 40. - P. 265.
25. Sulakvelidze, A. Bacteriophage therapy / A. Sulakvelidze, Z. Alavidze, J. G. Jr. Morris // Antimicrob. Agents Chemother. - 2001. - Vol. 45. - P. 649-659.
26. Summers, W. C. Felix d'Herelle and the Origins of Molecular Biology / W. C. Summers. - Yale New Haven, CT : UniversityPress, 1999. - 230 p.
27. Twort, F. An investigation on the nature of ultramicroscopic viruses / F. Twort // Lancet. - 1915. - Vol. 11. -P. 1241.
References
1. Aleshkin A. V., Zeygarnik M. V. Vozmozhnosti primeneniya bakteriofagov v kachestve probioticheskikh sredstv dekontaminatsii v oblasti pitaniya [Possible applications of bacteriophages as probiotic agents of decontamination in nutrition], Voprosy dietologii [Questions of dietology], 2012, no. 4, pp. 24—34.
2. Ansheles I. M. Opyt rannego lechebnogo i protivoochagovogo primeneniya dizenteriynogo bakteriofaga v Leningrade v 1937 g. [Experience of the early therapeutic and prophylactic application of dysentery bacteriophage in Leningrad in 1937]. Sbornik trudov: 2-y leningradskyy meditsinskyy institut. "Bakteriofag. Primenenie ego dlya pro-filaktiki i lecheniya dizenterii" [Collection of works of the 2nd Leningrad Medical Institute. "Bacteriophage. Its Application for Prophylaxis and Treatment of Dysentery"]. Leningrad, 1939, pp. 168-183.
3. Belikova M. A. Opyt fagoprofilaktiki dizenterii detey rannego vozrasta v Stalingrade. [Experience of phage prophilaxis of dysentery among the young children in Stalingrad]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobi-ologii [Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology], 1941, no. 5-6, p. 142.
4. Gamaleya N. F. Bakterioliziny - fermenty, razrushayushchie bakterii [Bacteriolysins - enzymes that destroy bacteria]. Russkiy arkhiv patologii [Russian Archives of Pathology], 1898, no. 6, pp. 607-613.
5. Georgadze I. A., Makashvili E. G. Georgiy Eliava [George Eliava]. Gruzinskaya sovetskaya entsiklopediya. [Georgian Soviet Encyclopedia]. Tbilisi, Kombinat pechati Gosudarstvennogo Komiteta Soveta Ministrov Gruzinskoy SSR po delam izdatel'stv, poligrafii i knizhnoy torgovli [Printing combine of the State Committee of the Council of Ministers of the Georgian SSR for Publishing, Printing and Book Trade], 1979, vol. 4, p. 125.
6. d'Erell' F. Bakteriofag i fenomen vyzdorovleniya [Bacteriophage and the convalescence phenomenon], Ti-flis, Tiflisskiy gosudarstvennyy universitet [Tiflis State University], 1935,262 p.
7. Kazhal N., Iftimovich R. Iz istorii bor'by protiv mikrobov i virusov [From the history of the fight against microbes and viruses]. Bucharest, Nauchnoe izdatel'stvo [Scientific publishing], 1968,404 p.
8. Kaplan A. S. Raspredelenie i sokhranenie dizenteriynogo polivalentnogo bakteriofaga v organizme belykh myshey posle odnokratnogo kormleniya [Distribution and conservation of dysentery polyvalent bacteriophage in the body of white mice after a single feeding], Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii [Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology], 1941, no. 5-6, p. 162.
9. Kokin G. A. Primenenie bakteriofagov v khirurgii [The use of bacteriophages in surgery], Sovetskaya med-itsina [Soviet medicine], 1941, no. 9, pp. 15-18.
10. Krestovnikova V. A. Fagoterapiya i fagoprofilaktika i ikh obosnovanie v rabotakh sovetskikh issledovateley [Phage therapy and phage prophylaxis and their justification in the work of Soviet researchers]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii [Journal of Microbiology Epidemiology and immunobiology], 1947, no. 11, pp. 56-65.
