CC BY
22
явление первичного адренэргического дисбаланса, присущего больным бронхиальной астмой.
Таблица 3. Результаты корреляционного анализа показателей тромбоцитарного звена гемостаза: средний радиус агрегатов тромбоцитов (РЗ Мах) и светопропуска-ние плазмы (1.Т Мах) при спонтанной и стимулированной
Группа исследования Кол-во па циен- TOB Спонтанная агрегация Стимулированная АДФ 1:20 Стимулированная АДФ 1:40 Стимулированная Адреналин 1:50
Контрольная группа 36 г=0.5015± 0.1506 р>0.996 г=0.3254± 0.1622 р>0.944 г=-0.2194± 0.2034 р<0.900 г=0.4003± 0.1871 р>0.952
Группа сопоставления 30 г=0.3342± 0.1781 р>0.925 г=0.3341± 0.1924 р>0.904 г=0.3289± 0.1969 р<0.900 г=0.7016± 0.1904 р>0.996
I группа 36 г=0.1043± 0.1731 р<0.9 г=0.5085± 0.1522 р>0.996 г=0.6648± 0.2156 р>0.991 г=0.9049± 0.1229 р>0.999
II группа 35 г=0.9256± 0.0703 р>0.999 г=0.4595± 0.1595 р>0.991 г=0.5685± 0.1887 р>0.991 г=0.4032± 0.2446 р<0.900
Использование симпатомиметиков ведет к прогрессирующему дозазависимому снижению светопропуска-ния плазмы, значительно более выраженному, чем при стимуляции агрегации тромбоцитов АДФ. Это, с одной стороны, свидетельствует о значительном увеличении количества тромбоцитарных агрегатов при стимуляции адреналином на фоне лечения симпатомиметиками, с другой стороны, подтверждает предположение о десен-ситизации рг-адренорецепторов тромбоцитарной мембраны и истощении их функционального резерва на фоне лечения.
Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что использование Рг-агонистов короткого действия (сальбутомол, фенотерол) в симптоматической терапии бронхиальной астмы приводит к значительным нарушениям тромбоцитарного звена гемостаза
с гиперагрегацией тромбоцитов и истощением функционального резерва Рг-рецепторов тромбоцитарной мембраны.
Литература
1. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы.-М.,1988.
2. Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилов И.Ю. и др. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов // Лаб. дело. 1989, 10; 15-18.
3. Татарский А.Р., Алиева K.M. Тромбоциты. Физиологическая активность. Роль в патогенезе бронхиальной астмы.//Пульмонология.-1991 .-№2.-С. 48-54.
4. Федосеев Г.Б. Механизмы обструкции бронхов. -С-Пб.,-1995.
5. Федосеев Г.Б.(ред.). Бронхиальная астма.-С-Пб.,-1996.
6. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма.-М.,1997.
7. Gabbasov Z.A., Gavrilov I.U. and Popov E.G. The use of optical density fluctuations for determination of platelet concentration. Platelets, 1992 (in press).
28.03.99 r.
ГОЛЕВЦОВА Зарета Шамиловна - доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой пропедевтики внутренних болезней Омской государственной медицинской академии.
ОВСЯННИКОВ Николай Викторович - зав. пульмонологическим отделением Омской городской клинической больницы.
КЛИМОВ Анатолий Иванович - гематолог ОГКБ №1, заочный аспирант кафедры пропедевтики внутренних болезней Омской государственной медицинской академии.
НОВГОРОДЦЕВА Елена Викторовна - врач, лаборант кафедры пропедевтики внутренних болезней Омской государственной медицинской академии.
ГОРБУШИН Александр Сергеевич - программист Омской государственной медицинской академии.
АНГЕЛОВА Анастасия Михайловна - клинический ординатор кафедры пропедевтики внутренних болезней Омской государственной медицинской академии.
