CC BY
77
Оригинальная статья (конкурс молодых ученых)
О.А. Гра
Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук, Москва
Ассоциация полиморфизма генов системы биотрансформации CYP1A1 и GST с риском развития рецидива острого лейкоза у детей
НАЛИЧИЕ ПОЛИМОРФИЗМА В ГЕНАХ СИСТЕМЫ БИОТРАНСФОРМАЦИИ МОЖЕТ ВНОСИТЬ СУЩЕСТВЕННЫЙ ВКЛАД В РАЗВИТИЕ ПЕРВИЧНЫХ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗОВ У ДЕТЕЙ, А ТАКЖЕ ВЛИЯТЬ НА ЧАСТОТУ И ОСОБЕННОСТИ РАЗВИТИЯ РЕЦИДИВОВ. НАМИ РАЗРАБОТАН БИОЛОГИЧЕСКИЙ МИКРОЧИП, КОТОРЫЙ ПОЗВОЛЯЕТ АНАЛИЗИРОВАТЬ 14 МУТАЦИЙ В ВОСЬМИ ГЕНАХ СИСТЕМЫ БИОТРАНСФОРМАЦИИ: CYP1A1, CYP2D6, GSTT1, GSTM1, NAT2, MTHFR, CYP2C9 И CYP2C19. С ПОМОЩЬЮ ДАННОГО БИОЧИПА БЫЛИ ПРОТЕСТИРОВАНЫ ОБРАЗЦЫ ДНК 332-Х ДЕТЕЙ С ДИАГНОЗОМ ОСТРЫЙ ЛИМФОБЛАСТНЫЙ ЛЕЙКОЗ (ОЛЛ) И 71-ГО РЕБЕНКА С ДИАГНОЗОМ ОСТРЫЙ МИЕЛОБЛАСТНЫЙ ЛЕЙКОЗ (ОМЛ). ГЕНОТИП CYP1A1 *1/*2А ЗНАЧИТЕЛЬНО ЧАЩЕ ВЫЯВЛЯЛИ У ДЕТЕЙ С РЕЦИДИВОМ ЗАБОЛЕВАНИЯ, ЧЕМ У ДЕТЕЙ С ПЕРВИЧНО ДИАГНОСТИРОВАННЫМ ЛЕЙКОЗОМ (ОР 2,11, P = 0,0291). «НУЛЕВОЙ» GSTT1 ГЕНОТИП РЕЖЕ НАБЛЮДАЛИ У ДЕТЕЙ С РЕЦИДИВОМ ЗАБОЛЕВАНИЯ, ЧЕМ У ДЕТЕЙ С ПЕРВИЧНЫМ ЛЕЙКОЗОМ (ОР 0,55, P = 0,0265). ПРИ РАЗДЕЛЕНИИ ПАЦИЕНТОВ ПО ПОЛУ У МАЛЬЧИКОВ С РЕЦИДИВОМ ОЛЛ БЫЛО ВЫЯВЛЕНО УВЕЛИЧЕНИЕ ЧАСТОТЫ CYP1A1 ГЕНОТИПА *1/*2A В СОЧЕТАНИИ С «НЕНУЛЕВЫМ» GSTT1 ГЕНОТИПОМ, ПО СРАВНЕНИЮ С ПАЦИЕНТАМИ С ПЕРВИЧНО ДИАГНОСТИРОВАННЫМ ОЛЛ (ОР 3,09, P = 0,0254). ПОМИМО ЭТОГО, У ДЕВОЧЕК С РЕЦИДИВОМ ОСТРОГО ЛЕЙКОЗА БЫЛО ВЫЯВЛЕНО УМЕНЬШЕНИЕ В 2,4 РАЗА ЧАСТОТЫ «НУЛЕВОГО» GSTM1 ГЕНОТИПА ПО СРАВНЕНИЮ С ГРУППОЙ ДЕВОЧЕК С ПЕРВИЧНЫМ ЛЕЙКОЗОМ (ОР 0,41, P = 0,0175). ТАКИМ ОБРАЗОМ, В НАСТОЯЩЕЙ РАБОТЕ ПОКАЗАНО, ЧТО ИЗУЧЕННЫЕ ГЕНОТИПЫ CYP1A1 И GST МОЖНО РАССМАТРИВАТЬ КАК ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА РЕЦИДИВА ОСТРОГО ЛЕЙКОЗА У ДЕТЕЙ.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ОСТРЫЙ ЛЕЙКОЗ, ЛЕКАРСТВЕННАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ, ЦИТОХРОМЫ P450, ГЛУТАТИОН-Б-ТРАНС-ФЕРАЗЫ, ПОЛИМОРФИЗМ, БИОЛОГИЧЕСКИЕ МИКРОЧИПЫ.