11. Pokrovskaya M. P., Kaganova L. S., Morozenko M. A, Bulgakova A. G., Skatsenko E. E. Lechenie ran bak-teriofagom [Bacteriophage treatment of wounds]. Moscow, Medgiz, 1942, 60 p.
12. Sapir I. B. Nablyudeniya i zamechaniya po povodu lecheniya dizenterii bakteriofagom [Monitoring and remarks about the bacteriophage treatment of dysentery], Trudy Moskovskogo oblastnogo instituta infektsionnykh bo-lezney [Works the Moscow Regional Institute of Infectious Diseases]. Moscow, Moscow Regional Institute of Infectious Diseases, 1939, pp. 135-151.
13. Federal'noe rukovodstvo po ispol'zovaniyu lekarstvennykh sredstv. Vypusk VII [Federal guide on the use of drugs. Issue VII]. Ed. by A. G. Chuchalina, Yu. B. Belousova, V. V. Yasnetsova. Moscow, Ekho, 2006, pp. 659-667.
14. Tsulukidze A. P. K metodike primeneniya bakteriofaga v khirurgicheskoy praktike [The method of use of a bacteriophage in surgical practice]. Vestnik khirurgii [Journal of surgery], 1941, no. 6, pp. 679-685.
15. Shkrob O. S. Akademik Nikolay Nilovich Burdenko (k 125-letiyu so dnya rozhdeniya) [Academician Niko-lay Burdenko (devoted to the 125th anniversary)]. Khirurgiya [Surgery], 2001, no. 5, pp. 61-63.
16. Adhya S., Merril C. The road to phage therapy. Nature, 2006, vol. 443, pp. 754-755.
17. Bruynoghe R., Maisin J. Essais de thérapeutique au moyen du bacteriophage du staphylocoque. Compt. Rend. Soc. Biol., 1921, vol. 85, pp. 1120-1121.
18. Chanishvili N. A Literature Review of the Practical Application of Bacteriophage Research. Hauppauge, New York, Nova Science Publishers, 2012, 283 p.
19. Chanishvili N. Phage therapy - history from Twort and d'Herelle through Soviet experience to current approaches. Adv. Virus Res., 2012. vol. 83, pp. 3^0.
20. Dutton L. O. The probable role of the bacteriophage in streptococcus infections. Jour. Lab. and Clin. Med., 1926, vol. 11, p. 763.
21. Hausler T. Viruses vs. Superbugs: a solution to the antibiotics crisis? New York, MacMillan, 2008,292 p.
22. Kuchmen A. The Forgotten Cure : The Past and Future of Phage Therapy. New York, Springer Science & Business Media, 2011,131 p.
23. Morrison S., Gardner R. E. The treatment of a lung abscess due to Bacillus coli with a lytic filtrate. J. Am. Med. Assoc., 1936, vol. 107, pp. 33-34.
24. Raiga A., Voitot J. Le bactériophage de d'Hérelle. Agent naturel et thérapeutique de la guérison des infections. Hôp Paris, 1952, vol. 40, p. 265.
25. Sulakvelidze A., Alavidze Z., Morris J. G. Jr. Bacteriophage therapy. Antimicrob. Agents Chemother, 2001, vol. 45, pp. 649-659.
26. Summers W. C. Felix d'Herelle and the Origins of Molecular Biology. Yale New Haven, CT, University Press, 1999,230 p.
27. Twort F. An investigation on the nature of ultramicroscopic viruses. Lancet, 1915, vol. 11, p. 1241.
УДК 616.98:579.882. ll]-031:611.63/65]-078 03.02.00-Общая биология
О H.B. Зур, А.Ю. Миронов, В.А. Алешкин, 14.01.00 - Клиническая медицина
С.С. Афанасьев, Е.Е. Рубальская, 14.03.00 - Медико-биологические науки М.С. Афанасьев, Е.О. Рубальский, 2016
АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ
Зур Наталья Васильевна, кандидат медицинских наук, врач-дерматовенеролог, Россия, 140415, Московская область, г. Коломна, ул. Уманская, д. 17, пом. 3, тел.: 8-910-408-23-57, e-mail: natalyzur@gmail.com.