УДК 577.155.367-577.158:616.24-002-053
АКТУАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ И ПУТИ ИХ КОРРЕКЦИИ ПРИ ПНЕВМОНИИ У ДЕТЕЙ
В.В. Мещеряков, А.Г.Сачкова, Л.А.Кривцова, В.Д.Конвай
Целью исследования явилось изучение взаимосвязи острого нарушения пуринового обмена, перекисного окисления липидов и степени гипоксии при острой пневмонии у 80 детей. В крови определялось содержание мочевой кислоты, продуктов перекисного окисления липидов и активность ферментов антиоксидантной защиты. Динамическое наблюдение показало, что в период разгара пневмонии в крови повышался уровень мочевой кислоты, продуктов перекисного окисления липидов, наблюдался дисбаланс ферментов антиоксидантной защиты. Выраженность биохимических изменений зависела от степени гипоксии (периода болезни, дыхательной недостаточности). Использование метронидазола в комплексном лечении позволило снизить интенсивность перекисного окисления липидов, уменьшить тяжесть клинических проявлений и сократить острый период болезни.
Проблема пневмонии у детей была и остается предметом поиска новых подходов для совершенствования
диагностики и лечения этого заболевания, что связано с достаточно большим удельным весом тяжелых форм и относительно высокой летальностью (1, 2, 8). Очевидно, что решение этих проблем и оптимизация лечения во многом зависят от выяснения механизмов развития заболевания. Принципиально новым направлением в этом смысле является изучение острого нарушения пурино-вого обмена, провоцируемого гипоксией, и его связь с процессами липопероксидации. Данные метаболические расстройства изучены в эксперименте (5). Пневмония у детей, как наиболее тяжелое заболевание легких, со-
провождающееся гипоксией, может служить наиболее показательной клинической моделью для этого.
Целью настоящей работы явилось изучение клинического значения уровня мочевой кислоты, показателей перекисного окисления липидов (ПОЛ) и поиск возможных путей коррекции выявленных нарушений.
Обследованы 80 детей с пневмонией в возрасте от одного месяца до 14 лет с различными формами пневмонии, находившихся на лечении в Областной детской клинической больнице в 1997 - 1999 гг. Биохимические исследования проводились в динамике: в разгар заболевания, в период клинического улучшения, перед выпиской из стационара. Определение содержания моче-
вой кислоты (МК) в плазме проводили по Otetea (14), фракции средних молекул (ФСМ) по H.H. Габриелян (3). Из эритроцитов крови готовился липидный экстракт по Folch (13), в котором определялось содержание общих липидов по Bragdon (11), диеновых конъюгатов (ДК) по Plazer (15), липофусциноподобного пигмента (ЛФПП) по Fletcher (12) активности супероксиддисмутазы (СОД) по
В.Н. Чумакову и Л.Ф.Осинской (10), каталаэы по В.Д. Конваю, A.B. Лукошкину (6).
В контрольную группу вошли 35 практически здоровых детей того же возраста. Результаты исследования обработаны статистически с использованием критерия Стьюдента и непараметрических методов анализа (4,7).
Таблица 1
Показатели пуринового обмена, перекисного окисления пипидов и антиоксидантной защиты
Показатели Здоровые п=35 Дыхательная недостаточность I степени п=15 Дыхательная недостаточность II степени п=31
разгар болезни улучшение выздоровление разгар болезни улучшение выздоровление
Мочевая кислота, мкмоль/л 90,7+3,9 114±9* 118±6" 101 ±5* 143±11"*® 120±10" 112±7"А
ДК, мкэкв/л 0,13±0,01 0,25±0,03" 0,17+0,02 0,21+0,02" 0,19±0,01*® 0,17±0,02 0,17±0,02
ЛФПП, ед/мг 3,ato,3i 8,69+0,80"* 8,16±0,82"* 7,16+0,70" 6,06±0,0,57" 5,41 ±0,48* 6,31±0,83"
ФСМ, ед/мл 1,98±0,10 2,6±0,33 2,59+0,18** 2,46+0,11" 2,98±0,16*" 2,61+0,18" 2,37±0,10*АЛ
СОД, ед/г 231±17 285±36 269±30 260±23 216±16 264±20 261±28
Каталаэа, сд/г мин 2081±147 2816+383 2696±306 3022±302" 2791 ±220" 2334±165 1863±134ллл*
Примечание. *, *** - достоверные различия со здоровыми детьми (р<0,05, р<0,01, р<0,001); л, лл, ллл -достоверные различия с периодом разгара (р<0,05, р<0,01, р<0,001); + - достоверные различия с периодом улучшения (р<0,05); @ - достоверные различия с периодом разгара пневмонии при дыхательной недостаточности I степени (р<0,05).
