CC BY
21
вляют биосинтез ДНК и белка, как в нормальных, так и в опухолевых гепатоцитах. Интерес к изучению регуляторной роли липопротеинов и их белкового компонента в механизмах противоопухолевой защиты с каждым годом возрастает. Известно, что глюкокортикоиды относятся к индукторам апоптоза. В данном исследовании предполагалось усилить антипролиферативный эффект ЛПОНП добавлением глюкокортикоид-ного гормона кортизола.
Цель исследования. Изучение влияния липопротеинов очень низкой плотности при их совместном добавлении с кортизолом на процессы пролиферации в культуре опухолевых клеток.
Материал и методы. В работе использовались мыши линии A/Sn с асцитной НА-1
гепатомой (Институт цитологии и генетики СО РАН). Клетки перитонеального экссудата получали после вскрытия брюшной полости для последующего культивирования. Эксперимент проводился на 4 группах: чистый контроль (физиологический раствор), ЛПОНП, кортизол и ЛПОНП+кортизол. Липопротеины очень низкой плотности добавляли в объеме 0,2мл (концентрация белка 00 мкг/мл) на 1мл питательной среды. В контрольную группу добавляли 0,2 мл физиологического раствора.
Концентрация кортизола в 1 мл инкубационной среды была 10-6М. Биосинтез ДНК измеряли по включению 3Н-тимидина. Время инкубации составляло 1,5 ч.
Результаты. Выявлено, что добавление ЛПОНП совместно с кортизолом оказывает цитостатическое действие на рост и развитие НА-1 гепатомы, определяемое по включению 3Н-тимидина. Показано, что в группах ЛПОНП+кортизол происходит снижение скорости биосинтеза ДНК на 52 % по сравнению с контролем. В группах с инкубацией в присутствии одного гормона снижение составило 25-30 %. Аналогичный эффект наблюдался в группах с добавлением ЛПОНП без кортизола.
Выводы. Несмотря на то, что антипроли-феративный эффект наблюдался во всех трех опытных группах, наиболее выраженным он был в группе ЛПОНП+кортизол. Вероятно, это связано с образованием активной транспортной формы липопротеин-гормон. Возможно, данный комплекс проявляет свое действие по иному биохимическому пути, через рецептор-опосредованный механизм проникновения гормона в клетку, который, в свою очередь, является более эффективным.
АКТИВНОСТЬ И СУБЪЕДИНИЧНЫЙ СОСТАВ ПРОТЕАСОМ В гиперплазированном и неоплазированном ЭНДОМЕТРИИ
В.Д. КОВАЛЬ, Л.В. СПИРИНА, О.В. ЭАМКОВА
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск
Актуальность. Пролиферативные заболевания эндометрия являются одним из наиболее распространенных видов онкогинекологиче-ской патологии. Протеолитические системы могут играть важную роль в патогенезе новообразований, в связи с этим большой интерес представляет изучение «ракового деградома» - комплекса протеаз, экспрессируемых опухолью. Одной из наиболее значимых систем внутриклеточного протеолиза является про-теасомная система. Однако на сегодняшний день исследований, посвященных изучению протеасомной системы при новообразовани-
ях эндометрия, немного, и они проводятся, главным образом, на клеточных линиях и культурах.
Цель исследования - изучение активности протеасом в тканях гиперплазированного эндометрия (ГЭ), рака эндометрия (РЭ) и субъеди-ничного состава протеасом в тканях РЭ.
Материал и методы. Первую группу составили 49 больных с морфологически верифицированным диагнозом РЭ 1-11 стадии (средний возраст - 56,8 ± 1,5 года). Все больные РЭ получали лечение в соответствии с рекомендованным алгоритмом объемов диагностики
и лечения злокачественных новообразований, утвержденным приказом МЗ РФ, где на первом этапе проводилось оперативное лечение. Вторая группа состояла из 31 больной с ГЭ (средний возраст - 50,7 ± 1,5 года). Все больные с ГЭ получали либо гормональное, либо хирургическое органосохранное лечение. Материалом для исследования послужили послеоперационные или полученные путем биопсии при проведении гистероскопического исследования образцы тканей малигнизированного, неизмененного, гиперплазированного эндометрия. Визуально неизмененную ткань брали на расстоянии не менее 1 см от границы опухоли. Активность протеасом определяли в осветленных гомогенатах опухолевой, неизмененной и гиперпла-зированной ткани по гидролизу флуорогенного олигопептида Suc-LLVY-AMC и выражали в Ед/ мг белка. Разделение протесом на пулы (26S и 20S) проводили методом фракционирования с помощью сульфата аммония. Субъединичный состав изучали с помощью метода Вестерн-блоттинг с последующей хемилюминесцентной визуализацией. Содержание белка определяли по методу Лоури.
Результаты. Анализ активности протеасом в группах больных с ГЭ и РЭ показал, что тотальная активность протеасом и активность
20$ пула при РЭ увеличивалась в 2,3 и 1,5 раза соответственно по сравнению с активностью ферментов при гиперплазии, в то время как для 26$ пула в обеих группах наблюдались одинаковые значения активности. Тотальная активность протеасом и активность пула 20$ также оказались выше в ткани опухоли по сравнению с неизмененной тканью (в 2,6 и 2,0 раза). Кроме того, в малигнизированном эндометрии активность пула 26$ также оказалась выше в 1,7 раза по сравнению с неизмененной тканью. Было установлено изменение субъединичного состава протеасом в ткани РЭ по сравнению с неизмененной тканью: экспрессия а1а2а3а5а6а7 составила 81,8 %, LMP7 - 146,4 %, LMP2 - 164,5%, РА28 - 125,5 %, ЯРТ6 - 133,7 % относительно неизмененной ткани.
Выводы. Показано повышение интенсивности протеасомзависимого протеолиза при РЭ, которое сопровождается изменением их молекулярного состава, где начинают преобладать иммунные субъединицы. При ГЭ наблюдается высокая активность 26$ протеасом, в то время как тотальная и 20$ активности ниже, чем при РЭ. Выявленный факт расширяет фундаментальные представления о патогенезе гиперпла-стических процессов и рака эндометрия.
ОПЫТ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ГАСТРОИНТЕСТИНАЛЬНЫМИ СТРОМАЛЬНЫМИ ОПУХОЛЯМИ
И.В. КОЛОБАЕВ, Л.А. ВАшАКМАДзЕ, В.М. ХОМЯКОВ
Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена
Актуальность. Г астроинтестинальные стро-мальные опухоли (ГИСО) являются наиболее распространенными мезенхимальными опухолями желудочно-кишечного тракта. Большинство мягкотканых образований, классифицируемых ранее как лейомиомы, шванномы, лейомиосар-комы и др., в настоящее время отнесены к ГИСО на основании результатов иммуногистохимиче-ского исследования. Увеличение числа больных с правильно поставленным диагнозом «ГИСО», с одной стороны, а также появление эффективных методов лечения - с другой, делают данную проблему весьма актуальной.
Цель исследования. Улучшить непосредственные и отдаленные результаты лечения больных с ГИСО.
Материал и методы. Изучен опыт лечения 30 больных ГИСО различных локализаций, наблюдавшихся в МНИОИ с 2005 по 2010 г. В 21 наблюдении определялось поражение желудка, в 5 - тонкой кишки, по 2 случая приходятся на прямую кишку и внеорганные локализации. По распространенности опухолевого процесса выделены две группы: локализованные формы (24 больных) и метастатические (6). Во всех случаях диагноз был подтвержден данными иммуноги-
