CC BY
9Список литературы
1. Lipopolysaccharides of Bacteroides intermedias (Prerotella intermedia) and Bacteroides (Porphyromonas) gingivalis induce interleukine-8 gene expression in human gingival fibroblast culture / V. Tamura, M. Tocuda, S. Nagaoka [et al.] // Infect. immunal. - 1992. - v. 60, N 11. - P. 4932-4937.
2. Прозапальна дiя лшополюахарида на слизову оболонку по-рожнини рота щурiв / А. П. Левицький, С. О. Дем'яненко, О. А. Макаренко [та ш.] // Одеський мед. журн. - 2010. - № 2 (118). - С. 9-11.
3. Кукурудз Н. I. Ктшко-мжробюлопчна ефективнють засто-сування композици амiзон-етонiй, iмобiлiзованоi на ^eM^3eMi «Силлард-П», у лiкуваннi генералiзованого пародонтиту / Н. I. Кукурудз, Р.В. Куцик, B.I. Герелюк // Лжи. - 2006. - № 3-4. - С. 93-102.
4. Борисенко А.В. Мжробюлопчне обгрунтування застосу-вання наночасток золота та срiбла для лiкування перiодонтитiв / А.В. Борисенко, О.Б. Ткач, О.М. Волощук // Наук. вюник нац. мед. ун-ту iM. О.О. Богомольця. - 2012. - № 1-2 (36-37). - С. 21-26.
5. Борисенко А.В. Изучение влияния препаратов наночастиц золота на условно патогенную микрофлору корневого канала / А.В. Борисенко, О.Б. Ткач, О.М. Волощук // Соврем. стоматология. - 2013. - № 1 (65). - С. 11.
6. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская [и др.] - К.: ГФЦ, 2007. - 26 с.
7. Патент на корисну модель № 43140, МПК (2009) G01N 33/48 Спосiб оцшки ступеня дисбюзу (дисбактерюзу) оргашв i тканин / Левицький А. П., Деньга О. В., Селiванська I. О. [та ш.] -№ u200815092; заявл. 26.12.2008; опубл. 10.08.2009. Бюл. № 15.
8. Левицкий А.П. Лизоцим вместо антибиотиков / А.П. Левицкий. - Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
9. Дисбиотические аспекты патогенеза, профилактики и лечения стоматологических заболеваний / А.П. Левицкий, А.К. Нико-лишин, Е.П. Ступак [и др.] // Проблеми екологи та медицини. -2011. - т. 15, № 3-4 (додаток 1). - С. 103.
REFERENCES
1. Tamura V., Tocuda M., Nagaoka S. [et al.]. Lipopolysaccharides of Bacteroides intermedias (Prerotella intermedia) and Bacteroides (Porphyromonas) gingivalis induce interleukine-8 gene expression in human gingival fibroblast culture. Infect. immunal. 1992;60 (11): 4932-4937.
2. Levitskiy A. P., Demyanenko S. О, Makarenko O. A. [ta in.]. The anti-inflammatory effect of lipopolysaccharide upon oral mucous membrane of rats. Оdеskiy medychnyy zhurnal. 2010; 2 (118): 9-11.
3. Kukurudz N.I., Kutsyk R.V., Gerelyuk V.I. The clinico-microbiological effectiveness of the use of the composition amizon-ethonium, immobilized on silica "Sillard-P", in the treatment of generalized periodontitis. Liky. 2006; 3-4: 93-102.
4. Borisenko A.V., Tkach O.B., Voloshchuk O.M. The clinico-microbiological effectiveness of the use of the composition amizon-ethonium, immobilized on silica "Sillard-P", in the treatment of generalized periodontitis. Nauk. visnyk nats. med. un-tu im. O.O. Bogomoltsya. 2012; 1-2 (36-37): 21-26.
5. Borisenko A.V., Tkach O.B., Voloshchuk O.M. The study of the influence of the preparations of nanoparticles of gold on the conditionally pathogenous microflora of root canal. Sovrem. stomatologiya. 2013; 1 (65): 11.
6. Levitskiy A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. [i dr.]
Fermentativnyy metod opredeleniya disbioza polosti rta dlya skrininga pro- i prebiotikov: metodicheskie rekomendatsii [Enzymatic methods for determination of oral dysbiosis for screening pro- and prebiotics: method guidelines]. ^ev, GFC, 2007: 26.
