CC BY
55
ИММУНОПАТОЛОГИЯ и КЛИНИЧЕСКАЯ иммунология
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014
УДК 618.3-06:616.61-002.3]-092:612.017.1]-078.33
Петров С.В., Серегин С.П., Новиков А.В., Агарков Н.М.
АНАЛИЗ РАЗНОМОДАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ПАРАМЕТРОВ ИММУНИТЕТА
в зависимости от клинического варианта неосложненного пиелонефрита во время беременности для его прогнозирования
ФГБОУ ВПО Юго-Западный государственный университет Министерства образования и науки России, 305040, г Курск
Изучены показатели врожденного иммунитета у беременных в III триместре с острым гестационным пиелонефритом, хроническим пиелонефритом в стадии обострения и ремиссии. Группа контроля - здоровые беременные женщины. Определяли содержание С3- и С4- компонентов комплемента, ^-ингибитора, фактора Н; активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови - фагоцитарный индекс (ФИ), фагоцитарное число, индекс активности фагоцитоза (ИАФ); оценивали активность кислородзависимых систем нейтрофилов периферической крови по реакции восстановления нитросинего тетразолия, спонтанного и стимулированного зимозаном, функциональный резерв нейтрофилов (ФРН), уровень лактоферрина. Максимальное содержание С3- и С4-компонентов комплемента (36,3±2,07 и 58,3±4,0 нг/мл соответственно) наблюдали в группе с гестационным пиелонефритом, впервые выявленным во время беременности. Концентрация С1-игибитора (110,2±19,1 нг/мл) в группе с гестационным пиелонефритом, наоборот, снижена. Показатели активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов периферической крови (ФИ 23,2±0,41%, ИАФ 1,02±0,03) в группе беременных с неосложненным пиелонефритом снижены по сравнению с таковыми в группе с нормально протекающей беременностью ФИ (50,5±4,2%, ИАФ 2,9±0,7). Изменения изучаемых параметров фагоцитоза наиболее выражены у беременных с впервые выявленным пиелонефритом. Отмечена тенденция к увеличению активности кислородзависимых систем нейтрофилов у пациенток с пиелонефритом. Наиболее выражены изменения содержания лактоферрина (1518,3±244,2 нг/мл) и ФРН (9,6±1,05%) у беременных с гестационным пиелонефритом по сравнению с аналогичными показателями у здоровых беременных (789,7±87,1 нг/мл и 5,8±0,14% соответственно).
Ключевые слова: система комплемента; врожденный иммунитет; неосложненный пиелонефрит; кислородза-висимая система нейтрофилов; активность фагоцитоза.
S.V Petrov, S.P. Seregin, A.V Novikov, N.M. Agarkov
ANALYSIS OF MULTI-MODAL CHANGE SETTINGS IMMUNITY, DEPENDING ON THE CLINICAL VARIANT UNCOMPLICATED PYELONEPHRITIS DURING PREGNANCY FOR PREDICTING
«Southwestern State University» of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation, 305040, Kursk,
Russian Federation
We studied the parameters of innate immunity in pregnant women in the third trimester with acute gestational pyelonephritis, chronic pyelonephritis in a stage of exacerbation and remission. Control group of healthy pregnant women. The indicators are components of complement C3-, C4-, ^-inhibitor factor N; activity and intensity of peripheral blood neutrophil phagocytosis -phagocytic index (PI), phagocytic number (PN), phagocytosis activity index (PAI); activity oxygen dependent systems of neutrophils in peripheral blood by the reaction of recovery tetrazoly nitro blue, spontaneous and stimulated zimozan, functional reserve of neutrophils (FRN), lactoferrin. The maximum content of C3 and C4 complement components in the group with gestational pyelonephritis, first detected during pregnancy (36,3±2,07 ng/ml, 58,3±4.0 ng/ml). Concentration d-игибитора (110,2±19,1 ng/ml) in the group with gestational pyelonephritis on the contrary decreased. Indicators of activity and the intensity of peripheral blood neutrophil phagocytosis (PI 23,2±0,41%, PAI 1,02±0,03) in the group of pregnant women with uncomplicated pyelonephritis reduced, compared with a group of normal pregnancy (50,5±4.2% and 2,9±0,7). Changes in the studied parameters of phagocytosis are most pronounced in the group of pregnant women with newly diagnosed pyelonephritis. There was a trend to increase of activity of oxygen dependent systems of neutrophils in patients with pyelonephritis. The most marked changes in the content of lactoferrin (1518,3±244,2 ng/ml) and functional reserve (9,6±1,05%) of neutrophils in the group of pregnant women with gestational pyelonephritis compared with healthy pregnant 789,7±87,1 ng/ml and 5.8±0,14% respectively.
key words: system of complement; innate immunity; uncomplicated pyelonephritis; oxygen dependent system neutrophils; phagocytosis activity.
