CC BY
66
№ 5 (71), 2010 г.
Аграрный вестник Урала
67
Ветеринария
АМИНОТРАНСФЕРАЗЫ И ФОСФАТАЗЫ ПРЯМОЙ КИШКИ У РАЗНОВОЗРАСТНЫХ ПОРОСЯТ
М.Г. ТЕРЕНТЬЕВА,
кандидат биологических наук, ассистент кафедры биологии и экологии, Чувашская ГСХА
Ключевые слова: поросята, прямая кишка, ферменты, постнатальный онтогенез.
Толстая кишка млекопитающих выполняет множество функций, такие как всасывание воды, утилизация витаминов, синтезируемых кишечной микрофлорой, поддержание водного и электролитного баланса, иммунобиологическая защита организма от патогенной микрофлоры, формирование каловых масс и т.д. [2, 3, 4]. Несмотря на многочисленные работы, посвящённые изучению морфофункциональных параметров толстой кишки, исследованию внутриклеточных ферментов уделяется мало внимания и в основном они проводятся на лабораторных животных [1, 3]. С целью выяснения характера возрастных изменений уровня ферментов в тканях толстой кишки нами проведено определение активности аминотран-сфераз и фосфатаз в тканях прямой кишки у поросят.
Методика исследований
Работа выполнена на поросятах крупной белой породы в возрасте 1, 10, 21, 30, 60, 120 суток, выращенных в условиях свинофермы «Студгоро-док» Чувашской государственной сельскохозяйственной академии. В гомогенатах тканей проксимального и дистального участков прямой кишки определена активность аланинаминот-рансферазы (АлАТ), аспартатаминот-рансферазы (АсАТ), щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатазы.
Активность ферментов АсАТ и АлАТ выявлена по методу Райтмана и Френкеля, КФ и ЩФ - по методу Бес-сея-Лоури-Брока. При определении активности ферментов использовали набор реактивов ООО «Витал Девелопмент Корпорэйшн» (Санкт-Петербург). Ферментативную активность выражали в мкмолях продуктов гидролиза, образующихся за 1 час в расчёте на г массы ткани. Полученные данные обрабатывали статистически с использованием ^критерия Стьюдента.
Результаты исследований
Полученные данные представлены в таблице. Поросята рождаются с неодинаковой активностью АлАТ (мкмоль/ гЧч) в тканях двух исследуемых участков прямой кишки. В проксимальном участке она составляет 22,06±2,33, в дистальном - меньше на 34,6% (р<0,05).
Характер возрастных изменений активности фермента в разных участках прямой кишки в течение первого месяца жизни поросят также неодинаковый. С первых по десятые сутки жизни в про-
ксимальном участке она увеличивается до 39,31 ±3,87, что на 78,2% выше, чем у односуточных (р<0,01), а в дистальном - возрастает лишь до 16,50±1,68, на 14,4%, и такое изменение недостоверно (р>0,05). В течение последующих одиннадцати суток в проксимальном участке кишки происходит снижение уровня активности АлАТ до 21,12±2,38, что на 46,3% ниже, чем у десятисуточных (р<0,01), а в дистальном в этот промежуток жизни поросят, наоборот, выявляется её увеличение до 34,03±2,85, в 2,1 раза (р<0,001). В проксимальном участке повторное увеличение активности фермента обнаруживается к месячному возрасту, до 33,31±3,05, что на 57,7% выше, чем у двадцатиодносуточных (р<0,05), а в дистальном участке в этот промежуток жизни она сохраняется примерно на таком же уровне, уменьшается лишь на 15,7% (р>0,05). Через месяц в обоих участках прямой кишки активность АлАТ падает: в проксимальном -до 15,39±1,83, что на 53,8% ниже, чем у месячных (р<0,001), и в дистальном -до 11,48±0,91, на 60,0% (р<0,001). С двухмесячного возраста изменение активности АлАТ в обоих участках прямой кишки недостоверное.
