УДК 615.322:582.998.2].011.5
АМИНОКИСЛОТНЫЙ И МИНЕРАЛЬНЫЙ СОСТАВ ТРАВЫ ПОСКОННИКА КОНОПЛЯНОГО
© 2007 г. А.И. Шевченко, А.М. Сампиев
With the help the aminoacid analyzer the qualitative and quantitative structure of amino acids of a grass Eupatorium cannabinum for the first time is investigated. The contents in her of nine amino acids is established, four of which are irreplaceable:, valin, lizin, leicin and treonin. By method of the issue spectral analysis in researched raw material it is revealed important for an organism 15 macro-and micro-cells: Cu, Zn, Sn, Mo, Sr, P, Mn, Ti, Fe, K, Na, Ca, Mg, Si, Al.
Аминокислоты, являясь строительными блоками пептидов и белков, выполняют ряд важных функций для организма человека. Минеральные элементы не только участвуют в различных биохимических процессах, стимулируют и нормализуют обмен веществ, но и являются своеобразными катализаторами биологических процессов в организме.
Ценным источником поступления аминокислот и минеральных веществ могут стать лекарственные растения и препараты растительного происхождения. Это связано прежде всего с тем, что эти вещества находятся в растениях в наиболее доступной и легкоусвояемой форме и поэтому имеют более высокую физиологическую активность по сравнению с синтетическими аналогами [1].
Лекарственное растительное сырье, помимо основных групп биологически активных соединений (БАС), содержит аминокислоты и минеральные вещества [2].
Цель работы - исследование аминокислотного и минерального состава травы посконника конопляного.
Методы исследования. Качественное обнаружение аминокислот проводили в водных извлечениях с помощью нингидриновой реакции и хроматографии в тонком слое сорбента. Для этого 5,0 г воздушно-сухого измельченного сырья заливали 50 мл воды очищенной и нагревали с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Извлечение фильтровали, сырье заливали снова 50 мл воды и операцию повторяли. Водные извлечения, полученные после трехкратной экстракции, объединяли, упарива-
ли под вакуумом до 25 мл и использовали для проведения качественных реакций и хроматографического анализа.
При качественном анализе смешивали равные объемы исследуемого извлечения и 0,1%-го свежеприготовленного раствора нингидрина и осторожно нагревали.
Хроматографический анализ проводили в тонком слое сорбента. 0,04-0,06 мл полученных извлечений наносили на подготовленные хроматографические пластинки «Силуфол» и хроматографировали в системах н-бутанол: уксусная кислота: вода (4:1:2) и пиридин: метанол: вода (4:80:20) параллельно с достоверными образцами аминокислот. Хроматограммы высушивали на воздухе, обрабатывали их 0,2%-м раствором нингидрина и нагревали в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение нескольких минут.
Для более детального изучения аминокислотного состава использовали аминокислотный анализатор «Аминохром II» (Венгрия), а также интегратор «DIGINT-L 80», стандартную калибровочную смесь аминокислот (Bio-Red, USA). Сырье исчерпывающе экстрагировали горячей водой. Извлечение фильтровали, упаривали досуха под вакуумом. Для определения свободных аминокислот сухой остаток растворяли в натриево-цитратном буфере (pH 2,2), объемы растворов доводили до 10 мл. Анализ аминокислот проводили в стандартных условиях, обычно используемых для белковых гидролизатов [3, 4].
Качественный состав и количественное содержание минеральных элементов определяли методом эмиссионного спектрального анализа. Образцы сырья измельчали, подвергали озолению в муфельной печи ЭКПС - 10 (Россия) при температуре 400 - 500 °С при доступе воздуха в течение 2 ч. Полученную золу после охлаждения взвешивали и анализировали на спектрографе ДФС-8-1 (Россия). Фотометрирование спектрограмм проводили с помощью атласа спектральных линий и спектров-стандартов с погрешностью не более 2 % в пересчете на золу [5].