Контактная информация:
Гра Ольга Алексеевна, аспирант лаборатории биологических микрочипов Института молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук Адрес: 119991, Москва, ул. Вавилова, д. 32, тел. (495) 135-62-59 Статья поступила 26.02.2007 г., принята к печати 14.06.2007 г.
Анализ генетического полиморфизма, определяющего наследственную предрасположенность к онкологическим заболеваниям, в том числе к злокачественным заболеваниям крови, является чрезвычайно актуальной задачей. Кроме того, за последнее время накоплено множество данных о том, что именно генетический полиморфизм лежит в основе индивидуальной чувствительности к лекарственным препаратам. Выявление ассоциаций полиморфных аллелей генов с конкретным заболеванием и ответом на лекарственную терапию позволяет не только выявлять механизмы заболевания и исследовать его природу, но и разрабатывать подходы к «персонализированной» ме-
O.A. Gra
Engelhardt Institute of Molecular Biology Russian Academy of Sciences, Moscow
Association of polymorphism in biotransformation system genes CYP1A1 and GST with risk of relapse in childhood acute leukemia
PRESENCE OF POLYMORPHISM IN GENES CODING BIOTRANSFORMATION SYSTEM MAY PLAY AN IMPORTANT ROLE IN FORMATION OF PRIMARY CHILDHOOD ACUTE LEUKEMIA, AND AFFECTS THE INCIDENCE AND FEATURES OF RELAPSE. WE DEVELOPED A BIOLOGICAL MICROCHIP WHICH ALLOWS TO ANALYZE 14 MUTATIONS IN EIGHT GENES OF BIOTRANSFORMATION SYSTEM: CYP1A1, CYP2D6, GSTT1, GSTM1, NAT2, MTHFR, CYP2C9 AND CYP2C19. THIS BIOCHIP HAS BEEN USED TO STUDY DNA SAMPLES FROM 332 CHILDREN WITH DIAGNOSIS OF ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA (ALL) AND 71 CHILDREN WITH DIAGNOSIS OF ACUTE MYELOBLASTIC LEUKEMIA (AML). IT WAS OBTAINED THAT VARIANT GENOTYPE CYP1A1 *1/*2А MORE OFTEN OCCUR IN CHILDREN WITH RELAPSE OF DISEASE THAN IN CHILDREN WITH PRIMARY DIAGNOSED LEUKEMIA (OR = 2,11, P = 0,0291). ALSO IT HAS BEEN SHOWN, THAT «NULL» GSTT1 GENOTYPE IS LESS FREQUENT IN CHILDREN WITH RELAPSE OF DISEASE THAN IN CHILDREN WITH PRIMARY DIAGNOSED LEUKEMIA (OR = 0,55, P = 0,0265). UPON SEX STRATIFICATION, BOYS WITH RELAPSE OF ALL DEMONSTRATED AN INCREASED OCCURRENCE OF THE CYP1A1 GENOTYPE *1/*2А IN COMBINATION WITH THE GSTT1 «NONNULL» GENOTYPE RELATIVE TO PATIENTS WITH PRIMARILY DIAGNOSED ALL (OR = 3,09, P = 0,0254). IN ADDITION, GIRLS WITH RELAPSE OF ACUTE LEUKEMIA DISPLAYED A 2,4-FOLD LOWER FREQUENCY OF THE «NULL» GSTM1 GENOTYPE AS COMPARED WITH THE GIRLS GROUP WITH PRIMARY LEUKEMIA (OR = 0,41, P = 0,0175). THUS, IT WAS SHOWN THAT STUDIED GENOTYPES CYP1A1 AND GST MIGHT BE PROGNOSTIC RISK FACTORS OF RELAPSE IN CHILDHOOD ACUTE LEUKEMIA.
