CC BY
19
Medical Immunology (Russia)/ Медицинская иммунология СООбШ,@НЫЯ Meditsinskaya Immunologiya
2018, Т. 20, № 5, стр. 739-746 . . 2018, Vol. 20, No 5,pp. 739-746
© 2018, СПбРО РААКИ ShOVt COmmUniCtttlOnS © 2018, SPb RAACI
АНАЛИЗ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ ХЕМОКИНОВ, ИХ РЕЦЕПТОРОВ, ГЕНОВ БЕЛКОВ ОСТРОЙ ФАЗЫ ВОСПАЛЕНИЯ И ГЕНА CD4 ПРИ ФОРМИРОВАНИИ ОЖИРЕНИЯ У ЖЕНЩИН
Кочетова О.В., Ахмадишина Л.З., Корытина Г.Ф., Викторова Т.В.
ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук», г. Уфа, Республика Башкортостан, Россия
Резюме. В настоящей работе была исследована частота генотипов и аллелей генов хемокинов (СХ^12 ге1801157, С^2 ге1024611), рецепторов хемокинов (ССЯ5ёсШ, СХ3СЯ1 ге3732378), гена белков острой фазы воспаления БАА ге1136743 и гена CD14 ге2569190 у женщин-татарок из Республики Башкортостан, страдающих ожирением и избыточной массой тела.
Группу пациенток составили неродственные между собой женщины с ожирением ИМТ > 30 кг/м2 (п = 225), женщины с избыточной массой тела ИМТ 25,0-29,9 кг/м2 (п = 184) и женщины контрольной группы (п = 327) ИМТ < 25,0 кг/м2. Генотипирование выполнено методом ПЦР-ПДРФ анализа. Группы пациенток и контроля отличались по таким показателям, как масса тела (р = 0,00001), уровень индекса массы тела (р = 0,001) и уровень глюкозы натощак (р = 0,0001).
При проведении исследования была выявлена ассоциация с ожирением генотипов AG-AA ф = 0,007) и аллеля А (р = 0,003) полиморфного локуса ге3732378 гена СХСЯ1 и генотипа ТТф = 0,027) и аллели Т (р = 0,021) полиморфного локуса ге1136743 гена БАА. Показано, что генотип АЛ полиморфного локуса ге3732378 гена СХ3СЯ1 ассоциирован с повышенной массой тела (р = 0,002) и повышенным уровнем ИМТ (р = 0,018); генотип GG полиморфного локуса ге1024611 гена С^2 ассоциирован с повышенным уровнем глюкозы натощак (р = 0,001).
На основе клинико-генетических данных и с использованием логистической регрессии выявлены статистически значимые различия, позволяющие прогнозировать развитие ожирения у женщин-татарок.
Ключевые слова: ожирение, генетические маркеры, хемокины, рецепторы хемокинов, воспаление
Адрес для переписки:
Кочетова Ольга Владимировна
ФГБУН«Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук» 450054, Россия, Республика Башкортостан, г. Уфа, пр. Октября, 71. Тел.: 8(917) 428-12-02. E-mail: Olga_MK78@mail.ru
Образец цитирования:
О.В. Кочетова, Л.З. Ахмадишина, Г.Ф. Корытина, Т.В. Викторова «Анализ полиморфных вариантов генов хемокинов, их рецепторов, генов белков острой фазы воспаления и гена CD4 при формировании ожирения у женщин»//Медицинская иммунология, 2018. Т. 20, № 5. С. 739-746. doi: 10.15789/1563-0625-2018-5-739-746 © Кочетова О.В. и соавт., 2018
Address for correspondence:
Kochetova Olga V.
Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center 450054, Russian Federation, Bashkortostan Republic, Ufa, October Prospect, 71. Phone: 7 (917) 428-12-02. E-mail: Olga_MK78@mail.ru
For citation:
O.V. Kochetova, L.Z. Akhmadishina, G.F. Korytina, T.V. Victorova "Gene polymorphism analysis of chemokines, chemokine receptors, acute phase proteins, and CD14 in female obesity development ", Medical Immunology (Russia)/ Meditsinskaya Immunologiya, 2018, Vol. 20, no. 5,pp. 739-746. doi: 10.15789/1563-0625-2018-5-739-746 DOI: 10.15789/1563-0625-2018-5-739-746
GENE POLYMORPHISM ANALYSIS OF CHEMOKINES, CHEMOKINE RECEPTORS, ACUTE PHASE PROTEINS, AND CD14 IN FEMALE OBESITY DEVELOPMENT
Kochetova O.V., Akhmadishina L.Z., Korytina G.F., Victorova T.V.
Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center, Ufa, Bashkortostan Republic, Russian Federation
Abstract. In the present study, we have investigated frequency of genotypes and functional alleles of genes encoding chemokines (CXCL12 rs1801157, CCL2 rs1024611), chemokine receptors (CCR5 del32, CX3CR1 rs3732378), acute phase proteins SAA rs1136743, and CD14 rs2569190 polymorphisms among Tatar obese or overweight women from the Republic of Bashkortostan.
The group of patients comprised unrelated women with obesity (BMI > 30 kg/m2, n = 225), females with overweight (BMI 25.0-29.9 kg/m2, n = 184), and control group of women (n = 327) BMI < 25.0 kg/m2. Genotyping was performed by PCR-RFLP analysis. Patients and controls differed in such parameters as body weight (p = 0.00001), BMI level (p = 0.001) and fasting glucose level (p = 0.0001).
An association was revealed between obesity and AG-AA genotypes (p = 0.007) and A allele (p = 0.003) of polymorphic locus rs3732378 of CXCR1 gene, as well as TT genotype (p = 0.027) and T allele (p = 0.021) of polymorphic locus rs1136743 of SAA gene. It has been shown that the AA genotype of polymorphic locus rs3732378 of the CX3CR1 gene is associated with increased body weight (p = 0.002) and elevated BMI (p = 0.018); the GG genotype of polymorphic locus rs1024611 of the CCL2 gene is associated with elevated fasting glucose level (p = 0.001).
As based on clinical and genetic data and using logistic regression, some statistically significant differences were revealed, which allow to predict development of obesity in Tatar women.
Keywords: obesity, genetic markers, chemokines, chemokine receptors, inflammation
Авторы декларируют отсутствие конфликта интересов, связанных с рукописью.
Работа получила частичную финансовую поддержку РГНФ и РФФИ р_Поволжье и программу поддержки биоресурсных коллекций ФАНО.
Введение
Многочисленные исследования последних лет показали значительную роль хронического низкоинтенсивного воспаления жировой ткани в развитие ожирения. Воспаление жировой ткани (ВЖТ) принимает участие в формировании избыточной массы тела, сахарного диабета 2 типа (СД2), метаболического синдрома (МС) и других осложнений. Жировая ткань (ЖТ) секрети-рует молекулы, регулирующие широкий спектр метаболических и иммунных процессов [1]. Питательные вещества, поступающие в большом количестве, запасаются в жировой ткани, это обуславливает увеличение объема клеток адипоци-тов и развитию окислительного стресса, приводящего к воспалению. Непосредственно в жировой ткани наблюдаются реакции, присущие воспалению: инфильтрация нейтрофилами, лимфоцита-
ми, макрофагами, секреция хемокинов и молекул адгезии, преобразование моноцитов в макрофаги. Так поддерживается высокий воспалительный фон в жировой ткани и в организме в целом. Наибольшее значение в этом случае придается хемокину МCР-1 или CCL2. Рядом авторов было установлено повышение уровня CCL2 у больных сахарным диабетом 2 типа и выявлена роль полиморфных вариантов гена CCL2 в механизмах инсулиновой резистентности [4]. У мышей с тар-гентной делецией гена CCL2 или его рецептора наблюдается сниженное количество макрофагов в ЖТ, тогда как повышенная экспрессия гена CCL2 приводит к повышению макрофагов в ЖТ. Доказано, что выраженность этого воспаления строго коррелирует со степенью ожирения. Позже было показано, что в жировой ткани продуцируется большое число различных хемокинов CCL2, CCL3, CCL5, CCL7, CCL8, CCL11, а также происходит активация рецепторов хемокинов CCR1, CCR2, CCR3, CCR5 [1].