При достоверно более высоком уровне мочевой кислоты в разгар пневмонии в сравнении со здоровыми (136 ± 6 мкмоль/л и 90,7 + 3,9 мкмоль/л, р < 0,001), получена четкая прямая зависимость этого показателя от степени дыхательной недостаточности (ДН) и периода заболевания (табл. 1) при отсутствии достоверных различий (р > 0,05) этого параметра в разгар болезни у детей с разными формами пневмонии при одинаковой степени ДН (очаговая, очагово-сливная, долевая, сегментарная). При клиническом выздоровлении этот показатель достоверно не отличался (р > 0,05) от аналогичного у здоровых детей только при ДН I, оставаясь повышенным при ДН II. Изложенное выше подтверждает установленную в эксперименте провоцирующую роль гипоксии в катаболизме пуриновых оснований (5). Выявленная при клиническом выздоровлении гиперурикемия при ДН II связана, по-видимому, с явлениями сохраняющейся гистотоксической гипоксии у детей с тяжелыми формами заболевания.
Из приведенных в табл. 1 данных следует, что содержание ДК в эритроцитах в разгар болезни при ДН I превышает аналогичный показатель у здоровых на 92,3% (р < 0,01), при ДН II - на 46,2% (р < 0,05). Содержание ЛФПП в эритроцитах остается повышенным на всех этапах исследования как при ДН I, так и при ДН N. Однако его повышение более выражено в группе детей с ДН I. Таким образом, наблюдается снижение содержания начальных и конечных продуктов ПОЛ в эритроцитах периферической крови с нарастанием степени ДН. Данное явление можно объяснить следующим образом: с усилением степени гипоксии и связанного с нею гипо-эргоза активизируется распад пуринов до мочевой кислоты с образованием ксантиноксидазой активных форм кислорода. Это приводит к усилению липопероксидации мембранных структур, которое более выражено при ДН II, чем при ДН I. В первом случае, вероятно, возникает большая потребность в депонировании разрушенных активными формами кислорода эритроцитов в селезен-
ке, поэтому в периферической крови при ДН II количество продуктов ПОЛ ниже, чем при ДН I. Этот феномен впервые обнаружен в эксперименте (9) и подтвержден нами в клинике.
Как следует из табл. 1, содержание ФСМ в крови при ДН I повышалось в разгар заболевания, при улучшении и выздоровлении соответственно на 31,3%, 30,8% (р < 0,01), 24,2% (р < 0,01), а при ДН II - на 50,0% (р < 0,01), 31,3% (р < 0,05), 20,7% (р < 0,01). Достоверных различий в уровне ФСМ в зависимости от степени ДН не обнаружено. Вместе с тем, выявлено усиление корреляционной связи между увеличением концентрации мочевой кислоты v ФСМ в крови при нарастании степени ДН (при ДН I г = 0,46, при ДН II г = 0,86).
При сравнении изменения активности ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ) в зависимости от степени ДН выяснено, что активность СОД в эритроцитах при ДН I выше, чем при ДН II. Отмечена прямая слабая корреляционная связь между уровнем мочевой кислоты и активностью СОД при ДН I (г = 0,39). При ДН II она отсутствует (г = 0,01). Это можно объяснить тем, что при ДН I молекула СОД меньше повреждается активными формами кислорода, чем при ДН II. Активность каталаэы при ДН I в динамике повышалась и перед выпиской превышала этот показатель у здоровых детей на 45% (р < 0,01). При ДН II в разгар болезни активность данного энзима была более высокой, чем у здоровых детей на 34,1% (р < 0,01). В дальнейшем она снижалась, несмотря на повышенную потребность в активации этого фермента. Таким образом, при ДН I увеличение активности СОД сопровождалось повышением активности каталаэы, однако это было недостаточным для эффективной АОЗ (уровень ЛФПП оставался высоким на всех этапах исследования). Тогда как при ДН II активность СОД снижалась в разгар болезни и в недостаточной степени повышалась в динамике. Активность каталаэы при ДН II к моменту выписки из стационара снижалась. Из вышеизложенного следует, что при ДН I существует недоста-
точное повышение активности ферментов АОЗ, а при ДН II - разнонаправленность их действия.
