CC BY
13
RUSSIAN JOURNAL OF ONCOLOGY. 2018; 23 (3-6) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133
CLINICALINVESTIGATIONS
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2018
Гришина К.А.1, Поспехова Н.И.1, Хайленко В.А.2, Карпухин А.В.1
АССОЦИАЦИЯ ЭКСПРЕССИИ МИКРОРНК С РАННЕй СТАДИЕй МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ РАКА МОЛОчНОй ЖЕЛЕЗЫ
'ФГБНУ «Медико-генетический научный центр им. акад. Н.П. Бочкова», 115522, Москва, Россия; 2ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Министерства здравоохранения РФ, 115478, Москва, Россия
Серьёзным осложнением рака молочной железы (РМЖ) является метастазирование опухолевых клеток. Инициация данного процесса происходит в близлежащие лимфатические сосуды. На сегодняшний день молекулярные механизмы метастазирования недостаточно изучены и требуются дальнейшие исследования. В этом плане уровень экспрессии микроРНК может дать информацию о механизмах развития метастазирования и быть источником маркеров прогноза метастатического РМЖ. В настоящей работе, по данным литературы, нами были отобраны 4 микроРНК (miR-34a, miR-145, miR-125b и miR-222), потенциально способных быть связанными с метастазированием, для изучения их ассоциации с метастазированием в лимфатические узлы на ранней стадии.
Измерение экспрессии 4 отобранных микроРНК на 40 парных образцах (опухоль-норма) производилось при помощи ПЦР в реальном времени. Были определены частоты пониженной или повышенной экспрессии микроРНК miR-34a, miR-145, miR-125b и miR-222 относительно нормальной ткани. Для более детального изучения связи экспрессии микроРНК с метастазированием в лимфатические узлы были выбраны miR-125b и miR-222. Была найдена ассоциация экспрессии этих 2 микроРНК с началом метастазирования в лимфатические узлы: с одинаковым уровнем достоверности различия (р=0,01).
Обе микроРНК (miR-125b и miR-222) участвуют в метастазировании РМЖ, видимо, посредством воздействия на эпителиально-мезенхимальный переход. Они потенциально могут выступать в качестве прогностических биомаркеров для оценки вероятности ранних метастазов в лимфатические узлы при РМЖ.
Ключевые слова: рак молочной железы; метастазирование; лимфатические узлы; экспрессия; микроРНК; miR-34a; miR-145; miR-125b; miR-222.
Для цитирования: Гришина К.А., Поспехова Н.И., Хайленко В.А., Карпухин А.В. Ассоциация экспрессии микроРНК с ранней стадией метастазирования рака молочной железы. Российский онкологический журнал. 2018; 23 (3-6): 129-133. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133. Для корреспонденции: Гришина Кристина Александровна, научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики сложно наследуемых заболеваний ФГБНУ «Медико-генетический научный центр им. акад. Н.П. Бочкова». E-mail: [email protected] Участие авторов:
Концепция и дизайн исследования - Карпухин А.В., Гришина К.А., Поспехова Н.И. Сбор и обработка материала - Хайленко В.А., Поспехова Н.И., Гришина К.А. Статистическая обработка - Карпухин А.В., Гришина К.А. Написание текста - Карпухин А.В., Гришина К.А. Редактирование - Карпухин А.В.
GrishinaK.A.1, PospekhovaN.I.1, KhaylenkoV.A.2, KarpukhinA.V.1
ASSOCIATION OF MICRORNA EXPRESSION WITH EARLY STAGE OF BREAST CANCER METASTASIS
1Research Centre for Medical Genetics (RCMG), 115522, Moscow, Russian Federation;
2N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology оf the Ministry of Health of the Russian Federation, 115478, Moscow, Russian Federation
A serious complication of breast cancer is metastasis of tumor cells. The initiation of this process takes place in the nearby lymphatic vessels. To date, the molecular mechanisms of metastasis are not well understood and further research is required. In this regard, the level of miRNA expression can provide information both on the mechanisms of metastasis development and also be a source of markers for the prognosis of metastatic breast cancer. In the present work, according to the literature, we selected four microRNAs (miR-34a, miR-145, miR-125b and miR-222), potentially capable of being associated with metastasis, to study their association with metastasis to lymph nodes at an early stage.