Известно, что некоторые нуклеотидные полиморфизмы могут увеличивать или уменьшать транскрипционную активность гена. Выявление
данных о распределении полиморфных вариантов генов, продукты которых принимают участие в патогенезе низкоинтенсивного хронического воспаления, является актуальным. Имеющиеся данные о роли генов системы воспаления при ожирении зачастую противоречивы. Данный момент обусловлен, прежде всего, этническими различиями испытуемых, что и обуславливает актуальность и необходимость данного исследования.
Целью исследования явился анализ вклада полиморфных вариантов генов хемокинов (С^2, СХ^1), рецепторов хемокинов (ССЯ5, СХ3СЯ1), гена белков острой фазы воспаления (5'АА1) и гена CD4 при формировании ожирения у женщин татарской этнической принадлежности, проживающих на территории Республики Башкортостан.
Материалы и методы
Группу пациенток татарской этнической принадлежности составили неродственные между собой женщины с ожирением, индекс массы тела (ИМТ) более 30 кг/м2 ^ = 225); женщины с избыточной массой тела, ИМТ которых варьировал от 25,0 до 29,9 кг/м2 ^ = 184). Контрольная выборка включала 327 женщин-татарок. Контрольная группа была подобрана в соответствии с уровнем ИМТ (менее 25 кг/м2) и средним возрастом, сопоставимым со средним возрастом пациенток. Проведенное исследование одобрено Комитетом по этике ИБГ УНЦ РАН, протокол № 8 от 14.03.2012 г. От всех участников было получено информированное добровольное согласие на использование биологического материала в планируемых исследованиях.
Клиническая характеристика испытуемых представлена в таблице 1. Сравнение клинических характеристик показало статистически значимые различия при сравнении групп пациенток и контроля по параметрам массы тела (р = 0,00001), уровня индекса массы тела (ИМТ) (р = 0,001) и уровня глюкозы натощак (р = 0,0001). Также различия были получены при сравнении женщин с избыточной массой тела и контрольной группой по массе тела (р = 0,00001), ИМТ (р = 0,001) и уровня глюкозы натощак (р = 0,008).
Отбор генов системы воспаления, включенных в анализ, основывался на анализе литературных данных результатов ранее проведенных исследований по ожирению и СД 2 типа. Образцы ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови с использованием фенольно-хлороформной экстракции. Генотипирование полиморфного локу-
са гена ССЯ5 del32 проводили с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР). Ампли-фицировали фрагмент размером 276 п.н., несущий потенциальную делецию в 32 парах нуклео-тидов. Генотипирование полиморфных маркеров генов СХа12 (^1801157), CD14 (^2569190), С^2 (^1024611), СХ3СЯ1 (^3732378), 5АА1 (^1136743) анализировали при помощи ПЦР с последующим расщеплением продукта соответствующими рестриктазами. Условия проведения ПЦР, последовательности праймеров описаны в таблице 2.
Ассоциация между полиморфными вариантами исследуемых генов и ожирением оценивалась с использованием критерия х2 Пирсона. Сравнивались попарно группы женщин с ожирением и контроль, женщины с избыточной массой тела и женщины контрольной группы. Равновесие Харди—Вайнберга рассчитывали в программе [8]. Регрессионный анализ применяли для оценки взаимодействия полиморфного локуса и клинических данных с использованием пакета программ SNPStats [12].
Мы получили данные о распределении частот аллелей и генотипов шести однонуклеотид-ных полиморфных маркеров генов: ССЯ5 ^е132), СХа12 (^1801157), CD14 (^2569190), С^2 (^1024611), СХ3СЯ1 (ге3732378), 5АА (^1136743) у женщин с ожирением и избыточной массой тела и контрольной группой. В таблице 3 представлены данные о распределении частот аллелей и генотипов исследованных полиморфных маркеров генов, показавших ассоциацию с ожирением, значения х2, уровень значимости (р). Отклонения от равновесия Харди—Вайнберга у женщин контрольной группы не выявлено (табл. 3).
