CC BY
54
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ НАНОЗОЛОТА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ПАРОДОНТА
Ткач Оксана Борисовна
ассистент кафедры терапевтической стоматологии, кафедра терапевтической стоматологии Национального медицинского университета
имени А.А. Богомольца, Украина, г. Киев E-mail: tkacho.b. 75@inbox. ru Борисенко Анатолий Васильевич д-р мед. наук, профессор кафедры терапевтической стоматологии, кафедра терапевтической стоматологии Национального медицинского университета
имени А.А. Богомольца, Украина, г. Киев Левицкий Анатолий Павлович д-р биол. наук, профессор, Институт стоматологии Национальной Академии
Медицинских Наук Украины, Украина, г. Одесса
EXPERIMENTAL SUBSTANTIATION OF NANOGOLD DRUGS FOR TREATMENT OF PERIODONTAL DISEASES
Oksana Tkach
assistant ofprofessor of Operative dentistry, Department of Operative dentistry of
A.A. Bogomolets National Medical University, Ukraine, Kiev
Anatoliy Borysenko
doctor of Medical Science, professor of Operative dentistry, Department of Operative Dentistry of A.A. Bogomolets National Medical University, Ukraine, Kiev
Anatoliy Levitsky
doctor of Biological Science Professor of The Institute of Stomatology of the NAMS
of Ukraine, Ukraine, Odessa
АННОТАЦИЯ
Экспериментальное обоснование применения препаратов с наночастицами золота для лечения экспериментального пародонтита. Исследование проведено на 35 белых крысах линии Вистар. Моделирование экспериментального пародонтита у крыс с помощью аппликаций геля с протамин-сульфатом вызывает в десне развитие дисбиоза, снижает содержание гиалуроновой кислоты и повышает степень атрофии альвеолярного отростка. Аппликации на десну геля с нанозолотом снижают степень дисбиоза, увеличивают содержание гиалуроновой кислоты и тормозят атрофию альвеолярного отростка.
ABSTRACT
The experimental substantiation the usage of drugs with gold nanoparticles for the treatment of experimental periodontitis. Study was conducted on 35 white Wistar rats. The modeling of experimental periodontitis in rats by using gel applications with protamine sulfate causes the development of dysbiosis in the gingiva, reduces the amount of hyaluronic acid and increases the degree of resorption of the alveolar bone. Applications of the gel with gold nanoparticles on the gingiva reduced the degree of dysbiosis, increased hyaluronic acid content and inhibit resorption of the alveolar bone.
Ключевые слова: нанозолото; мукозальные гели; десна; пародонти; дисбиоз; гиалуроновая кислота.
Keywords: nanogold nanoparticles; mucosal gels; gingiva; periodontal disease; dysbiosis; hyaluronic acid.
Для лечения заболеваний пародонта предложено значительное количество всевозможных медикаментозных препаратов, обладающих антибактериальным и противовоспалительным действием [4, с. 21; 25, с. 184; 15, с. 102; 7, с. 73]. Однако возможности многих антибактериальных средств, особенно, антибиотиков, существенно ограничены быстро возникающей потерей к ним чувствительности пародонтопатогенной
микрофлоры [14, с. 23; 6, с. 17; 26, с. 479]. Поэтому актуальным является разработка новых антибактериальных препаратов, к которым будет длительное время сохраняться чувствительность пародонтопатогенной микрофлоры.
В качестве альтернативы антибиотикам при лечении хронического генерализованного пародонтита в стадии обострения В.Н. Царев, С.Б. Чернышева [22, с. 15; 21, с. 19; 5, с. 128; 16, с. 20; 24, с. 64] рекомендуют использовать препараты: сифлокс, таревид, морфолоксацин, а также новые макролидные препараты: рулид, макропен, суммамед.
Одним из новых направлений в разработке медикаментозных препаратов является использование нанотехнологий с использованием наночастиц
металлов, обладающих антибактериальным действием. Среди них наибольшее внимание привлекает применение наночастиц золота и серебра. Вследствие очень маленьких размеров наночастицы могут легко проникать в ткани и их клетки. Особенностью золота, серебра и других металлов является то, что они легко образуют кластеры и коллоиды [17, с. 17; 23, с. 95]. Они имеют большую удельную поверхность, что увеличивает область контакта частиц золота и серебра с бактериями или вирусами, значительно повышая их бактерицидные свойства. Таким образом, применение золота и серебра в виде наночастиц позволяет в сотни раз снизить их концентрацию с сохранением всех бактерицидных свойств.
