Макаров М. С., Ларин А. Г., Боровкова Н. В., Хватов В. Б.
ГБУЗ «НИИ скорой помощи имени Н. В. Склифосовского», Москва
АДГЕЗИВНАЯ АКТИВНОСТЬ ТРОМБОЦИТОВ В РАЗНЫХ ОТДЕЛАХ СОСУДИСТОГО РУСЛА ПАЦИЕНТОВ С ТРОМБОЗАМИ БЕДРЕННЫХ АРТЕРИЙ
Цель исследования. Провести морфофункциональный анализ адгезивной активности тромбоцитов из разных отделов сосудистого русла пациентов с тромбозами бедренных артерий.
Методы. Исследовали образцы артериальной, капиллярной и венозной крови, консервированной на CPD (1:7), у 10 доноров (контроль) и 10 пациентов с тромбозами бедренных артерий на фоне острой ишемии нижней конечности. Забор крови у пациентов проводили непосредственно перед процедурой ангиографии. Для анализа тромбоцитов использовали метод оценки морфофункционального статуса тромбоцитов (Патент № 2485502 от 20.06.2013), который основан на окрашивании тромбоцитов витальным флуо-рохромным красителем с последующей оценкой их морфофункциональных параметров с помощью флуоресцентного микроскопа. Анализируемые параметры включали: относительное содержание тромбоцитов с гранулами ^тр.гр.) (%); морфофункциональную активность тромбоцитов (МФАТ) (в баллах); адгезивную активность тромбоцитов на стекле (ААТ) (в баллах). Для запуска адгезии пробу с витально окрашенными тромбоцитами на предметном стекле экспонировали при 37 °С в течение 30 мин. В ходе адгезии тромбоцитов на стекле происходит распластывание этих клеток, постепенное смещение гранул к периферии тромбоцитов, связывание гранул с клеточной оболочкой и выброс гранул за пределы тромбоцитов (дегрануляция), сопровождающиеся формированием тромбоцитами многочисленных отростков. ААТ оценивали по доле тромбоцитов, достигших конечной стадии адгезии, через 30 минут экспозиции на стекле. Динамику адгезии и дегрануляции тромбоцитов крови пациентов оценивали с интервалом в 2-3 минуты.
Результаты. У обследованных доноров не выявлено значимых различий по относитель-
ному содержанию тромбоцитов с гранулами и МФАТ в разных отделах сосудистого русла. Такой же эффект отмечен и у пациентов с тромбозами бедренных артерий. Вместе с тем, у пациентов с тромбозами бедренных артерий значения Dтр.гр. и МФАТ были значительно повышены (р<0,01), составляя в среднем 81,2±2,0 % и 68,3±2,1 баллов, в то время как у доноров значения этих параметров составляли соответственно 57,1±7,8 % и 48,6±5,8 баллов.
У доноров динамика адгезии и дегрануляции тромбоцитов на стекле была одинаковой во всех отделах сосудистого русла. Дегрануляция всех тромбоцитов с гранулами в крови доноров наступала в среднем через 29,9±0,5 мин, при этом значение ААТ составило 55,7±6,5 баллов. В то же время у пациентов с тромбозами бедренных артерий в артериальной крови отмечена более высокая скорость адгезии тромбоцитов с гранулами — полная дегрануляция всех тромбоцитов с гранулами в артериальной крови указанных пациентов наступала через 20,5±0,5 мин. В капиллярной крови этих же пациентов полная дегрануляция всех тромбоцитов наступала через 30,0±0,8 мин, что сопоставимо с аналогичным показателем у доноров. Напротив, в венозной крови пациентов с тромбозами бедренных артерий скорость адгезии была сниженной, вследствие чего полная дегрануляция всех тромбоцитов с гранулами наступала через 36,5±2,5 мин (р<0,01). При этом значения ААТ в артериальной и капиллярной крови составили в среднем 80,5 баллов, в венозной крови — 74,5 баллов. Необходимо подчеркнуть, что в артериальной крови пациентов с тромбозами бедренных артерий отмечено повышенное содержание больших округлых клеток диаметром 4,5-5 мкм, содержавших 10-20 крупных гранул (“тромбоциты ранней стадии активации”). Доля таких клеток во всей популяции тромбоцитов с гра-
«ПАТОЛОГИЯ ГЕМОСТАЗА - ОБЩЕКЛИНИЧЕСКАЯ ПРОБЛЕМА» НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ___________________
нулами в артериальной крови обследованных пациентов составила в среднем 30,2±2,5 %, тогда как в капиллярной и венозной крови этих же пациентов, а также в крови доноров содержание тромбоцитов ранней стадии активации не превышало 15-16 процентов.
