CC BY
26Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3
Rusak Yu.E., Efanova E.N., Rusak M.Yu.
Surgut State University, Surgut, Russia
Фототерапия (ПУВА, СФТ) в последние десятилетия занимает одно из ведущих мест в терапии псориаза. Механизм действия этих методов продолжают изучать. Важную роль в реализации фотоэффектов играет кислородный баланс кожи. Установлено, что у больных псориазом в очагах поражения содержание свободного кислорода снижено.
Цель исследования - изучение динамики кислородного баланса у больных псориазом в процессе ПУВА- и селективной фототерапии.
Материалы и методы. Изучение кислородного баланса у больных псориазом проводили полярографическим методом с использованием прибора ТСМ-2 Radiometer Ltd. (Дания), который позволяет оценить содержание, транспорт и потребление свободного кислорода в коже по значениям парциального давления кислорода (tcpÜ2). Под наблюдением находились 72 больных псориазом, из них в процессе ПУВА-терапии - 33, в динамике СФТ - 39.
Результаты. Исходные показатели свидетельствовали о наличии гипоксиче-ского состояния у пациентов, обусловленного сниженным напряжением кислорода в очаге, замедленном транспорте на микроциркуляторном уровне, снижении потребления кислорода тканями, недостаточными резервными возможностями. В процессе ПУВА-терапии выявили отсутствие выраженного влияния на напряжение кислорода, транспорт в сочетании со снижением скорости потребления и уменьшением резервных возможностей транспорта. В процессе СФТ показатели менялись в большей степени, отмечалось выраженное повышение содержания кислорода в очаге, улучшение транспорта на микроциркуляторном уровне, но не сказывалось на скорости потребления.
Выводы. Установлено, что свободный кислород кожи имеет большее значение в реализации эффекта СФТ в сравнении с ПУВА-терапией. Это обстоятельство подчеркивает различия в механизме действия этих методов лечения.
АНТАГОНИСТИЧЕСКОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ LACTOBACILLUS PLANTARUM 8RA-3 И LACTOBACILLUS RHAMNOSUS GG НА КЛЕТКИ ESCHERICHIA COLI M17 И BL21
Рыбальченко О.В.12, Орлова О.Г.12, Капустина В.В.1, Потокин И.Л.2
'Санкт-Петербургский государственный университет, 'Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия
ANTAGONISTIC ACTIVITY OF LACTOBACILLUS PLANTARUM 8RA-3 AND LACTOBACILLUS RHAMNOSUS GG ON ESCHERICHIA COLI M17 AND BL21
Rybalchenko O.V.12, Orlova O.G.12, Kapustina V.V.1, Potokin I.L.2
1St. Petersburg State University; 2State Research Institute of Highly Pure Bioprepara-tions, St. Petersburg, Russia
В настоящее время хорошо известно проявление антагонистической активности различными видами лактобактерий в отношении таких представителей семейства Enterobacteriaceae, как Escherichia coli, Shigella flexnerl, Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium. Несмотря на глубокий интерес к данной проблеме, информации о морфофизиологических и ультраструктурных изменениях в клетках-мишенях, подвергшихся действию метаболитов лактобактерий, крайне недостаточно.
Цель исследования - оценка характера взаимоотношений между клетками лактобактерий Lactobacillus plantarum 8RA-3, L. rhamnosus GG и энтеробактерий E. coli M17 и E. coli BL21 при совместном выращивании на клеточном и популяци-онном уровнях.
Материалы и методы. Методом двуслойного агара изучали характер взаимоотношений между микробными популяциями двух производственных штаммов лактобактерий L. plantarum 8RA-3, L. rhamnosus GG и двух штаммов кишечной палочки E. coli M17 и BL21. На электронно-микроскопическом уровне с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEM-100C (JEOL, Япония) исследовали морфофизиологические свойства клеток лактобактерий и кишечной палочки. Особенность подготовки электронно-микроскопических препаратов при использовании авторской методики обеспечивала сохранность исходной структуры и пространственного расположения клеток в микробных сообществах in vivo.
Результаты. Анализ ультратонких срезов кишечных палочек, ингибируемых метаболитами лактобактерий, показал многочисленные морфологические изменения в клетках E. coll при сравнении с интактными клетками. Ультраструктурные изменения в клетках-мишенях проявлялись в виде уменьшения толщины клеточных стенок, отслоения цитоплазматической мембраны от цитоплазмы и появления специфических цитоплазматических включений в полярных и в субполярных областях клетки. Особый интерес представляют микроколонии кишечных палочек, образующиеся на границе визуально различимой зоны подавления их роста лактобактериями. В этих микробных сообществах клетки E. coli M17 и BL 21 также испытывали воздействие бактериоциноподобных субстанций лактобактерий, которые проявлялись в виде аналогичных ультраструктурных изменений.
