CC BY
9Российская оториноларингология № 6 (55) 2011
УДК 616.323-007.61-036.12:575.191
АДДИТИВНЫЙ ВКЛАД ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ЗАМЕН ГЕНА ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ-а В ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К ХРОНИЧЕСКОМУ АДЕНОИДИТУ
Н. В. Терскова1, С. Г. Вахрушев1, Н. А. Шнайдер2, М. С. Пилюгина2 THE ADDITIVE CONTRIBUTION OF SINGLE NUCLEOTIDE REPLACEMENTS OF A TUMORS-а NECROSIS FACTOR GENE TO CHRONIC ADENOIDITIS PREDISPOSITION
N. V. Terskova1, S. G. Vakhrushev1, N. A. Shnayder2, M. S. Pilyugina2
ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого»
(1 Зав. каф. ЛОР-болезней с курсом постдипломного образования -проф. С. Г. Вахрушев)
2 Зав. каф. медицинской генетики и клинической нейрофизиологии Института постдипломного образования - проф. Н. А. Шнайдер)
Воспалительный процесс - важная патогенетическая характеристика хронического аде-ноидита (ХА). Авторы статьи высказывают гипотезу, что различные индивидуумы с воспалительным ответом на инициацию микробиологическими триггерами слизистой оболочки и лимфоидной ткани глоточной миндалины могут различаться персонифицированной адекватностью течения заболевания. В литературе уже описаны генетические полиморфизмы фактора некроза опухолей-а (TNF-a) при иных воспалительных заболеваниях, которые убедительно продемонстрировали взаимосвязь данных мутантных полиморфных вариантов гена TNF-a с клинической картиной (степенью тяжести, рецидивированием, затяжным течением) заболеваний. Понимание этого факта побуждает практикующих оториноларингологов шире подойти к изучению полиморфизма гена TNF-a с клинических позиций как к реальному инструменту персонализированной медицины - бурно развивающемуся современному направлению клинической генетики.
Ключевые слова: хронический аденоидит, ген, TNF-a, генетический полиморфизм, персонализированная медицина.
Библиография: 85 источников.
Inflammatory process is an important pathogenetic characteristic of chronic adenoiditis. The authors of the article put forward a hypothesis that various individuals with the inflammatory response to the influence of microbiological triggers on a mucous membrane and lymphoid tissue of pharyngeal tonsil can differ in terms of a personified adequacy of the course of the disease. Genetic polymorphisms of tumors-a necrosis factor (TNF-a) have already been described in medical literature and it has been convincingly shown that there is an interrelation between these mutant polymorph variants of TNF-a gene and the clinical picture (severity level, relapses, protracted course) of the disease. The understanding of this fact prompts practicing otorhinolaryngologists to take a wider approach to studying of the TNF-a gene polymorphism from the clinical positions and to see it as a real tool of the personalized medicine -a vigorously developing modern branch of clinical genetics.
Key words: chronic adenoiditis, gene, TNF
Bibliography: 85 sources.
В отношении эпидемиологии, этиологии и патогенеза ХА в последнее десятилетие найдено много очевидных и важных фактов. Однако проблема распространенности данного заболевания среди детей до сих пор не решена. Роль микрофлоры в инициации ХА безапелляционна, но отношения между патогенными агентами и иммунной системой являются взаимозависимыми [5]. Поэтому выраженность воспалительной реакции в значительной мере определяется возможностями макроорганизма противостоять воздействию на него патогенной микрофлоры. ^1423*
Иммунный надзор, защита от экзо- или эндогенных веществ, несущих признаки чужеродной информации, и поддержание гомеостаза - основные эволюционные функции иммунной системы [20]. Гомеостаз выражается в относительном постоянстве химического состава, осмотическом давлении, устойчивости основных физиологических функций. Гомеостаз специфичен и обусловлен генотипом. Генетический механизм гомеостаза - самовоспроизведение, основанное на редупликации дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) по принципу комплементарности. В случае нарушения структуры молекул ДНК восстановление генома, исправление повреждения осуществляются посредством репарации. При нарушении репарации происходит нарушение гомеостатических реакций. Таким образом, взаимодействие генетических и средовых компонентов, к числу которых относится влияние патогена, определяют различные формы генетического напряжения. С этой точки зрения необходимы специальные исследования по изучению роли и доли генетических детерминант в фенотипической изменчивости признаков воспалительных заболеваний, в частности ХА. Авторы настоящей статьи предлагают оригинальный взгляд на вышеуказанную проблему.
С точки зрения медицинской генетики все заболевания человека условно подразделяются на три основных типа: моногенные, хромосомные и полигенные (мультифакториальные) болезни. Моногенные болезни вызываются мутациями в одном гене в ядерной ДНК (в аутосоме или половой хромосоме) либо в митохондриальной ДНК (так называемая цитоплазмен-ная наследственность). Независимо от того, являются ли мутации генов доминантными или рецессивными, они проявляют характерные паттерны наследования. Хромосомные болезни включают аномалии числа хромосом (геномные мутации), повреждение одной или нескольких хромосом (хромосомные абберации): транслокации, дупликации, инверсии, делеции и др. До недавнего времени полигенные болезни не рассматривались как генетические заболевания, так как для них не наблюдается характерного менделевского типа наследования, а выраженность болезни во многом зависит от дополнительного воздействия внешнесредовых факторов (образа жизни больного, питания, климатических условий проживания и др.). Поэтому данный класс наследственных болезней чаще называется мультифакториальными заболеваниями (МФЗ). Даже когда генетический компонент МФЗ признается, многое в их патогенезе остается недостаточно изученным до сих пор. МФЗ - это результат не одиночной мутации в одном гене, а небольших изменений в ряде генов (так называемых точковых мутаций, полиморфных аллельных вариантов гена), которые в совокупности с воздействием внешнесредовых факторов определяют предрасположенность индивидуума к серьезному дефекту - тому или иному заболеванию.
Темп накопления геномной информации диктует сегодня научно обоснованную необходимость критического отношения к важным концептуальным изменениям в области оториноларингологии, в частности рассмотрения ХА как полигенного (мультифакториального) заболевания. Фундаментальный принцип эпидемиологии состоит в том, что макроорганизмы, характеризующиеся чувствительностью к микробным патогенам при ХА, должны обладать рядом определенных признаков, отличающих их от тех макроорганизмов, которые устойчивы к заболеванию. Эти признаки определяются типированием и могут быть фенотипическими и генотипическими. Как правило, фенотипические признаки определяются с помощью клинических, биохимических, иммунологических методов. Определение генетических признаков в настоящее время осуществляется методами идентификации ДНК-полиморфизмов у различных индивидуумов. Неродственные индивидуумы при развитии гнойно-воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей используют очень сходные механизмы защиты от проникновения микроорганизмов. Существует значительная белковая гомология для каждого типа детерминант патогенности, позволяющая предположить, что возможен горизонтальный перенос генов «устойчивости», в том числе и при ХА [16, 18, 19].