Хронический пиелонефрит в структуре экстрагенитальной патологии у беременных занимает ведущее место (4854%). Данное заболевание осложняет течение беременности и родов, является одним из пусковых механизмов гестоза, кровотечения в родах, приводит к невынашиванию беременности и перинатальной заболеваемости и смертности [1-3]. Серозные формы пиелонефрита во время беременности приводят к латентности, характеризуются трудностью диагностики и медленным развертыванием клинической картины.
Основными факторами, предрасполагающими к возникновению острого гестацинного пиелонефрита, являются сниже-
Петров Сергей Вячеславович (Petrov Sergey Vyacheslavovich), [email protected]
ние тонуса верхних отделов мочевых путей за счет повышенного содержания прогестерона, оказывающего дилатационное действие на гладкую мускулатуру мочеточников, а также механического фактора (сдавление мочеточников увеличенной в размере беременной маткой), наличие очага инфекции в организме [4-6, 8].
Несмотря на относительно подробное изучение данной проблемы, в литературе отсутствуют указания о возможности прогнозирования осложнений для матери и плода, что нередко приводит к запоздалой диагностике и несвоевременной терапии.
Если сложностей с лечением гнойных форм пиелонефрита сегодня не возникает, то говорить о дифференцированном подходе к лечению серозных форм как в период обострения, так и в период ремиссии пока не приходится [8, 9].
- 77 -
ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2014
Таблица 1
Показатели системы комплемента периферической крови
Показатель, нг/мл Основная группа
Контроль подгруппа 1.1 подгруппа 1.2 подгруппа 1.3
С3 13,4±0,95 36,3±2,07 25,5±1,29 28,6±1,15
С4 26,2±2,1 58,3±4,0 53,4±2,4 40,5±2,6
Ц-ингибитор 214,4±31,2 110,2±19,1 241,2±39,3 235,3±42,2
Фактор Н 30,6±3,9 166,5±19,3 190,3±21,3 177,3±24,1
Таблица 2 Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови
Основная группа
Показатель Контроль подгруппа 1.1 подгруппа 1.2 подгруппа 1.3
ФИ, % 50,5±4,2 23,2±0,41 25,9±0,9 28,7±0,6
ФЧ, абс. 5,62±0,29 3,87±0,13 3,88±0,21 3,78±0,14
ИАФ 2,9±0,7 1,02±0,03 1,11±0,03 1,15±0,06
Инфекционные факторы воспалительной патологии почек запускают целый каскад реакций, прежде всего иммунных, на системном и местном уровне [10, 11]. Диагностика гнойных и гнойно-деструктивных форм пиелонефрита проще, чем дифференциальная диагностика и определение степени тяжести серозного пиелонефрита [12]. В связи с этим, изучение клинико-иммунологических показателей, иммунологического статуса беременных с различными клиническими формами пиелонефрита, поиск новых методов доклинической диагностики, иммунологической коррекции и профилактики осложнений у беременных с хроническим пиелонефритом по-прежнему актуальны.
Цель исследования - изучить показатели врожденного иммунитета у беременных с различными формами неосложненного пиелонефрита.
Задачи исследования:
1) изучить показатели системы комплемента у беременных с различными формами неосложненного пиелонефрита;
2) выявить изменения активности и интенсивности фагоцитоза периферической крови у беременных;
3) определить показатели активности кислородзависимых систем нейтрофилов крови у беременных с неосложненным пиелонефритом.
Материал и методы. Комплексно обследовали 190 беременных, из которых 150 вошли в основную группу (диагностированный неосложненный пиелонефрит), а 40 - в контрольную (здоровые). Обследование проводили на 32-34-й неделе беременности.
В основу деления на подгруппы было положено наличие у пациенток неосложненной формы пиелонефрита по классификации А.Я. Пытеля и С.Д. Голигорского (1977). Так, в основной группе выделили три подгруппы: 1.1 - гестационный пиелонефрит, выявленный впервые во время беременности (n = 54); 1.2 - хронический пиелонефрит, стадия обострения (п = 40); 1.3 - хронический пиелонефрит, стадия ремиссии (п = 56).
Обследуемые женщины находились в возрасте 22-29 лет, у каждой из них беременность была одноплодной и завершилась своевременным рождением живых детей без пороков развития.