Результаты исследования. Результаты качественного анализа аминокислот позволили установить наличие этой группы соединений в траве посконника. При тонкослойном хроматографическом анализе аминокислоты проявлялись в виде 9 красно-фиолетовых пятен. Посредством аминокислотного анализатора в траве посконника конопляного обнаружено, что из 9 аминокислот 4 являются незаменимыми: валин, лизин, лейцин и треонин. Результаты определения аминокислот представлены в табл. 1.
Содержание и состав аминокислот травы посконника конопляного, %
Таблица 2
Содержание минеральных элементов в траве посконника конопляного, %
Таблица 1
№ Наименование аминокислоты Брутто формула Содержание, % в пересчете на абсолютно сухое сырье
Связанные аминокислоты Свободные аминокислоты
1 Аспаргиновая кислота C4H7O4N 12,15 1,15
2 Треонин* Серин C4H9O3N c3h7o3n 4,78 2,76
3 Глицин c2h5o2n 2,13 0,43
4 Алании c3h7o2n 3,28 -
5 Валин* C5H11O2N 2,06 1,15
6 Лейцин* C6H13O2N 2,78 1,33
7 Лизин* C6H14O2N2 1,32 1,48
8 Гистидин C6H9O2N3 1,46 0,43
9 Аргинин C6H14O2N4 8,31 2,27
Сумма аминокислот 38,27 11
* - незаменимые аминокислоты
Как видно из данных табл. 1, в траве посконника содержится 8 свободных и 9 связанных аминокислот. Суммарное содержание свободных аминокислот в траве посконника составляет в среднем 11 %, что свидетельствует о том, что изученное растение может служить источником аминокислот.
Результаты определения минерального состава приведены в табл. 2.
Приведенные в табл. 2 данные свидетельствуют о том, что трава посконника богата макро- и микроэлементами, из которых 10 являются жизненно необходимыми, а 5 - вероятно необходимыми [6]. Установ-
№ Наименование химического элемента Содержание, % в пересчете на абсолютно сухое сырье
1 Медь 0,0006
2 Цинк 0,002
3 Олово 0,0002
4 Молибден 0,00005
5 Стронций 0,06
6 Фосфор 0,5
7 Марганец 0,01
8 Титан 0,010
9 Железо 0,03
10 Калий 1,0
11 Натрий 0,06
12 Кальций 1,0
13 Магний 1,0
14 Алюминий 0,02
15 Кремний 0,15
лено, что кроме Са, Mg, Р, К - часто встречающихся макроэлементов в растениях, трава посконника отличается содержанием - Мп, Бе, Р, А1.
Полученные данные позволяют отметить, что трава посконника содержит значительные количества и богатые сочетания многих важнейших минеральных веществ и аминокислот. Наличие изученных веществ в комплексе с другими БАС подчеркивает фармакологическую ценность и предполагает возможность создания лекарственных фитопрепаратов из травы посконника конопляного.
Литература
1. Кошовий О.М., Комгсаренко А.М. Амшокислотний та мшеральний склад екстрактш 1з листя евкалшту // Фармаком. 2004. № 4. С. 1-5.
2. Дикорастущие полезные растения России / Отв. ред. А. Л. Буданцев, Л.Е. Лесиовская. СПб., 2001.
3. Казаренко Т.Д., Зуев С.Н., Муляр Н.Ф. Ионообменная хроматография аминокислот. Новосибирск, 1981.
4. Никифорова Е.Б. и др. Исследование аминокислотного состава водорастворимых комплексов цветков календулы и кукурузных рылец // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы 9 Междунар. съезда «Фитофарм 2005». Микке-ли, Финляндия, 2005. С. 424-426.
5. Калинин С.А. и др. Атлас спектральных линий для кварцевого спектрографа. М., 1959.
6. Скальный А.В. Химические элементы в физиологии и экологии человека. М., 2004.
Кубанский государственный медицинский университет, Краснодар
24 ноября 2006 г.