В перспективе изучения вопроса генетической устойчивости организма-хозяина к инфекции при ХА мы проявляем определенную осторожность, поскольку многие из предполагаемых полиморфных генов могут не оказаться впоследствии клинически значимыми. Несмотря на это, сравнительная медицинская генетика может быть использована для узнавания детерминант в геноме персонифицированного макроорганизма, поскольку является более тонким и
Российская оториноларингология № 6 (55) 2011
достоверным методом идентификации в сравнении с биохимической характеристикой (метаболическими профилями). Более того, традиционный путь антибактериальной терапии ХА, являющийся, между прочим, ликвидным в результате генетического скрининга природных изолятов микробов при гнойно-воспалительных заболеваниях, уступает предпочтительному в настоящее время подходу - идентификации новых клеточных мишеней и скринингу химических библиотек в поисках веществ с ингибиторными свойствами. Примером может являться ДНК-вакцинация - метод генной медицины, где вакцинируемым вводится ДНК, а не антиген (убитый или аттенуированный патоген или белковая субъединица). Это не приводит к иммунному ответу на молекулы ДНК, но если белок экспрессируется, то образуется белок, который может стимулировать выработку иммунной системой соответствующих антител [14]. Таким образом, лечение или предупреждение гнойно-воспалительных болезней верхних дыхательных путей, в том числе ХА, которые получили «статус» хронических инфекций, осуществляется персонализированно путем активации иммунной системы индивидуума в конкретной клинической ситуации. Эффективная вакцина против патогена обеспечит толерантность макроорганизма независимо от наличия у бактерии устойчивости к антибиотикам, и это демонстрирует преимущества предупреждения болезни по сравнению с ее лечением.
Многочисленными зарубежными и отечественными исследованиями, проводившимися за последние 20 лет, было убедительно показано, что в основе ХА лежат нарушения в функционировании иммунной системы [40]. Хорошо известно, что иммунная система включает в себя большое количество звеньев. Генетически детерминированными являются цитокины, характеризующиеся выраженными межиндивидуальными и популяционными различиями в уровне концентрации, благодаря наличию в структуре их генов функционально неравноценных полиморфных аллельных вариантов [23]. Одним из центральных регуляторов естественного ответа при ХА является провоспалительный цитокин TNF-a, участвующий в неспецифической защите организма от бактериальных и вирусных инфекций, включая пролиферацию, апоптоз, активацию иммунных клеток, воспаление [40]. Белок TNF-a состоит из 157 аминокислот. Основной мишенью его являются клетки-фагоциты - макрофаги и гранулоциты. Ранняя биологическая активность TNF-a (или цитокина «первого поколения») индуцируется антигенной стимуляцией, усиливается цитокинами «второго поколения» - интерлейкином-2, интрефероном-у, что позволяет амплифицировать иммунный ответ [17, 40]. TNF-a, индуцируя экспрессию множества цитокинов и собственную активность (по типу «порочного круга»), имеет важное значение для привлечения разных лейкоцитарных популяций в реактивный участок ткани. Кроме того, TNF-a стимулирует активацию цитотоксической субпопуляции Т-лимфоцитов - кластер дифференциации 8 (CD8) Т-киллеров, которые обуславливают апоптоз клеток-мишений [5]. Однако, когда происходят чрезмерная экспрессия TNF-a, а также нарушения регуляции каскада реакций, последствия этого могут иметь прогрессивно негативный характер для организма. Например, подобное осложнение возникает при быстро развивающейся инфекции, декомпенсации функций многих органов, синдроме дыхательной недостаточности [6]. При многих этих патологических состояниях цитокиновые сети между клетками накладываются на коммуникации органа с органом и нарушают их нормальное взаимодействие. В этой ситуации важным сопутствующим фактором является взаимосвязанная совокупность органов, состоящая из кишечника, печени и легких. Этот путь, вероятно, имеет значение в генерации циркулирующих уровней TNF-a вследствие перемещения бактерий или их продуктов жизнедеятельности через измененный эпителий кишечника, что ведет к выделению TNF-a из моноцитов крови и тканевых макрофагов разных органов. Следствием этих взаимодействий являются полиор-ганная дисфункция и воспаление легких, которые наиболее уязвимы в этой ситуации в связи с их дистальной локализацией. Кроме того, легкие являются реципиентами для множества продуктов активации, «спускающихся вниз» по дыхательным путям. В аспекте патогенетической роли TNF-a при персистенции глоточной миндалины при ХА у детей данный цитокин можно не только рассматривать как маркер тяжести течения заболевания, но и считать его стимулом для фибропластического процесса в ее ткани.
Результаты исследований последних лет показали, что процесс экспрессии TNF-a контролируется внутриклеточными репрессорными протеинами. Обнаружено, что для соответству-
ющей регуляции экспрессии TNF-a необходим протеиновый синтез с участием матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК), который контролируется через элементы в нетранслируе-мом регионе генома клетки, представляющий собой определенную последовательность аминокислот и, как оказалось, играющий ключевую роль в управлении ускоренной деградации специфических мРНК [6]. В настоящее время активно изучается возможность терапевтического использования эндогенных цитокинных ингибиторов TNF-a для лечения острых воспалительных заболеваний и обострений хронических. Более того, димерная растворимая конструкция рецептора, созданная слиянием рецептора TNF-a с константной частью фрагмент кристаллизующегося (Fc - fragment crystallable, англ.) иммуноглобулина G, определена как потенциальный терапевтический агент. Эта конструкция обладает более высоким аффинитетом и намного лучше угнетает активность TNF-a, чем мономерный рецептор к TNF-a. Поэтому для процесса воспаления при ХА с запуском экспрессии важным является изучение однонуклеотидных полиморфизмов - ОНП (или SNPs - single nucleotide polymorphisms, англ.) гена TNF-a. Этот вывод созвучен выводам ряда исследователей [23, 47].
На данном этапе интегрального развития отраслей медицины мы понимаем, что пока рано думать о влиянии впервые описанных в последние годы ОНП на клиническую терапевтическую практику ХА, но одно из возможных приложений имеющихся генетических знаний - это более адекватный (персонализированный) подбор лекарств, соответствующих проявлениям болезни, изменение подхода к апробации новых лекарств на стадии клинических испытаний. Несомненно, что уже сегодня исследование молекулярной природы генетической предрасположенности индивидуума может стать эффективным инструментом диагностики, профилактических мероприятий, лечения и диспансерного наблюдения детей, страдающих ХА.
Таким образом, разрешение проблемы в рамках выдвинутой гипотезы о влиянии полиморфизмов гена TNF-a на развитие и вектор течения ХА у детей предполагало решение двух стратегических задач. Нашей первой (технической) задачей изучения генетических детерминант при ХА явился анализ вариабельности ОНП гена TNF-a. Систематизация сведений об ОНП при данном заболевании согласуется с задачами проекта «Геном человека» (HGP - human genome project, англ.), запущенного в 1990 г. [62, 83]. Второй (прикладной) задачей явилось создание информационной базы данных для последующего создания банка биообразцов и генетического материала (ДНК) больных ХА детей и здоровых доноров региона Красноярского края.
