CC BY
31УДК 678.048:611-018.54+616.314.17-008.1
Вишневская А.А.
к. мед. н.
Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины» DOI: 10.24411/2520-6990-2020-12037 АНТИОКСИДАНТНО-ПРООКСИДАНТНОЕ СООТНОШЕНИЕ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО ПАРОДОНТИТА ПЛАЗМОГЕЛЕМ И ГИАЛУРОНОВОЙ
КИСЛОТОЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Vyshnevska A.A.
candidate of medical Sciences
State Establishment« The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery National Academy of Medical Science of Ukraine»
ANTIOXIDANT-PROOXIDANT CORRELATION IN SERUM OF BLOOD IN TREATMENT OF GENERALIZED PERIODONTITIS WITH PLASMOGEL AND HYALURONIC ACID IN
EXPERIMENT
Аннотация.
Работа выполнялась по изучению прооксидантно-антиоксидантного баланса в сыворотке крови в динамике при лечении генерализованного пародонтита комплексом биологически активных препаратов включающих плазмогель и гиалуроновую кислоту. Показано, что наиболее эффективной схемой лечения можно считать комбинированное применение плазмогеля из тромбоцитарной аутоплазмы и препарата гиалуроновой кислотой Hyadent BG на это указывает достоверное повышение индекса АПИ во втором сроке лечения.
Abstract.
The work was carried out to study the prooxidant-antioxidant balance in blood serum in dynamics in the treatment of generalized periodontitis with a complex of biologically active preparations including plasmogel and hyaluronic acid. It has been shown that the combined treatment ofplasmogel from platelet autoplasma and Hya-dent BG hyaluronic acid drug can be considered the most effective treatment regimen. This is indicated by a significant increase in the API index in the second term of treatment.
Ключевые слова: генерализованный пародонтит, плазмогель, гиалуроновая кислота, антиокси-дантно-прооксидантный индекс.
Keywords: generalized periodontitis, plasmogel, hyaluronic acid, antioxidant-prooxidant index.
Введение. Проблема генерализованного пародонтита является одной из самых сложных в стоматологии. На сегодняшний день эта проблема уже вышла на общемедицинский уровень, так как заболевания пародонта имеют связь с общесоматической патологией [1, 2]. В патогенезе пародонтита известна роль оксидативного стресса в котором одно из ведущих мест занимает перекисное окисление липидов (ПОЛ). При хроническом генерализованном пародонтите в тяжелой степени течения этот процесс приводит к повреждению клеточных мембран и интенсивности системного ответа организма на воспаление [3].
Цель исследования. Изучить в динамике состояние антиоксидантно-прооксидантного баланса в сыворотке крови при лечении генерализованного пародонтита плазмогелем из тромбоцитарной аутоплазмы и препаратом с гиалуроновой кислотой Ну-ааеШ Вв.
Материалы и методы. Для экспериментальных исследований было использовано 50 белых крыс линии Вистар стадного разведения, обоего пола, 2,5 -3 месячного возраста, весом 250-300г. Все животные находились на стандартном рационе вивария. Животные были разделены на 5 групп по 10 животных в каждой.
Первая группа (п=10, 5 самцов и 5 самок) служила для контроля здоровых показателей животных.
Животным 2,3,4 и 5 групп пародонтит моделировали лигатурной моделью, путем наложения лигатуры на резец верхней челюсти в области десне-вой борозды на протяжении 14 дней. Через 14 дней всем животным лигатуры снимали и проводили лечение [4].
Вторая группа животных являлась контрольной группой модели пародонтита (п=10, 5 самцов и 5 самок) в ней после снятия лигатур производили обработку десны марлевым тампоном смоченным 0,9 % раствором №С1, 2 раза с интервалом в 7 дней.
В третьей группе (п=10, 5 самцов и 5 самок) лечение проводили нанесением на десну плазмогеля из тромбоцитарной аутоплазмы, 2 раза с интервалом в 7 дней. Плазмогель получали по следующей схеме: производили забор крови у каждой крысы из хвостовой вены в количестве 2 мл, кровь собирали в пробирку с 0,2 мл раствора гепарина, центрифугировали на скорости 1000 об./мин. в течение 5 минут, полученную фракцию плазмы из пробирки отбирали шприцом, который помещали в термостат ТБВ-120 для приготовления плазмогеля, при температуре +80°С в течение 7 минут, охлаждали при
<<Ш11ШетиМ~^®и©Ма1>#!9Ш)),2©2© / MEDICAL SCIENCES_
кислоты в виде аппликаций как описано в четвертой группе животных. Интервалы между введениями обоих препаратов составляли 7 дней.
