Аллергенное и токсическое действие замороженных личинок анизакид на лабораторных животных Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Патогенез, патология и экономический ущерб

УДК 619:616.995.132-092

АЛЛЕРГЕННОЕ И ТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ЗАМОРОЖЕННЫХ ЛИЧИНОК АНИЗАКИД НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Т.Н. СИВКОВА кандидат биологических наук

Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика

Д.Н.Прянишникова

Соматические продукты личинок анизакид оказывают аллергенное действие на лабораторных крыс. При длительном пероральном введении нежизнеспособных личинок у животных регистрируют эозинофилию. В результате токсического воздействия отмечают увеличение печеночных показателей при биохимическом анализе крови. Наблюдают воспаление тонкой кишки с аллергическим компонентом.

Ключевые слова: аллергенное действие, личинки, ани-закиды, лабораторные крысы.

Анизакидоз, вызываемый личинками нематод семейства Anisakidae (Skrjabin et Korokhin, 1945), является опасным для здоровья человека заболеванием [1-3]. В целях профилактики заражения в замороженной рыбе и других гидробионтах допускается наличие только нежизнеспособных личинок паразитов [4]. Однако необходимо помнить, что соматические белки гельминтов и продукты их метаболизма могут оказывать токсическое и аллергическое действие. Так, кулинарная обработка и замораживание рыбы, содержащей анизакиды, не снижают опасности возникновения аллергической реакции. Установлено, что образование антител IgE вызывают экскреторно-секреторные продукты гельминтов, которые не инактивируются под воздействием высоких или низких температур.

В связи с этим, целью нашей работы было выяснение способности нежизнеспособных личинок анизакид вызывать аллергическую реакцию и морфологические изменения в различных внутренних органах млекопитающих.

Материалы и методы

Материалом для эксперимента служили нежизнеспособные личинки Anisakidae, выделенные из замороженных тушек путассу. Извлеченных личинок многократно промывали водопроводной водой, затем для предотвращения роста микрофлоры обрабатывали растворами антибиотиков.

Нелинейных лабораторных крыс-самцов (Rattus norvegicus Berk) массой 120-150 г разделили на четыре группы. Первой группе самцов в течение 10 сут перорально скармливали нежизнеспособных личинок анизакид в дозе 100

58_

Российский паразитологический журнал, 2009, № 1

экз./голову. Доза личинок для второй и третьей групп животных составляла 50 и 10 экз. соответственно. Четвертая группа служила интактным контролем.

На 3, 5 и 10 сут после инокуляции у крыс брали пробы периферической крови из когтя, фиксировали и окрашивали по Романовскому с последующим подсчетом лейкограммы и определения динамики эозинофилов.

На десятые сутки у крыс брали кровь из сердца и готовили сыворотку для проведения биохимического анализа по следующим показателям: общий белок, глюкоза, мочевина, креатинин, альфа-амилаза, общий билирубин, ала-нинаминотрансфераза (АлАТ), аспартатаминотрансфераза (АсАТ) и щелочная фосфатаза. Биохимическое исследование крови проводили с использованием стандартных методов. Затем животных декапитировали под легкой анестезией. Семенники, печень и участок тонкого кишечника фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине для гистологического исследования. Гис-тосрезы окрашивали гематоксилином и эозином.

Результаты и обсуждение

Во время эксперимента общее состояние подопытных животных оставалось удовлетворительным. Количество эозинофилов крови крыс перед началом проведения опыта колебалось в пределах 0-2 %, что соответствует физиологической норме. В крови крыс, которые ежедневно получали 100 личинок, уже на третьи сутки количество эозинофилов поднималось до 3-5 %, а на пятые сутки достигало уровня 7 %, однако к десятым суткам наблюдали понижение уровня эозинофилов до 2-3 %.

В первой и второй группах животных изменения в картине крови были менее выраженными. На третьи и пятые сутки опыта количество эозинофи-лов не превышало 3-4 %, а к десятым суткам этот показатель снизился до нормальных пределов.

У контрольных животных уровень эозинофилов не превышал нормы на всем протяжении опыта.

Биохимическое исследование сыворотки крови опытных животных показало статистически значимое повышение уровня общего белка, а также активности АлАТ и АсАТ в крови животных первой и второй групп. Кроме того, выявляли незначительное увеличение уровня креатинина и активности щелочной фосфатазы. Биохимические показатели оставались без изменений по сравнению с контролем. Показатели крови контрольных животных были в пределах физиологической нормы.

Гистологическое исследование позволило выявить наличие морфологических изменений в печени и особенно в тонкой кишке подопытных животных (рис.). В печени крыс первой и второй групп наблюдали гиалиновока-пельную и гидропическую дистрофию. Слизистая оболочка тонкой кишки была отечна, на поверхности отмечали слущивание клеток. В строме кишечной стенки выявляли диффузное скопление плазмоцитов и лимфоцитов, а также эозинофилов. В подслизистом слое был выражен умеренный отек. При исследовании тканей семенников отмечали сохранение структуры органа, отсутствие нарушений сперматогенеза и незначительный отек и полнокровие сосудов стромы.

Рис. 1. Кишечник крысы после перорального введения личинок анизакид (окраска гематоксилином и эозином, увел. 7 ок. х 20 об.)

При гистологическом исследовании соответствующих органов контрольных животных подобных изменений не отмечали.

Следовательно, при обработке рыбы низкими температурами соматические или экскреторно-секреторные продукты гельминтов, включающие белки, аминокислоты и ферменты, сохраняются. Часть этих продуктов может являться антигеном-аллергеном и вызывать аллергическую реакцию, интенсивность которой напрямую зависит от дозы личинок.

Таким образом, результаты наших исследований подтверждают, что экс-креторно-секреторно-соматические продукты замороженных личинок аниза-кид при длительном пероральном введении стимулируют выработку эозино-филов, следовательно являются аллергенами. Токсическое действие продуктов гельминтов вызывает повышение общего белка в периферической крови, а также увеличение уровня биохимических показателей, характеризующих функциональное состояние печени. Употребление в пищу свежемороженой рыбы, содержащей личинки нематод, может быть опасно для здоровья домашних животных.

Литература

1. Горохов В.В. // Ветеринария. - 1999. - № 5. - С. 7-14.

2. Довгалев А.С., Сергиев В.П., Коваленко И.М. и др. // Рыб. хоз-во. Сер.: Аквакультура: Информпакет. - 1999. - Вып.1. - С. 14-33.

3. Карманова И.В., Надеева О.А. // Матер. междунар. научн. конф. «Фауна, биология, морфология и систематика паразитов». - М., 2006. - С. 136137.

4. Поздняковский В.М., Рязанова О.А., Каленик Т.К., Дацун В.М. Экспертиза рыбы, рыбопродуктов и нерыбных объектов водного промысла. Качест-

60_

Российский паразитологический журнал, 2009, № 1

во и безопасность. - Новосибирск: Сибирское университетское издательство, 2005. - 309 с.

Allergic and toxic effects of Anisakis larvae somatic products on laboratory animals

T.N. Sivkova

Somatic products of larval steadies of Anisakis simplex induct a toxic effect on laboratory rats. Eosinophylia is observing from per os not live larvae induction. As a result of toxic influence the increase of hepatic parameters is marked. The inflammation of thin intestines with allergic component is marked.