Методологической основой исследования являлись следующие теоретические положения и подходы, позволяющие решить поставленные задачи:
1) исторические и философские идеи теории гомеостаза и адаптации, реализованные в опыте интегрированных школ П. К. Анохина, К. В. Судакова, В. В. Парина, Ф. З. Меерсона, Н. А. Онищенко, Д. С. Саркисова, Е. И. Чазова, Н. А. Агаджанян, К. Бернара, В. Кеннона [2, 3, 11].
2) концепции медицинской генетики Н. И. Вавилова, С. Н. Давиденкова, Ф. Х. К. Крика, Дж. Д. Уотсона, Р. Фишера, Дж. Б. С. Холдейна, С. Райта, Дж. У. Бидла, Э. Л. Тейтема, П. Эберсолда, Б. Ф. Граветта, Г. Меллера, К. Картера, Ф. Фогеля, А. Мотульски [22, 38, 43, 68, 69];
3) подходы к генодиагностике Н. Сакки, К. Б. Мюллиса, Ф. А. Фалуна, Т. Тущла, А. Боркхардта, Р. М. Тваймена, С. Б. Примроуза [56, 80, 81];
4) этические и юридические аспекты, а также принципы основных направлений медикогенетических исследований, связанных с гуманизацией научного процесса, учетом интересов личности и культурных потребностей отдельных народов мира и регионов России, сформулированные экспертами ЮНЕСКО («Всеобщая декларация о геноме человека и о правах человека», 1997) и Всемирной организацией здравоохранения по генетике человека (Genomics and World Health, WHO, 2002) [41, 57, 72];
5) положения, раскрывающие общие вопросы методологии медицинской науки, науковедения и понятийного аппарата медицинской генетики И. Ф. Жимулева, Е. Грин, Л. МакКлэйна [8, 46, 62, 83, 84].
Для проверки выдвинутой гипотезы и решения поставленных задач использовались следующие методы:
Российская оториноларингология № 6 (55) 2011
1) методы теоретического исследования: изучение и анализ специальной естественнонаучной и методической литературы в целях выявления различных точек зрения на изучаемую проблему; выявление основных положений для подтверждения гипотезы;
2) методы теоретического анализа: сравнение, сопоставление, анализ предмета исследования, обобщение результатов исследования.
Нами проведен критический обзор зарубежной и отечественной литературы по изучению вклада ОНП гена TNF-a, определяющих предрасположенность к ХА и влияющих на тяжесть заболевания, с учетом этнической предрасположенности. Информационный поиск проводили в базе данных Stanford с глубиной 15 лет, включая оригинальные статьи и литературные обзоры (сайт: http://highwire.standord.edu/lists/freeart.dtl). Стратегия заключалась в методологии поиска по ключевым словам с включением рубрик тезауруса публикаций, касающихся клинических рандомизированных исследований. Дополнительный поиск был проведен по при-статейным спискам литературы, включая предшествующие текстовые обзоры литературы и материалы научных конференций.
Однако в отношении ХА мы не встретили интересующих нас статей. Тогда мы сконцентрировали свое внимание на анализе вариабельности ОНП гена TNF-a при, казалось бы, отдаленных друг от друга мультифакториальных воспалительных заболеваниях в ответ на триггеры окружающей среды, но имеющих сродство в тканях-мишенях инфекции, локализации внедрения - слизистой оболочке, общности патогенеза. В результате информационного поиска нами проанализировано 230 работ по изучению полиморфизмов гена TNF-a, в том числе 180 работ - англоязычные источники.
Констатировано, что ген TNF-a, секвенированный и клонированный в 1985 г., локализован в пределах III класса главного комплекса гистосовместимости HLA на коротком плече 6-й хромосомы в регионе 6р21.3 и состоит из четырех экзонов [49, 60, 65]. Последний экзон более чем на 80% кодирует протеин [49]. Размер гена TNF-a с промоторной областью составляет 3815 п. н. Известны более 30 полиморфных вариантов этого гена (ОНП, микросателлиты), но только около половины из них влияют на экспрессию TNF-a in vitro [37].
Согласно данным современной литературы обнаружены ассоциации между ОНП в гене TNF-a и предрасположенностью к развитию некоторых воспалительных болезней (например, хронического бронхита, в том числе обструктивного бронхита, фиброзирующего альвеолита, бронхиальной астмы, острого среднего отита и частых инфекций верхних дыхательных путей, хронического гиперпластического синусита и полипоза, локализованных агрессивных форм периодонтитов, сепсиса, язвы желудка и двенадцатиперстной кишки, гепатита С) [26, 30, 36, 44, 45, 48, 50, 54, 55, 58, 70, 71 73, 75-77, 79, 85], аутоиммунных болезней (таких как псориаз, ревматоидный артрит, болезнь Крона, системная красная волчанка и др.) [7, 29, 31, 34, 51], а также нефропатии [27], эндометриоза [36, 74].
В результате проведенного анализа нами найдены описания девяти ОНП гена TNF-a: 238 G/A, 308 G/A, 376 G/A, 478 G/A, 572 C/A, 857 C/T, 863 C/A, 1031 Т/С и 1371 A/G [1, 4, 7, 10, 21, 23-27, 29-36, 39, 44, 45, 48, 50, 51, 54, 55, 58, 59, 61, 63, 70, 73-79, 82, 85]. Поэтому мы сочли приемлемым проанализировать литературные данные о ранее картированных мутациях гена при вышеперечисленных заболеваниях в аспекте экстраполяции на ХА.
Для аналогии понимания генетического типирования и исключения преаналитических ошибок в анализируемых исследованиях мы отобрали те работы, где для определения ОНП авторами применялся метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени с использованием меченых флуоресцентными агентами олигонуклеотидных проб, комплиментарных участку ПЦР-продукта (технология TaqMan). В случае данной технологии генотипы определяются по наличию или отсутствию продукта амплификации при использовании двух ДНК-зондов (к двум аллелям исследуемого полиморфизма), каждый из которых содержит флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. Наличие того или иного полиморфизма определяется по наличию флуоресценции в амплифицированной смеси. По результатам ПЦР-реакции выявлялись три вида наследования полиморфных аллельных вариантов гена TNF-a: А/А (аденин/аденин) - гомозиготный мутантный генотип, G/A (гуанин/аденин) - гетерозиготный генотип по мутантному аллелю, G/G (гуанин/гуанин) - гомозиготный дикий генотип (вариант нормы).