С целью изучения динамики изменений АПИ после лечения плазмогелем, препаратом с гиалуро-новой кислотой и комбинированной методики их применения экспериментальные животные выводились из эксперимента в 2 срока. Крыс подгрупп 1а, 2а, 3а, 4а и 5а выводили из эксперимента на следующий день после второго введения. Крысам подгруппы 1б, 2б, 3б, 4б и 5б проводили эвтаназию через 3 недели после второго введения.
Животных выводили из эксперимента под тио-пенталовым наркозом (20мг/кг) и производили забор крови для дальнейших биохимических исследований.
Биохимическими методами в сыворотке крови крыс определяли активность каталазы [5], малонового диальдегида (МДА) [6] и подсчитывали анти-оксидантно-прооксидантный индекс (АПИ).
Обработку результатов проводили вариационно-статистическими методами анализа на персональном компьютере IBM PC в SPSS SigmaStat 3.0 и StatSoft Statistica 6.0. [7]
Результаты и их обсуждение. Результаты исследований представлены в таблице.
Таблица
Влияние плазмогеля и препарата гиалуроной кислоты hyaDENT BG на динамику индекса АПИ в
комнатной температуре в течение 10 минут и наносили на область патологически измененных тканей, закрывали пародонтальной повязкой Reso-Pac, на 6 часов до самостоятельного рассасывания паро-донтльной повязки.
В четвертой группе (n=10, 5 самцов и 5 самок) с лечебной целью наносили препарат гиалуроной кислоты (ГК) на десну в виде аппликаций по 0,2 г., 2 раза с интервалом в 7 дней. Используемый препарат hyaDENT BG, гель вязко эластический на основе гиалуронвой кислоты. В состав которого входят: гиалуроновой кислоты - 2 мг, кросс-связанной гиалуроновой кислоты -16 мг, натрия хлорид - 6,9 мг и вода для инъекций до - 1,0 мг. Производитель: BioScience GmbH, Германия. Сертификат соответствия №» UA.TR.039.343, дата выдачи - 18.04.2018г.
В пятой группе (n=10, 5 самцов и 5 самок) после снятия лигатур проводили лечение с использованием комплекса плазмогеля из тромбоцитарной аутоплазмы и препарата с гиалуроновой кислотой. С начала применяли плазмогель по методике описанной в третьей группе животных, а через день после плазмогеля применяли препарат гиалуроновой
" ——Показатели Группы ———____ Пол Индекс АПИ
1 срок 2 срок
Группа 1 (контроль) самки 15,27±0,47 17,81±0,40
самцы 13,0±0,24 14,57±0,28
Группа 2 Модель (контроль) самки 2,33±0,18 p< 0,001 1,90±0,10 p< 0,001 p4 < 0,05
самцы 1,95±0,12 p< 0,001 1,89±0,11 p< 0,001 p4> 0,6
Группа 3 Модель + плазмогель самки 5,41±0,32 p< 0,001 Р1 < 0,001 7,85±0,27 p< 0,001 p1 < 0,001 p4 < 0,002
самцы 4,47±0,28 p< 0,001 Р1 < 0,001 6,77±0,34 p< 0,001 p1 < 0,001 p4> 0,1
Группа 4 Модель + ГК самки 3,81±0,26 p< 0,001 p: < 0,001 p2< 0,002 5,58±0,25 p< 0,001 p1 < 0,001 p2 < 0,002 p4 < 0,01
самцы 3,75±0,18 p< 0,001 p1 < 0,001 p2< 0,05 6,66±0,20 p< 0,001 p1 < 0,001 p2> 0,5 p4 < 0,01
Группа 5 Модель + плазмогель + ГК самки 6,47±0,43 p< 0,001 p1 < 0,001 p2> 0,1 p3< 0,002 14,66±0,44 p< 0,001 p1 < 0,001 p2 < 0,001 ps < 0,001 p4 < 0,001
Примечание :
р - показатель достоверности отличий от группы 1 (контроль) Р1 - достоверность отличий от 2 группы Р2 - достоверность отличий от 3 группы Рз - достоверность отличий от 4 группы Р4 - достоверность отличий между 1 и 2 сроком
самцы 5,56±0,32 p< 0,001 pi < 0,001 Р2 < 0,02 рз< 0,001 11,76±0,56 p< 0,002 Р1 < 0,001 Р2 < 0,001 рз < 0,001 Р4 < 0,001
Антиоксидантно-прооксидантный индекс отражает состояние антиоксидантных систем и процессов пероксидации липидов.