Помимо этого, золото и серебро являются мощными иммуномодуляторами, сравнимыми со стероидными гормонами. В зависимости от дозы, они могут, как стимулировать, так и угнетать фагоцитоз. Под их влиянием повышается количество иммуноглобулинов классов А, М, G, увеличивается процентное содержание абсолютного количества Т-лимфоцитов. Наночастицы золота, обладающие целым рядом уникальных характеристик (оптические свойства, прочность, высокая площадь поверхности) могут служить для усиления сигнала при проведении иммуноферментного анализа за счет их связывания с антителами [17, с. 17; 23, с. 95].
Данные свойства наночастиц серебра и золота могут быть использованы для лечения разнообразных патологических процессов, вызванных микроорганизмами, в том числе и заболеваний пародонта. Это подчеркивает актуальность исследования возможностей применения препаратов наночастиц золота и серебра в лечении генерализованного пародонтита.
В проведенных ранее экспериментальных исследованиях нами было изучено противовоспалительное действие препаратов золота и серебра. В частности при моделировании экспериментального воспаления тканей десны воздействием кишечного эндотоксина (липополисахарида, ЛПС) была показана способность мукозальных гелей, содержащих наночастицы золота или серебра на силикагелевом, носителе угнетать воспалительный процесс [3, с. 2]. В
частности наночастицы золота в наибольшей степени восстанавливали активность лизоцима, сниженную при развитии экспериментального воспаления слизистой рта, вызванного действием ЛПС [3, с. 2]. Микробиологическими исследованиями показано выраженное антибактериальное действие препаратов с наночастицами золота на стандартные штаммы микроорганизмов и условно-патогенную микрофлору корневых каналов [3, с. 2].
Исходя из этого, целесообразным является дальнейшее экспериментальное изучение свойств препаратов с наночастицами золота с целью обоснования их клинического применения.
Целью настоящей работы было экспериментальное обоснование применения препаратов с наночастицами золота для лечения экспериментального пародонтита путем изучения их пародонтопротекторного действия.
Материалы и методы исследования.
Экспериментальное исследование было проведено на 35 белых крысах линии Вистар (самки, 5 месяцев, средняя живая масса 230±15 г). Для моделирования у них модели экспериментального пародонтита был избран протаминовый пародонтит. Эта модель была избрана в связи с тем, что протамин, как ингибитор гепарина, активирует гиалуронидазу, которая повышает проницаемость гистогематических барьеров и является провоспалительным фактором [19, с. 125]. Протаминовую модель экспериментального пародонтита воспроизводили у крыс путем трехдневного нанесения на десну по 0,5 мл геля карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), содержащего 10 % раствора протамина сульфата в концентрации 10 мг/мл [10, с. 9].
В качестве испытуемого лекарственного средства — препарата с наночастицами золота — был использован мукозальный 3 %-ный гель натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), содержащий 5 % силикагеля с включением 500 мкг/г наночастиц золота размера 5 нм [3, с. 2; 20, с. 509]. Для
сравнения использовали также мукозальный гель КМЦ без сорбента («пустой» гель) и мукозальный гель, содержащий 5 % силикагеля (препараты сравнения).
Экспериментальные животные (крысы) были разделены на 5 равных групп: 1-ая — норма; 2-ая — экспериментальный пародонтит (без лечения); 3-я — экспериментальный пародонтит + «пустой» гель, начиная с 5 дня опыта в течение 5 дней; 4-ая — экспериментальный пародонтит + гель, содержащий 5 % силикагеля и 5-ая — экспериментальный пародонтит + гель с наночастицами золота.
Испытуемые лечебные гели наносили на десну в количестве 0,5 мл один раз в день после еды в течение 5 дней.
