CC BY
87
Б01 10.25587/8УЕи.2019.3(16).39459 УДК: 579.61
М. Н. Егорова, Л. А. Тарасова, С. А Смагулова, Я. А Ахременко, Ф. Д. Васильева, В. И. Иларова
АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ОКСИДА ГРАФЕНА
Аннотация. Материалы, обладающие антимикробными свойствами, представляют большой интерес для медицинского производства. Однако безопасность современных материалов на основе соединений аммония, ионов серебра и оксида титана пока не соответствуют желаемым нормам. Оксид графена является перспективным кандидатом для биомедицинских разработок, поскольку проявляет хорошие антимикробные свойства при минимальной цитотоксичности в отношении человеческих клеток. В данной работе представлены результаты собственных исследований антимикробных свойств оксида графена. Показано, что суспензия оксида графена оказывает бактерицидное и фунгицидное действие, повреждая мембраны микробных клеток.
Ключевые слова: оксид графена, антимикробная активность, графен, антибактериальные свойства.
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 18-02-00449
ТАРАСОВА Лидия Андреевна - канд. мед. наук, доцент кафедры гистологии и микробиологии Медицинского института ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +79248692808
TARASOVA Lidiya Andreevna - Candidate of Medical Sciences, Associate Professor, Department of Histology and Microbiology, Institute of Medicine, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
АХРЕМЕНКО Яна Александровна - канд. мед. наук, доцент, заведующий курсом микробиологии и иммунологии кафедры гистологии и микробиологии Медицинского института ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +7 924 1753177
AHREMENKO Yana Aleksandrovna - Candidate of Medical Sciences, Associate Professor, Head of the Course of Microbiology and Immunology, Department of Histology and Microbiology, Institute of Medicine, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
ИЛАРОВА Вера Иннокентьевна - заведующий учебно-научной микробиологической лабораторией клиники Медицинского института ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +79241706276
ILAROVA Vera Innokentievna - Head of the educational and scientific microbiological laboratory, Clinic, Institute of Medicine, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
ВАСИЛЬЕВА Федора Дмитриевна - научный сотрудник Учебно- научно-технологической лаборатории «Графеновые нанотехнологии», Физико-технический институт ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +79141052775
VASILEVA Fedora Dmitrievna - researcher of the Academic technologic laboratory «Graphene Nanotechnologies», Institute of Physics and Technologies, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
СМАГУЛОВА Светлана Афанасьевна - канд. физ.-мат. наук, доцент, заведующий учебно-научно-технологической лаборатории «Графеновые нанотехнологии», Физико-технический институт ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +79142901045
SMAGULOVA Svetlana Afanasyevna - Candidate of Physics and Mathematics, Associate Professor, Head of the Academic technologic laboratory «Graphene Nanotechnologies», Institute of Physics and Technologies, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
ЕГОРОВА Марфа Никитична - инженер Учебно-научно-технологической лаборатории «Графеновые нанотехнологии», Физико- технический институт ФГАОУ ВО «Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова». E-mail: [email protected]. Телефон: +79681557683
EGOROVA Marfa Nikitichna - engineer of the Academic technologic laboratory «Graphene Nanotechnologies», Institute of Physics and Technologies, M.K.Ammosov North-Eastern Federal University. E-mail: [email protected]
М N. Egorova, L. A. Tarasova, S. A. Smagulova, Ya. A. Akhremenko, F. D. Vasilieva, V I. Ilarova
ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF GRAPHENE OXIDE
Abstract. Materials with antimicrobial properties are interesting for medical production. However, the safety of modern materials based on ammonium compounds, silver ions and titanium oxide does not meet of standards. Graphene oxide is a promising candidate for biomedical research because it exhibits good antimicrobial properties with minimal cytotoxicity against human cells. This paper presents the results of our own research on the antimicrobial properties of graphene oxide. It is shown that the suspension of graphene oxide has a bactericidal and fungicidal effect, due to damage the membrane of microbial cells.