Анализ проведенного нами обзора показал, что наиболее изученным является полиморфный локус 308 гена TNF-a [1, 4, 7, 10, 13, 21, 24-27, 29-31, 33-36, 42, 44, 45, 48, 50, 52, 54, 55, 58, 59, 61, 63, 66, 70-77, 79, 82, 85]. Можно предполагать, что ОНП с заменой гуанина (G) аденином (A) в полиморфном локусе 308 гена TNF-a неслучайно привлекает внимание ученых и является полиморфизмом-кандидатом, потенцирующим воспалительный ответ при указанных заболеваниях. Авторами подчеркивается важное клиническое значение аллельных вариантов указанного полиморфизма, носительство которых приводит к флюктуации концентрации TNF-a, т. е., что ОНП в ДНК-мотивах, связывающих факторы транскрипции (регуляторная область генов), может оказывать существенное влияние на транскрипционную активность этих генов и, следовательно, на уровень синтеза белковых продуктов. По данным ряда авторов, действительно, наибольшее влияние на транскрипцию гена TNF-a оказывают ОНП в позициях 308, а также 238, 376 [47].
При экспрессии гомозиготного и гетерозиготного генотипов по мутантному полиморфному аллелю 308 A/A и 308 G/A гена TNF-a синтезируется белок, отличающийся высокой ин-дуцибельностью. Носители этих аллелей примерно в 2,5 раза чаще заболевают бронхиальной астмой, нефропатией, чем индивидуумы, не имеющие этих мутаций [4, 27, 33, 55, 70, 75, 77]. Аналогичные данные позволяют сделать предположительный вывод, что аллель А* гена TNF-a может являться генетическим предиктором не только бронхиальной астмы, но и хронической обструктивной болезни легких и хронического бронхита. Расчетное значение соотношения шансов (OR - odds ratio, англ.) равно соответственно OR = 1,9 [95% ДИ: 1,1 - 3,2] (р < 0,03) и OR = 11,1 [95% ДИ: 2,89 - 42,57] (р < 0,001) [4, 48, 79]. Сопоставимые данные представлены при фиброзирующем альвеолите, когда прямое участие в патогенезе принимает генетически зависимый высокопродуцирующий гомозиготный и гетерозиготный варианты по мутантному аллелю 308 A/A и 308 G/A гена TNF-a, обуславливающий критический уровень провоспали-тельного протеина в ткани легких [50]. Следует подчеркнуть, что риск связан не с атопией, а с гиперреактивностью бронхов, которая также вносит свой вклад в манифестацию симптомов заболевания [28, 77]. При этом значимо влияние гаплотипов 252 G*/308 A* гена TNF-a, формирующих аддитивную модель совместного действия нескольких генов, детерминирующих подверженность бронхиальной астме [75, 77]. Кроме того, следует учитывать влияние этнической составляющей на ассоциацию аллели A* с предрасположенностью к данному заболеванию не в пользу монголоидов (азиатов).
В отношении хронического неспецифического воспалительного процесса высказано предположение, что гомозиготный и гетерозиготный генотипы по мутантному аллелю 308 A/A и 308 G/A гена TNF-a могут играть одну из ведущих патогенетических ролей в этиологии хронического гиперпластического синусита с полипами в полости носа, так как белок является ведущим цитокином в иммунитете слизистой оболочки. У 332 обследуемых европеоидов (179 пациентов с билатеральным полипозом и 153 здоровых взрослых) была проведена детекция полиморфизмов генов 14 цитокинов, но только в отношении мутантного аллеля А* гена TNF-a в двух исследуемых группах были установлены статистические различия - OR = 1,86 [95% ДИ: 1,14 - 3,09] (р < 0,01) [44].
Утверждение о функциональной уместности обсуждения полиморфизмов гена TNF-a в полиморфном локусе 308 в контексте сепсиса при менингококковой инфекции поддерживается высокой продукцией TNF-a в ответ на внедрение N. meningitidis при гомозиготном носитель-стве А/А (OR = 1,93 [95 % ДИ: 1,08 - 3,46] (р = 0,0034). Однако это не влияет на вероятность летального исхода после заражения [73, 82]. Среди основных сообщений о полиморфизмах гена TNF-a указывается, что гетерозиготный генотип по мутантному аллелю 308 G/A также коррелирует в 20-40% с повышением продукции белка TNF-a [23, 78]. Наиболее часто этот генотип ассоциирован с высокой восприимчивостью к инфекциям [23, 35, 42, 47, 66, 85].
Интерес представляет наблюдение K. Реваи и соавт. В 2008 г. исследователи курировали и обследовали 242 ребенка с частыми инфекциями верхних дыхательных путей, сочетанными с отитами, в течение от 6 до 12 месяцев. Результаты продемонстрировали, что у детей-носителей гомозиготного генотипа по мутантному полиморфному аллелю 308 A/A гена TNF-a - на 42% повышается риск развития острого среднего отита после острых респираторных вирусных ин-
Российская оториноларингология № 6 (55) 2011
фекций (ОРВИ) по сравнению с больными детьми, являющимися гомозиготными носителями дикого (нормального) полиморфного аллеля 308 G/G (OR = 1,43) [26]. При этом у детей установлен факт риска возникновения острого среднего отита как осложнения ОРВИ при семейной агрегации мутантного полиморфного аллеля А* гена TNF-a (локус 308) в отягощенных семьях за счет статистически значимого преобладания гомозиготного и гетерозиготного генотипов А/А и G/A у родителей. Распространенность полиморфных аллельных вариантов достигает 25% среди европейского населения. Аналогичный вывод о вкладе рассматриваемого полиморфизма в модуляцию тяжести ОРВИ в виде присоединения отита получены Дж. А. Пателом и соавт. в 2011 г. - OR = 1,6 [95% ДИ: 0,99-2,58] (р < 0,05) [30]. Авторами также акцентировано, что, во-первых, совместно с негативными факторами окружающей среды (загрязнение атмосферы, сигаретный дым) этот риск утрируется; во-вторых, среди расовых и этнических групп - европеоидов, негроидов и латиноамериканцев - статистически значимых различий в распространении полиморфных аллельных вариантов не показано (р > 0,33 для всех генотипов).
Диаметрально противоположные выводы делают Н. Л. Каганова и соавт. [7]. Исследователи, проанализировав ассоциацию полиморфного варианта 308 G/A гена TNF-a с развитием псориаза в выборках больных псориазом и здоровых доноров, показали, что гомозиготный генотип G/G полиморфного локуса 308 гена TNF-a является маркером повышенного риска развития псориаза - OR = 2,9 [95% ДИ: 1,299-6,0354] (р = 0,013). Возможно, что это специфическая особенность выборки русской этнической принадлежности.
