CC BY
120
ПУБЛИКАЦИИ по ПРОБЛЕМЕ
О.И. Анфиногенова, Т.П. Бондарь. Использование иммунологических методов исследования в оценке состояния здоровья студенчества. ФГАОУ ВПО Северо-Кавказский Федеральный университет
Важным источником информации о состоянии адаптационных резервов организма являются исследования клеток периферической крови, участвующих в иммунной защите организма и относящихся к клеточным факторам системы неспецифической резистентности. Целью исследования явилось изучение морфофункциональных особенностей сегмен-тоядерных нейтрофилов у студентов, обучающихся на первом курсе в университете. В ходе диспансерного наблюдения за состоянием здоровья студентов, при составлении электронного паспорта здоровья обследовано 781 студентов в возрасте 17-18 лет. Выделена группа молодых людей (38 юношей и 24 девушки) с повышенным количеством общего числа лейкоцитов и незначительным увеличением отношения гранулоцитов к агранулоцитам. Исследовали общий анализ крови, подсчет лейкоцитарной формулы, морфометрические показатели и содержание миелопероксидазы, неферментных катионных белков в нейтрофильных гранулоцитах, НСТ-тест, спонтанный фагоцитоз клеток. Установлено, что общее количество лейкоцитов не выходило за пределы референсных границ, (8,3 ± 0,5), увеличение доли гранулоцитов (58,9 ± 1,7) и уменьшение агра-нулоцитов (31,2 ± 0,9). Анализ лейкоцитарной формулы показал следующее распределение клеточных пулов: эозинофилы (3,8 ± 0,73), палочкоядерные нейтрофилы (4,3 ± 0,49), сегмен-тоядерные нейтрофилы (58,8 ± 0,96), лимфоциты (33,1 ± 0,98) и моноциты (6 ± 0,78). Размеры нейтрофилов были несколько увеличены: площадь (67,0 ± 2,2), средний диаметр (9,1 ± 0,15) и фактора формы (22,7 ± 0,4). Также повышены значения ядерно-клеточного (0,45 ± 0,01), ядерно-цитоплазматического отношения (1,0 ± 0,08) и количества сегментов ядра (1,8 ± 0,07). Тест с нитросиним тетразолием (НСТ-тест) укладывался в пределы нормальных величин, спонтанный фагоцитоз демонстрирует высокую степень активности нейтрофилов 78 ± 2,5%. Отмечалось незначительное увеличение среднего цитохимического коэффициента активности катионных белков (2,2 ± 0,08) и среднего цитохимического коэффициента активности миелопероксидазы в гранулах нейтрофилов (2,23 ± 0,04).
Таким образом, с помощью проведенного анализа получены данные, которые позволяют характеризовать определенный уровень напряжения иммунного статуса организма у студентов-первокурсников и возможно могут служить маркерами развития преморбидных состояний, а также инструментом донозологической диагностики.
Д.С. Бубликов, А.В. Андриенко. Оценка жесткости эритроцитов у больных ревматоидным артритом на фоне применения эритроцитарных дезагрегантов. ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет Минздрава России, Барнаул
Для профилактики тромботических событий сосудистых осложнений ревматоидного артрита (РА) широко используются эритроцитарные дезагреганты. С целью адекватного их применения требуется своевременная лабораторная диагностика реологических параметров красных кровяных телец, в частности, жесткости их мембраны.
Цель и задачи исследовании - изучение жесткости эритроцитов (ЖЭ) у больных РА на фоне применения пентокси-филлина в качестве эритроцитарного дезагреганта.
Материалом для исследования явилась отмытая эритроци-тарная взвесь, полученная из крови больных РА (n=75). Оценка ЖЭ проводилась на капиллярном вискозиметре конструкции авторов Алтайского государственного медицинского и политехнического университетов (Усынин В.В., Пронин С.П., 2002 г).
ЖЭ в группе больных РА при применении пентоксифил-лина составила 2,45 ±_0,24 Н/м3, что было статистически зна-
чимо ниже ЖЭ до его применения, составлявшей 3,45 ± 0,43 Н/м3 (p < 0,01).
Коррекция ЖЭ у больных РА целесообразна с использованием эритроцитарных дезагрегантов, в частности, пенток-сифиллина.