Keywords: graphene oxide, antimicrobial activity, graphene, antibacterial properties.
Acknowledgements: This work was supported by the RFBR grant No. 18-02-00449.
Введение
Научные исследования в последние годы привели к открытию новых материалов, например, таких как оксид графена (ОГ), обладающий рядом уникальных свойств, в том числе антимикробными [1]. ОГ представляет собой sp2-гибридизованные атомы углерода с кислородсодержащими группами на их поверхности (гидроксильные, карбоксильные, эпоксидные и.т.д.). На создание и исследование этих материалов направлена работа многих коллективов и в России, и за рубежом публикуются десятки тысяч статей в год [2]. ОГ, синтезированный химическим расщеплением, представляет собой суспензию с отдельными монослойными чешуйками, из которой путем удаления растворителя получают оксид-графеновую пленку, или так называемую оксид-графеновую бумагу. Графеновая бумага уже используется для создания защитных слоев, химических фильтров, компонентов электрических батарей и суперконденсаторов, электронных и оптоэлектронных компонентов, антибактериальных медицинских бинтов [3-18]. Открываются все новые возможности приложений из графеновой бумаги - гибкие биосенсоры, биоразлагаемые нанокомпозиты, графеновые чернила [19, 20]. Графеновая бумага - область исследований, обещающая качественные изменения в электронике, механике, оптике, электротехнике, медицине и других областях. В настоящий момент большое внимание уделяется исследованию наноструктур ОГ как антимикробных агентов. Ранее проведенные исследования в этой области дают основание предполагать, что антимикробное действие оксида графена происходит за счет влияния двух факторов: механического повреждения мембраны микробных клеток острыми концами нанотрубок ОГ и запуском окислительного стресса [21, 22].
Цель исследования - изучить антимикробную активность оксида графена 29мг/мл относительно контрольных штаммов Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Candida albicans.
Материалы и методы
Синтез оксида графена
Для получения оксид-графеновой суспензии был использован модифицированный метод Хаммерса [23, 24]. При модифицированном методе Хаммерса очищенный природный графит подвергается окислению под действием перманганата калия в концентрированной серной кислоте в течение длительного времени [25-27]. Полученная смесь перемешивается и разбавляется деионизованной водой. После этого в раствор добавляется 5 %-ый раствор пероксида водорода до появления бриллиантово-желтой окраски. Нейтральный уровень рН суспензии достигается вакуумным фильтрованием с использованием деионизованной воды. Полученная суспензия подвергается центрифугированию в течение 15 мин на частоте 3000 об/мин для удаления уцелевших, относительно крупных частиц графита. Диспергированные нанолисты ОГ, не перешедшие в осадок, могут храниться долгое время во взвешенном состоянии. ОГ бумага на подложке из SiO2/Si была получена методом каплеобразования из суспензии ОГ.
Микробиологические исследования
В качестве тест-культур использованы контрольные штаммы американской коллекции типовых культур: EscherichiacoliATCC® 25922, StaphilococcusaureusATCC® 29213, Candidaalbicans ATCC® 10231. Для каждого штамма готовили суспензию на основе дистиллированной воды с конечной концентрацией 105 КОЕ/мл.
Для тестирования антимикробных свойств в пробирки, содержащие 1 мл суспензии ОГ в концентрации 29 мг/мл, вносили 1 мл суспензии тест-культуры, инкубировали при 37°С. Высев на питательные среды производили через 20, 40, 60, 120 минут и 24 часа инкубации с ОГ. Культивирование тестовых культур проводили на Мясопептонном агаре (МПА), для грибов рода Candida использовали Сабуро-бульон, температура культивирования - 37°С, время инкубации - 24 часа, с последующим подсчетом количества выросших колоний классическим методом.