Частота распределения генотипов и аллелей исследованных генов у пациенток и сравнительный анализ распределения частот генотипов показали, что у женщин с ожирением наблюдается повышение частоты генотипов AG и АА полиморфного локуса ге3732378 гена СХСЯ1 по сравнению с контрольной группой (р = 0,007, OR = 1,7 С1 95% 1,17-2,38). Ассоциация подтвердилась и в случае сравнения частоты встречаемости аллелей, было выявлено снижение частоты аллеля G и увеличение аллеля А в группе женщин с ожирением (р = 0,003, OR = 1,6 С1 95% 1,182,18). Анализ распределения генотипов и аллелей локуса ге3732378 гена СХСЯ1 в группе женщин с избыточной массой тела также выявил ассоциацию генотипов AG и АА и аллеля А с ожирением (р = 0,001, OR = 1,0 С1 95% 0,68-1,47 и р = 0,002, 1,68 С1 95% 1,22-2,31 соответственно).
ТАБЛИЦА 1. АНАЛИЗ КЛИНИЧЕСКИХ И МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ИСПЫТУЕМЫХ
TABLE 1. CLINICAL AND METABOLIC PARAMETERS OF SUBJECTS UNDER STUDY
Показатель Parameters Ожирение Obesity (n = 225) Избыточная масса тела Overweight (n = 184) Контроль Control group (n = 327) p* p**
Возраст, г Age, year 43,1±2,6 39,8±2,4 39,1±2,9 0,47 0,81
Рост, см Height, cm 163,0±5,6 161,7±5,4 162,8±5,6 0,62 0,40
Масса тела, кг Body mass, kg 90,2±3,7 77,6±3,4 56,9±3,4 0,00001 0,00001
Индекс массы тела, кг/м2 Body mass index, kg/m2 40,1±1,7 26,6±1,5 21,2±1,8 0,001 0,001
Продолжительность заболевания, г Disease duration, year 20,5±2,1 - - - -
Уровень глюкозы натощак, ммоль/л Fasting glucose, mmol/L 5,9±1,3 5,1±1,9 4,1±0,8 0,0001 0,008
Примечание. /2, р* - /2 и уровень значимости при сравнении контроля с группой ожирения; /2, р** - /2 и уровень значимости при сравнении контроля с группой избыточной массы тела.
Note. x2, р*, comparison between the obese women and control group; x2, р**, comparison between the overweight women and control control.
ТАБЛИЦА 2. ПОЛИМОРФНЫЕ МАРКЕРЫ, ИХ ЛОКАЛИЗАЦИЯ, НУКЛЕОТИДНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ПРАЙМЕРОВ, РЕСТРИКТАЗЫ И АЛЛЕЛИ
TABLE 2. POLYMORPHIC MARKERS, THEIR LOCATION, PRIMERS SEQUENCES, RESTRICTION ENZYMES AND ALLELES
Ген, хромосомная локализация Gene, chromosomal location Полиморфизм, локализация Polymorphism, location npaMMepbi, pecTpuKTa3a Primers, restriction enzyme Аллель, размеры фрагментов, п.н. Allele, the sizes of fragments, b.p.
