CC BY
43
УДК 612
А. В. Тихонов, И. Н. Григорьева
25 ЛЕТ ИССЛЕДОВАНИЮ ЛП(А)-ЛИПОПРОТЕИДА - МАРКЕРА ИБС -В НОВОСИБИРСКЕ
НИИ терапии СО РАМН, Новосибирск
В настоящей работе рассмотрен липопротеид (а) (Лп(а)) как одна из атерогенных форм липоп-ротеидов. Предложенный метод количественного определения Лп(а) в крови имеет высокую чувствительность и специфичность как диагностический тест в отношении ИБС. Повышенный уровень Лп(а) в обследованных мужских и женских популяциях ассоциирован как с ИБС, так и с ЖКБ независимо от основных факторов риска ХНИЗ. Условной нормой следует считать уровень Лп(а) 5-18 мг/дл. Границей риска ИБС является уровень Лп(а) 20 мг/дл; границей риска ЖКБ у мужчин - 28 мг/дл, у женщин - 24 мг/дл.
Ключевые слова: исследование липопротеидов
Одной из наиболее острых проблем современной медицины являются диагностика и лечение болезней сосудов сердца, на долю которых приходится половина смертей в развитых странах. В настоящее время одной из ведущих причин развития атеросклероза считается нарушение липопротеид-ного обмена и связанное с этим повышение в крови концентрации липопротеидов низкой (ЛПНП) и очень низкой плотности (ЛПОНП). Близок к ЛПНП класс липопротеидов(а) (Лп(а))-, физиологическая роль которых остается неясной. Лп(а) был открыт Berg К. [9] и первоначально рассматривался как качественный признак. Лп(а)-липоп-ротеиды не являются гомогенными. Частица Лп(а) имеет электрофоретическую подвижность, характерную для пре-Р-бета ЛП. В составе белковой части частицы Лп(а) нет апоА и апоС, однако присутствует до 15% альбумина и уникальный белок апо(а), который находится в комплексе с апоВ100 (до 65%). По скорости флотации в растворах разной плотности липопротеиды делят на пять основных классов. Лп(а) можно обнаружить во фракциях ЛПОНП, ЛПНП, ЛПВП. Максимальное количество Лп(а) содержится во фракции с плотностью 1,063-1,120 г/мл. В 1987 году Utermann G. с соавт. [20] открыли и описали 6 генетически детерминированных (В,81,82,Б3,4,0) фенотипов апо(а), в которых по мере нарастания молекулярного веса увеличивается содержание белка апо(а) и холестерина (ХС). Основная масса белков класса Лп(а) (35% пула) представлена комплексом апоВ100/ апо(а) с соотношением 2:1. Благодаря наличию такой специфической структуры Лп(а), наряду с ЛПНП, приобретает способность связывать ХС и переносить его в сосудистую стенку [5]. Лп(а) содержит два белка, апоВ100 и апо(а), расположенных на поверхности сферической частицы. Одним из негативных свойств комплекса апоВ100/апо(а) является способность образовывать агрегаты с себе подобными, особенно при высокой концентрации их в крови. Такие агрегаты могут быть при-
чиной риска ИБС. Кроме того, под влиянием апо(а) высокогидрофобный апоВ100 приобретает способность растворяться в воде [18]. Значительная роль Лп(а) в развитии ИБС, вероятно, обусловлена двумя причинами: у Лп(а)-позитивных лиц наблюдается повышенный уровень общего ХС, и, кроме того, вероятно, частицы самого Лп(а) обладают высокой атерогенностью [10,14, 21]; обнаружили Лп(а) в пораженных атеросклерозом участках сосудистой стенки, где они были локализованы вместе с ЛПНП и фибрином. Весьма интересным представляется изучение уровней Лп(а) и при других липид-зависимых заболеваниях [13], таких, как холестериновая желчнокаменная болезнь (ЖКБ), одну из стадий которой - холестери-ноз желчного пузыря - называют “атеросклерозом желчного пузыря”.
На основании вышеизложенного важной научной задачей было уточнение концепции роли Лп(а), как важного генетического маркера риска развития атеросклероза, в патогенезе заболеваний, связанных с нарушениями липидного обмена
- ИБС и холестериновой ЖКБ - на основе исследования особенностей количественного уровня Лп(а) в плазме крови с помощью гетероиммунных моноспецифических антисывороток при этих заболеваниях.
Для выполнения поставленной цели в 1983-1996 гг. А.В. Тихоновым были получены ге-тероиммунные моноспецифические антисыворотки к Лп(а)-липопротеидам плазмы крови человека
[6]. В качестве реципиента были выбраны отечественные мини-свиньи селекции Института цитологии и генетики СО РАН. Выбор этих животных определяется тем, что у свиней сердечно-сосудистая система и липидный обмен по многим параметрам сходны с соответствующими показателями у человека. Это приблизило процесс антитело-образования к условиям изоиммунизации. Были разработаны схемы иммунизации, определен оптимальный возраст животных и доза антигена,
наиболее эффективные для получения больших количеств гетероиммунных моноспецифических антисывороток в высоком титре.