Визуализация антимикробного действия ОГ
Для визуализации процесса взаимодействия ОГ с тест-культурой использовали сканирующий электронный микроскоп JEOL 7800F, 1kV Каплю (0,1 мл) оксида графена наносили на кремниевую подложку. Стерильной бактериологической петлей с плотной питательной среды снимали 1 колонию суточной культуры контрольного штамма и вмешивали ее в каплю ОГ на кремниевой подложке, инкубировали при температуре 37°С и микроскопировали через 2 и 24 часа.
В качестве «отрицательного» контроля применяли стерильный физиологический раствор с соответствующей тест-культурой.
Результаты
Результаты микробиологических исследований показали, что антимикробная активность оксида графена зависела от времени инкубации (рис. 1).
120
i 100
а
j
в
Э №
ГГ|
i JO
i zo
I
о
Рисунок 1. Выживаемость контрольных штаммов после инкубации с ОГ 29 мг/мл
Так, при инкубации c ОГ 29 мг/мл в течение 20 минут жизнеспособность сохраняли 100 % (5*105КОЕ) клеток контрольного штамма E.coli и 95 % (4,75*105КОЕ) клеток S. aureus и C. albicans. Через 40 минут инкубации при высеве на питательные среды было выявлено 85 % (4,25*105КОЕ), 70 % (3,5*103К0Е), 82 % (4,1*104К0Е) жизнеспособных клеток E.coli, S. aureus и C. albicans соответственно. После 60 минут инкубации жизнеспособность определялась у 73 % (3,65*103К0Е), 55 % (2,75*102К0Е), 70 % (3,5*103К0Е) клеток E.coli, S. aureus и C. albicans соответственно. Через 2 часа инкубации с ОГ количество живых клеток тест-культур E.coli, S. aureus и C. albicans снизилось до 25 % (1,25*102К0Е), 12 % (6*102К0Е) 20 % (1*102К0Е) соответственно. Через 24 часа инкубации контрольных штаммов с ОГ при последующем высеве на питательные среды рост отсутствовал, жизнеспособные микроорганизмы не выявлены. Кроме того, можно предположить, что чувствительность к ОГ грамположительных микроорганизмов выше, чем у грамотрицательных, поскольку снижение количества жизнеспособных клеток S. Aureus происходит быстрее. В отрицательном контроле не наблюдалось значимых изменений в количестве клеток контрольных штаммов.
Изображения, полученные с помощью сканирующего электронного микроскопа, показывают, что после 2 часов инкубации с ОГ клетки тест-культур покрываются слоем нанолистов, при этом происходит их фиксация и, вероятно, ограничение жизнедеятельности. Через 24 часа
20 40 ЬО 120
Бреглп ммнуТГ
инкубации с ОГ на снимках видно множественное нарушение целостности клеточной стенки E.coli и S.aureus с вытеканием внутреннего содержимого. У грибов рода Candida также обнаружены повреждения мембраны, приводящие к гибели клетки (рис. 2).
Рисунок 2. СЭМ изображения тестовых-культур& aureus (A), E.coli (B), C.albicans (C) после инкубации с физиологическим раствором, тестовых-культур S. aureus (D), E.coli (E), C. albicans (F) c оксидом графена (29мг/мл) в течение 2 ч. и 24 ч. (G), (Y), (I) соответственно
Заключение
Полученные данные свидетельствуют о выраженной противомикробной активности оксида графена 29мг/мл. Максимальное противомикробное влияние проявляется через 2 часа взаимодействия с суспензией ОГ, под воздействием которой происходит повреждение клеточной мембраны микроорганизма с последующей его гибелью. Чувствительность к ОГ обнаружена у бактерий и грибов. При этом грамположительные толстостенные бактерии погибают под действием ОГ быстрее, чем грамотрицательные тонкостенные.
Таким образом, полученные результаты доказывают перспективность применения ОГ в качестве недорогого и высокоэффективного противомикробного углеродного наноматериала.