В связи с вышесказанным, мы рекомендуем использовать эритроцитарные дезагреганты, в частности, пентоксифиллин для снижения ЖЭ у больных РА с целью предупреждения тром-ботических событий сосудистых осложнений системного РА.
Д.С. Бубликов, А.В. Андриенко. Взаимосвязь вязкости цельной крови с клинической активностью ревматоидного артрита, оцененной по шкале DAS-28. ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет, Барнаул
Построение клинического диагноза ревматоидный артрит (РА) включает в себя оценку активности процесса, для чего широко используют методику суставного счета по шкале DAS-28. Однако, неясно, насколько активность заболевания взаимосвязана с изменением вязкости цельной крови у женщин с РА.
Цель и задачи исследования - оценить взаимосвязь суставного счета по шкале DAS-28 у женщин, страдающих РА с изменением вязкости цельной крови.
Материалом для исследования явилась отмытая эритро-цитарная взвесь, полученная из крови больных РА («=45). Оценка ЖЭ проводилась на капиллярном вискозиметре конструкции авторов Алтайского государственного медицинского и политехнического университетов (Усынин В.В., Пронин С.П., 2002 г.). Всем больным была рассчитана активность РА по шкале DAS-28.
ВК в исследуемой группе составила 2,95 ± 0,54 Н/м3. Между ВК и количественным подсчетом активности РА по шкале DAS-28 выявлена корреляционная связь - прямая и сильная (r = 0,72).
Определение ВК у больных РА целесообразно в качестве альтернативных лабораторных маркеров активности заболевания.
В связи с вышесказанным, рекомендуем определять ВК у больных РА для комплексного подсчета активности заболевания.
Д.С. Бубликов, Е.Н. Воробьева, А.В. Андриенко. Антитела к циклическому цитруллинированному пептиду - рутинный маркер серопозитивности ревматоидного артрита, или предиктор сосудистых осложнений? ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет, Барнаул
Антитела к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП) входят в панель исследования серопозитивности ревматоидного артрита (РА). Представляется актуальным изучение взаимосвязи концентрации АЦЦП с маркерами ма-крососудистых поражений, в частности, липидным спектром и высокочувствительным СРБ (вч-СРБ) сыворотки крови.
Цель и задачи исследования - оценить взаимосвязь АЦЦП с общим холестерином (ОХС) и вч-СРБ у больных РА.
Исследование проведено у женщин с РА («=43), серо-позитивных по АЦЦП, средний возраст - 53,32+2,12 года. Уровень АЦЦП в сыворотке крови определялся количественным методом на анализаторе «Униплан», концентрация ОХС - ферментативным колориметрическим методом на аналитической биохимической платформе Modular SWA (Roshe).
Уровень АЦЦП равнялся 250,48 ± 54,82 ммоль/л. Концентрация вч-СРБ и ОХС составила 25,5 ± 3,54 ммоль/л и 7,52 ± 2,24 ммоль/л соответственно. Между АЦЦП и вч-СРБ выявлена прямая сильная корреляционная связь (r = 0,75). Корреляция между уровнем ОХС и АЦЦП (r = 0,54), прямая, средней силы.
Таким образом, перспективно рассматривать АЦЦП не только как маркер серопозитивности РА, но и в качестве предиктора сосудистых осложнений.
В связи с вышесказанным, мы рекомендуем пересмотреть взгляд на АЦЦП как на рутинный метод оценки серопозитив-ности РА.
Е.Н. Воробьева, Д.С. Бубликов, А.В. Бубликова. Липидо-грамма у больных ревматоидным артритом: консенсус между клиническими потребностями и экономической целесообразностью. ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет, Барнаул, КГБУЗ городская больница № 4, Барнаул
При ревматоидном артрите (РА) из биохимических маркеров, позволяющих прогнозировать кардиоваскулярный риск, в стандарт ведения входит лишь общий холестерин (ОХС), что несомненно недостаточно для адекватной коррекции факторов риска (ФР).
Цель и задачи исследования - оценить распространенность нарушений липидного спектра у больных РА.