Нами обследовано семь детей с ДН III в раннем возрасте. У троих из них пневмония была двусторонней; у двоих - очаговой, у пяти - очагово-спивной, в том числе у троих - госпитальной. С осложнениями заболевание протекало у пяти детей. Все обследованные лечились в отделении реанимации и интенсивной терапии, находились на ИВЛ. У этих детей повышение уровня мочевой кислоты в плазме крови было значительно более выраженным, чем при ДН 1-11 (252 ± 53 мкмоль/л) и сочеталось в двух случаях с нормальным, а в пяти - со сниженным содержанием в эритроцитах ДК. У одного ребенка отмечено нормальное, у пяти - сниженное, у одного - повышенное содержание в эритроцитах ЛФПП. Таким образом, у большинства детей с ДН III отмечалось снижение содержания начальных и конечных продуктов ПОЛ при повышенной концентрации урата в плазме. Это, по-видимому связано с вышеописанным феноменом депонирования разрушенных эритроцитов в селезенке и меньшей чувствительностью к перекисному стрессу ретикулоцитарных форм. Наличие прямой корреляционной связи (г = 0,52) уровнем мочевой кислоты и ЛФПП подтверждает интенсификацию процессов ПОЛ в результате усиления катаболизма пуринов, однако эта взаимосвязь осуществляется в пределах низкого содержания ЛФПП в эритроцитах периферической крови. Образующиеся в результате интенсивного катаболизма пуринов свободные формы кислорода повреждают молекулу СОД - первого фермента АОЗ. Это приводит к снижению активности данного энзима в эритроцитах у пяти из семи детей. Была обнаружена сильная обратная корреляционная связь между уровнем этого показателя и концентрацией мочевой кислоты в крови (г = - 0,73). Активность каталазы была также снижена у пяти детей и повышена у двоих. Таким образом, при ДН III метаболические расстройства более выражены, чем при ДН I - II.
У умерших детей (п = 3) в разгар болезни отмечалось увеличение в плазме концентрации урата на 205 -279% по сравнению со здоровыми детьми, ФСМ на 102 -287%. Наряду с этим, у умерших наблюдалось снижение содержания ЛФПП на 47,4%, 36,1%, 45,9%, активности СОД на 39,0%, 28,1%, 7,79% и каталазы на 25,0%, 41,2%, 30,6% по сравнению с контрольной группой. Неуклонный рост концентрации мочевой кислоты в сочетании с падением уровня ЛФПП в эритроцитах периферической крови при нарастании тяжести ДН позволили считать производный показатель МК/ЛФПП биохимическим маркером тяжести метаболических расстройств в целом (табл. 2).
Таблица 2.
Уровень показателя МК/ЛФПП в зависимости
Ни у одного из выздоровевших детей, даже при самых тяжелых дыхательных расстройствах и токсикозе, этот показатель не достигал и, тем более, не превышал цифры такового у умерших. Из этого следует, что увеличение предложенного производного показателя более 130 является прогностически неблагоприятным критерием в плане исхода болезни.
Нами апробирована возможность коррекции метаболических расстройств при тяжелой пневмонии у детей метронидазолом. Этот препарат назначают, в основном, как этиотропное средство. Возможность его использования как ингибитора ксантиноксидазы в клинико-биохимическом аспекте не изучена. Препарат назначался 32 детям с ДН II - III, не достигшим 12 лет, в дозе 7,5 мг/кг внутривенно медленно (5 мл/мин) каждые 8 часов в течение 7-10 дней, детям старше 12 лет - 500 мг (100 мл) в том же режиме. При пневмонии с ДН I метро-нидазол не назначался. Клиническая эффективность препарата оценивалась по длительности одышки, лихорадки, локальной симптоматики в легких с использованием критерия Вилкоксона-Манна-Уитни (4). При традиционном лечении эти показатели составили в среднем 8, 11, 15 дней соответственно, а в группе детей, получавших метронидазол - 6, 11, 15. У больных, получавших метронидазол были менее продолжительными период одышки и время нахождения в отделении реанимации (р < 0,05).
Уровень ЛФПП у детей, лечившихся метронидазолом, не отличался достоверно от этого показателя в контрольной фуппе уже на втором этапе исследования -при клиническом улучшении. У детей, получавших традиционную терапию, содержание ЛФПП в эритроцитах оставалось повышенным не только в разгар пневмонии на 55,4% (р < 0,01), но и при улучшении состояния на 38,7% (р < 0,05), а также перед выпиской на 61,8% (р < 0,01) по сравнению с контролем. Вышеизложенное свидетельствует об ингибировании процессов липоперок-сидации метронидазолом. Однако концентрация мочевой кислоты в плазме не зависела от вида терапии и была достоверно выше в обеих группах относительно здоровых детей. Из этого следует, что катаболизм пуринов усилен как у пациентов, лечившихся традиционно, так и у получавших метронидазол.