Эвтаназию животных осуществляли на 13-й день от начала опыта под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца. Иссекали десну и альвеолярный отросток нижней челюсти. Ткани до исследования хранили при -30 °С. Степень атрофии альвеолярного отростка определяли по стандартной методике [18, с. 96].
Гомогенаты десны готовили в буфере (20 мг/мл 0,05 М трис-НС1 буфера, рН 7,5). В них определяли активность уреазы [9, с. 15], лизоцима [9, с. 15], эластазы [8, с. 11], каталазы [8, с. 11], содержание малонового диальдегида (МДА) [8, с. 11] и концентрацию гиалуроновой кислоты [1, с. 151]. По соотношению активности каталазы и содержания МДА рассчитывали антиоксидантно-прооксидантный индекс АПИ [8, с. 11], а по соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза по Левицкому [11].
В гомогенате костной ткани альвеолярного отростка определяли активность щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатаз [12, с. 40]. По соотношению ЩФ/КФ рассчитывали индекс минерализующей способности костной ткани пародонта (ИМ) [13, с. 17].
Результаты и их обсуждение.
Экспериментальное моделирование пародонтита приводит к визуальному воспалению десны крыс. Наличие воспалительного процесса в десне
подтверждается возрастанием в ней активности уреазы. В частности у крыс второй группы (экспериментальный пародонтит без лечения) ее активность возрастала в 1,7 раза: от 0,38 ± 0,10 мк-кат/кг до 0,63 ± 0,10 мк-кат/кг (табл. 1). Возрастание активности уреазы свидетельствует об увеличении микробной обсемененности десны. Одновременно с этими проявлениями воспаления отмечается снижение местной резистентности полости рта экспериментальных животных, о чем свидетельствует снижение активности лизоцима в гомогенатах десны в 1,2 раза: с 252 ± 39 ед/кг до 132 ± 45 ед/кг.
Аппликации геля с нанозолотом на десну в количестве 0,5 мл один раз в день после еды в течение 5 дней приводят к снижению интенсивности воспалительного процесса в тканях пародонта крыс пятой группы. Это подтверждается биохимическими показателями: активность уреазы снижается в 1,5 раза — с 0,63 ± 0,10 мк-кат/кг до 0,42 ± 0,12 мк-кат/кг. Повышается уровень неспецифической резистентности слизистой рта, о чем свидетельствует возрастание активности лизоцима в десне в 1,9 раза: со 132 ± 45 ед/кг до 202 ± 57 ед/кг.
Сравнительные результаты, полученные с препаратами сравнения, подтверждают эффективность применения аппликаций геля с нанозолотом на десну. Так, у экспериментальных животных 3-й группы, которым проводили аппликации «пустым» гелем без наночастиц золота активность уреазы не снижалась, оставаясь на уровне экспериментального пародонтита — 0,63 ± 0,12 мк-кат/кг. Отмечено незначительное, но статистически недостоверное (р>0,05) повышение активности лизоцима со 132 ± 45 ед/кг до 149 ± 55 ед/кг.
В четвертой группе экспериментальных животных крысам наносили аппликации геля с сорбентом без наночастиц золота. Данная комбинация не оказывала существенного лекарственного действия на экспериментальное воспаление в пародонте. Повышенная при экспериментальном пародонтите активность уреазы оставалась на том же уровне — 0,62 ± 0,10 мк-кат/кг. Отмечено повышение (но статистически недостоверное р>0,05) активности лизоцима со 132 ± 45 ед/кг до 202 ± 47 ед/кг.
Данные, полученные в этих группах с препаратами сравнения, подтверждают эффективность действия геля с наночастицами золота (табл.1).
Таблица 1.
Влияние геля с нанозолотом на активность уреазы и лизоцима в десне
крыс с экспериментальным пародонтитом (во всех г руппах п=7)
№№ гр. Группы Уреаза, мк-кат/кг Лизоцим, ед/кг
1. Норма 0,38 ± 0,10 252 ± 39
2. Пародонтит 0,63 ± 0,10 р>0,05 132 ± 45 р>0,05
3. Пародонтит + гель «пустой» 0,63 ± 0,12 р>0,05 149 ± 55 р>0,05
4. Пародонтит + гель с сорбентом 0,62 ± 0,10 р>0,05 р1>0,8 202 ± 47 р>0,3 р1>0,3
5. Пародонтит + гель с нанозолотом 0,42 ± 0,12 р>0,5 р1>0,05 202 ± 57 р>0,3 р1>0,3
Примечания. р — показатель достоверности различий с гр. № 1; р1 — показатель достоверности различий с гр. № 3.
По соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза по Левицкому [22, с. 21]. У крыс второй группы с экспериментальным пародонтитом этот показатель возрастает более чем 3 раза (рис. 1). Аппликации геля с наночастицами золота на десну у крыс второй группы приводят к достоверному снижению этого показателя почти до уровня нормы. В третьей и четвертой группах экспериментальных животных, где применялись препараты сравнения, снижение показателя степени дисбиоза незначительное и статистически недостоверное.
3,6 П 3
й
со О
й 2,4 А
ю о
л К и
1,8 -
^ 1 2 0) н
и
0,6 Н 0
норма
*
2
*
пародонтит
** *
-Ь-
4
** -Е-
Рисунок 1. Влияние геля с нанозолотом на степень дисбиоза десны крыс с экспериментальным пародонтитом: 1 — норма, 2 — пародонтит (П), 3 — П + гель «пустой», 4 — П + гель с сорбентом, 5 — П + гель с нанозолотом, *— р<0,05 в сравнении с гр. № 1; **— р<0,05 в сравнении с гр. № 3
При экспериментальном пародонтите у крыс второй группы возрастает уровень маркеров воспаления: уровень эластазы возрастает с 31 ± 4 мк-кат/кг до 38 ± 3 мк-кат/кг; уровень малонового диальдегида (МДА) возрастает с 13,0 ± 1,3 мкмоль/кг до 16,3 ± 0,6 мкмоль/кг (табл. 2). Это свидетельствует о начинающемся воспалении в десне (гингивит). Аппликации геля с нанозолотом у крыс второй группы приводит к снижению уровня маркеров воспаления практически до уровня нормы: уровень эластазы снижается с 38 ± 3 мк-кат/кг до 30 ± 4 мк-кат/кг; уровень малонового диальдегида (МДА) снижается с 16,3 ± 0,6 мкмоль/кг до 15,6 ± 1,6 мкмоль/кг. Аппликации геля с сорбентом (4-я группа) снижают уровень эластазы до 33 ± 2 мк-кат/кг и содержания МДА до 15,7 ± 1,4 мкмоль/кг (практически до уровня нормы). Аппликации «пустого» геля приводит к незначительному статистически недостоверному (р>0,05) снижению маркеров воспаления (табл. 2).
Таблица 2.
Влияние геля с нанозолотом на уровень маркеров воспаления в десне крыс с экспериментальным пародонтитом (во всех группах п=7)
1
3
5
№№ гр. Группы Эластаза, мк-кат/кг МДА, мкмоль/кг
1. Норма 31 ± 4 13,0 ± 1,3
2. Пародонтит 38 ± 3 р>0,05 16,3 ± 0,6 р<0,05
3. Пародонтит + гель «пустой» 37 ± 3 р>0,05 15,6 ± 1,0 р>0,05
4. Пародонтит + гель с сорбентом 33 ± 2 р>0,3 р1>0,1 15,7 ± 1,4 р>0,05 р1>0,9
5. Пародонтит + гель с нанозолотом 30 ± 4 р>0,8 р1>0,3 15,6 ± 1,6 р>0,05 р1>0,9
Примечания. р — показатель достоверности различий с гр. № 1; р1 — показатель достоверности различий с гр. № 3.
В таблице 3 представлены результаты определения активности каталазы и антиоксидантно-прооксидантного индекса (АПИ) в десне крыс с экспериментальным пародонтитом. Активность каталазы при экспериментальном пародонтите в гомогенатах десны крыс снижается, что приводит и к снижению индекса АПИ. Аппликации геля с нанозолотом приводят к незначительному, статистически недостоверному (р>0,05) повышению этих показателей. Аналогичные результаты получены и в группах сравнения с «пустым» гелем (3-я группа) и гелем с сорбентом (4-я группа) — р>0,05.