Исследование проведено у женщин с РА (n=67), средний возраст - 53,32 ± 2,12 года. Концентрации ОХС, триглицеридов (ТГ), холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности (ХС ЛПНП и ХС ЛПВП соответственно) определяли ферментативным колориметрическим методом на аналитической биохимической платформе Modular SWA (Roshe). Индекс атеро-генности (ИА) рассчитывали по общепринятой формуле.
Уровень ОХС в исследуемой группе составил 7,52 ± 2,24 ммоль/л, ТГ - 2,95 ± 0,58 ммоль/л, ХС ЛПНП - 3,02 ±
1.14 ммоль/л, ХС ЛПВП - 0,74 ± 0,27 ммоль/л. ИА равнялся
4.15 ± 1,05.
В популяции больных РА широко распространены дисли-пидемии. В связи с вышесказанным, рекомендуем включить липидограмму в перечень стандартных исследований больных РА.
С.Ф. Карпенко, Х.М. Галимзянов. Особенности реакции торможения миграции лейкоцитов с сердечным экстрактом у больных коксиеллезом. ГБОУ ВПО Астраханская государственная медицинская академия Минздрава РФ
Цель - изучить показатели реакции торможения миграции лейкоцитов с сердечным экстрактом у больных коксиеллезом.
Обследовано 30 больных со среднетяжелым течением коксиеллеза в возрасте от 17 до 49 лет (1-4 нед болезни). Контроль - 30 доноров. Реакцию торможения миграции лейкоцитов проводили по методу Clausen I. в агаровой среде (1971). Сердечный экстракт получали по методу Китаева М.И. (1973).
На 1-й неделе у 70% больных отмечалось торможение миграции лейкоцитов, а у 30% - ускорение. На 2-й неделе ИМ понижался до 49,2% у 50% пациентов и был в 1,4 раза ниже, чем на 1-й нед (p < 0,001). Ускорение отмечалось у 12,5% пациентов, а у 37,5% больных показатели не отличалась от нормы. На 3-й неделе ИМ понижался у 40% пациентов до 70,9% и был в 1,4 раза выше, чем на 2-й неделе (p < 0,001). У 60% больных показатели не отличались от контроля. Большинство больных были выписаны из стационара на 3-й неделе. На 4-й неделе ИМ понижался до 50% у половины пациентов и был в 1,4 раза ниже, чем на 1-й и 3-й неделе (p < 0,001). У 50% больных ИМ достигал 218,3% и был в 1,4 раза выше, чем на первой неделе (p < 0,001).
Таким образом, у больных коксиеллезом развивалась гиперчувствительность замедленного типа к сердечной ткани. Изучаемый тест характеризовал активность воспалительного процесса и степень клеточной аутосенсибилизации. Он может быть рекомендован как дополнительный метод обследования больных при коксиеллезе для прогнозирования осложнений, длительности болезни и своевременной коррекции терапии.
Н.М. Лазарева, С.В. Лапин, А.Л. Маслянский, М.Д. Че-шуина, Е.П. Иливанова, В.Л. Эмануэль. Антинуклеарные антитела в лабораторной иммунологической диагностике системной склеродермии. ГБОУ ВПО СПбГМУ им. И.П. Павлова Минздрава России, Санкт-Петербург
Системная склеродермия (ССД) представляет собой аутоиммунное заболевание неизвестной этиологии с возникновением иммунологических, сосудистых повреждений, пораже-
ния соединительной ткани и появлением в сыворотке крови антинуклеарных антител.
Цель и задачи - определить встречаемость антинуклеарных антител у больных системной склеродермией. Выяснить их встречаемость при различных формах ССД, а также в диагностике основных осложнений.
Были исследованы сыворотки крови пациентов с ССД (n=60). В данных образцах выявлялся антинуклеарный фактор (АНФ) методом непрямой иммунофлюоресценции (нРИФ) и антинуклеарные к 13 аутоантигенам (Scl-70, CENP A/B, RP 11/155, фибрилларину, NOR90, Th/To, PM-Scl100/75, Ku, PDGFR, Ro-52) методом лайнблота (Euroimmun, Германия).