CCR5 3p21 32 I/D p.Ser185Ile rs333 F 5'-tgc cgc cca gtg gga ctt tg-3' R 5'-cgg cag gac cag ccc caa g-3' D 318 I 350
CXCL12 10q11 rs1801157 12197A>G 3'-конец 3'-flanking regions F 5'-ctg ggg gtg cca gga cca gt-3' R 5'-ccc tgc tgc cct ccc aga aga-3' MspI A-147 G-116 and 31
CD14 5q31 rs2569190 c.-260T>C F 5'-cag ttc cct cct ctg tga acc-3' R 5'-atc atc ctt ttc cca cac cca-3' HaelII A-249 G-108 and 141
CCL2 17q12 rs1024611 -2518A>G 5'-конец 5'-flanking regions F 5'-ctc acg cca gca ctg acc tcc-3' R 5'-agc cac aat cca gag aag gag acc-3' PvuII A-300 G-228 and 72
CX3CR1 3p21.3 rs3732378 T280M экзон2 exon 2 F 5'-gga ctg agc gcc cac aca gg-3' R 5'-agg ctg gcc ctc agt gtg act-3' BstNAI A-148 G-128 and 20
SAA1 11p15.1 rs1136743 A70V экзон 3 exon 3 F 5'-ccc ctc taa ggt gtt gtt gga-3' R 5'-ctc cac aag gag ctc gtc tc-3' BshNI T-289 C-183 and 106
ТАБЛИЦА 3. ЧАСТОТА РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕНОТИПОВ И АЛЛЕЛЕЙ ИССЛЕДОВАННЫХ ГЕНОВ У ПАЦИЕНТОК И КОНТРОЛЯ
TABLE 3. DISTRIBUTION OF GENOTYPES AND ALLELES OF THE STUDIED GENES IN PATIENTS AND CONTROL GROUP
Генотип/ аллель Genotype/ allele Ожирение Obesity (n = 225) Избыточная масса тела Overweight (n = 184) Контроль ИМТ Оontrol group (n = 327) X2, р* X2, р**
CCR5 del32
I/I D/I D/D 194 86.22 30 13.33 1 0.44 144 78.26 38 20.65 2 1.09 264 80.73 60 18.35 3 0.92 2,95 0,22 0,45 0,79
I D 418 92.89 32 7.11 326 88.59 42 11.41 588 89.91 66 10.09 2,57 0,109 0,306 0,58
CXCL12 rs1801157
G/G A/G A/A 113 50.22 103 45.78 9 4.00 97 52.72 81 44.02 6 3.26 163 49.85 146 44.65 18 5.50 0,66 0,72 1,46 0,48
G A 329 73.11 121 26.89 275 74.73 93 25.27 472 72.17 182 27.83 0,08 0,78 0,19 0,66
CD14 rs2569190
ООН 53 23.56 109 48.44 63 28.00 50 27.17 90 48.91 44 23.91 73 22.32 180 55.05 74 22.63 2,74 0,25 2,07 0,36
T О 215 47.78 235 52.22 190 51.63 178 48.37 326 49.85 328 50.15 0,38 0,54 0,23 0,63
CCL2 rs1024611
A/A A/G G/G 122 54.22 94 41.78 9 4.00 100 54.35 73 39.67 11 5.98 165 50.46 140 42.81 22 6.73 2,16 0,34 0,72 0,70
A G 338 75.11 112 24.89 273 74.18 95 25.82 470 71.87 184 28.13 1,27 0,26 0,53 0,47
CX3CR1 rs3732378
G/G A/G A/A 132 58.67 81 36.00 12 5.33 100 54.35 79 42.93 5 2.72 230 70.34 90 27.52 7 2.14 9,80, 0,007 13,28 0,001
G A 345 76.67 105 23.33 279 75.82 89 24.18 550 84.10 104 15.90 9,11 0,003 10,01 0,002
SM rs1136743
О/О T/О T/T 63 28.00 112 49.78 50 22.22 57 30.98 103 55.98 24 13.04 111 33.94 171 52.29 45 13.76 7,20 0,027 0,65 0,72
О T 238 52.89 212 47.11 217 58.97 151 41.03 393 60.09 261 39.91 0,357 0,021 0,08 0,77
Примечание. См. примечание к таблице 1.
Note. As for Table 1.
Анализ распределения частот генотипов и аллелей выявил тенденцию к увеличению частоты генотипов ТТ и СТ полиморфного локуса ге1136743 гена SAA1 в группе пациенток с ожирением по сравнению с контрольной группой (р = 0,033, OR = 1,41 С1 95% 0,97-2,05) (табл. 2). При сравнении аллелей было выявлено статистически значимое повышение частоты аллеля Т в группе пациенток, показатель OR составил 1,35 (С1 95% 1,06-1,72), р = 0,017.