Таблица 3.
Влияние геля с нанозолотом на активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с экспериментальным пародонтитом (во всех группах п=7)
№№ гр. Группы Каталаза, мкат/кг АПИ
1. Норма 7,33 ± 0,92 5,64 ± 0,52
2. Пародонтит 6,36 ± 0,51 р>0,3 3,90 ± 0,31 р<0,05
3. Пародонтит + гель «пустой» 6,70 ± 0,30 р>0,1 4,29 ± 0,30 р<0,05
4. Пародонтит + гель с сорбентом 6,82 ± 0,23 р>0,1 р1>0,3 4,34 ± 0,31 р<0,05 р1>0,5
5. Пародонтит + гель с нанозолотом 6,85± 0,37 р>0,05 р1>0,03 4,39 ± 0,34 р<0,05 р>0,5
Примечания. р — показатель достоверности различий с гр. № 1;
р1 — показатель достоверности различий с гр. № 3.
В отличие от активности каталазы, индекс АПИ при экспериментальном пародонтите снижается достоверно. Однако аппликации гелей с силикагелем или с нанозолотом практически его не изменяют.
Как известно, гиалуроновая кислота — это межклеточный «цемент», который снижает проницаемость гисто-гематических барьеров и тем самым оказывает противовоспалительное действие [25, с. 184]. Определение содержания гиалуроновой кислоты в гомогенатах десны крыс показывает, что при экспериментальном пародонтите оно снижается почти вдвое — с 1157 ± 52 мг/кг до 756 ± 34 мг/кг. Аппликации геля с наночастицами золота у крыс пятой группы повышает содержание гиалуроновой кислоты до 987 ± 38 мг/кг. Аппликации «пустого» геля и геля с сорбентом приводят к изменения содержания гиалуроновой кислоты, не отличающиеся достоверно от ее уровня при экспериментальном пародонтите. полученные результаты у крыс разных групп представлены на рис. 2.
В
о «
о
и о к о
£
1300 1200 1100 1000 900 800 700 600 500
пародонтит *
норма
2
4
* «
*
1
3
5
Рисунок 2. Влияние геля с нанозолотом на содержание гиалуроновой кислоты в десне крыс с экспериментальным пародонтитом: 1 — норма, 2 — пародонтит (П), 3 — П + гель «пустой», 4 — П + гель с сорбентом, 5 —
П + гель с нанозолотом
На рис. 3 показано, как изменяется степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти крыс с экспериментальным пародонтитом. Видно, что при пародонтите достоверно возрастает степень атрофии, а под влиянием аппликации гелей с силикагелем или с нанозолотом степень атрофии костной ткани достоверно снижается, причем после аппликаций геля с нанозолотом — до нормы.
40
£ 36
к к
1ф 32
¡Г
£ 28
О
С
24
20
норма
пародонтит
А А
2
4
Рисунок 3. Влияние геля с наночастицами золота на степень атрофии альвеолярного отростка нижней челюсти крыс с экспериментальным пародонтитом: 1 — норма, 2 — пародонтит (П), 3 — П + гель «пустой», 4 — П + гель с сорбентом, 5 — П + гель с нанозолотом
Определение в костной ткани альвеолярного отростка активности фосфатаз и индекса минерализации (ИМ) показывает (табл. 4), что при экспериментальном пародонтите активность щелочной и кислой фосфатазы незначительно повышается, а индекс минерализации (ИМ), наоборот, снижается (р>0,05). Аппликации геля с нанозолотом достоверно увеличивают
А
А
1
3
5
минерализующую способность костной ткани пародонта. Главным образом это происходит за счет роста активности щелочной фосфатазы (ЩФ), которая является маркером остеобластов [5, с. 128]. Аппликации «пустого» геля и геля с сорбентом не оказывают значительного влияния на активность фосфатаз, а состояние минерализации даже несколько усугубляют. Однако если индекс минерализации сравнивать с аналогичным показателем 3-й группы (группа сравнения), то гель с нанозолотом достоверно увеличивает минерализующую способность костной ткани пародонта.
Таблица 4.