АНФ был выявлен в 100% случаев. Антитела к Scl-70, CENP A/B, RP11/155, PM-Scl100, PM-Scl75, N0R90, Ku, Ro-52 были обнаружены в 28, 46, 42, 8, 10, 10, 9, 43% случаев соответственно. Значения модифицированного кожного счета Роднана были выше при наличии антител к Scl-70 (p = 0,03). У пациентов с наличием антител к CENP A/B был выявлен более высокий уровень креатинина в сыворотке крови при сниженной скорости клубочковой фильтрации (р < 0,01), а так же большая длительность заболевания (р < 0,01). Антитела к PM-Scl100 были ассоциированы с наличием полиней-ропатии (p = 0,03).
Определение антинуклеарных антител может быть рекомендовано для лабораторной диагностики ССД, осложнений заболевания и использоваться как маркер тяжелого течения заболевания.
Лернер М.Ю., Мазинг А.В., Лапин С.В. Информативность определения концентрации свободных легких цепей иммуноглобулинов методом иммуноферментного анализа в диагностике моноклональных гаммапатий.
ГБОУ ВПО СПб ГМУ им. И.П. Павлова Минздрава России, Санкт-Петербург
Определение концентрации лёгких цепей и их соотношения используется для диагностики как гематологических (множественная миелома, болезнь Вальденстрема), так и негематологических (криоглобулинемия, полиневриты, ами-лоидоз).
Целью данного исследования - определить диагностические параметры выявления легких цепей для повышения эффективности диагностики парапротеинемий.
Было исследовано 209 образцов сыворотки крови здоровых доноров для расчета границ норм, 362 образца, взятых у лиц с подозрением на парапротеинемию для расчета чувствительности и специфичности метода. Сыворотки исследовались методом иммуноферментного анализа с использованием тест-системы «Полигност» (Санкт-Петербург, Россия). Результаты сопоставлялись с «золотым стандартом» для выявления парапротеинов методом иммунофиксации (реактивы Helena Biosciences, Великобритания).
Были рассчитаны границы норм концентрации легких цепей. Каппа - 4,5-20,4 . мкг/мл Лямбда 3,0-18,7 мкг/мл Каппа/ Лямбда соотношение - 0,6-2,7. Чувствительность и специфичность составила: каппа в диагностике миеломы с моно-клональной каппа-цепью 72,5% и 100%, лямбда - 73,7% и 94% соответственно, коэффициент каппа/лямбда - чувствительность 80,3% для каппы, 89% для лямбды, специфичность 100% для каппа-миеломы и 94% для лямбда-миеломы.
Таким образом, определение концентрации свободных легких цепей в сыворотке крови информативно для диагностики парапротеинемий. Показана важность изменения соотношения каппа и лямбда легких цепей.
Москалёв А.В., Рудой А.С. Роль TGFp в иммунопато-генезе эрозивно-язвенных поражений гастродуоденаль-ной области у лиц с недифференцированной дисплазией соединительной ткани. Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, Санкт-Петербург
Установлены особенности иммунопатогенеза эрозивно-язвенных поражений гастродуоденальной области (ГДО) у лиц с различной степенью выраженности недифференциро-
ванной дисплазии соединительной ткани (НДСТ). Однако наиболее выраженная динамика выявлена со стороны трансформирующего ростового фактора ß (TGFß). Это связано с тем, что TGFß вовлечен в различные физиологические и патофизиологические процессы. Учитывая, что TGFßj - изо-форма активно участвует в процессах тканевой репарации, то ее профили могут быть использованы как фактор мониторинга ремиссии и активной фазы заболевания у изучаемой категории больных.
Цель - выявить возможные взаимосвязи профилей TGFßj в периферической крови у больных эрозивно-язвенными заболеваниями гастродуоденальной области с сопутствующей дисплазией соединительной ткани в периоды ремиссии и активной фазы заболевания.
Осуществлено комплексное обследование 78 больных язвенной болезнью и эрозивными гастродуоденитами (возраст 22,4 ± 1,3 года) в фазе обострения и клинико-эндоскопической ремиссии. Уровни TGFßj определяли с помощью диагностических тест-систем фирмы Bender MedSystems.
Установлены достоверные различия профилей TGFßj у лиц с язвенной - 89,3 ± 2,1 пг/мл патологией в сравнении с эрозивной - 65,6 ± 2,8 пг/мл, что подтверждает, установленную ранее лишь повышенную активность метаболизма коллагенсодержащих структур соединительной ткани при язвенном дефекте. При этом уровни TGFßj были достоверно более низкими (в 3,1 раза) у обследуемых в фазе клинико-эндоскопической ремиссии, отражающей снижение активности фибрилло- и коллагеногенеза.