Литература
1. Hu, W. Graphene-based antibacterial paper / W. Hu, C. Peng, W. Luo, X. Li, D. Li, Q. Huang, C. Fan // ACS nano. - 2010. - № 4 (7). - P. 4317-4323.
2. Tang, L. Bottom-up synthesis of large-scale graphene oxide nanosheets / L. Tang, X. Li, R. Ji, K. Teng, G. Tai, J. Ye, C. Weia, S. Lau // Journal of Materials Chemistry. - 2012. - № 22. - P. 5676-5683.
4. Lee, C. Measurement of the Elastic Properties and Intrinsic Strength of Monolayer Graphene, C. Lee, X. Wei, J. W. Kysar, J. Hone // Science. - 2008. - № 321 (5887). - P. 385-388.
6. Stankovich, S. Graphene-based composite materials / S. Stankovich, D. A. Dikin, G. H. B. Dommett, K. M. Kohlhaas, E. J. Zimney, E. A. Stach, R. D. Piner, S. T. Nguyen, R. S. Ruoff // Nature. - 2006. - № 442 (7100). P. 282-286.
8. Balandin, A. A. Superior Thermal Conductivity of Single-Layer Graphene / A. A. Balandin, S. Ghosh, W. Bao, I. Calizo, D. Teweldebrhan, F. Miao, C. N. Lau // Nano letters. - 2008. - № 8 (3). P. 902-907.
10. Novoselov, K.S. Electric field effect in atomically thin carbon films / K.S. Novoselov, A K. Geim, S.V. Morozov, D. Jiang, Y. Zhang, S.V. Dubonos, I.V. Grigorieva, A.A. Firsov // Science. - 2004. - № 306 (5696). P. 666-669.
12. Novoselov, K.S. Two-dimensional gas of massless Dirac fermions in grapheme / K.S. Novoselov, A.K. Geim, S.V Morozov, D. Jiang, M.I. Katsnelson, I.V. Grigorieva, S.V Dubonos, A.A. Firsov // Nature. -2005. - № 438. - P. 197-200.
14. Zhang, Y. Experimental Observation of Quantum Hall Effect and Berry's Phase in Graphene / Y. Zhang, Y.-W. Tan, H.L. Stormer, P. Kim // Nature. - 2005. - № 438. P. 201-204.
16. Geim, A. K. Graphene: Status and Prospects/ Geim A. K. // Science. - 2009. - № 324. P. 1530-1534.
18. Zhang, Y. Electric Field Modulation of Galvanomagnetic Properties of Mesoscopic Graphite / Y. Zhang, J.P. Small, M.E.S. Amori, P. Kim // Physical Review Letters. - 2005. - № 94. - P. 176803-1-176803-4.
20. Li, D. Processable aqueous dispersions of graphene nanosheets/ D. Li, M.B. Muller, S. Gilje, R.B. Kaner, G.G. Wallace // Nature Nanotechnology. - 2008. - № 3. P. 101-105.
22. Lin, Y.M. 100-GHz Transistors from Wafer-Scale Epitaxial Graphene / Lin Y.M., C. Dimitrakopoulos, K.A. Jenkins, D.B. Farmer, H.Y. Chiu, A. Grill, P. Avouris // Science. - 2010. - № 327. - P. 662
24. Dong, X. Electrical Detection of DNA Hybridization with Single-Base Specificity Using Transistors Based on CVD-Grown Graphene Sheets / X. Dong, Y. Shi, W. Huang, P. Chen, L.-J. Li // Advanced Materials. -2010. - № 22. - P. 1649-1653.
26. He, Q. Centimeter-Long and Large-Scale Micropatterns of Reduced Graphene Oxide Films: Fabrication and Sensing Applications, Q. He, H.G. Sudibya, Z. Yin, S. Wu, H. Li, F. Boey, W. Huang, P. Chen, H. Zhang // American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. - P. 3201-3208.