Влияние геля с нанозолотом на активность фосфатаз и индекс минерализации костной ткани пародонта крыс с экспериментальным __пародонтитом (во всех группах п=7)__
№№ гр. Группы ЩФ, нкат/кг КФ, нкат/кг ИМ
1. Норма 120,9 ± 14,6 1,99 ± 0,22 60,7 ± 1,9
2. Пародонтит 123,0 ± 9,4 р>0,6 2,16 ± 0,05 р>0,3 56,9 ± 1,7 р>0,3
3. Пародонтит + гель «пустой» 88,9 ± 7,0 р<0,05 2,13 ± 0,18 р>0,3 41,7 ± 1,4 р<0,05
4. Пародонтит + гель с сорбентом 97,0 ± 7,2 р>0,05 р1>0,2 2,130 ± 0,12 р>0,3 р1=1 45,5 ± 1,5 р<0,05 р1>0,05
5. Пародонтит + гель с нанозолотом 108,9 ± 10,1 р>0,3 р1>0,05 2,15 ± 0,12 р>0,3 р1>0,7 50,6 ± 3,1 р<0,05 р1<0,05
Примечания. р — показатель достоверности различий с гр. № 1; р1 — показатель достоверности различий с гр. № 3.
ВЫВОДЫ.
1. Моделирование экспериментального пародонтита с помощью протамина увеличивает степень дисбиоза десны за счет увеличения микробной обсемененности и снижения уровня неспецифического иммунитета.
2. Развитие дисбиоза в десне снижает содержание гиалуроновой кислоты и увеличивает степень атрофии альвеолярного отростка.
3. Аппликации на десну геля с нанозолотом снижают степень дисбиоза, увеличивают содержание гиалуроновой кислоты и тормозят атрофию альвеолярного отростка.
Таким образом, на основании проведенных экспериментальных исследований можно утверждать о наличии у геля с нанозолотом пародонтопротекторных свойств.
Список литературы:
1. Асатиани В.С. Новые методы биохимической фотометрии М. 1965. — 298 с.
2. Борисенко А.В., Ткач О.Б., Волощук О.М. Вивчення впливу препарапв з наночасточками золота на умовно-патогенну мжрофлору кореневого каналу // Современная стоматология. — 2013. — № 1. — С. 11—14.
3. Борисенко А.В., Ткач О.Б., Левицкий А.П. Влияние оральных аппликаций силикагеля, содержащего наночастицы золота или серебра на степень дисбиоза десны крыс после воздействия липополисахарида // Вюник стоматологи. — 2013. — № 3 (84). — С. 2—4.
4. Грудянов А.И., Дмитриева Н.А., Фоменко Е.В. Применение лактобактерина в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта // Терра Медика. Спец. вып. 2002. — С. 21—23.
5. Дмитриева Л.А. и др. Современные аспекты клинической пародонтологии. М.: Медпресс. 2001. — С. 128.
6. Дмитриева Л.А. с соавт. Сравнительная оценка современных антибактериальных препаратов при лечении пародонтита тяжелой степени в стадии обострения // Стоматология. — 1997. — Т. 76, — № 6. — С. 19— 22; — 1998. — Т. 77, — № 4. — С. 17—19.
7. Кузнецов Е.А. Микробная флора полости рта и ее роль в развитии патологических процессов / Е.А. Кузнецов, Царев В.Н., Давыдова М.М. и др. / Под ред. проф. Е.А. Кузнецова. М. 1995. — 73 с.
8. Левицкий А.П. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости (метод. рекомендации) / А.П. Левицкий, О.В. Деньга, О.А. Макаренко [и др.] Одесса: КП ОГТ. 2010. — 16 с.
9. Левицкий А.П. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков (метод. рекомендации) / А.П. Левицкий, О.А. Макаренко, И.А. Селиванская [и др.] К.: ГФЦ, 2007. — 23 с.
10. Левицкий А.П., Хлыстун Н.Л., Ступак Е.П., Гончарук С.В., Скидан К.В. Влияние аппликаций геля с протамином на биохимические показатели воспаления и дисбиоза в десне крыс // Вюник стоматологи. 2012. Спец. выпуск № 7 — С. 9—12.