Заключение. У обследованных пациентов с тромбозами бедренных артерий морфофункциональные параметры витально окрашенных тромбоцитов были достоверно выше нормы.
При этом выявлено различие динамики адгезии тромбоцитов с гранулами в разных отделах сосудистого русла. Скорость адгезии и дегрануляции тромбоцитов в капиллярной крови была нормальной, в артериальной крови — повышенной, в венозной крови — сниженной. Увеличение скорости адгезии и дегрануляции тромбоцитов в артериальной крови может быть связано с повышенным содержанием клеток, находящихся на ранней стадии активации.
Нургалиева Д. Т., Бешимбаева Ж. И., Сенгирбаев Д. А.
Государственный медицинский университет;
Больница скорой медицинской помощи, г. Семей, Казахстан
СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА ПРИ АУТОИММУННОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИЧЕСКОЙ ПУРПУРЕ
Аутоиммунная тромбоцитопеническая пурпура взрослых относится к относительно часто встречающимся гематологическим заболеваниям. В гематологической практике в 40 % случаев аутоиммунная тромбоцитопеническая пурпура является причиной геморрагического синдрома.
Цель исследования. Совершенствование
методов диагностики больных аутоиммунной тромбоцитопенической пурпурой на основе изучения показателей гемостаза.
Материалы и методы. Подвергнуто обследованию 63 больных с аутоиммунной тромбоцито-пенической пурпурой (57,3 %). Возраст больных
находился в пределах от 22 до 50 лет. Средний возраст по группе составил 30,2±1,9 года, в том числе у больных с аутоиммунной тромбоцитопе-нической пурпурой — 31,8±1,6 года.
Осуществлялся полный анализ показателей плазменно-коагуляционного звена гемостаза, во многом зависящего от степени нарушений со-судисто-тромбоцитарного — с одной стороны, и определяющего течение и клиническую значимость тромбозов — с другой.
Результаты сравнительного исследования представлены в таблице.
Особенности состояния системы гемостаза у больных АИТП
Показатели Здоровые лица, п = 35 АИТП, п = 63
Число тромбоцитов, *109/л 275±13 27±6**
Фактор Виллебранда, % 79,6±3,0 124,3±4,7*
АПТВ, с 40,2±2,6 28,3±2,2*
Протромбиновое время, с 16,5±1,1 12,5±0,9*
РПДФ, мкг/мл 1,42±0,09 4,19±0,17**
РФМК, мкг/мл 32,8±1,4 65,9±3,5**
Фибринолиз, мин 4,4±0,2 6,6±0,3*
АТШ, % 95,2±4,6 78,8±5,1*
Примечание: * — различия со здоровыми лицами достоверны, p<0,05, ** — p<0,01,
Из данных, представленных в таблице, видно, что имелась четкая зависимость показателей системы гемостаза у обследованных от наличия аутоиммунной тромбоцитопенической пурпуры.
Так, число тромбоцитов у больных с обострением хронического течения аутоиммунной тромбоцитопенической пурпуры снижалось в среднем по группе более чем в 10 раз по срав-