The measurement of the expression offour selected miRNAs on 40 paired samples (tumor-norm) was performed using real-time PCR. Frequencies of miR-34a, miR-145, miR-125b, and miR-222 relative to normal tissue were determined for reduced or increased miR-mRNA expression. For a more detailed study of the association of miRNA expression with lymph node metastasis, miR-125b and miR-222 were selected. An association of expression of these two miRNAs was found with the onset of metastasis to the lymph nodes: with the same level of confidence, differences (p = 0.01). Both miRNAs (miR-125b and miR-222) are involved in the metastasis of breast cancer, apparently by influencing the epithelial-mesenchymal transition. They can potentially act as prognostic biomarkers to assess the likelihood of early lymph node metastases in breast cancer.
Keywords: breast cancer, metastasis, lymph nodes, expression, miR-34a, miR-34a, miR-145, miR-125b, miR-222, marker.
For citation: Grishina K.A., Pospekhova N.I., KhaylenkoV.A., Karpukhin A.V. Association of microRNA expression with early stage of breast cancer metastasis. Rossiiskii onkologicheskii zhurnal. (Russian Journal of Oncology). 2018; 23 (3-6): 129-133. (In Russ). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133.
РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2018; 23 (3-6) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133
MMHMHECKME MŒflEflOBAHIM
For correspondence: Kristina A. Grishina, researcher of the Laboratory of molecular genetics of complex inherited diseases RCMG. E-mail: [email protected] Contribution Authors: Grishina, Pospekhova, Khaylenko, Karpukhin Authors participation:
The concept and design of the study - Karpukhin, Grishina, Pospekhova Collection and processing of material - Khaylenko, Pospekhova, Grishina Statistical processing - Karpukhin, Grishina Text Writing - Karpukhin, Grishina Editing - Karpukhin Information about authors: Grishina K. A. https://orcid.org/0000-0002-0394-7801 Pospekhova N. I. https://orcid.org/0000-0001-5255-5065 KhaylenkoV. A. https://orcid.org/0000-0002-9924-5854 Karpukhin A. V. https://orcid.org/0000-0002-7001-9116 Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Acknowledgment. The work was performed as part of the state assignment of the Ministry of Science and Higher Education of Russia.
Received 21 August 2018 Accepted 04 September 2018
Рак молочной железы (РМЖ) относится к наиболее распространённым типам рака. Каждый год РМЖ диагностируется у 2,1 миллиона женщин. По оценкам, в 2018 г. от РМЖ умерло 627 тыс. женщин -это примерно 15% всех случаев смерти от рака среди женщин. В то время как уровень заболеваемости РМЖ выше среди женщин в более развитых регионах, он увеличивается почти во всех регионах мира [1].
Серьёзным осложнением РМЖ является мета-стазирование опухолевых клеток в ткани других органов. Инвазивный РМЖ развивается у 240 тыс. женщин и приводит к 40 тыс. смертельных случаев в год в США [2]. Инициация данного процесса происходит в близлежащие лимфатические сосуды, и в основном данный процесс затрагивает подмышечный лимфатический узел. Несмотря на достижения высокого охвата скрининговыми методами, почти у 12% женщин с РМЖ обнаруживают метастазы. Ме-тастазирование наиболее часто приводит к летальному исходу.
В настоящее время существует ряд эффективных методов лечения РМЖ, но метастатический РМЖ редко поддаётся лечению. Хотя хирургическое вмешательство является основным методом лечения, большое значение имеет адъювантная химиотерапия. Этот факт, а также развитие персонализированной медицины приводят к задаче более точного прогнозирования течения заболевания, связанного с этим объёма хирургического вмешательства, а также выбора средств таргетной терапии у больных РМЖ.
На сегодняшний день молекулярные механизмы метастазирования недостаточно изучены и требуются дальнейшие исследования. В этом плане уровень экспрессии микроРНК может дать информацию как о механизмах развития метастазирования, так и быть источником маркеров прогноза метастатического рака молочной железы. Выявление и изучение микроРНК, тесно связанных с развитием метастатического РМЖ, могут внести существенный вклад в понимание процессов, происходящих при метастазировании опухоли, и персонификацию лечения. Таким эффективным средством диагностики может быть метод, основанный на количественном определении уровня микроРНК.