11. Левицький А.П. Патент на корисну модель № 43140, МПК (2009) G01N 33/48 Спошб оцшки ступеня дисбюзу (дисбактерюзу) оргашв i тканин / А.П. Левицький, О.В. Деньга, 1.О. Селiванська та ш. № u200815092; заявл. 26.12.2008; опубл. 10.08.2009. Бюл. № 15.
12. Левицький А.П. Экспериментальные методы исследования стимуляторов остеогенеза (метод. рекомендации) / А.П. Левицкий, О.А. Макаренко, О.В. Деньга [и др.] К.: ГФЦ, 2005. — 50 с.
13. Левицький А.П., Макаренко О.А., Ходаков 1.В., Зеленша Ю.В. Ферментативний метод оцшки стану юстково1 тканини // Одеський мед. журн. — 2006. — № 3. — С. 17—21.
14. Мащенко И.С., Самойленко А.В. Косенко К.Н. Этиотропное и патогенетическое обоснование дифференцированных подходов к терапии генерализованного пародонтита // Вюник стоматологи. — 2002. — № 4. — С. 23—27.
15. Мащенко 1.С., Самойленко А.В. Роль вщновлення нормобюзу пародонтальних тканин шсля етютропно!' антибактерiальноï терапи у хворих на генералiзований пародонтит // Вюник стоматологи. — 2000. — № 3. — С. 102—105.
16. Модина Т.Н. Лечение быстропрогрессирующего пародонтита тяжелой степени с применением управляемой эндолимфатической инфузии антибиотиков // Пародонтология. 1999. № 1.
17. Москаленко В.Ф., Люовий В.М., Чекман 1.С., Горчакова Н.О., Звягшцева Т.В., Небесна Т.Ю, Сирова Г.О., Загородний М.1. Hy^Bi основи наномедицини, нанофармакологп та нанофармацп // Науковий вiсник нащонального медичного yнiверситетy iменi О. О. Богомольця. — 2009. — № 2. — С. 17—31.
18. Николаева А.В. Макро-микроскопические исследования зубо-челюстной системы крыс при воздействии на верхний шейный симпатический узел / В кн.: Материалы к макро-микроскопической анатомии. Киев, — 1965. — Вып. 3. — С. 96—101.
19. Соколова И.И., Хлыстун Н.Л., Левицкий А.П. Роль гиалуронидазы в патогенезе дистрофически-воспалительных заболеваний пародонта // Вюник стоматологи. 2012. Спец. выпуск № 6. — С. 125.
20. Трохимчук А.К., Легенчук А.В., Подольская В.И., Войтенко Е.Ю., Овечко В.С., Щур А.В. Формирование наночастиц благородных металлов в пористых кремнеземах и биологических матрицах // Наносистеми, наноматерiали, нанотехнологп. Збiрник наукових праць. — 2008. — т. 6, — вип. 2. — С. 509—527.
21. Царев В.Н., Романов А.Е. и др. Выбор антибактериальных препаратов для комплексного лечения пародонтита в стадии обострения // Стоматология. — 1997. — № 6. — С. 19—22.
22. Царев В.Н., Чернышова С.Б. Перспективы применения препаратов фторхинилового ряда в комплексном лечении хронического генерализованного пародонтита в стадии обострения // Стоматология. 1998. № 6.
23. Чекман И.С., Маланчук В.А., Гордейчук М.А. Нанотехнологии и наноматериалы: применение в стоматологии и челюстно-лицевой хирургии // Укр. Мед. Часопис. — 2009. — № 6 (74) XI/XII. — С. 95—97.
24. Шашкина И.В., Новикова И.Б., Клюева Н.Н. Опыт лечения хронических заболеваний пародонта антибиотиком вильпрафен // Стоматология. —
2001. — Т. 80, — № 1. — С. 64—65.
25. Machenko I.S. New principle of treatment of parodont tissues diseases // Abstracts of the 8 the Russia-Japan International Medical Symposium. Irkutsk,
2002. — P. 184—185.
26. Slots J., Rams T.E. Antibiotic in periodontal therapy: advantages and disadvantages // J. Clin. Periodontol. — 1990. — V. 17. — P. 479—493.