Критериями включения пациенток в обследование стало отсутствие органической патологии органов мочевыделительной системы, а также острой инфекционной патологии, специфической инфекции, передающейся половым путем. Исключали пациенток с хроническими экстрагенитальными
очагами воспалительной патологии в стадии обострения.
Обследование беременных включало выявление клиникоанамнестических характеристик течения беременности, лабораторную диагностику воспалительной патологии почек и исследование показателей врожденного иммунитета.
Содержание С3-, С4-компонентов комплемента, фактора Н, С1-ингибитора определяли в плазме с помощью набора реагентов ProCon (ООО «Протеиновый контур», Санкт-Петербург) методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови оценивали по проценту фагоцитоза (ФИ - фагоцитарный индекс), фагоцитарному числу (ФЧ) и индексу активности фагоцитоза (ИАФ). Содержание лактоферрина определяли твердофазным иммуноферментным методом на тест-системах «Лактоферрин-стрип» (“Вектор-Бест”, Новосибирск, Россия). Активность кислородзависимых систем нейтрофилов оценивали по реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ), спонтанного (сп.) и стимулированного (ст.) зимозаном, с расчетом функционального резерва нейтрофилов (ФРН). Полученные результаты подвергали компьютерному статистическому анализу при помощи у критерия-Стьюдента.
В структуре соматических заболеваний до беременности в основной группе следует отметить хроническую железодефицитную анемию у 105 (70±5,3%), пациенток заболевания эндокринной системы у 54 (36±4,7%), артериальную гипертензию различного генеза у 27 (18±5,7%), заболевания органов дыхания у 24 (16±5,2), заболевания желудочнокишечного тракта у 39 (26±4,4%). Большинство беременных с хроническим пиелонефритом страдали анемией до наступления настоящей беременности. Средняя длительность заболевания почек у них составила 13,5±4,4 года.
Наиболее частой патологией гениталий в анамнезе у беременных были воспалительные заболевания матки и придатков - 35±5,2% против 15±3,5% в группе контроля (р < 0,05). В группе с пиелонефритом частота невынашивания беременности составляла 14±3,5%, в контрольной - 10±4,6% (р > 0,05).
В основной группе беременность осложнялась развитием ФПН у 34±4,5% женщин, в контроле - у 12,5±2,5%. Угрожающий выкидыш и угрожающие преждевременные роды в основной группе диагностировали у 44,6±4,8% пациенток, в контрольной - у 20±3,6%; внутриутробное инфицирование -у 72±5,7 и 15±4,3% соответственно.
В результате общего анализа мочи и анализа мочи по Не-чипоренко лейкоцитурию выявили у 90±5,4% женщин основной группы.
Бактериурия в количестве 105КОЕ/мл и выше была у 66 (44±6,4%) беременных основной группы преимущественно в период обострения заболевания. В случае латентного течения пиелонефрита отмечали бактериурию с микробиологическим критерием 102-104 КОЕ/мл.
Наиболее частым возбудителем хронического пиелонефрита являлись Escherichia coli (66±5,2%), грамположительные стрептококки и стафилококки (24±4,5%); грамотрицательные бактерии семейства Enterobacteriaceae (10±3,5%): Klebsiella (6±2,2%) и прочие (Enterobacter spp, Proteus, Candida spp.) (р < 0,05).
При исследовании показателей системы комплемента пери-
Таблица 3
Активность кислородзависимых систем нейтрофилов периферической крови
Основная группа
Показатель Контроль подгруппа 1.1 подгруппа 1.2 подгруппа 1.3
НСТ-сп., % 23,3±1,7 13,5±1,09 19,3±2,1 21,6±1,44
НСТ-ст., % 28,2±2,3 26.3±1,58 27,4±1,91 29,1±2,66
ФРН, % 5,8±0,14 9,6±1,05 8,8±0,58 5,1±0,3
Лактофер-рин, нг/мл 789,7±87,1 1518,3±244,2 1166,3±118,1 905,0±91,6
- 78 -
ИММУНОПАТОЛОГИЯ и КЛИНИЧЕСКАЯ иммунология
ферической крови выявили повышение содержания С3 и С4 у пациенток основной группы в сравнении с таковыми в контроле, причем максимальные параметры обнаружили в подгруппе 1.1 (гестационный пиелонефрит) - 36,3±2,07 и 58,3±4 нг/мл соответственно. В подгруппе 1.2 (обострение хронического пиелонефрита) уровень С3 в сравнении с аналогичным показателем в подгруппе 1.3 (хронический пиелонефрит, ремиссия) достоверно не отличался (25,5±1,29 и 28,6±1,15 нг/мл соответственно; р < 0,05). Имело место повышение концентрации С4 в подгруппе
1.2 в сравнении с этим показателем в подгруппе 1.3 - 53,4±2,4 и 40,5±2,6 нг/мл соответственно (р < 0,05). Отметили снижение С1-ингибитора в подгруппе 1.1 (110,2±19,1 нг/мл ) в сравнении с таковым в группе контроля (214,4±31,2 нг/мл) и подгруппах
1.2 (241,2±39,3 нг/мл) и 1.3 (235,3±42,2 нг/мл) (р < 0,05). Содержание фактора Н в основной группе превышало контрольное более чем в 5 раз. В контрольной группе - 30,6±3,9 нг/мл, в подгруппах основной группы достоверной разницы не выявили (подгруппа 1.1 - 166,5±19,3 нг/мл, подгруппа 1.2 - 190,3±21,3 нг/мл, подгруппа 1.3 - 177,3±24,1 нг/мл; р < 0,05) (табл. 1).