Было проведено сравнение количественных клинических и антропометрических характеристик пациенток с ожирением в соответствии с генотипами полиморфных локусов исследованных генов. Статистически значимые различия были получены только в группе пациенток. В результате исследования была выявлена тенденция к увеличению массы тела у носителей генотипа АА полиморфного локуса ге1801157 гена СХ^12 (р = 11,66 (С1 95% 0,63-22,69), р = 0,056). Анализ полиморфного локуса ге3732378 гена СХ3СЯ1 выявил ассоциацию генотипа АА с повышенной массой тела (в = 19,27 (С1 95% 8,3930,16), р = 0,002), носители генотипа GG имели в среднем 75,73 кг массы тела, носители генотипа AG — 75,7 кг, а генотипа АА — 95 кг; также была выявлена ассоциация с уровнем ИМТ (в = 5,48 (С1 95% 1,67-9,28), р = 0,018), носители генотипа GG имели 34,35 кг/м2, носители генотипа AG — 28,87 кг/м2, индивиды с генотипом АА — 34,35 кг/м2.
Было установлено, что полиморфный маркер ге1024611 гена С^2 ассоциирован с уровнем глюкозы натощак. Носители генотипа АА (ге1024611 гена С^2) имели пониженный уровень глюкозы, который составил 5,18 ммоль/л по сравнению с 7,33 ммоль/л и 6,58 ммоль/л у носителей алелля G в гомозиготном и гетерозиготном состоянии соответственно (в = 0,67 [С1 95% 0,230,89], р = 0,001). Анализ количественных признаков и полиморфных вариантов генов ССЯ5, CD14, SAA статистически значимых различий не выявил.
В настоящий момент уже достаточно хорошо известна роль генов хемокинов и их рецепторов, а также других генов системы воспаления в развитии ожирения и СД 2 типа [1]. Учитывая наличие генетического разнообразия этнических групп, актуальным и необходимым является проведение репликативных исследований новых маркеров с риском развития ожирения. Проведенный анализ полиморфных вариантов генов системы воспаления у женщин с ожирением выявил статистически значимые различия по следующим генетическим маркерам: СХСЯ1
(ге3732378), SAA1 (^1136743), СХ^12 (^1801157), С^2 (ге1024611). Полученные результаты согласуются с исследованием других авторов. Выявленная нами ассоциация полиморфного локуса ге3732378 гена СХ3СЯ1 (рецептора фракталки-на) с риском развития ожирения у женщин-татарок соответствует результатам, полученным Sirois-Gagnon D. и соавт. [11]. Известно, что вариант Т280М, обусловленной заменой треонина на метионин в положении 280 2-го экзона, влияет на экспрессию гена СХ3СЯ1. Полиморфный вариант М гена СХСЯ1 (ге3732378) ассоциирован с ожирением, резистентностью к инсулину, СД2 и атеросклерозом [7, 11]. Сниженное количество фракталкина и его рецептора было обнаружено в сыворотке крови у больных с нервной анорек-сией. Повышенная экспрессия этих хемокинов была выявлена в адипоцитах лиц, страдающих ожирением [15]. Фракталкин CX3CL1 и его рецептор CX3CR1 рассматривают в качестве важных маркеров активации воспалительного процесса, связанного с хемотаксисом различных лейкоцитов в зону воспаления. Было показано, что система СХ3^1-СХ3СЯ1 модулирует адгезию моноцитов к адипоцитам [15]. И можно утверждать, что комплекс СХ3^1-СХ3СЯ1 представляет собой важное звено хемокинов, модулирующих адгезию моноцитов к адипоцитам и отвечающих за воспаление жировой ткани.
Ассоциация полиморфных вариантов локу-са ге1136743 гена SAA1 с ожирением также находит свое подтверждение, по данным других авторов [13]. SAA1 относят к основным белкам острой фазы воспаления. SAA1 также способствует миграции моноцитов и лимфоцитов, повышая уровень экспрессии хемокинов. Было обнаружено, что SAA1 ассоциируется с уровнем холестерина в крови. Известно, что повышенный уровень SAA1 вызывает амилоидоз и является фактором риска развития атеросклероза, а также определяет клинические осложнения СД2. Вместе с тем механизм, который может связывать генетический полиморфизм SAA1 с ожирением, пока неизвестен.