МикроРНК представляют собой группу небольших молекул, которые эволюционно высококонсервативны и кодируются примерно 1% генома у большинства видов. Это класс некодирующих белок РНК, которые функционируют в качестве регуляторов генов путём деградации их мРНК-мишеней и ингибирования трансляции. Было обнаружено более 2 тыс. микроРНК человека, которые регулируют около 30% всех генов [3].
В настоящей работе по данным литературы нами были отобраны 4 микроРНК (miR-34a, miR-145, miR-125b и miR-222), потенциально способных быть связанными с метастазированием, для изучения их ассоциации с метастазированием в лимфатические узлы на ранней стадии.
Материалы и методы
В данной работе исследовались парные свежезамороженные образцы нормальной и опухолевой ткани молочной железы больных, проходивших лечение в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Бло-хина» Минздрава России. В исследование были включены парные образцы (опухоль-норма) ткани молочной железы 40 больных РМЖ в возрасте 3683 года, включая 10 больных с ранними метастазами в лимфатические узлы (преимущественно N1). Все образцы охарактеризованы гистологически, имму-ногистохимически и классифицированы по TNM, а также указаны баллы по рецепторам эстрогена и прогестерона. Основное их число представлено инфильтративным протоковым РМЖ и 24 больных имеют более 5 баллов по рецептору эстрогена (медиана уровня экспрессии рецепторов эстрогена а в опухолевой строме) по данным иммуногистохи-мии. В выборке представлены в основном больные с РМЖ люминального типа А и В.
Выделение РНК производили при помощи наборов: miRNeasyMiniKit (QIAGEN, США) - предназначенных для ткани. Все процедуры проводили согласно инструкции к наборам. Наличие и качество РНК проверяли, используя электрофорез в 1,8% агарозном геле. Электрофорез проводили в горизонтальном аппарате для электрофореза SUB CELL 96 BIO-RAD производства США при постоянной силе тока 130 мА в течение 30 мин. Концентрацию водного раствора РНК определяли на спектрофотоме-
RUSSIAN JOURNAL OF ONCOLOGY. 2018; 23 (3-6) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133
CLINICAL INVESTIGATIONS
тре Nanodrop 1000 (ThermoScientific, США) согласно инструкции к прибору. Обратную транскрипцию проводили, используя набор TagManMicroRNAReve гееТга^спрйопКй (AppliedВiosystems, США). Уровень экспрессии измеряли с помощью прибора для ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ)-StepOnePlus (AppliedВiosystems, США). Каждое измерение проводили трижды. ПЦР-РВ осуществляли с использованием наборов для оценки уровня экспрессии микроРНК TaqMan® miRNAAssays hsa-miR-125b-5p,TaqMan® miRNAAssays hsa-miR-222*, TaqMan® miRNA hsa-miR-34a-5p, TaqMan® miRNAAssays hsa-miR-145. Анализ результатов проводили с помощью встроенного программного обеспечения StepOneSoftware, которое позволяет сравнить относительные количества целевой последовательности РНК в опухолевой и нормальной ткани. В качестве контрольной использовали микроРНКи48. В результате обработки измерений получены значения уровней экспрессии микроРНК в опухолевой ткани относительно нормальной. Полученный массив данных обрабатывался с использованием пакета стандартных программ Statistica 10.0 иMedCalc. Уровень значимости для выявленных различий принимали равным <0,05.
Методом количественной ПЦР-РВ в парных образцах (опухоль-норма) у 40 больных были определены уровни экспрессии 4 микроРНК: miR-34a, miR-145, miR-125b и miR-222. Больные были разбиты на 2 группы по исследуемому признаку, ме-тастазирование в лимфатические узлы. С использованием ROC-анализа были определены пороги, оптимально разделяющие метастазирующие опухоли и без метастазов по уровню экспрессии ми-кроРНК, которые составили: для miR-34a больше 31,6, для miR-125b больше 3,6, для miR-145 больше 2, для miR-222 больше 3. Дальнейшую обработку производили с использованием данных порогов статистическим методом с использованием критерия Фишера. Уровень значимости принимали равным менее 0,05.