Таким образом, профили TGFßj характеризуют активность иммуновоспалительных процессов, позволяют считать, что основным фактором иммунопатогенеза у данной категории больных лежит повышенная TGFßj-активность, что может являться следствием дефицита фибрилллина-1, мутации которого определяют фенотипические проявления ряда наследственных расстройств соединительной ткани, что и является следствием хронизации эрозивно-язвенных процессов.
А.В. Соломенников, Н.А. Арсениев. Разработка и создание экспертно-аналитической системы для экспресс-оценки реакции иммунной системы по показателям клинического анализа крови и С-реактивного белка. ГБУЗ Городская больница № 38 им. Н.А. Семашко, Санкт-Петербург
Цель исследования - создание типовых «обобщенных профилей» характерных изменений иммунитета по данным формулы крови и возможность их использования в оценке состояния иммунитета в индивидуальных случаях.
На основании результатов корреляционного анализа фактических значений С-реактивного белка (СРБф) и показателей клинического анализа крови 97 пациентов с различной патологией была составлена формула регрессии для расчета предполагаемых значений С-реактивного белка по формуле крови (С-реактивный белок расчетный; СРБр). При этом ККр (коэффициент линейной корреляции) между расчетным и фактическим значениями СРБ достигал +0,71 (« = 97). В другом исследовании, используя результаты обследования пациентов с раком толстой кишки и больных с дисбактериозом кишечника (всего 104 наблюдения) выявили достоверную корреляционную связь между динамикой показателей специфического иммунитета (CD3, CD4, CD8, CD16 , CD19, Ig A,M,G) и клинического анализа крови. При этом на фоне преобладания активности различных звеньев иммунитета характер их корреляционных связей с формулой крови отличался. Отсюда был сделан вывод о том, что отличительные особенности признаков воспалительного процесса по конфигурации клинического анализа крови и показателю С-реактивного белка связаны, в том числе, с проявлениями активности факторов специфического иммунного ответа. Используя полученные материалы, нами была составлена программа расчетов СРБр и различий СРБф и СРБр с использованием программы Excel по показателям формулы крови и значению СРБф, которая, при наличии ПК, в режиме онлайн способна рассчитать соответствующие показатели (СРБр, СРБр+СРБф, СРБр-СРБф,
СРБф% и СРБр% от их суммы, СРБр/СРБф), что, по нашему мнению, позволяет ориентировочно определять общую антигенную нагрузку (СРБр+СРБф) и «доли» участия специфического и неспецифического иммунитета в элиминации патогенного фактора (СРБф% и СРБр%). При этом используя предложенный алгоритм оценки проявлений специфической иммунной реакции в показателях гемограммы, можно определять ее характерные особенности у каждого больного по данным клинического анализа крови.
Р.С. Тишенина. Радиоиммунологические методы в диагностической, научно - аналитической и педагогической деятельности. ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Москва
Гормональная лаборатория МОНИКИ по разделу «Здравоохранения», входящая в состав биохимической лаборатории МОНИКИ по разделу «Наука», с 1973 г. внедряет РИА-методы определения гормонов, в последние годы некоторые онкомаркеры. По заданию Минздрава СССР и РФ сотрудники лаборатории принимали участие в апробации и внедрении новых РИА-методов, разрабатываемых зарубежными производителями с 1974 г. Эта единственная лаборатория в Московской области, использующая в своей работе РИА-методы. Спектр РИА-методов позволяет диагностировать и осуществлять контроль лечения практически всех заболеваний эндокринной системы, как у взрослых, так и у детей. Обследуются пациенты из клиник института, клинико-диагностического отдела МОНИКИ, из прикрепленных областных учреждений.
С внедрением в клиническую практику автоматических анализаторов на основе ИФА и иммунохемилюминесцент-ных методов в лаборатории РФ, сотрудники лаборатории используют РИА-методы в качестве референсных практически для всех аналитов. Нами установлено, что чувствительность одного из наиболее современных иммунохемилюми-несцентных автоматических анализаторов 3-го поколения Иммулайт 2000 при низких концентрациях инсулина, АКТГ и других аналитов не позволяет определить их истинную концентрацию. Поэтому у больных, страдающих сахарным диабетом 1-го типа, нами инсулин определяется с помощью РИА-метода, АКТГ при низких концентрациях - ИРМА-методом.