28. Wang, X. Transparent Carbon Films as Electrodes in Organic Solar Cells / X. Wang, L. Zhi, N. Tsao, Z. Tomovic, J. Li, K. Mullen// Angewandte Chemie Internatiomal Edition. - 2008. - № 47. - P. 2990-2992.
30. Wang, X. Transparent, Conductive Graphene Electrodes for Dye-Sensitized Solar Cells / X. Wang, L. Zhi, K. Mullen// Nano Letters. - 2008. - № 8. - P. 323-327.
32. Yin, Z. Electrochemical Deposition of ZnO Nanorods on Transparent Reduced Graphene Oxide Electrodes for Hybrid Solar Cells / Z. Yin, S. Wu, X. Zhou, X. Huang, Q. Zhang, F. Boey, H. Zhang // Small. - 2010. -№ 6. - P. 307-312.
34. Schedin, F. Detection of individual gas molecules adsorbed on grapheme / F. Schedin, A.K. Geim, S.V Morozov, E.W. Hill, P. Blake, M.I. Katsnelson, K.S. Novoselov // Natural Materials. - 2007. - № 6. - P. 652-655.
36. Wang, Z. Direct Electrochemical Reduction of Single-Layer Graphene Oxide and Subsequent Functionalization with Glucose Oxidase / Z. Wang, X. Zhou, J. Zhang, F. Boey, H. Zhang// The Journal of Physical Chemistry C. - 2009. - № 113. - P. 14071-14075.
38. Geim, A.K. The Rise of Graphene / A.K. Geim, K.S. Novoselov // Nature of Materials. - 2007. - № 6. -P. 183-191.
40. Yang, K. Graphene in Mice: Ultrahigh In Vivo Tumor Uptake and Efficient Photothermal Therapy / K. Yang, S. Zhang, G. Zhang, X. Sun, S.-T. Lee, Z. Liu // Nano Letters. - 2010. - № 10. - P. 3318-3323.
42. Akhavan, O. Toxicity of Graphene and Graphene Oxide Nanowalls against Bacteria / O. Akhavan, E. Ghaderi // American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. - P. 5731-5736.
44. Zhang, Y.B. Cytotoxicity effects of graphene and single-wall carbon nanotubes in neural phaeochromocytoma-derived PC12 cells/ Y.B. Zhang, S.F. Ali, E. Dervishi, Y. Xu, Z.R. Li, D. Casciano, A.S. Biris// American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. -P. 3181-3186.
46. Hummers, W. S. Preparation of Graphitic Oxide / W. S. Hummers, R. E. Offeman // Journal of the American Chemical Society. - 1958. - № 80. - P. 1339-1339.
48. Alexandrov, G. N. Thin partially reduced oxide-graphene films: Structural, optical, and electrical properties / G. N. Alexandrov, S.A. Smagulova, A.N. Kapitonov, F.D. Vasilieva, I.I Kurkina, P. V. Vinokurov, V.D. Timofeev, I.V Antonova // Nanotechnologies in Russia. - 2014. - № 9 (5-6). - P. 18-22.
50. Kapitonov, A.N. Characterization of Graphene Oxide Suspension for Fluorescence Quenching in DNA-Diagnostics / A.N. Kapitonov, G.N. Alexandrov, F.D. Vasileva, S.A. Smagulova, V.B. Timofeev, N.R. Maksimova, A.A. Kuznetsov // Korean Journal of Materials Research. - 2016. - № 26 (1). - P. 1-7.
52. Васильева, Ф.Д. Исследование свойств суспензии, пленок и бумаг оксида графита, синтезированного из природного графита месторождения Южной Якутии / Ф.Д. Васильева, А.Н. Капитонов, А.Е. Томская, С.А Смагулова // ЖСХ. - 2018. - № 59 (4). - P. 859
References
1. Hu, W. Graphene-based antibacterial paper / W. Hu, C. Peng, W. Luo, X. Li, D. Li, Q. Huang, C. Fan // ACS nano. - 2010. - № 4 (7). - P. 4317-4323.