KEY WORDS: ACUTE LEUKEMIA, DRUG RESISTANCE, CYTOCHROME P450, GLUTATHIONE-S-TRANSFERASES, POLYMORPHISM, OLIGONUCLEOTIDE BIOCHIPS.
дицине, то есть лечению, учитывающему биохимическую индивидуальность каждого пациента.
Острый лейкоз — одно из наиболее распространенных онкологических заболеваний у детей и одна из основных причин смертности в детском возрасте. Пик заболеваемости лейкозами приходится на возраст 2-5 лет с постепенным уменьшением количества заболевших в возрасте 7 лет и старше [1]. Наиболее распространенная форма — острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), составляющий приблизительно 80% всех острых лейкозов. На острый миелоб-ластный лейкоз (ОМЛ) приходится приблизительно 15% случаев онкогематологических болезней у детей [2, 3].
Острый лейкоз у детей неоднороден по клиническим проявлениям, реакции на терапию и прогнозу течения болезни, при этом прогностические факторы в значительной степени обусловлены характеристиками лейкемических клеток. С другой стороны, существуют данные, что полиморфизм ферментов системы биотрансформации вносит вклад в развитие первичных острых лейкозов у детей, а также влияет на частоту и особенности развития рецидивов острых лейкозов [4, 5]. Наиболее важными являются ферменты первой фазы биотрансформации, а именно ци-тохромы семейства Р450, такие как CYP1A1, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19, которые активируют ксенобиотики путем формирования генотоксичных промежуточных метаболитов, и ферменты второй фазы, такие как глутатион-Б-транс-феразы (GST) и ариламин-Ы-ацетилтрансферазы (NAT), которые осуществляют превращение генотоксичных соединений в нетоксичные [6]. Кроме того, многие гены определяют реакцию организма на противоопухолевые препараты. Так, например, ферменты MTHFR и MTRR участвуют в метаболизме таких противоопухолевых препаратов как фторурацил и метотрексат [7].
Ранее в лаборатории биологических микрочипов Института молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН был создан биочип для анализа полиморфизма генов системы биотрансформации [8]. Разработанный биочип позволяет анализировать 14 мутаций в 10 различных генах: CYP1A1 (С4887А, A4889G, T6235C), CYP2D6 (G1934A, DelA2637), GSTT1 (делеция), GSTM1 (делеция), NAT2 (С481Т, G590A, G857A), MTHFR (C677T), CYP2C9 (С430Т, C1075T) и CYP2C19 (G681A). Цель настоящего исследования заключалась в выявлении ассоциации между основными генетическими полиморфизмами ферментов, отвечающих за метаболизм химиопрепаратов или играющих ключевую роль в клеточном метилировании, и развитием рецидива острого лейкоза у детей.
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Обследованы 332 ребенка с ОЛЛ, из которых 258 пациентов были с первично диагностированным ОЛЛ и 74 пациента находились в рецидиве заболевания. Также обследован 71 ребенок с диагнозом ОМЛ, из которых 41 пациент был с первично диагностированным ОМЛ и 30 пациентов находились в рецидиве заболевания. Образцы крови/красного костного мозга получены при постановке первичного диагноза, констатации рецидива или в период ремиссии в онкогематологических отделениях Российской детской клинической больницы (Москва), Морозовской детской клинической больницы (Москва) и Московского областного онкологического диспансера (Балашиха). Пациентам с диагнозом ОЛЛ проводили программную терапию по протоколу ALL-MB-02, пациенты с диагнозом ОМЛ получали терапию по протоколу AML-2000 (Москва-Минск). Все пациенты были младше 18 лет и являлись жителями Европейской части России. Родители всех пациентов подписали информированное согласие.