Результаты
Были исследованы особенности экспрессии 4 микроРНК (miR-34a, miR-145, miR-125b и miR-222) в парных образцах РМЖ (опухоль-норма) без метастазирования в лимфатические узлы (N0) и на ранних этапах метастазирования в лимфатические узлы (N1). Первоначально были определены частоты пониженной или повышенной экспрессии указанных микроРНК относительно нормальной ткани.
В соответствии с полученными результатами, микроРНК miR-34a экспрессируется примерно в одинаковом числе случаев как пониженно, так и повышенно относительно нормы, в то время как miR-145, miR-125b и miR-222 экспрессируются в основном (65-85% случаев) пониженно по отношению к нормальной ткани (рис. 1).
Также были отдельно проанализированы группы метастазирующих опухолей и без метастазов. Так как было заметно обогащение опухолей больных с метастазированием экспрессией рецептора эстрогена более 5 баллов (9 больных из 10), предварительно была проанализирована возможная связь метастазирующих опухолей с эстрогеновым стату-
сом. Было получено, что частоты опухолей с высокими баллами эстрогена и меньше 5 не отличаются в группах с и без метастазирования в лимфатические узлы (р=0,4). То есть накопление метастатических опухолей в группе с экспрессией эстрогена является случайным.
При анализе экспрессии микроРНК отдельно по группам, видно, что профиль экспрессии ми-кроРНК в группе без метастазирования в лимфатические узлы похож на профиль экспрессии целой выборке (рис. 1 и 2а).
В то же время профиль экспрессии в группе больных с ранним началом метастазирования в лимфатические узлы демонстрирует, что микроРНК
70 60
miR-34a
miR-125b miR-222
Повышенная ■ Пониженная
miR-145
Рис. 1. Частоты экспрессии микроРНК в образцах опухоли РМЖ относительно нормальной ткани
90 80
miR-34a
miR-125b miR-222
Повышенная ■ Пониженная
miR-145
120 100
II
miR-34a
miR-125b miR-222
Повышенная ■ Пониженная
miR-145
Рис.2. Частоты повышенной и пониженной экспрессии 4 микроРНК относительно нормы: а) в группе больных без метастазирования в лимфатические узлы, б) в группе больных с ранним началом метастазирования в лимфатические узлы
90
80
50
40
30
20
10
0
70
60
50
40
30
20
10
0
80
60
40
20
0
РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2018; 23 (3-6) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
miR-34a, miR-125b и miR-222 экспрессируются примерно в одинаковом числе случаев как пониженно, так и повышенно, а miR-145 экспрессирует-ся в основном пониженно (80% случаев) (рис. 2б). Как видно при анализе указанных профилей экспрессии, наиболее значимые изменения по отношению к неметастазирующим опухолям наблюдаются для микроРНК miR-125b - повышенная экспрессия в группе с метастазированием составила большую долю случаев (40%) по сравнению с группой без метастазов (4%). Подобные отличия наблюдались и в отношении miR-222 - в группе с метастазирую-щими опухолями заметно больше случаев с повышенной экспрессией. Характеристики экспрессии miR-145 практически не изменились, невелики отличия экспрессии miR-34a (рис. 2 а,б).
Для более детального изучения связи экспрессии микроРНК с метастазированием в лимфатические узлы были выбраны miR-125b и miR-222. С использованием точного критерия Фишера и определённых при ROC анализе пороговых значений экспрессии была найдена ассоциация экспрессии 2 микроРНК (miR-125b и miR-222) с началом метастазирования в лимфатические узлы: с одинаковым уровнем достоверности различия (р=0,01). Экспрессия этих микроРНК связана с существенным риском метастазирования РМЖ. Относительный риск (ОР) составил для miR-125b ОР = 6,00, 95%ДИ 1,39 -25,95 и для miR-222 ОР = 2,16, 95%ДИ 1,89 -3,62.
Обсуждение
Хотя участие микроРНК в метастазировании РМЖ известно, их роль в развитии РМЖ на ранней стадии метастазирования изучена недостаточно. Нами исследована связь экспрессии 4 микроРНК с началом метастазирования в лимфатические узлы
(N1).