По-видимому, опосредованный гипоксией распад пуринов до мочевой кислоты в условиях ингибирования ксантиноксидазы метронидазолом происходит по другому пути, катализируемому ксантиндегидрогеназой. Последняя, по сравнению с ксантиноксидазой, не обладает способностью генерировать активные формы кислорода. Этим можно объяснить подавление процессов липо-пероксидации метронидазолом, несмотря на сохраняющийся высокий уровень урата в плазме.
Установленные закономерности подтверждают экспериментальные данные о провоцирующем влиянии усиленного катаболизма пуринов вследствие гипоксии на липопероксидацию мембранных структур. Это вносит существенный вклад в понимание патогенеза пневмонии у детей.
Уровень мочевой кислоты служит объективным критерием выраженности метаболических расстройств при пневмонии. Для объективизации оценки тяжести заболевания и прогнозирования его исхода при ДН II и ДН III рекомендуется рассчитывать коэффициент МК/ЛФПП.
Использование метронидазола при пневмонии с ДН II и ДН III позволяет сократить период клинических проявлений ДН и снизить уровень липопероксидации мембранных структур.
Литература
1. Андреева Л.И. Тяжелое течение острых пневмоний // 7-й Национальный конгресс по болезням органов дыхания: Сборник резюме. - М., 1997. - С. 264.
2. Баранов A.A. Состояние здоровья детей и задачи Союза педиатров России // Педиатрия. -1995. - № 4. - С. 7-14.
от степени ДН и исхода пневмонии
Показатель МК/ЛФПП Выздоровление Летальный исход
ДН1 ДН II ДН III ДН III
Средний 13,1±1,7 29,0±2,6 58,5±17 135±4
Минимальный 2,5 15,8 28,8 131
Максимальный 37,8 123 86,5 138
3. Габриелян H.H., Коновалов Г.А., Дмитриев A.A. и др. Прогностическое значение некоторых лабораторных показателей у больных с острой почечной недостаточностью // Анестезиология и реаниматология. - 1983. -№ 1. - С. 48 - 50.
4. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. - Л., 1978. -296 с.
5. Конвай В.Д. Нарушение пуринового обмена в печени в постреанимационном периоде и его профилактика. Дисс.... доктора мед. наук. - Омск, 1988. - 426 с.
6. Конвай В.Д., Лукошкин A.B. Патогенез, профилактика и лечение постреанимационной болезни II Труды XVII научно-практической конференции ЦНИЛ. - Омск, 1988.-С.31 -34.
7. Мерков A.M., Поляков Л.Е. Санитарная статистика. -Л., 1974.-384с.
8. Пневмонии Ю.Е.Вельтищева.
С.Ю.Каганова,
12. Fletcher B.L., Dillard C.J., Tappel H.L. Measurement of fluoresent lipid peroxidation products in biological systems tissues II Anal. Biochem. - 1973. - V. 52, № 1. - P. 1-9.
13. Folch J., Lees M., Stonesstaenly J.M. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues II J. Biol. Chem. - 1957. - V. 226, № 2. - P. 497 - 509.
14. Otetea G., Menguica M., Costescu R. Dozarea spectrofotometrica a acidullii uric in serul sangium absortie spesifica la 290 mm // Timisoara Med. -1976. - V. 21, № 21. - P. 90 - 94.
15. Plazer Z. Lipoperoxidation Systeme in biologischen Material. 2 mitt. Bestimung der Lipoperoxidation in Saugetierorganismus // Nahrung. -1968. - Bd. 12., № 6. - S. 679 - 684.
28.03.99 r.
МЕЩЕРЯКОВ Виталий Витальевич - кандидат медицинских наук, доцент кафедры детских болезней N9 1 Омской государственной медицинской академии.
САЧКОВА Александра Геннадьевна - аспирант кафедры детских болезней № 1 Омской государственной медицинской академии.
КРИВЦОВА Людмила Алексеевна - доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой детсхих болезней № 1 Омской государственной медицинской академии.