В работе использовали образцы ДНК, выделенные из лейкоцитов периферической крови или красного костного мозга с помощью набора Wizard Genomic DNA Purification Kit («Promega», США), в соответствии с инструкцией производителя.
Необходимые для анализа фрагменты ДНК получали с помощью двухэтапной мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Типы изученных мутаций и последовательности праймеров опубликованы ранее [8] или могут быть получены у авторов.
Изучаемые гены были объединены в группы, соответствующие блокам олигонуклеотидных проб на биочипе. В группу 1 (блок 1) вошли гены: CYP1A1 (4887С>А, 4889A > G, 6235T > C) и CYP2D6 (1934G > A, 2637delA); в группу 2 (блок 2) — GSTT1 (делеция) и GSTM1 (делеция); в группу 3 (блок 3) — NAT2 (481С > Т, 590G > A, 857G > A) и MTHFR (677C > T); в группу 4 (блок 4) — CYP2C9 (430С > T, 1075C > T) и CYP2C19 (681G > A). На первой стадии мультиплексной ПЦР амплифицировали фрагменты генов, входящих в блоки 1, 3, 4; на второй стадии — в блоки 1-4. ПЦР проводили при стандартных условиях, как описано ранее [8]. Для гибридизации на микрочипе использовали флуоресцентно меченные образцы, полученные на второй стадии мультиплексной ПЦР. После проведения гибридизации флуоресцентный сигнал от ячеек микрочипа регистрировали с помощью портативного анализатора биочипов, снабженного камерой ПЗС и программным обеспечением ImageWare («Биочип-ИМБ», Россия).
Достоверность определения генотипов для каждого полиморфного варианта была подтверждена секвенировани-ем на автоматическом секвенаторе ABI Prism Genetic Analyzer 3100 («Applied Biosystems», США).
Для проверки соответствия распределения генотипов ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга использовали стандартный метод х2 [9]. При сравнении частот аллелей и генотипов и оценке связи различных генотипов с риском развития лейкозов использовали двусторонний точный тест Фишера (программа GraphPad InStat). Относительный риск (ОР, OR — odds ratio) развития заболевания при определенном генотипе рассчитывали по формуле:
OR
a/b c/d
, где а = п±, Ь = ^-п±, с = п2, сі = ^-п2; N и N3 — численность выборки, п± и п2 — количество индивидуумов с изучаемым признаком в этих двух выборках.
В приведенных в данной работе расчетах ОР указан с 95%-м доверительным интервалом (95% ДИ). Критический уровень значимости для отвержения нулевой гипотезы принимали равным 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Распределение 0УР1А1 генотипов
Был проведен анализ частот CYP1A1 генотипов у детей с первично диагностированным острым лейкозом и в рецидиве заболевания. Среди пациентов с рецидивом ОЛЛ или ОМЛ генотип CYP1A1 *1/*2А выявляли чаще, чем в группе пациентов с первично диагностированным острым лейкозом (табл. 1). Следует отметить, что в случае пациентов с рецидивом ОЛЛ полученные различия были статистически значимыми (ОР 2,29, р = 0,0322). У пациентов с рецидивом острого лейкоза было отмечено статистически значимое увеличение частоты CYP1A1 генотипа *1/*2А по сравнению с группой пациентов с первичным лейкозом (ОР 2,11, р = 0,0291).