7. Levitskiy A. P., Denga O. V., Selivanskaya I. A. [i dr.]. The method of estimation of the degree of dysbiosis (dysbacteriosis) of organs and tissues. Patent of Ukraine 43140. IPC (2009) G01N 33/48. Application number u 200815092. Date of filling: 26.12.2008. Publ.: 10.08.2009. Bul. № 15.
8. Levitskiy A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics].Оdеssа, KP OGT, 2005:74.
9. Levitskiy A. P., Nikolishyn E. P., Stupak E. P. The dysbiotic aspects of pathogenesis, prevention and treatment of dental diseases. Problemy ekologiy ta meditsiny. 2011; 15 (3-4):103.
Поступила 31.07.13
УДК 616.31-092:612.017.11-078-73
Т. В.Томилина, к. мед. н., О. А. Макаренко, д. биол. н., И. А. Селиванская, к. тех. н., Л. Н. Хромагина, к. биол. н., О. Э. Кнава
Государственное учреждение «Харьковский национальный медицинский университет» Государственное учреждение «Институт стоматологии национальной академии медицинских наук Украины»
АНТИДИСБИОТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ КВЕРТУЛИНА НА ДЕСНУ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ИММУНОДЕФИЦИТОМ
При иммунодефиците, вызываемом с помощью циклофос-фана, наблюдалось развитие дисбиоза в десне, которое значительно снижалось при пероральном введении Кверту-лина (кверцетин+инулин+цитрат кальция) в дозе 150 мг/кг. Ключевые слова: иммунодефицит, дисбиоз, десна, Кверту-лин.
Т. В. ТомЫЫа, О. А. Макаренко, I. О. Сел1ванська, Л. М. Хромагта, О. Е. Кнава
Державна установа «Харювський нащональний медичний ушверситет»
Державна установа «1нститут стоматологи НАМН»
АНТИДИСБ1ОТИЧНА Д1Я КВЕРТУЛ1НА НА ЯСНА ЩУР1В З ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИМ 1МУНОДЕФ1ЦИТОМ
У щур1в з iмунодефщитом, який викликали за допомогою цик-лофосфану, спостер^али розвиток дисбюзу в яснах. Перора-льне введення Квертулшу (кверцетин+шулш+цитрат каль-щю) в дозi 150 мг/кг значно знижувало стутнь дисбюзу. Ключов1 слова: iмунодефiцит, дисбюз, ясна, Квертулш.
T. V. Tomilina, O. A. Makarenko, I. A. Selivanskaja, L. N. Khromagina, O. E. Knava
State Establishment "Kharkov National Medical University" State Establishment "The Institute of Stomatology of the National academy of medical science of Ukraine"
THE ANTIDYSBIOTIC EFFECT OF QUERTHULIN UPON GUM OF RATS WITH EXPERIMENTAL IMMUNODEFICIENCY
ABSTRACT
Prebiotics and hepatoprotectors are known among the most effective antidysbiotic preparations. The aim of this investigation was to study the antidysbiotic effect of the preparation "Querthulin ", into the composition of which the prebiotic inulin and hepatoprotector quercethin as well as calcium citrate enter. The experiments were held with 18 white rats of Vistar line. In 12 of them the experimental immunodeficiency (ID) was restored by two intraperitoneal introductions (with two days interval) of cyclophosphan dosed at 45 mg/kg per injection. Six of these very rats were given 150 mg/kg "Querthulin" each with the feed. Leukocytosis, conditioned mainly by the growth of the contents of neutrophils, was observed in 14 days after cyclophosphan introduction. The contents of lymphocytes, on the contrary, reduce. The increase in the contents of leukocytes mostly at the expense of lymphocytes is found in the group of rats with ID, given "Querthulin". At ID the activity of urease, speaking of the growth of microbe insemination, is increasing
© Томилина Т. В., Макаренко О. А., Хромагина Л. Н.,
Кнава О. Э., 2013.
quickly. "Querthulin " truly reduces the activity of urease. At ID the activity of lysozyme more than twice as much decreases, and the degree of dysbiosis rises almost more than by 22 times. "Querthulin " really increases the activity of lysozyme and more than twice as much reduces the degree of dysbiosis. "Querthulin" truly raises API index; this fact may speak of its protective effect.
The conclusions. 1. The preparation "Querthulin " reduces the dysbiotic phenomena in gum, appearing at ID. 2. "Querthulin " increases the level of reduced at ID lymphocytes in blood. 3. "Querthulin " do not terminate the observed at ID inflammatory phenomena in gum, but raises the antioxidant-prooxidant index API.
Key words: immunodeficiency, dysbiosis, gum, "Querthulin ".