У новорожденных поросят уровень активности АсАТ (мкмоль/гЧч) в тканях обоих участков прямой кишки не имеет существенных различий и составляет соответственно 17,40±1,85 и 13,39±1,46. В последующий месяц жизни поросят характер возрастных изменений активности АсАТ в проксимальном и дистальном участках разный. В первые три недели жизни поросят в проксимальном участке прямой кишки активность фермента колеблется примерно на одинаковом уровне. Она значительно возрастает к месячному возрасту и достигает 58,82±4,76, что в 2,7 раза выше, чем у двадцатиодносуточных (р<0,001). В дистальном участке первичное повышение активности АсАТ определяется к десятисуточному возрасту, до 27,31 ±2,47, что в 2,0 раза выше, чем у односуточных (р<0,01). В отличие от проксимального участка здесь к двадцатиодносуточному возрасту она падает до 14,34±1,24, что на 47,5% ниже, чем у десятисуточных (р<0,01). В последующие девять суток жизни, к месячному возрасту, так же, как и в проксимальном участке, активность АсАТ значительно возрастает, до 60,64±5,21, что в 4,2 раза выше, чем у двадцатиодносуточных
428003, Республика Чувашия,
г. Чебоксары,
ул. Карла Маркса, 29;
тел. 8-9278659031;
e-mail: [email protected]
(р<0,001). В последующие возрастные сроки поросят характер возрастных изменений активности фермента в обоих участках прямой кишки одинаков: с возрастом она постепенно падает. Так, в проксимальном участке к двухмесячному возрасту она уменьшается до 27,10±2,15, что на 53,9% меньше, чем у месячных (р<0,001), и в дистальном -до 28,67±2,84, на 52,7% (р<0,001). К четырёхмесячному возрасту продолжает уменьшаться и достигает в проксимальном участке до 16,08±0,91, что на 40,7% ниже, чем у двухмесячных (р<0,01), и в дистальном - до 16,75±1,34, на 41,6% (р<0,01). Достоверные возрастные изменения активности АсАТ в прямой кишке обнаруживаются в течение всего исследуемого постнатально-го периода поросят.
В первые десять суток жизни поросят уровень активности ЩФ (мкмоль/гЧч) в тканях проксимального и дистального участка прямой кишки изменяется по-разному. У односуточных поросят в проксимальном участке она высокая и составляет 32,72±3,02, а в дистальном -на 41,0% ниже проксимального (р<0,01). В течение первых десяти суток жизни поросят в проксимальном участке прямой кишки активность ЩФ резко снижается, до 6,65±0,68, что на 79,7% ниже, чем у односуточных (р<0,001). В дистальном участке, наоборот, возрастное изменение активности фермента небольшое, лишь на 9,8% выше, и оно недостоверное (р>0,05). С возрастом, к двадцатиодносуточному возрасту, в обоих участках прямой кишки происходит повышение активности ЩФ: в проксимальном - до 34,02±2,69, что в 5,4 раза выше, чем у десятисуточных (р<0,001), и в дистальном - до 55,59±5,37, в 2,6 раза (р<0,001). К тридцатисуточному возрасту изменение активности фермента в обоих участках прямой кишки незначительное и недостоверное. Через месяц, к двухмесячному возрасту, активность ЩФ в проксимальном участке возрастает до 43,54±3,13, что на 26,7% выше, чем у месячных (р<0,05), и приблизительно на таком уровне сохраняется у четырёхмесячных. В дистальном
Piglets, rectum, enzymes, postnatal ontogeny.
68
Аграрный вестник Урала
№ 5 (71), 2010 г.
Ветеринария
участке, наоборот, она существенно уменьшается, до 32,31 ±2,94, что на 39,5% ниже, чем у месячных (р<0,01), и так же, как и в проксимальном, с двухмесячного возраста существенно не изменяется. Необходимо отметить, что стабильный уровень активности ЩФ на разных участках прямой кишки разный: в проксимальном участке он выше, чем в дистальном, в 1,5 раза.
Активность КФ (мкмоль/гЧч) у односуточных поросят в обоих исследуемых участках прямой кишки имеет примерно одинаковый уровень: в проксимальном участке - 10,85± 1,41, в дистальном -8,86±0,84. В последующие возрастные сроки жизни поросят характер возрастных изменений активности КФ в обоих участках прямой кишки одинаковый. В течение первых десяти суток активность фермента в проксимальном и дистальном участках снижается, соответственно, до 4,03±0,28, на 62,9% (р<0,01), и до 3,11±0,16, на 64,9% (р<0,001). Через одиннадцать суток жизни, к двадцатиодносуточному возрасту, активность КФ значительно возрастает, соответственно, до 12,97±1,56, в 3,2 раза
(р<0,001), и до 11,24±1,68, в 3,6 раза (р<0,01). Такой же относительно высокий и примерно равный уровень активности фермента определяется и у месячных поросят. К двухмесячному возрасту активность фермента значительно падает, соответственно, до 3,69±0,24, на 72,4% (р<0,001), и до 3,88±0,18, на 68,7% (р<0,01). С двухмесячного возраста активность КФ на обоих участках прямой кишки изменяется недостоверно.