Для врачей клинических профилей и для специалистов клинической лабораторной диагностики был организован при кафедре эндокринологии ФУВ МОНИКИ единственный в РФ цикл усовершенствования « Клинико-лабораторная диагностика заболеваний эндокринной системы». На этом цикле РИА-методы применяются в качестве 2-х обучающих программ. По одной программе курсанты на основании подсчета радиоактивности при построении стандартной калибровочной кривой изучают принцип иммунного анализа, легче воспринимаются принципы твердофазного иммуноферментного и флюоресцентного иммуноанализов. Вторая программа позволяет обучающимся оценивать результаты собственного пипетирования. Для этого нами используются остатки радиоактивности. К работе допускается сотрудник, у которого при пипетировании различных концентраций коэффициент вариации не превышает 2-3%.Используя РИА-набор фирмы Immunotech (Чехия) для определения в моче свободного кортизола, нами разработан РИА-метод определения коньюгированной фракции кортизола, позволяющий диагностировать хроническую надпочечниковую недостаточность при нормальной экскреции свободного кортизола. При отсутствии поставок в РФ реактива Solution U «Immunotech», Чехия для исследования альдостерона в моче, нами модифицирован этот этап. Метод применяется с целью диагностики вариантов гипо- и гипер-альдостеронизма у детей и взрослых.
Л.Д. Цатурян1, Т.П. Бондарь2, Д.А. Андросова'. Клеточные и гуморальные факторы: адаптационный аспект. 'ГБОУ ВПО Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава РФ; 2ФГАОУ ВПО СевероКавказский федеральный университет
Необходимым условием нормальной жизнедеятельности организма является сбалансированное состояние регулятор-ных и компенсаторных механизмов, определяющих адаптационный потенциал. Наибольшую важность эти процессы представляют для организма студентов при переходе на новый жизненный этап - обучение в вузе. Одним из индикаторов изменения внутренней среды организма является клеточное и гуморальное звено иммунитета.
Исходя из вышесказанного, целью данного исследования явилось изучение клеточных и гуморальных факторов в адаптационном аспекте при обучении в вузе.
В соответствии с поставленной целью нами были обследованы студентки первого курса, занимающиеся (1-я группа, n = 24) и не занимающиеся спортом (2-я группа, n = 30). В исследуемых группах студенток выявляли корреляционную взаимосвязь содержания лимфоцитов (%) и уровня IgA, IgM, IgG (мг/мл) в сыворотке крови. Обработка полученных показателей проводилась с использованием пакета корреляционного анализа Microsoft Excel, степень значимости коэффициентов корреляции считалась достоверной при p < 0,05.
Известно, что основные классы иммуноглобулинов вырабатываются лимфоцитами, а содержание лимфоцитов влияет на уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови. Показатели уровня IgA, IgM, IgG находятся в пределах нормы и характеризуют нормальный иммунный статус студенток обеих групп. У девушек, занимающихся спортом, тесная корреляционная связь наблюдается между содержанием лимфоцитов и уровнем IgA (r = + 0,77, р < 0,01), а также выраженная корреляционная связь между содержанием лимфоцитов и уровнем IgG (r = + 0,57, р < 0,01). Важно отметить отрицательную выраженную корреляционную связь между содержанием IgA и IgM (r = -0,54, р < 0,01) у спортсменок. У студенток второй группы выявлены слабые корреляционные связи, иллюстрирующие зависимость содержания лимфоцитов и уровня иммуноглобулинов.
Таким образом, нами изучены корреляционные взаимосвязи содержания лимфоцитов и уровня IgA, IgM, IgG у студенток при адаптации к условиям обучения в вузе. Девушки-спортсменки по сравнению со студентками второй группы имеют более выраженные адаптационные механизмы, проявляющиеся в сбалансированной работе клеточных и гуморальных факторов иммунного статуса.