Изучение распределения полиморфизмов ключевого гена гомеостатических систем -TNF-a в полиморфном локусе 308 - у долгожителей Тюменской и Новосибирской обл. и подростков Новосибирска с оценкой их влияния на индивидуальную продолжительность жизни как генов «прочности» при позитивной и «бренности» при негативной ассоциации явилось целью коллектива сибирских ученых [13]. Выявлено следующее распределение генотипов и аллелей: ТОТ-а: 308 А/А - 0; 3,6; 1,4%; 308 G/A - 39,1; 21,6; 23,2%; 308 G/G - 60,9; 74,5; 75,4%; 308 А-аллель - 19,6; 14,5; 13%; 308 G-аллель - 80,4; 85,5; 87% соответственно. Статистически значимые различия выявлены между группами долгожителей Тюменской и Новосибирской обл. в распределении гетерозиготного генотипа по мутантному полиморфному аллелю 308 G/А гена TNF-a (х2= 4,48; р = 0,0344), а также между долгожителями Новосибирской области и подростками Новосибирска в распределении генотипической комбинации TNF-a 308 (А/А+А^) (который встречается чаще у долгожителей - %2 = 4,18; р = 0,0408). Наблюдаемые различия в частотном распределении генотипа 308 G/А между долгожителями Сибири авторы объясняют возможными особенностями распространения инфекционных заболеваний в этом регионе. Таким образом, исследование контрастных возрастных групп констатировало генотипическую комбинацию «прочности» [TNF-a 308 (A/A+A/G)] и аллель «бренности» (аллель G* полиморфного локуса 308 гена TNF-a). Отсутствие значимых различий между контрастными возрастными группами отражает не «нейтральность» изучаемых генных полиморфизмов в отношении продолжительности жизни, а их плейотропный эффект.
Прогредиентное негативное влияние мутантного полиморфизма в локусе 308 гена TNF-a на характер местного воспаления при периодонтите изучено А. Сузуки и соавт. [71]. Изучение влияния ОНП в позиции 308 на уровень транскрипции гена TNF-a продемонстрировало противоречивые результаты. По данным одних исследователей, аллель А* гена TNF-a связана с более высоким уровнем транскрипционной активности гена, чем аллель G* [21, 61, 71]. По другим данным, полиморфный аллельный вариант -308 G/A не оказывал влияния на транскрипционную активность данного протеина [59, 63, 64]. Частота полиморфизмов значительно варьировала среди этнических групп. Так, в работе Н. Г. де Менезис и соавт. также предпринята попытка оценить влияние носительства аллельного полиморфного варианта на тяжесть течения хронического периодонтита и генерализованного агрессивного периодонтита в бразильской популяции [63]. В группах больных индивидуумов отмечалась высокая частота встречаемости аллели G* гена TNF-a. Однако ассоциативной взаимосвязи генотипов с предрасположенностью и течением заболевания подтверждено не было, поскольку эта частота была сопоставима с частотой встречаемости изучаемых генотипов в группе здоровых людей
(р > 0,05). Этой точки зрения придерживаются Д. Ф. Кинан и соавт., М. Эндо и соавт. [24, 25]. Возможно, что разница в выводах объясняется не только этнической и гендерной принадлежностью выборок, но и разницей в сопоставлении уровней сывороточного или местного белка TNF-a с генетическим полиморфизмом как отражение тяжести патологического процесса, который может изменяться в зависимости от экологических факторов (например, курения). Следовательно, при планировании исследования необходимо учитывать продукты экспрессии TNF-a в тканях. А. Фассманн и соавт. настоятельно рекомендуют исследование комбинации полиморфных генотипов TNF-a в различных локусах во взаимосвязи с хроническим периодонтитом [67]. Такие же противоречивые данные были получены М. Фольважным и соавт. [59], а позднее M. Донати и соавт. [32] при изучении влияния полиморфного аллельного варианта 308 G/A гена TNF-a.
В 2009 г. Н. Л. Кагановой и соавт. в промоторной области гена TNF-a идентифицирован новый полиморфный аллельный вариант 572 C/A у больных псориазом. Исследователи отметили, что у большинства индивидуумов, как у больных псориазом (98,9%), так и у здоровых доноров (98,0%), был идентифицирован гомозиготный генотип 572 A/A. Возможно, высокая частота этого генотипа характерна для выборки русской этнической принадлежности, но ассоциативной связи с предрасположенностью к заболеванию установлено не было [7]. Следует отметить, что полиморфные аллельные варианты 478 G/A и 1371 A/G, локализованные в первом и третьем интронах гена TNF-a соответственно, не приводят к фенотипическому полиморфизму заболевания, однако могут играть регуляторную роль. Установлено, что гомозиготный генотип 1371 G/G гена TNF-a является протективным в отношении риска развития псориаза - OR = 0,154 [95% ДИ: 0,0475-0,4977] (p = 0,0014) [7].
С математической точки зрения, подверженность или предрасположенность к какому-либо заболеванию (как кривая) распределена нормально и гауссово распределение имеет одну вершину (рис.) [12].
Подверженность обусловлена большим числом генов, действующих аддитивно, и каждый из них вносит собственный вклад. При повышении порога подверженности развивается болезнь. И хотя порог подверженности может быть четко определен, существует пороговая область, внутри которой от дополнительных средовых факторов будет зависеть, заболеет индивидуум или нет. Из этого следует, что индивидуум даже с необычайно высокой подверженностью к определенному заболеванию может не заболеть при благоприятных условиях среды, но возможна и обратная картина. Таким образом, особенностью ХА как полигенного заболевания является то, что только один генный локус не является ответственным за развитие болезни. Это результат аддитивного (суммарного) действия множества генных локусов и внешних факторов, что необходимо учитывать при планировании исследования. Относительная роль каждого генетического фактора и фактора окружающей среды различна в случае каждого заболевания [15].
Заключение. В настоящее время изучение полиморфизмов гена TNF-a при полигенных заболеваниях продолжается. Выявление продуктов экспрессии генов-кандидатов в тканях и органах больных тем или иным заболеванием с наследственной предрасположенностью, в том
Число индивидов
А Порог
Подверженность
Рис. Распределение здоровых и больных индивидуумов в зависимости от порога подверженности (по Г. Р. Мутовину, 2001 [12]).
Российская оториноларингология № 6 (55) 2011
числе и ХА, служит одним из доказательств правильной идентификации гена, участвующего в развитии патологического процесса. Констатировано, что бессимптомный клинический статус человека, обозначаемый также как условно нормальный, не является уже полностью здоровым, так как возникает ряд молекулярных различий между бессимптомным клиническим статусом и здоровым индивидуумом. Эти изменения отмечены Ци. Чжоу и соавт. согласно профилям глобальной генной экспрессии [53].
Изложенные нами данные ярко иллюстрируют возможность и необходимость разработки новой технологии, позволяющей улучшить существующие пути профилактики, диагностики и результаты лечения ХА. Популяционные и этнические особенности (различные генотипы коренного и пришлого населения, включая мигрантов) региона Красноярского края объясняют важность идентификации и изучения частот встречаемости мутантных полиморфных аллельных вариантов гена TNF-a в аспекте изучаемой ЛОР-патологии у детей в связи со сложными климатическими внешнесредовыми факторами (большая протяженность региона от Саян до Северного Ледовитого океана с преобладанием регионов с резко континентальным климатом и регионов Крайнего Севера). Запланированное нами исследование, проверяющее гипотезу об аддитивном вкладе однонуклеотидных замен в локусе 308 гена TNF-a в предрасположенность к ХА у детей Красноярского края (аналитическое исследование), позволит нам выявить и количественно оценить взаимосвязи между этими явлениями. Можно предполагать, что внедрение научно обоснованной медицинской персонализированной медицины при ХА имеет еще и экономический аспект. Поэтому наиболее эффективно направлять имеющиеся ресурсы на развитие методов максимально эффективной и максимально безопасной персонализированной профилактики.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анализ полиморфизма трех позиций промоторного региона гена TNF-альфа у пациентов с ишемической болезнью сердца, нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда / А. В. Шевченко [ и др.] // Кардиология. -2010. - Т. 50, № 2. - С. 9-14.