При исследовании активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов периферической крови выявили снижение всех показателей в основной группе по сравнению с таковым в контрольной (р < 0,05). ФИ в контроле составил 50,5±4,2%, в подгруппе 1.1 - 23,2±0,41%, подгруппе 1.2 -25,9±0,9%, подгруппе 1.3 - 28,7±0,6%. ФЧ в контрольной группе - 5,62±0,29, подгруппе 1.1 - 3,87±0,13, подгруппе 1.2- 3,88±0,21, подгруппе 1.3 - 3,78±0,14. ИАФ в контрольной группе - 2,9±0,7, подгруппе 1.1 - 1,02±0,03, подгруппе
1.2 - 1,11±0,03, подгруппе 1.3 - 1,15±0,0б (табл. 2).
При определении активности кислородзависимых систем нейтрофилов периферической крови имело место достоверное повышение уровня лактоферрина в основной группе по сравнению с таковым в контроле (789,7±87,1нг/мг), его максимальное значение отметили в подгруппе 1.1 (1518,3±244,2 нг/мг; р < 0,05); в подгруппе 1.2 - 1166,3±118,1 нг/мг, в подгруппе 1.3 - 905±91,6 нг/мг Параметры НСТ-сп. в подгруппе 1.1 (13,5±1,09%) ниже, чем в подгруппе 1.2 (19,3±2,1%), подгруппе 1.3 (21,6±1,44%) и контроле (23,3±1,7%). Показатели НСТ-ст достоверной разницы не представляли: в контрольной группе - 28,2±2,3%, подгруппе 1.1 - 26,3±1,58%, подгруппе 1.2 - 27,4±1,91%, подгруппе 1.3 -29,1±2,66% (р > 0,05). ФРН достоверно повышался в подгруппах 1.1 (9,6±1,05%) и 1.2 (8,8±0,58%) в сравнении с таковым в контроле (5,8±0,14%) и подгруппе 1.3 (5,1±0,3%), где оказался минимальным (р < 0,05) (табл. 3).
Выводы
1. Показатели компонентов комплемента беременных с неосложненным пиелонефритом и нормально протекающей беременностью имеют достоверные отличия. Максимальное содержание С3-, С4-компонентов комплемента установили в группе с гестационным пиелонефритом, впервые выявленным во время беременности. Противоположны изменения концентрации С1-игибитора - в группе с гестационным пиелонефритом она снижена.
2. Показатели активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов периферической крови у беременных с неосложненным пиелонефритом снижены по сравнению с таковыми у женщин с нормально протекающей беременностью. Изменения изучаемых параметров фагоцитоза наиболее выражены у беременных с впервые выявленным пиелонефритом.
3. Выявили тенденцию к увеличению активности кисло-родзависимых систем нейтрофилов у пациенток с пиелонефритом. Наиболее выражены изменения содержания лактофер-рина и ФРН у беременных с гестационным пиелонефритом.
4. Изменения показателей иммунитета более выражены у беременных с гестационным пиелонефритом, впервые выявленным во время беременности, чем у беременных, страдающих хроническим пиелонефритом, обострившимся во время беременности. Диагностическую ценность в определении клинического варианта пиелонефрита имеют следующие параметры: содержание С3-компонента комплемента, С1-ингибитора, лактоферрина и ФРН.
ЛИТЕРАТУРА
1. Иремашвили В.В. Инфекции мочевыводящих путей: современный взгляд на проблему. Русский медицинский журнал. 2007; 15 (29): 2231-6.