2. Tang, L. Bottom-up synthesis of large-scale graphene oxide nanosheets / L. Tang, X. Li, R. Ji, K. Teng, G. Tai, J. Ye, C. Weia, S. Lau // Journal of Materials Chemistry. - 2012. - № 22. - P. 5676-5683.
4. Lee, C. Measurement of the Elastic Properties and Intrinsic Strength of Monolayer Graphene, C. Lee, X. Wei, J. W. Kysar, J. Hone // Science. - 2008. - № 321 (5887). - P. 385-388.
6. Stankovich, S. Graphene-based composite materials / S. Stankovich, D. A. Dikin, G. H. B. Dommett, K. M. Kohlhaas, E. J. Zimney, E. A. Stach, R. D. Piner, S. T. Nguyen, R. S. Ruoff // Nature. - 2006. - № 442 (7100). P. 282-286.
8. Balandin, A. A. Superior Thermal Conductivity of Single-Layer Graphene / A. A. Balandin, S. Ghosh, W. Bao, I. Calizo, D. Teweldebrhan, F. Miao, C. N. Lau // Nano letters. - 2008. - № 8 (3). P. 902-907.
10. Novoselov, K.S. Electric field effect in atomically thin carbon films / K.S. Novoselov, A K. Geim, S.V. Morozov, D. Jiang, Y. Zhang, S.V. Dubonos, I.V. Grigorieva, A.A. Firsov // Science. - 2004. - № 306 (5696). P. 666-669.
12. Novoselov, K.S. Two-dimensional gas of massless Dirac fermions in grapheme / K.S. Novoselov, A.K. Geim, S.V. Morozov, D. Jiang, M.I. Katsnelson, I.V. Grigorieva, S.V. Dubonos, A.A. Firsov // Nature. -2005. - № 438. - P. 197-200.
14. Zhang, Y. Experimental Observation of Quantum Hall Effect and Berry's Phase in Graphene / Y. Zhang, Y.-W. Tan, H.L. Stormer, P. Kim // Nature. - 2005. - № 438. P. 201-204.
16. Geim, A. K. Graphene: Status and Prospects/ Geim A. K. // Science. - 2009. - № 324. P. 1530-1534.
18. Zhang, Y. Electric Field Modulation of Galvanomagnetic Properties of Mesoscopic Graphite / Y. Zhang, J.P. Small, M.E.S. Amori, P. Kim // Physical Review Letters. - 2005. - № 94. - P. 176803-1-176803-4.
20. Li, D. Processable aqueous dispersions of graphene nanosheets/ D. Li, M.B. Muller, S. Gilje, R.B. Kaner, G.G. Wallace // Nature Nanotechnology. - 2008. - № 3. P. 101-105.
22. Lin, Y.M. 100-GHz Transistors from Wafer-Scale Epitaxial Graphene / Lin Y.M., C. Dimitrakopoulos, K.A. Jenkins, D.B. Farmer, H.Y. Chiu, A. Grill, P. Avouris // Science. - 2010. - № 327. - P. 662
24. Dong, X. Electrical Detection of DNA Hybridization with Single-Base Specificity Using Transistors Based on CVD-Grown Graphene Sheets / X. Dong, Y. Shi, W. Huang, P. Chen, L.-J. Li // Advanced Materials. -2010. - № 22. - P. 1649-1653.
26. He, Q. Centimeter-Long and Large-Scale Micropatterns of Reduced Graphene Oxide Films: Fabrication and Sensing Applications, Q. He, H.G. Sudibya, Z. Yin, S. Wu, H. Li, F. Boey, W. Huang, P. Chen, H. Zhang // American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. - P. 3201-3208.