41
ПЕДИАТРИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ/ 2007/ ТОМ 4/ № 3
Оригинальная статья
Генотип, п (%)
СУР1А1 *1/*2А Другие сочетания аллельных вариантов ОР 95% ДИ Р
ОЛЛ (п = 258) ОЛЛ-рецидив (п = 74) 22 (8,5) 13 (17,6) 236 (91,5) 61 (82,4) •І— 09 2 1,09-4,80 0,0322
ОМЛ (п = 41) ОМЛ-рецидив (п = 30) 5 (12,2) 5 (16,7) 36 (87,8) 25 (83,3) 1,0 1,44 0,38-5,50 0,733
ОЛЛ + ОМЛ (п = 299) (ОЛЛ + ОМЛ)-рецидив (п = 104) 27 (9,0) 18 (17,3) 272 (91,0) 86 (82,7) 1,0 2,11| 1,11-4,02 0,0291
Примечание:
| Статистически значимые различия.
Распределение ЭвТ генотипов
В случае гена GSTT1 была выявлена обратная тенденция — «нулевой» GSTT1 генотип у детей с рецидивом ОЛЛ или ОМЛ выявляли значительно реже, чем у детей с первично диагностированным лейкозом, причем в группе больных ОЛЛ выявленные различия были статистически значимыми (ОР 0,48, р = 0,0227) (табл. 2). У пациентов с рецидивом острого лейкоза частота «нулевого» GSTT1 генотипа была в 1,8 раза ниже, чем у пациентов с первичным лейкозом (ОР 0,55, р = 0,0265).
Половые различия в частотах полиморфных вариантов генов системы биотрансформации
Был проведен анализ частот полиморфных вариантов генов системы биотрансформации при разделении пациентов и здоровых доноров на группы по половому признаку. Статистически значимых половых различий по частотам полиморфных вариантов генов системы биотрансформации выявлено не было.
Распределение СУР1А1 и ЭвТ генотипов у мальчиков с острыми лейкозами. Сочетание генотипа СУР1А1 *1/*2А и ЭвТ генотипов
При анализе частот СУР1Д1 генотипов с разделением пациентов по полу у мальчиков с рецидивом ОЛЛ было выявлено статистически значимое увеличение частоты генотипа СУР1Д1 *1/*2Д, по сравнению с группой мальчиков с первично диагностированным лейкозом (ОР 2,90, р = 0,033) (табл. 3).
У мальчиков с рецидивом ОЛЛ или ОМЛ также было обнаружено уменьшение частоты «нулевого» GSTT1 генотипа, по сравнению с группой мальчиков с первично диагностированным лейкозом, причем полученные различия были статистически значимыми только в случае ОЛЛ (ОР 0,35,
р = 0,0163). Частота «нулевого» GSTT1 генотипа у мальчиков с рецидивом острого лейкоза была в 2,7 раза ниже, чем у мальчиков с первично диагностированным лейкозом (ОР 0,37, р = 0,0085).
С помощью анализа ген-генных взаимодействий у мальчиков с рецидивом ОЛЛ было выявлено статистически значимое увеличение частоты генотипа СУР1Д1 *1/*2Д в сочетании с «ненулевым» GSTT1 генотипом, по сравнению с пациентами с первично диагностированным ОЛЛ (ОР 3,09, р = 0,0254) (табл. 3).
Распределение ЭвТ генотипов у девочек с острым лейкозом
При анализе частот GST генотипов у девочек с рецидивом ОЛЛ или ОМЛ было обнаружено уменьшение частоты «нулевого» GSTM1 генотипа, по сравнению с группой девочек с первично диагностированным лейкозом; различия были статистически значимыми только для ОЛЛ (ОР 0,37, р = 0,0303) (табл. 4). Частота «нулевого» GSTM1 генотипа у девочек с рецидивом острого лейкоза была в 2,4 раза ниже, чем у девочек с первичным лейкозом (ОР 0,41, р = 0,0175).
Полученные с помощью биочипа данные свидетельствуют о том, что определенные аллельные варианты генов системы биотрансформации могут быть факторами риска развития рецидива острого лейкоза. Большинство выявленных в настоящей работе закономерностей согласуется с данными литературы [10-14].