В нашей предыдущей работе [1] было показано, что у крыс с экспериментальным иммунодефицитом (ИД) в десне развивается дисбиоз, на фоне которого снижается содержание гиалуроновой кислоты и увеличивается уровень биохимического маркера воспаления - активность эластазы.
Как известно, одними из наиболее эффективных антидисбиотических средств являются пребиотики [2] и гепатопротекторы [3]. Поэтому целью настоящего исследования стало изучение антидисбиотического действия препарата Квертулин, в состав которого входят пребиотик инулин и гепатопротектор кверце-тин, а также цитрат кальция [4].
Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на 18 белых крысах линии Вистар (самцы, 10 месяцев, средняя живая масса 280 ± 12 г). У 12 из них воспроизводили экспериментальный ИД путем двукратного (с интервалом 2 дня) внутрибрюшин-ного введения циклофосфана в дозе 45 мг/кг на одну инъекцию. Из этого числа 6 крыс с первого дня ежедневно получали с кормом по 150 мг/кг Квертулина.
Умерщвление животных осуществляли через 14 дней под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца и иссекали десну. В крови определяли содержание лейкоцитов и лейкоцитарную формулу [5].
В гомогенате десны (20 мг/мл 0,05 М трис-НС1-буфера рН 7,5) определяли уровень маркеров воспаления [6]: активность эластазы [7] и содержание малонового диальдегида (МДА) [8]; активность уреазы [9] как биохимического маркера микробной обсеме-ненности, активность лизоцима [10] в качестве показателя неспецифического иммунитета и активность антиоксидантного фермента каталазы [11]. По соотношению относительных активностей уреазы и лизо-цима рассчитывали степень дисбиоза по Левицкому [12], а по соотношению активности каталазы и содержания МДА рассчитывали антиоксидантно-прооксидантный индекс АПИ [6]
Кроме того, в гомогенате десны определяли содержание гиалуроновой кислоты [13].
Таблица
Влияние Квертулина на лейкоцитарную формулу крови у крыс с иммунодефицитом (ИД)
№№ п/п Показатели Норма ИД ИД + Квертулин
1 Лейкоциты, х109/л 13,98 ± 2,32 29,00 ± 6,47 р<0,05 33,70 ± 2,94 р<0,05 р1>0,05
2 Нейтрофилы сегментоядерные, % 26,0 ± 3,1 35,6 ± 2,2 р<0,05 33,0 ± 7,56 р>0,1 р:>0,3
3 Нейтрофилы палочкоядерные, % 1,40 ± 0,50 4,00 ± 0,63 р<0,05 3,0 ± 1,0 р>0,05 р1>0,05
4 Лимфоциты, % 55,6 ± 2,7 38,6 ± 3,2 р<0,01 47,2 ± 6,8 р>0,05 р1>0,05
5 Моноциты, % 10,0 ± 0,8 13,4 ± 0,6 р<0,05 13,4 ± 1,4 р<0,05 р1=1,0
6 Эозинофилы, % 7,0 ± 0,8 8,4 ± 2,4 р>0,05 3,4 ± 1,3 р<0,05 р1<0,05
группой «Норма»;
Примечание : р - показатель достоверности различий с р1 - покакзатель достоверности различий с группой «ИД».
Результаты и их обсуждение. В таблице показаны результаты определения содержания лейкоцитов и лейкоцитарной формулы в крови у крыс с ИД. Как видно из этих данных, после 14 дней с момента введения циклофосфана наблюдается лейкоцитоз, обусловленный, главным образом, увеличением содержания нейтрофилов. Содержание лимфоцитов, напротив,
снижается. В этот период наблюдается спленомегалия в отличие от срока 7 дней, когда наблюдалась лейкопения и снижение органного индекса селезенки [1].
В группе крыс с ИД, получавших Квертулин, наблюдается увеличение содержания лейкоцитов за счет, главным образом, лимфоцитов.
На рис. 1 представлены результаты определения в десне уровня маркеров воспаления и содержание гиалуроновой кислоты. Как видно из этих данных, при ИД наблюдается достоверное увеличение активности эластазы и снижение содержания гиалуроновой кислоты. Прием Квертулина не оказал существенного влияния на эти показатели.
На рис. 2 представлены результаты определения в десне крыс с ИД активности уреазы, лизоцима и степени дисбиоза. Из этих данных видно, что при ИД резко возрастает активность уреазы, свидетельствующая об увеличении микробной обсемененности. Квертулин достоверно снижает активность уреазы.