28. Wang, X. Transparent Carbon Films as Electrodes in Organic Solar Cells / X. Wang, L. Zhi, N. Tsao, Z. Tomovic, J. Li, K. Mullen// Angewandte Chemie Internatiomal Edition. - 2008. - № 47. - P. 2990-2992.
30. Wang, X. Transparent, Conductive Graphene Electrodes for Dye-Sensitized Solar Cells / X. Wang, L. Zhi, K. Mullen// Nano Letters. - 2008. - № 8. - P. 323-327.
32. Yin, Z. Electrochemical Deposition of ZnO Nanorods on Transparent Reduced Graphene Oxide Electrodes for Hybrid Solar Cells / Z. Yin, S. Wu, X. Zhou, X. Huang, Q. Zhang, F. Boey, H. Zhang // Small. - 2010. -№ 6. - P. 307-312.
34. Schedin, F. Detection of individual gas molecules adsorbed on grapheme / F. Schedin, A.K. Geim, S.V. Morozov, E.W. Hill, P. Blake, M.I. Katsnelson, K.S. Novoselov // Natural Materials. - 2007. - № 6. -P. 652-655.
36. Wang, Z. Direct Electrochemical Reduction of Single-Layer Graphene Oxide and Subsequent Functionalization with Glucose Oxidase / Z. Wang, X. Zhou, J. Zhang, F. Boey, H. Zhang// The Journal of Physical Chemistry C. - 2009. - № 113. - P. 14071-14075.
38. Geim, A.K. The Rise of Graphene / A.K. Geim, K.S. Novoselov // Nature of Materials. - 2007. - № 6. -P. 183-191.
40. Yang, K. Graphene in Mice: Ultrahigh In Vivo Tumor Uptake and Efficient Photothermal Therapy / K. Yang, S. Zhang, G. Zhang, X. Sun, S.-T. Lee, Z. Liu // Nano Letters. - 2010. - № 10. - P. 3318-3323.
42. Akhavan, O. Toxicity of Graphene and Graphene Oxide Nanowalls against Bacteria / O. Akhavan, E. Ghaderi // American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. - P. 5731-5736.
44. Zhang, Y.B. Cytotoxicity effects of graphene and single-wall carbon nanotubes in neural phaeochromocytoma-derived PC12 cells/ Y.B. Zhang, S.F. Ali, E. Dervishi, Y. Xu, Z.R. Li, D. Casciano, A.S. Biris// American Chemical Society Nano. - 2010. - № 4. -P. 3181-3186.
46. Hummers, W. S. Preparation of Graphitic Oxide / W. S. Hummers, R. E. Offeman // Journal of the American Chemical Society. - 1958. - № 80. - P. 1339-1339.
48. Alexandrov, G. N. Thin partially reduced oxide-graphene films: Structural, optical, and electrical properties/ G. N. Alexandrov, S.A. Smagulova, A.N. Kapitonov, F.D. Vasilieva, I.I Kurkina, P.V. Vinokurov, V.D. Timofeev, I.V. Antonova // Nanotechnologies in Russia. - 2014. - № 9 (5-6). - P. 18-22.
50. Kapitonov, A.N. Characterization of Graphene Oxide Suspension for Fluorescence Quenching in DNA-Diagnostics / A.N. Kapitonov, G.N. Alexandrov, F.D. Vasileva, S.A. Smagulova, V.B. Timofeev, N.R. Maksimova, A.A. Kuznetsov// Korean Journal of Materials Research. - 2016. - № 26 (1). - P. 1-7.
52. Vasil'eva, F.D. Issledovanie svoistv suspenzii, plenok i bumag oksida grafita, sintezirovannogo iz prirodnogo grafita mestorozhdeniia Iuzhnoi Iakutii / F.D. Vasil'eva, A.N. Kapitonov, A.E. Tomskaia, S.A Smagulova // ZhSKh. - 2018. - № 59 (4). - P. 859.