Так, например, увеличение частоты СУР1Д1 *1/*2Д генотипа в группе детей с рецидивом острого лейкоза может быть объяснено следующим образом. Синтетические глю-кокортикоиды (такие как дексаметазон и преднизолон) входят в большинство протоколов лечения ОЛЛ; согласно данным литературы, эти препараты могут потенцировать
Таблица 2. GSTT1 генотипы детей с острым лейкозом
ввт Генотип, п (%) ОР 95% ДИ Р
у/у ч/-
ОЛЛ (п = 258) ОЛЛ-рецидив (п = 74) 89 (34,5) 15 (20,3) 169 (65,5) 59 (79,7) 1,0 0,48| 0,26-0,90 0,0227
ОМЛ (п = 41) ОМЛ-рецидив (п = 30) 13 (31,7) 8 (26,7) 28 (68,3) 22 (73,3) 1,0 0,78 0,28-2,22 0,793
ОЛЛ + ОМЛ (п = 299) (ОЛЛ + ОМЛ)-рецидив (п = 104) 102 (34,1) 23 (22,1) 197 (65,9) 81 (77,9) 1,0 0,55| 0,33-0,92 0,0265
Примечание:
| Статистически значимые различия. соответствует гомозиготе по мутации, «N1/-» соответствует гетерозиготному варианту или гомозиготе дикого типа.
Таблица 3. CYP1A1 и GSTT1 генотипы мальчиков с первично диагностированными острыми лейкозами и в рецидиве заболевания. Сочетание CYP1A1 генотипа *1/*2А с «ненулевым» GSTT1 генотипом у мальчиков с ОЛЛ
Генотип, п (%)
CYP1A1 *1/*2A Другие сочетания аллельных вариантов ОР 95% ДИ Р
ОЛЛ (n = 144) ОЛЛ-рецидив (n = 48) 12 (8,3) 10 (20,8) 132 (91,7) 38 (79,2) 1,0 2,90| 1,16-7,22 0,033
GSTT1 V/V М/-
ОЛЛ (n = 144) ОЛЛ-рецидив (n = 48) 47 (32,6) 7 (14,6) 97 (67,4) 41 (85,4) 1,0 0,35| 0,15-0,85 0,0163
ОМЛ (n = 16) ОМЛ-рецидив (n = 18) 5 (31,3) 3 (16,7) 11 (68,8) 15 (83,3) 1,0 0,44 0,09-2,25 0,429
ОЛЛ + ОМЛ (n = 160) (ОЛЛ + ОМЛ)-рецидив (n = 66) 52 (32,5) 10 (15,2) 108 (67,5) 56 (84,8) 1,0 0,37| 0,18-0,79 0,0085
CYP1A1 *1/*2А + одна/обе аллели GSTT1 N/- Другие сочетания аллельных вариантов
ОЛЛ (n = 144) ОЛЛ-рецидив (n = 48) 10 (6,9) 9 (18,8) 134 (93,1) 39 (81,3) 1,0 3,09| 1,17-8,15 0,0254
Примечание:
| Статистически значимые различия. соответствует гомозиготе по мутации, «N1/-» соответствует гетерозиготному варианту или гомозиготе дикого типа.
43
Таблица 4. GSTM1 генотипы девочек с первично диагностированным острым лейкозом и в рецидиве заболевания
GSTM1 Генотип, п (%) ОР 95% ДИ Р
V/V N/-
ОЛЛ (n=114) 67 (58,8) 47 (41,2) 1,0 0,15-0,90 0,0303
ОЛЛ-рецидив (n=26) 9 (34,6) 17 (65,4) 0,37|
ОМЛ (n=25) 15 (60,0) 10 (40,0) 1,0 0,12-1,93 0,482
ОМЛ-рецидив (n=12) 5 (41,7) 7 (58,3) 0,48
ОЛЛ + ОМЛ (n=139) (ОЛЛ + ОМЛ)-рецидив (n=38) 82 (59,0) 14 (36,8) 57 (41,0) 24 (63,2) •і 01 Н Ч. 0 0,19-0,85 0,0175
Примечание:
| Статистически значимые различия. <^^» соответствует гомозиготе по мутации, «N1/-» соответствует гетерозиготному варианту или гомозиготе дикого типа.