В отношении полиморфных вариантов локу-са ге1024611 гена С^2 получены противоречивые данные. В ряде исследований была выявлена протективная ассоциация полиморфного варианта G гена С^2 (ге1024611) с уровнем глюкозы натощак. Так, в работе Те1ег J. и соавт. [14] была установлена защитная роль аллеля G в развитии гестационного сахарного диабета. Simeoni Е. и соавт. [10] провели большое исследование среди европеоидов, включающее 3307 человек,
и выявили, что аллель G негативно коррелирует с уровнем CCL2 в плазме крови и распространенностью резистентности к инсулину и СД2. Вместе с тем в нашем исследовании протек-тивная ассоциация выявлена с аллелем A, что согласуется с данными других авторов, проводивших исследование, в польской и индийской популяциях [2, 5]. Показано, что полиморфизм промоторного региона g.2493A>G (rs1024611) влияет на экспрессию гена CCL2 [9]. По сравнению с аллелем A, присутствие аллеля G усиливает транскрипцию гена CCL2 и увеличивает продукцию белка CCL2 in vitro и in vivo. Лейкоциты индивидуумов с генотипами GG и AG производят значительно более высокие уровни CCL2, чем носители генотипаАА [2]. В работе Kim C.S. и со-авт. [6] было показано, что уровень циркулирующего CCL2 значительно повышен у пациентов с ожирением, так же как и уровень экспрессии
CCL2 в жировой ткани пациентов с ожирением значительно выше, чем у испытуемых с нормальной массой тела. CCL2 считается ответственным за накопление макрофагов в жировой ткани. Предыдущие исследования показали, что повышенный уровень в сыворотке крови CCL2 у людей коррелирует с маркерами метаболического синдрома, ожирением, резистентностью к инсулину, диабету, гипертонией и увеличением концентрации триацилглерола в сыворотке [3].
В заключение следует отметить, что результаты нашей работы подтверждают предположение о влиянии полиморфизма генов С^2, СХ^1, ССЯ5, СХ3СЯ1, ¿ЛЛ1, CD4 на процессы, играющие важную роль в патогенезе воспаления жировой ткани. Проведенное исследование еще раз подчеркивает важность молекулярно-гене-тических исследований ожирения в зависимости от популяционной структуры населения.
Список литературы / References
1. Шварц В. Жировая ткань как эндокринный орган // Проблемы эндокринологии, 2009. Т. 55, № 1. С. 38-43. [Schwartz V. Adipose tissue as an endocrine organ. Problemy endokrinologii = Problems of Endocrinology, 2009, Vol. 55, no. 1, pp. 38-43. (In Russ.)]
2. Dabrowska-Zamojcin E., Romanowski M., Dziedziejko V., Maciejewska-Karlowska A., Sawczuk M., Safranow K., Domanski L., Pawlik A. CCL2 gene polymorphism is associated with post-transplant diabetes mellitus. Int. Immunopharmacol., 2016, Vol. 32, pp. 62-65.
3. Dworacka M., Krzyzagorska E., Iskakova S., Bekmukhambetov Y., Urazayev O., Dworacki G. Increased circulating RANTES in type 2 diabetes. Eur. Cytokine Netw., 2014, Vol. 25, no. 3, pp. 46-51.
4. Jiang Z., Hennein L., Xu Y., Bao N., Coh P., Tao L. Elevated serum monocyte chemoattractant protein-1 levels and its genetic polymorphism is associated with diabetic retinopathy in Chinese patients with Type 2 diabetes. Diabet. Med., 2016, Vol. 33, no. 1, pp. 84-90.
5. Kaur S., Panicker S.R., James T., Sarma P.S., Thankappan K.R., Kartha C.C. Association of monocyte chemoattractant Protein-1-2518 polymorphism with metabolic syndrome in a South Indian cohort. Metab. Syndr. Relat. Disord., 2009, Vol. 7, no. 3, pp. 193-198.