Высокая интенсивность возрастных изменений активности АлАТ у поросят в проксимальном участке прямой кишки определяется в течение первых трёх недель жизни и с месячного по двухмесячный возраст, а в дистальном участке - с десятых по двадцать первые сутки жизни поросят. Активность АсАТ в обоих участках кишки наиболее интенсивно изменяется с двадцать первых по тридцатые сутки и с месячного по двухмесячный возраст. Активность щелочной фосфатазы наиболее интенсивно изменяется в проксимальном участке с первых по десятые и с десятых по двадцать первые сутки. В дис-
тальном участке высокие темпы изменений выявляются с десятых по двадцать первые и с тридцатых по шестидесятые сутки. С высокой интенсивностью активность кислой фосфатазы изменяется во всех участках прямой кишки с десятых по двадцать первые и с тридцатых по шестидесятые сутки жизни поросят.
Выводы
Выраженная интенсивность возрастных изменений активности АсАТ и АлАТ в обоих участках прямой кишки выявляется с десятисуточного по двухмесячный возраст, а активности ЩФ и КФ наиболее интенсивно изменяются в изучаемых участках в течение первых двух месяцев жизни поросят.
Выявленные темпы и характер возрастных изменений активности АсАТ, АлАТ, ЩФ и КФ отражают различие у растущих поросят скорости белкового и фосфорорганического обмена в разных участках прямой кишки в зависимости от возраста, состава корма и интенсивности гетерохимического развития толстого кишечника.
Повышение или уменьшение активности ферментов в отдельные промежутки жизни поросят в различных участках прямой кишки, по-видимому, свидетельствует об увеличении или снижении интенсивности структурнохимического развития кишки с ростом и развитием молодняка свиней.
Полученные нами сведения подтверждаются результатами работ других исследователей об участии ферментов в структурно-химическом развитии органов и систем органов в онтогенезе, в которых выявлена разнохарактерность становления ферментных систем [1, 2, 3, 4].
Таблица
Активность ферментов в тканях прямой кишки у разновозрастных чистопородных поросят
Название фермента Участок кишки Возраст, сут.
1 10 21 30 60 120
АлАТ, мкмоль/г-ч проксимальный 22,06±2,33 39,31±3,87** 21,12±2,38** 33,31±3,05* 15,39±1,83*** 13,93±1,37
дистальный 14,42±1,04 16,50±1,68 34,03±2,85*** 28,69±2,85 11,48±0,91 *** 11,86±0,97
АсАТ, мкмоль/г-ч проксимальный 17,40±1,85 16,91 ±1,68 21,91 ±2,23 58,82±4,76*** 27,10±2,15*** 16,08±0,91 **
дистальный 13,39±1,46 27,31±2,47** 14,34±1,24** 60,64±5,21*** 28,67±2,84*** 16,75±1,34**
Щелочная фосфатаза, мкмоль/г-ч проксимальный 32,72±3,02 6,65±0,68*** 34,02±2,69*** 34,37±2,29 43,54±3,13* 46,66±3,07
дистальный 19,32±1,84 21,22±2,54 55,59±5,37*** 53,44±4,12 32,31±2,94** 32,11 ±1,82
Кислая фосфатаза, мкмоль/г-ч проксимальный 10,85±1,41 4,03±0,28** 12,97±1,56*** 13,38±1,02 3,69±0,24*** 4,26±0,23
дистальный 8,86±0,84 3,11 ±0,16*** 11,24±1,68** 12,41 ±1,94 3,88±0,18** 4,52±0,24
* - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001 (по отношению к предыдущему возрасту).
Литература
1. Игнатьев Н. Г. Характер и степень возрастных изменений активности трансаминаз в толстом кишечнике у морских свинок // Актуальные проблемы сельскохозяйственного производства : м-лы Межрегион. науч.-практ. конф., посв. 70-летию ЧГСХА. Чебоксары, 2001. С. 266-272.
2. Коротько Г. Ф. Введение в физиологию желудочно-кишечного тракта. Ташкент, 1987. 221 с.
3. Тимофеева Н. М. [и др.]. Гидролазы толстой кишки при различных формах экспериментальной патологии у крыс // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. 2000. Т. 86. № 12. С. 1662-1668.
4. Уголев А. М. Теория адекватного питания и трофология. Л. : Наука, 1991. 317 с.