2. Сафронова Л.А. Пиелонефрит и беременность. Русский медицинский журнал. 2000; 8 (18):778—81.
3. Петров С.В., Серегин С.П., Кузьмин А.А., Кузьмина М.Н. Исследование цитокинового статуса при лечении серозного пиелонефрита во время беременности для систем принятия решений. Известия Юго-Западного государственного университета. 2012; 4 [2 (43)]: 56-60.
4. Авдошин В.П., Морозов С.Г., Соболев В.А. Оценка эффективности лечения острого гестационного пиелонефрита (с использованием магнитолазерной терапии). Акушерство и гинекология. 2005; (3): 12-3.
5. Бабаев В.А., Мазурская Н.М., Никольская И.Г., Тареева Т.Г. Показатели центральной гемодинамики и сократительной функции миокарда в процессе родов у пациенток с хроническим вторичным пиелонефритом. Российский вестник акушера-гинеколога. 2003. (3): 15-9.
6. Бабина М.Г. Особенности течения беременности, родов, состояния новорожденных у женщин с хроническим пиелонефритом: Дисс. М.; 2003.
7. Никольская И.Г, Новикова С.В., Микаелян А.В., Чернявская Л.В. Беременность у пациенток с хроническим пиелонефритом: особенности цитокинового профиля. В кн.: Материалы 2-го регионального научного форума «Мать и дитя». Сочи; 2008: 63.
8. Макаров О.В., Озолиня Л.А., Сумеди Т.Н. Изменения показателей иммунитета у пациенток с невынашиванием беременности инфекционного генеза в первом триместре. Российский вестник акушера-гинеколога. 2008; 8 (6): 28-32.
REFERENCES
1. Iremashvili V. VInfections ofurinary ways: modern view on a problem; Russkiy meditsinskiy zhurnal. 2007; 15 (29): 2231-6 (in Russian).
2. Safronova L.A. Pyelonephritis and pregnancy; Russkiy meditsinskiy zhurnal. 2000; 8 (18): 778-81 (in Russian).
3. Petrov S. V, Seryogin S. P., Kuzmin A.A. Kuzmin M. N. Research of the tsitokinovy status at treatment of serous pyelonephritis during pregnancy for decision-making systems. Izvestiya Yugo-Zapadnogo gosudarstvennogo universiteta. 2012; 4 [2 (43)]: 56-60 (in Russian).
4. Avdoshin V.P., Morozov S.G., Sobolev VA. Assessment of efficiency of treatment of sharp gestational pyelonephritis (with use of magnetolaser therapy). Akusherstvo i ginekologiya. 2005; (3): 12-3 (in Russian).
5. Babayev V.A. Mazursky H.M., Nikolsky I.G. Tareeva T.G. Indicators of the central haemo dynamics and sokratitelny function of a myocardium in the course of childbirth at patients with chronic secondary pyelonephritis. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekolo-ga. 2003; 3 : 15-9 (in Russian).
6. Babina M. G. Features of a course ofpregnancy, childbirth, conditions of newborns at women with chronic pyelonephritis: Diss. Moscow; 2003 (in Russian).
7. Nikolsky I.G. Novikova S. V, Mikayelyan A.V Chernyavsky L.V Pregnancy at patients with chronic pyelonephritis: features of a tsitokinovy profile. In: ials of the 2nd regional scientific forum “Mother and child”: Sochi;2008:63 (in Russian).
8. Makarov О. V, Ozolinya L.A., Sumedy T.N. Changes of indicators of immunity at patients with a nevynashivaniye of pregnancy of infectious genesis in the first trimester. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa. 2008; 8 (6): 28-32 (in Russian).
9. Condron C., Toomey D., Casey R.G., Shaffii M., Creagh T., Bouchier-Hayes D. Neutrophil bactericidal function is defective in patients with recurrent urinary tract infections. Urol. Res. 2003; 31(5): 329-34.
10. Delzell J.E.Jr., Lefevre M.L. Urinary tract infections during pregnancy. Am. Fam. Physician. 2000; 61: 713-21.
11. Suman E., Gopalkrishna Bhat K., Hegde B.M. Bacterial adherence and immune response in recurrent urinary tract infection. Int. J. Gynaecol. Obstetr. 2001; 75; (3): 263-8.
12. Shea K. Hilburger E. Baroco P. oldfield E. Successful treatment of vancomycin-resistant enterococcus faecium pyelonephritis with dap-tomycin during pregnancy. Ann. Pharmacother 2008; 18: 211-8.
Поступила 27.05.13 Received 27.05.13
- 79 -