н §
ев H о ев Ч
96 т-
80 ---
64
48
32 ---
16 ---
(ч
J4
Л « 40
s -s 32
â 24
s
16
8
1
и о
о ft
S3
[—I
600
500
400
200
100
1 2 3
1 2 3
1 2 3
0
Рис. 1. Влияние Квертулина на уровень маркеров воспаления и гиалуроновой кислоты в десне крыс с иммунодефицитом (ИД): 1 - норма; 2 - ИД; 3 - ИД+Квертулин (* - р<0,05 в сравнении с группой № 1)
Й 1,05
Й
¥ 0,9
<s 0,75
M 5
cd
£ 0,6
0,45 0,3 0,15 0
400
о
-Д 320 --- 240 --- 160
80
I
« и
_св -
О S
22
s
4 8 "TT 8
и
--S-- 6
H
о
1 12 3
1 2 3
4
2
1
3
Рис. 2. Влияние Квертулина на активность уреазы, лизоцима и степень дисбиоза в десне крыс с иммунодефицитом (ИД): 1 - норма; 2 - ИД; 3 - ИД+Квертулин (* - р<0,05 в сравнении с группой № 1; ** - р<0,05 в сравнении с группой № 2).
Рис. 3. Влияние Квертулина на активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с иммунодефицитом (ИД): 1 - норма; 2 -ИД; 3 - ИД+Квертулин (* - р<0,05 в сравнении с группой № 1).
При ИД более, чем в 2 раза снижается активность лизоцима, и почти в 22 раза возрастает степень дис-биоза. Квертулин достоверно повышает активность лизоцима и более, чем в 2 раза снижает степень дис-биоза.
На рис. 3 представлены результаты определения активности каталазы и индекса АПИ в десне крыс с ИД. Активность каталазы при ИД снижается (однако, р>0,05), а Квертулин ее не повышает. Однако Квертулин достоверно повышает индекс АПИ, что может свидетельствовать о его защитном действии.
Нам кажется, что избранная доза Квертулина (150 мг/кг) недостаточна для проявления его протио-вовспалительного эффекта. В дальнейших исследованиях предстоит изучить зависимость «доза-эффект», увеличив дозировку Квертулина не менее, чем в 2 раза.
Выводы. 1. Препарат Квертулин снижает дисбио-тические явления в десне, возникающее при ИД.
2. Квертулин повышает сниженный при ИД уровень лимфоцитов в крови.
3. Квертулин не устраняет воспалительные явления в десне, наблюдаемые при ИД, однако повышает антиоксидантно-прооксидантный индекс АПИ.
Список литературы
1. Левицкий А. П. Пародонтопротекторное действие квертулина при экспериментальном иммунодефиците / А П. Левицкий, Т. В. Томилина, И. И. Соколова // Вестник стоматологии. - 2013. - № 2. - С. 2-6.
2. Изучение микробиоценоза при хронических заболеваниях слизистой оболочки полости рта / В.В. Хазанова, И.М. Рабинович, Е.А. Земская [и др.] // Стоматология. - 1996. - т. 76, № 2. -С. 26-27.
3. Левицкий А. П. Антимикробная функция печени / А. П. Левицкий, С.А. Демьяненко, Ю.В. Цисельский - Одесса: КП ОГТ, 2011. - 141 с.
4. Квертулин. Витамин Р, пребиотик, гепатопротектор / А.П. Левицкий, О.А. Макаренко, И.А. Селиванская [и др.] - Одесса: КП ОГТ, 2012. - 20 с.
5. Базарнова М. А. Клиническое исследование крови. В кн. Руководство по клинической лабораторной диагностике. Ч. 2 (под ред. М.А. Базарновой) / М.А. Базарнова, Т.Л. Сакун - К.: Вища школа, 1982. - С. 35-52.
6. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: метод. рекомендации / А.П. Левицкий, О.В. Деньга, О.А. Макаренко [и др.] - Одесса, 2010. - 16 с.
7. Левицкий А. П. Методы определения активности эла-стазы и ее ингибиторов: метод. рекомендации / А.П. Левицкий, А.В. Стефанов - К.: ГФЦ, 2002. - 15 с.
8. Стальная И. Д. Метод определения малонового диаль-дегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. - М. : Медицина, 1977. - С. 66-68.
9. Гаврикова Л. М. Уреазная активность ротовой жидкости у больных с острой одонтогенной инфекцией челюстно-лицевой области / Л. М. Гаврикова, И. Т. Сегень // Стоматология. -1996. - Спец. вып. - С. 49-50.
10. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков / А.П. Левицкий - Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
11. Гирин С. В. Модификация метода определения активности каталазы в биологических субстратах / С. В. Гирин // Лабораторная диагностика. - 1999. - № 4. - С. 45-46.
12. Пат. 43140 Украша, МПК (2009) 00 Ш 33/48. Спосiб оцшки ступеня дисбюзу (дисбактерюзу) оргашв i тканин / Левиць-кий А.П., Деньга О.В., Селiванська 1.О. [та ш.]. - № и200815092. -заявл. 26.12.08; опубл. 10.08.09, Бюл. № 15.
13. Асатиани В. С. Новые методы биохимической фотометрии / В.С. Асатиани - М.: Наука, 1965. - 298 с.
REFERENCES
1. Levitsky A.P., Tomilina T.V., Sokolova I.I.
Parodontoprotective action of quertulin at the experimental immunodeficiency. Vestnik stomatologii. 2013;2:2-6.
2. Khazanova V. V., Rabinovich I. M., Zemskaya E. A. The study of microbiocenosis at chronic diseases of oral mucous membrane. Stomatologiya. 1996; 76(2):26-27.
3. Levitskiy A. P., Demyanenko S. A., Tsiselskiy Yu. V. Antimikrobnaya funktsiya pecheni [The antimicrobic function of liver].Оdеssа, KP OGT, 2011:141.
4. Levitskiy A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A., Khromagina L. N. [i dr.] Kvertulin. Vitamin P, prebiotik, gepatoprotektor ["Querthulin", Vitamin P, prebiotic, hepatoprotector]. Оdеssа, KP OGT, 2012:20.
5. Bazarnova M. A., Sakun T. L. Klinicheskoe issledovanie krovi [The clinical study of blood. In the book "The Manual on Clinical Laboratorial Diagnostics. P. 2 (ed. Bazarnova M.A.)]. Kiev, Vyshcha shkola, 1982:35-52.
6. Levitskiy A. P., Denga O. V., Makarenko O. A., Demyanenko S. A., Rossachanova L. N., Knava O. E. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Оdеssа, KP OGT, 2010:16.
7. Levitskiy A. P., Stefanov A. V. Metody opredeleniya aktivnosti elastazy i eye ingibitorov: metodicheskie rekomendatsii [The methods of the determination of the activity of elastase and its inhibitors: method guidelines]. Kiev, GFK, 2002:15.
8. Stalnaya I. D., Garishvili T. G. Metod opredeleniya malonovogo dialdegida s pomoshchyu tiobarbiturovoy kisloty [The method of revelation of malonic dialdehyde with thiobarbituric acid]. Moskva, Meditsina, 1977:66-68.
9. Gavrikova L. M., Segen I. T. Urease activity of oral liquid in patients with acute odontogenic infection of maxillo-facial part. Stomatologiya. 1996; The extra issue :49-50.
10. Levitskiy A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Оdеssа, KP OGT, 2005:74.
11. Girin S. V. The modification of the method of the determination of catalase activity in biological substrates. Laboratornaya
diagnostika. 1999; 4:45-46.
12. Levitskiy A. P., Denga O. V., Selivanskaya I. A., Makarenko O. A., Demyanenko S. A., Tsiselskiy Yu. V. The method of estimation of the degree of dysbiosis (dysbacteriosis) of organs and tissues. Patent of Ukraine 43140. IPC (2009) G01N 33/48. Application number u 200815092. Date of filling: 26.12.2008. Publ.: 10.08.2009. Bul. № 15.
13. Asatiani V. S. Novye mrtody biokhimicheskoy fotometrii [The new methods in biochemical photometry]. Moskva, Nauka, 1965:298.
Поступила 19.06.13
УДК: 541.515:616.314.17-002-092.9:615.235
В. Д. Лук'янчук, д. мед. н. Д. О. Гордшчук, Д. С. Кравець, к. мед. н.
ДЗ «Луганський державний медичний ушверситет»
ПОР1ВНЯЛЬНИЙ АНАЛ1З К1НЕТИКИ ВШЬНОРАДИКАЛЬНИХ РЕАКЦ1Й У ЩУР1В
НА МОДЕЛ1 ПАРОДОНТИТУ ПРИ ЗАСТОСУВАНН1 АЦЕТИЛЦИСТЕШУ
Хрошчний генералiзований пародонтит (ХГП), представляв одну з найбтьш актуальних проблем стоматологи на сьо-годтштй день. Як вiдомо, в патогенезi ХГП важливим тд
© Лук'янчук В. Д., Гордшчук Д. О., Кравець Д. С., 2013.