Заключение. Ультратонкое строение клеток Е. саИ М17 и В1_21, ингибируемых лактобактериями, значительно отличалась от морфологических изменений, вызываемых воздействием других стрессовых факторов. Так, например, при естественном процессе автолиза отмечено нарушение целостности цитоплазматической мембраны и клеточной стенки. Высокотемпературное воздействие приводило к расширению периплазматического пространства и появлению многочисленных внутрицитоплазматических инвагинаций. При щелочном шоке отмечали исчезновение рибосом.
Таким образом, электронно-микроскопический анализ морфофизиологических изменений в клетках-мишенях при воздействии клеток-антагонистов позволит расширить понимание процессов межвидовых взаимоотношений на клеточном и популяционном уровнях и усовершенствовать выбор штаммов лактобактерий при создании препаратов-пробиотиков.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ИЗОЛЯТОВ ГРУППЫ «PENICILLIUM NON-MARNEFFEI» ИЗ БИОМАТЕРИАЛОВ ЧЕЛОВЕКА
Рябинин И.А., Богомолова Т.С., Шабанова В.В., Рукина А.Н., Пинегина О.Н., Борзова Ю.В., Шадривова О.В., Десятик Е.А., Чилина Г.А., Васильева Н.В.
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова; Российский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Р.Р. Вредена, Санкт-Петербург, Россия
IDENTIFICATION OF THE ISOLATES OF «PENICILLIUM NON-MARNEFFEI» GROUP FROM HUMAN BIOMATERIALS
Ryabinin I.A., Bogomolova T.S., Schabanova V.V., Rukina A.N., Pinegina O.N., Borzova Yu.V., Schadrivova O.V., Desyatik E.A., Chilina G.A., Vasilyeva N.V.
North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov; First Saint Petersburg State Medical University named after I.P. Pavlov; Russian Research Institute of Traumatology and Orthopedics named after R.R. Vreden, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - проведение фенотипической идентификации группы штаммов Peniciiiium spp. из биоматериалов с использованием программно-математической обработки морфологических признаков культуры in vitro.
Материалы и методы. В исследование включили 4 штамма, выделенные из биоптата лёгкого и двух образцов бронхоальвеолярного лаважа больных онкоге-матологического профиля, а также из биоптата сустава пациента с микотическим гонартрозом. Штаммы субкультивировали на среде Сабуро, агаре Чапека в классической прописи и с дрожжевым экстрактом 7 суток при 25 °С, затем идентифицировали по параметрам микроморфологии с помощью электронной системы Института биологического разнообразия грибов им. А. Вестердик (Утрехт, Нидерланды) «Aspergillus S Penicillium Database» на платформе «Biolomics» Микрометрию выполнили на микроскопе Leica CME (Leica, Германия). Для корректировки использовали руководства Frisvad J.C. и Samson R.A., 2004 (для рода Peniciiiium sensu stricto), а также Yilmaz N. et al., 2014 (для рода Taiaromyces). Дополнительно штаммы изучили методом линейной MALDI-TOF-масс-спектрометрии клеточного экстракта, как описано нами ранее [Riabinin I.A. et al. Mycoses, 2015].
Результаты. При формулировке окончательных результатов идентификации руководствовались величинами долей сходства оригинальных изолятов с типовыми коллекционными штаммами и положением штаммов в дендрограмме кластеризации морфологических свойств по алгоритму «UPGMA». Штаммы удалось идентифицировать как Peniciiiium variabiie (из биоптата легкого), P. waksmanii/veiutinum-complex, Eupeniciiiium osmophiium? (из БАЛ), и Taiaromyces coiumbinus/piceus-complex (из биоптата сустава). MALDI-масс-спектры изолятов имеют признаки, типичные для семейства Trichocomaceae, но в целом масс-спектрометрическая идентификация оказалась неуспешной.
Заключение. Штаммы из обширной группы видов «Peniciiiium non-marneffei» эпизодически встречаются в медицинской практике как возбудители инвазивных микозов. Проблема идентификации таких изолятов молекулярными и физико-химическими методами состоит в том, что эти методы либо недостаточно эффективны (MALDI-TOF-MS), либо дорогостоящие (ДНК-секвенирование). Возможным решением данной проблемы является внедрение в микологическую диагностику электронных экспертных систем обработки фенотипических признаков, которые основаны на банках данных культур эталонных штаммов.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ТЕСТ-СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ ИММУНО-АПТАМЕРНОЙ ПЦР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕПТИДОГЛИ-КАН-АССОЦИИРОВАННОГО ЛИПОПРОТЕИНА LEGIONELLA SPP.
Рябко А.К., Зенинская Н.А., Марьин М.А., Романенко Я.О., Фирстова В.В., Шемякин И.Г.
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии, Оболенск, Россия
IMMUNOAPTAMER-BASED PCR TEST SYSTEM DIAGNOSTIC PARAMETERS DEFENITION FOR DETERMINATION OF PEPTIDOGLYCAN-ASSOCIATED LIPO-