Экспрессия 3 из изученных микроРНК (miR-145, miR-125b и miR-222) была понижена в основном числе образцов, что согласуется с данными, полученными в других работах [4-6]. МикроРНК miR-34а в нашей выборке была экспрессирована в близком соотношении по числу образцов как повышенно, так и пониженно относительно нормальной ткани. Имеющиеся в литературе данные неоднозначны - наблюдали как пониженную экспрессию miR-34a при РМЖ [7], так и разнонаправленную экспрессию этой микроРНК в различных образцах РМЖ [8]. Такая ситуация обусловлена, видимо, разным составом выборок РМЖ. Например, при лю-минальном раке чаще наблюдается повышение экспрессии miR-34a относительно нормы [8].
С ранней стадией метастазирования в лимфатические узлы оказались ассоциированы 2 микроРНК (miR-125b и miR-222). Данные литературы по микроРНК miR-125b противоречивы. Эта микроРНК по-разному экспрессируется в разных типах онкологических заболеваний, однако в опухолях яичника и молочной железы - низко экспрессируется [5]. Полученные нами результаты при неметастатическом РМЖ коррелируют с данными литературы. Но при исследовании ассоциации miR-125b с ранним началом метастазирования в лимфатические узлы было выявлено статистически достоверное увеличение числа случаев с повышенной экспрес-
сией при метастазировании. То есть, повышенная экспрессия miR-125b ассоциирована с началом метастазирования в лимфатические узлы. Эти данные указывают в пользу действия этой микроРНК в качестве онкомира. Такое действие может быть связано с её участием в процессах эпителиально-мезенхимального перехода. Эпителиально-мезен-химальный переход - это процесс молекулярного перепрограммирования и фенотипического изменения, которое проявляется переходом эпителиальных клеток, связанных друг с другом полярной связью, что позволяет им быть неподвижными и крепко сцепленными, к подвижным мезенхималь-ным клеткам, что повышает их инвазивные свойства. Эпителиально-мезенхимальный переход сигнализирует о ранней стадии метастазирования, так как клетки, в которых происходят молекулярные изменения для разрыва соединения «клетка-клетка», способны отделяться от первичного очага опухоли, проникать через базальную мембрану в кровоток и приобретать обратно эпителиальный фенотип с образованием метастаза [9]. Повышенная экспрессия miR-125b способна приводить к изменению фенотипа клеток РМЖ (эпителиально-мезенхимальный переход), действуя через свою прямую мишень -ген-супрессор опухоли STARD13, путем реорганизации актиновогоцитоскелета. MiR-125b оказывает положительное действие на экспрессию Vimentin и a-SMA, также участвующих в процессе эпителиаль-но-мезенхимального перехода.
Сообщалось, что микроРНК могут находиться в ломких участках хромосом, в частности, микроРНК miR-125b-1 находится в участке хромосомы 11q23. Возможно, что хромосомные транслокации могут привести к аберрантно высокой экспрессии miR-125b в молочной железе и других типах опухолей. Кроме того, микроРНК miR-125b может вмешиваться в онкогенную передачу сигналов, ингибируя ключевые компоненты сети p53, действуя как онко-генная miRNA, напрямую взаимодействуя с геном-супрессором опухоли p53 [10].
Ещё одна микроРНК - miR-222 - имела существенное различие экспрессии между группами с ранним метастазированием опухолей и без метаста-зирования. Данная микроРНК также оказывает влияние на эпителиально-мезенхимальный переход посредством гена-мишени TRPS1и ZEB. Нокдаун гена TRPS1 приводит к увеличению экспрессии ZEB2, что в свою очередь через ген E-cadherin приводит к потере контакта «клетка-клетка». Увеличение экспрессии miR-222 способствует усилению миграции клеток и инвазии. Негативная регуляция мРНК E-кадгерина с помощью miR-221/222 является результатом воздействия miR-221/222 на TRPS1 и, таким образом, ослабления его ингибирования ZEB2 [6]. Наша работа демонстрирует увеличение экспрессии онкомира miR-222 при метастазировании. Впервые была показана ассоциация повышенной экспрессии данной микроРНК с начальным этапом метастазирования в лимфатические узлы.