При оценке индекса АПИ в первой группе животных показатель у самок в первом сроке составил 15,27±0,47, во втором сроке 17,81±0,40, у самцов показатель АПИ был меньше чем у самок, в первом сроке 13,0±0,24 и во втором сроке 14,57±0,28.
В группе с моделью пародонтита, где животные не получали лечения (II группа) показатели у самок в первом сроке были 2,33±0,18 во втором 1,90±0,10, у самцов 1,95±0,12 в первом сроке и 1,89±0,11 во втором сроке.
В группе, где лечение проводилось плазмоге-лем, мы видим повышение индекса АПИ, как у самок в первом сроке 5,41±0,32 и во втором сроке 7,85±0,27, так и у самцов 4,47±0,28 в первом сроке и 6,77±0,34 во втором сроке.
В четвертой группе, где лечение было выполнено препаратом гиалуроновой кислотой показатели так же повышались, но в первом сроке как у самок 3,81±0,26 так и у самцов 3,75±0,18 незначительно по сравнению с третьей группой р2<0,002. Но во втором сроке этот показатель повышался у самок до 5,58±0,25, у самцов 6,66±0,20.
В группе с применением комбинации препаратов из плазмогеля и ГК были получены показатели достоверного повышения индекса АПИ. И так, в первом сроке у самок показатель составил 6,47±0,43, у самцов 5,56±0,32. А вот во втором сроке индекс АПИ практически соответствовал показателям в группе интактных животных. И составил у самок 14,66±0,44, а у самцов 11,76±0,56.
Как видно из проведенных исследований, показатель АПИ при моделировании пародонтита лигатурной моделью снижается практически в 6,5 раз по сравнению с группой интактных животных. Применение регенеративных методик с использованием плазмогеля из тромбоцитарной аутоплазмы и препарата с гиалуронвой кислотой способствует достоверному повышению индекса АПИ, что дает возможность говорить о способности данного комплекса улучшать состояние антиоксидантной системы.
Выводы. 1. Моделирование пародонтита лигатурной моделью способствует снижению антиокси-дантно-прооксидантного индекса в сыворотке крови.
2. Лечение с применением плазмогеля из тром-боцитарной аутоплазмы и препарата гиалуроновой кислотой Hyadent BG по отдельности (в 3 и 4 группах) увеличивают индекс АПИ.
3. Наиболее эффективной схемой лечения можно считать комбинированное применение плаз-могеля из тромбоцитарной аутоплазмы и препарата гиалуроновой кислотой Hyadent BG на это указывает достоверное повышение индекса АПИ во втором сроке лечения.
Список литературы
1. Iordanishvili A.K. Age epidemiology of para-dontic diseases / A.K. Iordanishvili, A.V. Tikhonov,
A.L. Arev, S.V. Soldatov // Parodontologia. - 2010. -№1. - Р. 25-8
2. Lerroy R. Methodological issues in epidemiological studies of periodontitis - how can it be improved? / R. Lerroy, K. A. Eaton, A. Savage // BMC Oral Health. - 2010. - № 10. - Р. 8
3. Grigoryan A.S. Paradontic diseases. Patho-genesis, diagnosis, treatment: guidelines for physi-cians./ Grigoryan A.S., Grudyanov A.I., Rabukhina N.A., Frolova O.A. - M.:Meditsinskoe informatsion-noe agentstvo: - 2004.
4. Сукманский О. И. Экспериментальная модель генерализованного пародонтита / О. И. Сукманский, О. А. Макаренко // Вюник стоматологи. -2006. - № 2. - С. 2-3.
5. Метод определения активности каталазы / М. А. Королюк, Л. И. Иванова, И. Г. Майорова, В. Е. Токарев // Лаб. дело. — 1988. — № 1. — С. 1619.
6. Стальная И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили // Современ-ные методы в биохимии / [Под ред.
B.Н. Ореховича]. - М.: Медицина. - 1977. - С. 6668.
7. Юнкеров В. И. Математико-статистиче-ская обработка данных медицинских исследований / В. И. Юнкеров, С. Г. Григорьев. - С.-Пб.: ВмедА, 2002. - 266 с.