2. Анохин П. К. Идеи и факты в разработке теории функциональных систем // Психол. журн. - 1984. - Т. 5, № 2. -
С. 107-118.
3. Бернар К. Лекции по экспериментальной патологии (Lecons de pathologie experimental, 1971) [Электрон. ресурс] [Div-ZIP] / Пер. Д. Е. Жуковского; Ред., вступит. ст. и прим. Л. Н. Карлик // Классики биологии и медицины. - М.; Л.: Биомедгиз, 1937. - 588 с. - Электрон. дан. - Scan: AAW, Djvuing: mor, 2011. - Режим доступа: http://www.pubLlib.ru/ARCHIVES/B/BERNAR_Klod/_Bernar_K..html#01, свобод. - Загл. с экрана.
4. Бронхиальная астма и хроническая обструктивная болезнь легких, клинико-генетические аспекты диагностики / И. И. Черкашина [и др.] // Сибир. мед. обозрение. - 2010. - № 1. - С. 16-19.
5. Волков А. Г., Трофименко С. Л. Клинические проявления вторичного иммунодефицита при заболеваниях ЛОР-органов. - Ростов н/Д, 2008. - 208 с.
6. Гавришева Н. А., Антонова Т. В. Инфекционный процесс: клинические и патофизиологические аспекты: учеб. пособие. - СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2006. - 282 с.
7. Генетические аспекты псориаза / Н. Л. Каганова [и др.] // Вестн. дерматологии и венерологии. - 2009. - № 4. - С. 20-26.
8. Жимулев И. Ф. Общая и молекулярная генетика. - Новосибирск: Сибир. унив. изд-во, 2007. - 480 с.
9. Клаг У., Каммингс М. Основы генетики (мир биологии и медицины). - М.: Техносфера, 2009. - 896 с.
10. Клинико-генетические аспекты воспалительных заболеваний кишечника / Е. Ю. Валуйских [и др.] // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. - 2008. - Т. 18, № 6. - С. 68-74.
11. Меерсон Ф. З. Адаптационная медицина: концепция долговременной адаптации. - М.: Дело, 1993. - 138 с.
12. Мутовин Г. Р Основы клинической генетики. - М.: Высш. шк., 2001. - 234 с.
13. Поиск генов «прочности» и «бренности»: роль полиморфизма некоторых ключевых генов иммунологического гомеостаза в развитии патологий, сокращающих продолжительность жизни / В. А. Белявская [и др.] // Молекуляр. медицина: науч.-практ. журн. - 2005. - № 3 . - С. 55-60.
14. Примроуз С., Тваймен Р. Геномика. Роль в медицине. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2008. - 277 с.
15. Пузырев В. П. Генетика мультифакториальных заболеваний: между прошлым и будущим // Мед. генетика. -2003. - Т. 2, № 12. - С. 498-508.
16. Роль полиморфизма гена интерлейкина-1р в развитии воспаления глоточной миндалины / Н. В. Терскова [и др.] // Рос. оториноларингология. - 2010. - № 6. - С. 87-94.
17. Симбирцев А. С., Громова А. Ю. Функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул воспаления // Цитокины и воспаление. - 2005. - № 1. - С. 3-10.
18. Терскова Н. В., Вахрушев С. Г., Капустина Е. В. Молекулярно-генетические основы патогенеза хронического аденоидита как мультифакториального заболевания. Межрегиональная ЛОР-конференция, посвящ. 75-летию Новосибир. ГМУ и кафедры ЛОР-болезней: тез. докл. - Новосибирск, 2010. - С. 77-78.
19. Терскова Н. В., Вахрушев С. Г. / К вопросу этиопатогенеза хронического аденоидита. IX конгресс ринологов: тез. докл. - М.: Рос. общество ринологов, 2011. - С. 50.
20. Хаитов Р. М. Иммунология. М.: Медицина, 2002. - 324 с.
21. Abraham L. J., Kroeger K. M. Impact of the -308 TNF promoter polymorphism on the transcriptional regulation of the TNF gene: relevance to disease // J. Leuckol. Biol. - 1999. - Vol. 66, N 4. - P. 562-566.
22. Aebersold R., Gravatt B. F. Proteomics - advances, applications and the challenges that remain // Trends Biotechnol. -2002. - Vol. 20, suppl. 12. - S. 1-2.
23. Allen R.D. Polymorphism of the human TNF-alfa promoter - random variation or functional diversity? // Mol. Immunol. - 1999. - Vol. 36, N 15-16. - P. 1017-1027.
24. Analysis of genetic polymorphisms at the interleukin-10 and tumor necrosis factor loci in early-onset periodontitis / D. F. Kinane [et al.] // J. Periodontal. Res. - 1999. - Vol. 34. - P. 379-386.
25. Analysis of single nucleotide polymorphisms in the 5'-flanking region of tumor necrosis factor-alfa gene in Japanese patients with localized early-onset periodontitis / M. Endo [et al.] // J. Periodontol. - 2001. - Vol. 72. - P. 1554-1559.
26. Association between cytokine gene polymorphisms and risk for upper respiratory tract infection and acute otitis media / K. Revai [et al.] // Clin. Infect. Dis. - 2009. - Vol. 49, N 2. - P. 257-261.
27. Association between tumor necrosis factor-а G-308A polymorphism and risk of nephropathy in obese Chinese type 2 diabetic patients / Y. Wang [et al.] // Nephrol. Dial. Transplant. - 2005. - Vol. 20. - P. 2733-2738.
28. Association between - 308 tumour necrosis factor promoter polymorphism and bronchial hyperreactivity in asthma / T. C. Li Kam Wa [et al.] // Clin. Exp. Allergy. - 1999. - Vol. 29, N 9. - P. 1204-1208.
29. Association of cytokine gene polymorphisms with psoriasis in cases from the Nile Delta of Egypt / A. Settin [et al.] // Acta Dermatoven APA. - 2009. - Vol. 18, N 3. - P. 105-112.
30. Association of proinflammatory cytokine gene promoter polymorphisms with susceptibility to otitis media / J. A. Patel [et al.] // Pediatrics. - 2006. - Vol. 118, N 6. - P. 2273-2279.
31. Association of the tumor necrosis factor -308 variant with differential response to anti-TNF agents in the treatment of rheumatoid arthritis / J. R. Maxwell [et al.] // Human Molecular Genetics. - 2008. - Vol. 17, N 22. - P. 3532-3538.
