CC BY
22
активность протеасом и их субъединичный состав при опухолевых заболеваниях желудочно-кишечного тракта
К.В. ХВОРИЛОВА, Э.В. ИВАНОВА, Л.В. СПИРИНА, А.В. АВГУСТИНОВИЧ
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск
Актуальность. Деградация белков в клетке, которую осуществляют протеасомы, играет важную роль в процессе развития злокачественных новообразований. Однако не известно влияние гистологического типа опухоли на состояние протеасомной системы при опухолевых заболеваниях желудочно-кишечного тракта.
Цель исследования. Изучить активность и субъединичный состав протеасом в опухолях желудочно-кишечного тракта в зависимости от их гистологического строения.
Материал и методы. В исследование были включены 16 пациентов с морфологически верифицированным диагнозом рак желудка (средний возраст - 60,4 ± 7,5 года) и 15 больных колоректальным раком (средний возраст - 58,0 ± 11,9 года), проходивших комбинированное лечение в НИИ онкологии СО РАМН. Материалом исследования являлась опухолевая ткань и визуально не измененная ткань, находящаяся на расстоянии не менее 2 см от границы опухолей. Тотальная активность протеасом определялась по гидролизу флуорогенного олигопептида Suc-LLVY-AMC. Разделение протеасом на пулы проводилось методом фракционирования в два этапа: добавлением сульфата аммония до 40 % насыщения (26S-протеасом), до 70 % насыщения ^OS-протеасом). Субъединичный состав протеасом исследовали методом Вестерн блот-тинга. Плотность полос определяли с помощью стандартной компьютерной программы Image J. Результаты выражали в процентах от содержания субъединиц протеасом в неизмененной ткани. Статистическую обработку осуществляли с помощью пакета прикладных программ SPSS Statistics 17.0.
Результаты. Выявлено, что тотальная активность протеасом в ткани рака желудка достоверно выше в 2,3 раза по сравнению с визуально не измененной тканью. Активность 26S и 20S протеасом в ткани опухоли желудка имела тенденцию к повышению по сравнению с таковой в нормальной ткани. Экпрессия а1а2а3а5а6а7 субъединиц протеасом была снижена в опухоли до 75,6 ± 12,7 % по сравнению с неизмененной тканью. Содержание иммунных субъединиц протеасом LMP7, LMP2 и PA28P повышалось в опухоли на 131,5, 71,5 и 51,4% соответственно. В ходе исследования связи субъединичного состава протеасом с клинико-морфологическими параметрами рака желудка выявлено, что экспрессия а1а2а3а5а6а7 и LMP 7 субъединиц протеасом связана с наличием метастазов в регионарные лимфатические узлы (R=-0496, р=0,05; R=-514 р=0,041 соответственно). Тотальная активность протеасом в ткани рака кишечника была в 1,9 раза выше, чем в неизмененной ткани, а активность 26S и 20S пулов выше соответственно в 1,5 и 2,0 раза. Экспрессия а1а2а3а5а6а7 субъединиц протеасом была равна 62,6 ± 7,4 % по сравнению с неизмененной тканью. Содержание иммунных субъединиц протеасом LMP7, LMP2, PA28P достигало 233,4 ± 41,8; 197,5 ± 30,7 и 173,6 ± 30,6% соответственно. Выявлено, что размер опухоли кишечника связан с тотальной активностью про-теасом в неизмененной ткани (R=0,53, p=0,04).
Выводы. Показано, что состояние протеасом-ной системы связано с гистологическим типом опухоли желудочно-кишечного тракта. Выявлены связи активности протеасом и их субъеди-ничного состава с клинико-морфологическими параметрами заболевания.
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2011. Приложение № 1