каталитическую активность фермента CYP1A1, действуя на него через глюкокортикоид-чувствительные рецепторы [10, 15]. Индукция экспрессии гена CYP1A1 химиопрепаратами, применяемыми при лечении ОМЛ, в литературе не описана, тем не менее механизм действия данных противоопухолевых агентов предполагается сходным. Наличие полиморфизма в гене CYP1A1, в свою очередь, приводит к повышению ферментативной активности и, тем самым, обусловливает увеличение концентрации промежуточных генотоксичных метаболитов [13, 16]. Вероятно, поэтому носители генотипа CYP1A1 *1/*2A более чувствительны к канцерогенному действию противоопухолевых препаратов, что и определяет предрасположенность к повторному возникновению опухоли (в частности, к развитию рецидива острого лейкоза).
С другой стороны, уменьшение частоты «ненулевого» GSTT1 и/или GSTM1 генотипа у пациентов с рецидивом острого лейкоза также вполне объяснимо. GST участвуют в метаболизме многих противоопухолевых препаратов и могут обусловливать устойчивость к цитотоксичным химиопрепаратам, применяемым при лечении опухолевых заболеваний [14, 17]. Следовательно, можно предположить, что отсутствие фермента GSTT1 (у носителей «нуле-
вого» GSTT1 генотипа) приводит к накоплению цитоток-сичных препаратов, что в значительной степени повышает эффективность их действия и обусловливает более длительную безрецидивную выживаемость.
Кроме того, у мальчиков с рецидивом ОЛЛ было выявлено увеличение частоты генотипа CYP1A1 *1/*2А в сочетании с «ненулевым» GSTT1 генотипом, по сравнению с группой мальчиков с первично диагностированным ОЛЛ. Полученные различия позволяют предположить, что для носителей остальных генотипов противоопухолевая терапия является значительно более эффективной: при попадании в организм цитотоксичных препаратов отсутствие варианта CYP1A1 *1/*2А не приводит к повышению активности фермента CYP1A1 и, следовательно, не предрасполагает к повторному развитию опухоли (в том числе, рецидива), а наличие «нулевого» GSTT1 генотипа способствует накоплению цитотоксичных и иммуносу-прессирующих метаболитов, усиливая этим эффективность их действия.
Таким образом, в настоящей работе показано, что изученные генотипы CYP1A1 и GST можно рассматривать как прогностические факторы риска развития рецидива острого лейкоза у детей.
ПЕДИАТРИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ/ 2007/ ТОМ 4/ № 3
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Алексеев Н.А. Гематология детского возраста. Руководство для врачей. — СПб.: Гиппократ, 1998.
2. Вуд М.Э., Банн П.А. Секреты гематологии и онкологии. Под ред. Ю.Н. Токарева и Е.А. Бухны. — М.: Бином, 1997.
3. Chan K.W. Acute lymphoblastic leukemia // Curr Probl Pediatr Adolesc Health Care. — 2002. — V. 32, № 2. — P 40-49.
4. Майорова О.А., Нетребенко О.К., Шумилов П.В. Влияние полиморфных вариантов ферментных систем на развитие онкологических процессов (нутрициологические аспекты) // Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. — 2003. — Т. 2, № 1. — C. 45-48.
5. Чупова Н.В., Самочатова Е.В., Руднева А.Е и др. Генетический полиморфизм тиопурин-в-метилтрансферазы в лечении детей с острым лимфобластным лейкозом // [ематология и трансфузио-логия. — 2005. — Т. 50, № 6. — C. 3-9.
6. Баранов В.С., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э. и др. Геном человека и гены «предрасположенности». Введение в предиктивную медицину. — СПб.: Интермедика, 2000.