32. Association of the -159 CD14 gene polymorphism and lack of association of the -308 TNF A and Q 551R IL-4RA polymorphisms with severe chronic periodontitis in Swedish Caucasians / M. Donati [et al.] // J. Clin. Periodontol. -2005. - Vol. 32, N 5. - P. 474-479.
33. Associations of tumor necrosis factor G-308A with childhood asthma and wheezing / Y.-F. Li [et al.] // Am J. Respir. Crit. Care Med. - 2006. - Vol. 173. - P. 970-976.
34. Association of TNF-а gene polymorphisms with systemic lupus erythematosus in Taiwanese patients / Y. J. Lin [et al.] // Lupus. - 2009. - Vol. 18. - P. 974-979.
35. Association of TNF2, a TNF-alpha promoter polymorphism, with septic shock susceptibility and mortality: a multicenter study / J. P. Mira [et al.] // JAMA. - 1999. - Vol. 282, N 6. - P. 561-568.
36. Association of tumor necrosis factor-а gene polymorphisms with advanced stage endometriosis / G. H. Lee [et al.] // Human Reproduction. - 2008. - Vol. 23, N 4. - P. 977-981.
37. Bidwell J., Keen L., Gallgher G. Cytokine gene polymorphism in human disease: on-line database» // Genes and Immunity. - 1999. - P. 3-19.
38. Coelho P.S.R., Kumar A., Snyder M. Genome-wide mutant collections: toolboxes for functional genomics // Curr. Opin. Micribiol. - 2000. - Vol. 3. - P. 309-315.
39. Cytokine gene polymorphism in human disease: on-line databases, Supplement 1 / J. Bidwell [et al.] // Genes and Immunity -2001. - Vol. 2. - P. 61-70.
40. Cytokines locally produced by lymphocytes removed from the hypertrophic nasopharyngeal and palatine tonsils / A. Komorowska [et al.] // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. - 2005. - Vol. 69. - P. 937-941.
41. Daley G. O. Prospects for stem cell therapeutics: myths and medicines // Curr. Opin. Genet. Dev. - 2002. - Vol. 12. -P. 607-613.
42. Evidence for cytokine mediation of disease expression in adults experimentally infected with influenza A virus /
D. P. Skoner [et al.] // J. Infect. Dis. - 1999. - Vol. 180, N 1. - P. 10-14.
43. Finlay R. B., Falkow S. Common themes in microbial pathogenicity revisited // Microbiol. MolBiol. Rev. - 1997. -Vol. 61. - P. 136-169.
44. Genetic polymorphisms in chronic hyperplastic sinusistis with nasal polyposis /J. M. Berstein [et al.] // Laryngoscope. -2009. - Vol. 119, N 7. - P. 1258-1264.
45. Genetic polymorphisms in immunoresponse genes TNFA, IL6, IL10, and TLR4 are associated with recurrent acute otitis media / M. Emonts [et al.] // Pediatrics. - 2007. - Vol. 120, N 4. - P. 814-823.
46. Green E. D. Strategies for the systematic sequencing of complex genomes // Nature Rev. Genet. - 2001. - Vol. 2. -
P. 573-583.
47. Hajeer A. H., Hutchinson I. V. TNF-alfa gene polymorphism: clinical and biological implications // Microsc. Res. Tech. - 2000. - Vol. 50, N 1. - P. 216-228.
48. Huang S. L., Su C.-H., Chang S.-C. Tumor necrosis factor-а gene polymorphisms in chronic bronchitis // Am J. Respir. Crit. Care Med. - 1997. - Vol. 156. - P. 1436-1439.
49. Human lymphotoxin and tumor necrosis factor genes: structure, homology and chromosomal localization / G. E. Nedwin [et al.] // Nucleic. Acids. Res. - 1985. - Vol. 13, N 17. -P. 6361-6373.
50. Increased risk of fibrosing alveolitis associated with interleukin-1 receptor antagonist and tumor necrosis factor-а
gene polymorphisms / M. Whyte [et al.] // Am J. Respir. Crit. Care Med. - 2000. - Vol. 162. - P. 755-758.
PoccuucKaa оториноnарингоnогиa № 6 (55) 2011
51. Inflammatory bowel disease: the role of inflammatory cytokine gene polymorphisms / J. Balding [et al.] // Mediators of Inflammation. - 2004. - Vol. 13, N 3. - P. 181-187.
52. Interleukin-1 and tumor necrosis factor-a gene polymorphisms in Turkish patients with localized aggressive periodontitis / E.Guseldemir [et al.] // J. of Oral Science. - 2008. - Vol. 50, N 2. - P. 151-159.
53. In vivo reprogramming of adult pancreatic exocrine cells to beta-cells / Q. Zhou [et al.] // Nature. - 2008. - Vol. 455, N 7213. - P. 627-632.
54. Joki-Erkkila V., Puhakka H., Hurme M. Cytokine gene polymorphism in recurrent acute otitis media // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. - 2002. - Vol. 28. - P. 17-20.
55. Kamali-Sarvestani E., Ghayomi M.A., Nekoee A. Association of TNF-a -308G/A and IL-4-589C/T gene promoter polymorphisms with asthma susceptibility in the south Iran // J. Investig. Allergol. Clin. Immunol. - 2007. - Vol. 17, N 6. - P. 361-366.
56. Karlin S. Detecting anomalous gene clusters and pathogenicity islands in diverse bacterial genomes // Trends Microbiol. - 2001. - Vol. 9. - P. 335-343.
57. Kay M. A., Glorioso J. C., Naldini L. Viral vectors for gene therapy: the art of turning infectious agents into vehicles of therapeutics // Nature Med. - 2001. - Vol. 7. - P. 33-40.
58. Knight J. Polymorphisms in tumor necrosis factor and other cytokines as risk for infectious diseases and the septic syndrome // Cur. Infect. Dis. Rep. - 2001. - Vol. 3. - P. 427-439.
59. Lack of association between the TNF alfa G -308A promoter polymorphism and periodontal disease / M. Folwaczny [et al.] // J. Clin. Periodontol. - 2004. - Vol. 31, N 11. - P. 449-453.
60. Linkage map of the human major histocompatibility complex including the tumor necrosis factor genes / M. C. Carrol [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1987. - Vol. 84. - P. 8535-8539.
61. Lin L., Pan Y. P., Yin L. Y. Study on the correlation of cytokine gene polymorphism with chronic periodontitis // Shanghai Kou Qiang Yi Xue. - 2003. - Vol. 12, № 6. - P. 456-459.
62. McClain L. Informing technology policy decisions: the US Human Genome Project's ethical, legal and social implications programs as a critical case // Technol. Soc. - 2002. - Vol. 24. - P. 111-132.
63. de Menezes N. G., Colombo A.P.V. Lack of association between the TNF-a -308 (G/G) genetic polymorphisms and periodontal disease in Brazilians // Braz. Oral. Res. - 2008. - Vol. 22, N 4. - P. 322-327.
64. No correlation of five gene polymorphisms with periodontal conditions in a Greek population / D. Sacellari [et al.] // J. Clin. Periodontol. - 2006. - Vol. 33, N 11. - P. 765-770.