Таким образом, обе микроРНК (miR-125b и miR-222) участвуют в метастазировании РМЖ, видимо, посредством воздействия на эпителиально-мезен-химальный переход. Повышенные экспрессии данных микроРНК в опухолях молочной железы по сравнению с условно-нормальной тканью указыва-
RUSSIAN JOURNAL OF ONCOLOGY. 2018; 23 (3-6) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2018-23-3-6-129-133
ют на их роль как онкомиров в данном типе опухолей. Вследствие их связи с ранним метастазиро-ванием РМЖ они потенциально могут выступать в качестве прогностических биомаркеров для оценки вероятности ранних метастазов в лимфатические узлы при РМЖ.
Соблюдение этических стандартов Данное исследование одобрено комитетом по этике ФГБНУ «МГНЦ им. Н.П. Бочкова».
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Благодарность. Работа выполнена в рамках государственного задания Минобрнауки России.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. https://www.who.int/cancer/prevention/diagnosis-screening/ breast-cancer/en/
2. Woods R. W., Camp M., Durr N. J., Harvey S. (Accepted/In press). A Review of Options for Localization of Axillary Lymph Nodes in the Treatment of Invasive Breast Cancer. AcademicRa-diology. https://doi.org/10.1016/j.acra.2018.07.002
3. Гришина К.А., Хайленко В.А., Хайленко Д.В., Карпухин А.В. Роль микроРНК в развитии РМЖ и их потенциал в качестве биомаркеров этого заболевания. Опухоли женской репродуктивной системы. 2018; 15 (3): 40-7. https://doi. org/10.17650/1994-4098-2018-14-3-40-47
4. Hu J., Guo H., Li H., Liu Y., Liu J. et al. Retraction: MiR-145 Regulates Epithelial to Mesenchymal Transition of Breast Cancer Cells by Targeting Oct4. PLoS One. 2013; 8 (5): 10.1371/
CLINICAL INVESTIGATIONS
annotation/aaef10de-ee36-416f-93eb-959dfa3dc92e. https://doi. org/10.1371/annotation/aaef10de-ee36-416f-93eb-959dfa3dc92e
5. Feng Tang, Rui Zhang, Yunmian He, Meijuan Zou, Le Guo, Tao Xi. MicroRNA-125b Induces Metastasis by Targeting STARD13 in MCF-7 and MDA-MB-231 Breast Cancer Cells. PLoS One. 2012; 7 (5): e35435. https://doi.org/10.1371/journal. pone.0035435
6. Chernyy V., Pustylnyak V., Kozlov V., Gulyaeva L. Increased expression of miR-155 and miR-222 is associated with lymph node positive status. Journal of Cancer. 2018; 9 (1): 135-40. DOI: 10.7150/jca.22181.
7. Xiaoping Rui, Haibin Zhao, Xianqiu Xiao, Li Wang, Lin Mo, Yao Yao. MicroRNA-34a suppresses breast cancer cell proliferation and invasion by targeting Notch1. Exp.Ther. Med. 2018; 16 (6): 4387-92. DOI: 10.3892/etm.2018.6744
8. Paola Bonetti, Montserrat Climent, Fabiana Panebianco, Chiara Tordonato, Angela Santoro, Matteo Jacopo Marzi, Pier Giuseppe Pelicci, Andrea Ventura & Francesco Nicassio. Dual role for miR-34a in the control of early progenitor proliferation and commitment in the mammary gland and in breast cancer. Oncogene. 2019; 38: 360-74. https://doi.org/10.1038/s41388-018-0445-3
9. Yilmaz M., Christofori G. EMT, the cytoskeleton, and cancer cell invasion. Cancer Metastasis Rev. 2009; 28: 15. https://doi. org/10.1007/s10555-008-9169-0
10. Yanwei Luo Xinye Wang Weihong Niu Heran Wang Qiuyuan Wen Songqing Fan Ran Zhao Zheng Li Wei XiongShuping Peng Zhaoyang Zeng Xiaoling Li Guiyuan Li Ming Tan Ming Zhou. Elevated microRNA-125b levels predict a worse prognosis in HER2-positive breast cancer patients. Oncology letters. 2016: 867-74. https://doi.org/10.3892/ol.2016.5482
Поступила 21.08.2018 Принята к печати 04.09.2018