6. Kim C.S., Park H.S., Kawada T., Kim J.H., Lim D., Hubbard N.E., Kwon B.S., Erickson K.L., Yu R. Circulating levels of MCP-1 and IL-8 are elevated in human obese subjects and associated with obesity-related parameters. Int. J. Obes. (Lond.), 2006, Vol. 30, pp. 1347-1355.
7. Moatti D., Faure S., Fumeron F., Amara Mel-W., Seknadji P., McDermott D.H., Debre P., Aumont M.C., Murphy P.M., de Prost D., Combadiere C. Polymorphism in the fractalkine receptor CX3CR1 as a genetic risk factor for coronary artery disease. Blood, 2001, Vol. 97, no. 7, pp. 1925-1928.
8. Rodriguez S., Gaunt T.R., Day I.N. Hardy-Weinberg equilibrium testing of biological ascertainment for Mendelian randomization studie. Am. J. Epidemiol., 2009, Vol. 169, no. 4, pp. 505-514.
9. Rovin B.H., Lu L., Saxena R. A novel polymorphism in the MCP-1 gene regulatory region that influences MCP-1 expression. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1999, Vol. 259, no. 2, pp. 344-348.
10. Simeoni E., Hoffmann M.M., Winkelmann B.R., Ruiz J., Fleury S., Boehm B.O., Marz W., Vassalli G. Association between the A-2518 G polymorphism in the monocyte chemoattractant protein-1 gene and insulin resistance and Type 2 diabetes mellitus. Diabetologia, 2004, Vol. 47, no. 9, pp. 1574-1580.
11. Sirois-Gagnon D., Chamberland A., Perron S., Brisson D., Gaudet D., Laprise C. Association of common polymorphisms in the fractalkine receptor (CX3CR1) with obesity. Obesity, 2011, Vol. 19, no. 1, pp. 222-227.
12. Sole X., Guino E., Valls J., Iniesta R., Moreno V. SNPStats: a web tool for the analysis of association studies. Bioinformatics, 2006, Vol. 22, no. 15, pp. 1928-1929.
13. Sun L., Ye R.D. Serum amyloid A1: Structure, function and gene polymorphism. Gene, 2016, Vol. 583, no. 1, pp. 48-57.
14. Teler J., Tarnowski M., Safranow K., Maciejewska A., Sawczuk M., Dziedziejko V., Sluczanowska-Glabowska S., Pawlik A. CCL2, CCL5, IL4 and IL15 gene polymorphisms in women with gestational diabetes mellitus. Horm. Metab. Res., 2017, Vol. 49, no. 1, pp 10-15.
15. Zhang S., Tang H., Gong C., Liu J., Chen J. Assessment of serum CX3CL1/fractalkine level in Han Chinese girls with anorexia nervosa and its correlation with nutritional status: a preliminary cross-sectional study. J. Investig. Med., 2016, Vol. 65, no. 2, pp. 333-337.
Авторы:
Кочетова О.В. — к.б.н., научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук», г. Уфа, Республика Башкортостан, Россия
Ахмадишина Л.З. — к.б.н., научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук», г. Уфа, Республика Башкортостан, Россия
Корытина Г.Ф. — д.б.н., старший научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук», г. Уфа, Республика Башкортостан, Россия Викторова Т.В. — д.м.н., главный научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук», г. Уфа, Республика Башкортостан, Россия
Поступила 19.10.2017 Принята к печати 23.10.2017
Authors:
Kochetova O.V., PhD (Biology), Research Associate, Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center, Ufa, Bashkortostan Republic, Russian Federation
Akhmadishina L.Z., PhD (Biology), Research Associate, Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center, Ufa, Bashkortostan Republic, Russian Federation
Korytina G.F., PhD, MD (Biology), Senior Research Associate, Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center, Ufa, Bashkortostan Republic, Russian Federation
Victorova T.V., PhD, MD (Medicine), Main Research Associate, Institute of Biochemistry and Genetics, Ufa Science Center, Ufa, Bashkortostan Republic, Russian Federation
Received 19.10.2017 Accepted 23.10.2017