КОНВАЙ Владимир Дмитриевич - доктор медицинских наук, професор, зав. биохимическим отделом ЦНИЛ Омской государственной медицинской академии.
у детей / Под ред. М„ 1995.-304 с.
9. Редькин Ю.В., Лобов В.В., Мирошник O.A., Соколова Т.Ф. Типовые изменения эритрона при терминальных и постреанимационных состояниях // Анестезиология и реаниматология. -1990. - № 6. - С. 36 - 40.
10. Чумакова В.Н., Осинская Л.Ф. Количественный метод определения активности цинк-, медьзависимой супероксиддисмутазы в биологическом материале // Вопросы медицинской химии. - 1977. - Т. 23, № 5. - С. 712 -716.
11. Bragdon J.H. Colometric determination of blood lipids // J. biol. chem. -1951. - V.190, № 2. - P. 513 - 517.
УДК 616.61 +616.379-008.64
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПОЧЕК У КРЫС С АЛЛОКСАНОВЫМ ДИАБЕТОМ
С. А. Казаков
В статье рассмотрены некоторые функциональные почечные показатели у крыс с аллоксаноеой моделью диабета. На 2-3 сутки от индуцирования диабет проявился гипергликемией, глюкозурией, кетонурией, увеличением содержания в крови хреатинина, мочевины. По росту активности альфа-амилазы и гамма-глутамилтрансферазы в крови обнаружено повреждение клеток поджелудочной железы и печени. Снижение концентрационных индексов креатинина, мочевины, экскретируемой фракции мочевины при увеличении экскретируемой фракции воды, характеризовали функцию почек у крью с диабетом. Эти данные позволяют использовать солевые растворы в комплексном лечении гипергликемии при диабете.
коз в эксикаторе, и по исчезновении роговичного рефлекса проводилась декапитация. Кровь собиралась в гепаринизированную пробирку и центрифугировалась в течение 10 минут при 3000 оборотах в минуту. Надоса-дочная жидкость собиралась в такую же пробирку. Биологические жидкости не замораживались и исследовались в течение рабочего дня. Материал от контрольных особей получен по аналогичной методике.
Определение биохимических показателей проведено с помощью наборов фирмы "HUMAN", Германия, на анализаторе "Humalazer 2000". Креатинин определялся кинетически колориметрически без депротеинизации с помощью раствора пикриновой кислоты. Содержание глюкозы установлено с помощью гпюкозооксидазной-пероксидазной методики без депротеинизации. Содержание мочевины изучено кинетически при прибавлении к пробам уреазной-глутаматдегидрогеназной смеси с содержанием соответствующего количества альфа-кетоглутарата в фосфатном буфере. Альфа-амилазная [ЕС 3.2.1.1] активность изучена кинетически с использованием субстрата 2-хлор-4-нитрофенилмальтотриозида.
Активность гамма-глутамилтрансферазы [ЕС 3.3.2.2] определялась по катализированию реакции между гам-ма-глутамил-З-карбокси-4-нитроанилидом и глицилгли-цином. В качестве стандартов использованы фирмен-
Современная функциональная нефрология - это бы-строразвивающаяся отрасль медицинских знаний. Результаты нефрологических исследований имеют широкое применение в фармакологии, экспериментальной и клинической медицине [1,2]. Данное исследование проведено для выяснения влияния аллоксановой модели диабета у крыс на нарушение функции почек.
Исследование проведено на базе ЦНИЛ Омской медицинской академии. Самцы беспородной белой крысы содержались в условиях вивария, в клетках по 2-3 особи, и получали стандартный сухой корм и овощи. После взвешивания и маркировки они были введены в эксперимент подкожной инъекцией 5%-го раствора аллоксана в дозе 160 мг/кг веса фирмы "Хемапол", Чехословакия, на физиологическом растворе, в область шеи [3]. Поскольку животные реагировали на введение препарата, то перед введением они погружались в неглубокий сон в парах эфира в эксикаторе. После введения препарата животные содержались в условиях, аналогичных контрольным особям.
Животные были забиты на 2-3 сутки от введения аллоксана. Они были взвешены на весах и при этом спонтанно мочились. Моча собиралась с полиэтиленового пакета дозатором в разовую пробирку типа "Эппен-дорф". Животные погружались в глубокий эфирныи нар-