Б.Б. Шойбонов'-3, В.Ю. Баронец2,3, В.Р. Хайбулин3. «Нагрузочный» тест определения функциональной активности системы комплемента. 'ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН, 2ФГБУ Национальный научный центр наркологии Минздрава РФ, 3ФГБУ НИИ нормальной физиологии им. П.К. Анохина РАМН, Москва
Цель исследования - разработка «нагрузочного» теста определения функциональной активности системы комплемента.
В работе исследовали сыворотки крови 20 доноров, 20 больных с инструментально подтвержденным атеросклерозом каротидных артерий, 15 детей, обследуемых на хронические инфекции. Забор крови проводили натощак из локтевой вены, отделяли сыворотку и определяли реактивность системы комплемента (РСК) по методу, разработанному ранее. Суть метода заключается в проведении реакции лизиса эритроцитов барана 25% сывороткой человека в присутствии 0,25М №С1 в инкубационной гемолитической системе. В качестве сенсибилизирующих антител используются аутоло-гичные гетерофильные антитела в разведении 1:3. Проба в конечном объеме 0,2 мл инкубируется в течение 10 мин при 37оС. Реакцию останавливают добавлением 1,25 мл 0,75М раствора №С1, центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин. Степень лизиса (СЛ,%) определяют спектрофотометрически при длине волны 412 нм. Рассчитывают степень ингибирова-ния по формуле СИ,% = 100-СЛ. При нормальной реактивности 0,25М №С1 ингибирует систему комплемента на уровне 35-70%. При ингибировании до 34% - повышенная реактивность системы комплемента, от 71 до 100% - пониженная реактивность.
При исследовании РСК в группе доноров из 20 человек получены следующие результаты. У 8 (40%) РСК в пределах нормы, у 4 (20%) сниженная РСК и у 8 (40%) повышенная реактивность системы комплемента. Интересные результаты получены при обследовании детей с наличием хронического инфекционного заболевания. У 13 (86%) выявлена повышенная реактивность системы комплемента, у 1 - пониженная и только у одного - нормальная РСК. Обследование больных с инструментально подтвержденным атеросклерозом каротид-ных артерий выявило следующую картину. У 6 больных РСК была в пределах нормальных значений, у 7 - пониженная и у остальных 7 - повышенная реактивность системы комплемента.
Вывод. 1. Модификация теста определения гемолитической активности системы комплемента позволяет отказаться от гемолитической сыворотки кролика как источника сенсибилизирующих антител. 2. Увеличение концентрации сыворотки до 25% уменьшает в 6 раз время проведения анализа. 3. Использование «нагрузки» в виде 0,25М №С1 в гемолитической системе является «дифференциально-диагностическим» критерием реактивности системы комплемента. 4. При наличии системной воспалительной реакции в организме человека показатель РСК повышен. 5. Сниженная реактивность системы комплемента может свидетельствовать о скрытом иммунодефиците. 6. Данные по больным с атеросклерозом каротидных артерий свидетельствуют о необходимости учета реактивности системы комплемента при назначении иммуномодулято-ров. 7. Исследования крови детей с хроническими инфекциями подтверждают наличие воспалительного процесса и только у 1 ребенка выявлено иммуносупрессивное состояние.
ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ИММУНОГЕМАТОЛОГИИ
Самир Ахмед. Международные указания и рекомендации в клинической иммуногематологии. Компания «BioRad Laboratories», Объединенные Арабские Эмираты
Эффективность и надежность стандартов исследований в трансфузиологии напрямую связана с системой контроля качества. Технические ошибки, опечатки, использование невалидованных техник либо оборудования с несовместимыми реагентами могут привести к потере результатов совместимости, а также к развитию острых и отсроченных посттрансфузионных реакций. Будут рассмотрены эти международные требования и рекомендации с целью обмена информации о лабораторных процедурах и про-
цессах. В результате будут рассмотрены указания, которые должны обязательно учитываться при претрансфузионном тестировании, с целью повышения и улучшения качества проводимых исследований, расширения области знаний по существующим рекомендациям, а также информации об использовании автоматизации при иммуногематологических исследованиях.
Мы рассмотрим методы и рекомендации для различных тестов в формате что?, когда? и как?
Самир Ахмед. Гемолитическая болезнь плода или новорожденных вследствие резус конфликта. Компания «Bio-Rad Laboratories», Объединенные Арабские Эмираты