7. Calvert H. An overview of folate metabolism: features relevant to the action and toxicities of antifolate anticancer agents // Semin Oncol. — 1999. — V. 26 (2 Suppl. 6). — P. 3-10.
8. Глотов А.С., Наседкина Т.В., Иващенко Т.Е. и др. Разработка биочипа для анализа полиморфизма генов системы биотрансформации // Молекулярная биология. — 2005. — № 39. — С. 403-412.
9. Вейр Б. Анализ генетических данных. Под ред. Л.А. Животов-ского и А.И. Пудовкина. — М.: Мир, 1995.
10. Krajinovic M., Labuda D., Mathonnet G. et al. Polymorphisms in genes encoding drugs and xenobiotic metabolizing enzymes, DNA
repair enzymes, and response to treatment of childhood Acute Lymphoblastic Leukemia // Clin Cancer Res — 2002. — V. 8. — R 802-810.
11. Rocha J.C., Cheng C., Liu W. et al. Pharmacogenetics of outcome in children with acute lymphoblastic leukemia // Blood. — 2005. — V. 105, № 12. — R 4752-4758.
12. Stanulla M., Schrappe M., Brechlin A.M. et al. Polymorphisms within glutathione S-transferase genes (GSTM1, GSTT1, GSTR1) and risk of relapse in childhood B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia: a case-control study // Blood. — 2000. — V. 95, № 4. — R. 1222-1228.
13. Voso M.T., D'Alo F., Gumiero D. et al. The CYR1A1*2a allele is an independent prognostic factor for acute myeloid leukemia // Haematologica. — 2005. — V. 90, № 7. — R 982-984.
14. Anderer G., Schrappe M., Brechlin A.M. et al. Rolymorphisms within glutathione S-transferase genes and initial response to glucocorticoids in childhood acute lymphoblastic leukaemia // Rharmacogenetics. — 2000. — V. 10, № 8. — R. 715-726.
15. Celander M., Weisbrod R., Stegeman J.J. Glucocorticoid potentiation of cytochrome R4501A1 induction by 2,3,7,8-tetrachlorodiben-zo-p-dioxin in porcine and human endothelial cells in culture // Biochem Biophys Res Commun. — 1997. — V. 232, № 3. — R. 749-753.
16. Infante-Rivard C., Labuda D., Krajinovic M. et al. Risk of childhood leukemia associated with exposure to pesticides and with gene polymorphisms // Epidemiology. — 1999. — V. 10, № 5. — R 481-487.
17. Rapageorgiou G., Iliadis S., Botsoglou N. et al. Lipid peroxidation of rat myocardial tissue following daunomycin administration // Toxicology. — 1998. — V. 126, № 2. — R 83-91.
Автор выражает большую признательность за неоценимый вклад в проведенное исследование А.С. Глотову, Ж.М. Кожекбаевой, О.В. Макаровой, Т.В. Наседкиной.
Официальное издание Союза
ПерИОДИЧНОСТЬ ВЫХОДа: 6 раз в год
Адрес редакции: 119991, Москва, Ломоносовский
Оригинальные статьи Обзоры литературы Лекции Обмен опытом В помощь врану Клиническое наблюдение Социальная педиатрия и организация здравоохранения • Из истории медицины
Журнал входит в Перечень ведущих научных журналов и изданий ВАК
Целевая аудитория
Педиатры, детские хирурги, детские диетологи, научные работники и преподаватели вузов, организаторы здравоохранения
Отдел рекламы: e-mail: [email protected]
rek1 @nczd.ru Телефон (495) 132-30-43
Издаётся с 2002 г.
Тираж 5 ООО экземпляров
(495) 132-72-04, e-mail: [email protected]
HJrrwll «1>»<Г|Ин1Г пин Cfl« r-.il [¥>¿1 lbU{Vihi I'QTiIhh
Вопросы современной педиатрии
Главный редактор журнала -
Академик РАМН, председатель Исполкома Союза педиатров России, директор Научного центра здоровья детей РАМН Баранов Александр Александрович