65. Old L. J. Tumor necrosis factor (TNF) // Science. - 1985. - Vol. 230, N 4726. - P. 630-632.
66. Polymorphic cytokine genotypes as markers of disease severity in adult periodontitis / G. M. Galbraith [et al.] // J. Clin. Periodontol. - 1999. - Vol. 26, № 11. - P. 705-709.
67. Polymorphisms in the +252 (A/G) lymphotoxin-alpha and the -308 (A/G) tumor necrosis factor-alpha genes and susceptibility to chronic periodontitis in a Czech population / A. Fassmann [et al.] // J. Periodontal Res. - 2003. -Vol. 38, N 4. - P. 394-399.
68. Redefining bacterial populations: a postgenomic reformation / E. A. Joyce [et al.] // Nature Rev. Genet. - 2002. -Vol. 3. - P. 462-473.
69. Reich D. E., Cargill M., Bolk S. Linkage disequilibrium in the human genome // Nature. - 2001. - Vol. 411. - P. 199-204.
70. Relation between tumor necrosis factor polymorphism TNFa-308 and risk of asthma / J. S. Witte [et al.] // Eur. J. of Human Genetics. - 2002. - Vol. 10, N 6. - P. 82-85.
71. Single nucleotide polymorphisms associated with aggressive periodontitis and severe chronic periodontitis in Japanese / A. Suzuki [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2004. - Vol. 317. - P. 887-892.
72. Somia N., Verma I.M. Gene therapy: trials and tribulations // Nat. Rev. Genetics. - 2000. - Vol. 1. - P. 91-99.
73. The tumor necrosis factor polymorphism TNF (-308) is associated with susceptibility to meningococcal sepsis, but not with lethality / R. C. Read [et al.] // Crit. Care Med. - 2009. - Vol. 37, N 4. - P. 1237-1243.
74. The tumor necrosis factor-a promoter - 1031C polymorphism is associated with decreased risk of endometriosis in a Japanese population / T. Asghar [et al.] // Human Reproduction. - 2004. - Vol. 19, N 11. - P. 2509-2514.
75. TNF-a (-308G/A) and CD14 (2159T/C) polymorphisms in the bronchial responsiveness of Korean children with asthma / S.L. Hong [et al.] // J. Allergy Clin. Immunol. - 2007. - Vol. 119, N 2. - P. 398-404.
76. TNF and LTA gene polymorphisms reveal different risk in gastric and duodenal ulcer patients / A. Lanas [et al.] // Genes and Immunity. - 2001. - Vol. 2. - P. 415-421.
77. TNF-a -308G/A in two international population based cohorts and risk of asthma / F. Castro-Giner [et al.] // Eur. Respir. J. - 2008. - Vol. 32, N 2. - P. 350-361.
78. Tumor necrosis factor (TNF) gene polymorphism influences TNF-alfa production in lipopolysaccharide (LPS) stimulated whole blood cell culture in healthy humans / E.Louis [et al.] // Clin. Exp. Immunol. - 1998. - Vol. 113, N 3. - P. 401-406.
79. Tumor necrosis factor gene polymorphisms are associated with COPD / M.R. Gingo [et al.] // Eur. Respir. J. - 2008. -Vol. 31, N 5. - P. 1005-1012.
80. Tuschl T., Borkhardt A. Small interfering RNAs: a revolutionary tool for the analysis of gene function and gene therapy // Mol. Intervent. - 2002. - Vol. 2. - P. 158-167.
81. Twyman R. M., Primrose S. B. Techniques patents for SNP genotyping // Pharmacogenomics. - 2003. - Vol. 4. -P. 67-79.
82. Variation in the tumor necrosis factor-alpha gene promoter region may be associated with death from meningococcal disease / S. Nadel [et al.] // J. Infect. Dis. - 1996. - Vol. 174, N 4. - P. 878-880.
83. Williams S. J., Hayward N. K. The impact of the Human Genome Project on medical genetics // Trends Mol. Med. -2001. - Vol. 7. - P. 229-231.
84. Yaspo M. L. Taking a functional genomics approach in molecular medicine // Trends Mol. Med. - 2001. - Vol. 7. -P. 494-502.
85. Yee L. J., Tang J., Herrera J. Tumor necrosis factor gene polymorphisms in patients with cirrhosis from chronic hepatitis C virus infection // Genes Immun. - 2000. - Vol. 1, N 6. - P. 386-390.
Терскова Наталья Викторовна - канд. мед. наук, ассистент кафедры оториноларингологии Красноярского ГМУ им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого. 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1; тел.: 8(391)-220-16-25, e-mail: terskovanatasha@mail.ru ; Вахрушев Сергей Геннадиевич - д-р мед. наук, проф., зав. каф. оториноларинго-логииКрасноярского ГМУ им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого. 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1; тел.: 8(391)-220-16-25, e-mail: vsg20061@yandex.ru; Шнайдер Наталья Алексеевна - д-р мед. наук, проф., зав. каф. медицинской генетики и клинической нейрофизиологии Института постдипломного образования Красноярского ГМУ им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого. 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1; тел.: 8(391)-220-98-
71, e-mail: NASchnaider@yandex.ru; Пилюгина Марина Сергеевна - мл. науч. сотрудник лаборатории медицинской генетики Красноярского ГМУ им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого. 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1; тел.: 8(391)-220-98-71, e-mail: Pilya.ru@mail.ru
УДК 616.323-007.61-036.12-053.2-036
АКТИВНОСТЬ НАД(Ф)-ЗАВИСИМЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ АДЕНОИДИТОМ В ОБЕСПЕЧЕНИИ ГОМЕОСТАЗА
Н. В. Терскова1, А. А. Савченко2, 3, С. Г. Вахрушев1, А. С. Смбатян1 NAD(P)-DEPENDENT DEHYDROGENASES ACTIVITY IN BLOOD LYMPHOCYTES OF CHILDREN WITH CHRONIC ADENOIDITIS IN HOMEOSTASIS MAINTENANCE
N. V. Terskova 1, A. A. Savchenko2, 3, S. G. Vakhrushev1, A. S. Smbatyan1
ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого»
(13ав. каф. ЛОР-болезней с курсом постдипломного образования -проф. С. Г. Вахрушев;
2 зав. каф. физиологии им. проф. А. Т. Пшоника - проф. А. А. Савченко)
3 Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН, г. Красноярск
(Директор - засл. деятель науки РФ, член-кор. РАМН, проф. В. Т. Манчук)
Изучены уровни активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах у детей с хроническим аденоидитом. Авторами установлены общие и специфические особенности метаболизма лимфоцитов у детей с хроническим аденоидитом в период ремиссии заболевания в зависимости от периода онтогенетического развития иммунной системы. Проведено сравнение аналогичных параметров в группе здоровых детей. Результаты работы позволяют сделать выводы о недостаточности энергетических процессов при формировании данной нозологии.
Ключевые слова: хронический аденоидит, лимфоцитарный иммунитет, активность НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ.