В качестве антигена использовали фракцию, содержащую смесь частиц Лп(а) и ЛПВП, выделенную из плазмы донорской крови человека с помощью препаративного ультрацентрифугирования в интервале плотности d=1,063-1,090. Использовались ультрацентрифуги L5-65 BECKMAN и BECKMAN-SPINKO, угловой ротор Ti 45 BECKMAN. Центрифугирование проводили в течение 24 часов при 40 000 об/мин [11, 12]. Иммунные антисыворотки подвергали истощению и очистке. Проводили абсорбцию антисывороток избытком крови Лп(а)-негативного донора и фракцией ЛПНП того же донора. Иммунохимическое исследование проводили методом двойной иммунодиффузии по Ouchterlony О.[17] в микроварианте на предметных стеклах [8] в агаровом геле фирмы “Дифко”. Гетероиммунные антисыворотки к Лп(а) плазмы крови прошли иммунологическую проверку и подтвердили свою специфичность (87,5%), чувствительность (82,4%) в качестве диагностического теста в отношении ИБС, т.е. было показано соотношение между реальным наличием или отсутствием заболевания и данными анализа
[7]. Титр полученных антисывороток был 1:128-1:256.
Для определения уровня концентрации Лп(а) на основании сравнительного изучения ряда современных методов выявлено, что наиболее перспективным для условий клинических лабораторий и при популяционных обследованиях населения является метод простой радиальной иммунодиффузии (РИД) по Mancini G. et al. [16]. Модифицированный вариант метода проводился на предметных стеклах, залитых гелем агарозы с полимеризо-ванными в нем антителами с последующим замером диаметра диффузии, что позволило сравнительно просто осуществлять расчет уровня концентрации по калибровочной кривой, при построении которой использовали квадрат диаметра преципитата как функцию концентрации антигена. В пределах своей чувствительности простая радиальная иммунодиффузия пригодна для определения любых антигенов при условии наличия соответствующей моноспецифической антисыворотки и чистых или стандартных антигенов для калибровочной системы [4]. Метод РИД технически очень прост, не требует дорогостоящего оборудования, отличается хорошей воспроизводимостью, а также позволяет использовать образцы в весьма небольших объемах [1, 19].
В дальнейшем проводилось изучение особенности полиморфизма в разных популяциях по уровню концентрации Лп(а) с помощью полученных антисывороток. Обследованы представители нескольких этнических групп населения Чукотки и Горного Алтая (491 чел.) в экспедициях 1980-
1992 гг., жители Новосибирска по программе ВОЗ “Моника” (967 мужчин в возрасте 25-64 лет: 129 больных ИБС и 838 практически здоровых).
В обследованных группах уровень концентрации Лп(а) колебался от 0 до 80 мг/дл. Причем нулевая концентрация Лп(а) в популяции жителей Сибири была отмечена у 58% от всех обследованных, в том числе среди лиц без ИБС - 60% и лиц с ИБС -45%; среди жителей Чукотки - в 53%. У чукчей прибрежных диапазон колебания был 3,5-75,5 мг/дл, что указывает на значительное фенотипическое разнообразие в этой популяции. Среди коренных жителей Чукотки чаще встречались лица с уровнями Лп(а) 15,5 и 18 мг/дл. Средний уровень (медиана) Лп(а) в крови среди обследованных жителей Новосибирска составил 20,6 мг/дл, а у коренных жителей Чукотки - 28 мг/дл. Распределение уровня Лп(а) у них, как и у жителей Новосибирска, было асимметричным со смещением моды влево вариационного ряда и имело форму пирамиды с расширенным основанием. Это указывает на тенденцию организма образовывать и сохранять в здоровом организме в повышенном количестве вариации с более низким уровнем концентрации Лп(а) плазмы крови. Такое распределение характерно для большинства популяций Западной Европы и Америки [15]. У эскимосов и чукчей тундровых распределение Лп(а) было ближе к нормальному.
Модальный класс был отмечен среди лиц без ИБС на уровне 14 мг/дл - 60% всех обследованных, а среди лиц с ИБС - 16,4 мг/дл (63% обследованных). Постмодальный квантиль среди лиц без ИБС составлял 27,5% всех случаев (при среднем уровне 40,9 мг/дл). Среди лиц с ИБС постмодальный класс составил 31% всех обследованных (при среднем уровне 48 мг/дл). Среди лиц с ИБС уровень концентрации Лп(а) плазмы крови 7175 мг/дл отмечен в 2,8% случаев; 55-65 мг/дл был отмечен у 8,4% больных ИБС, а среди практически здоровых - всего у 1-2 человек. Уровень концентрации Лп(а) плазмы крови более 30 мг/дл был достоверно выше среди больных ИБС во всех обследованных популяциях (р<0,001). У практически здоровых чукчей прибрежных он составил 40,4%, а среди больных - 57,1% (р<0,001). У эскимосов и тундровых чукчей эти показатели были соответственно 27,5-43% и 36,2-50%.
Из 60% практически здоровых жителей Новосибирска, имевших уровень Лп(а) 14 мг/дл, 73% составляли лица в возрасте 30-34 лет. Среди больных ИБС в этом возрасте в 2 раза реже встречались лица с таким уровнем Лп(а), но значительно чаще такой уровень наблюдался в возрасте 40 лет и старше. В 30 лет группа лиц с уровнем Лп(а) 8 мг/дл составляла 12,5%; 14 мг/дл - 60% , 31 мг/дл
- 27,5%. В возрасте 60 лет соотношение было равным 8,0; 29,5 и 62,5%.
Проведенное изучение количественного уровня Лп(а) плазмы крови свидетельствует о том, что уровень концентрации Лп(а) ассоциирован с заболеванием ИБС и может служить патогенетическим маркером заболевания в популяциях жителей Сибири и среди коренных жителей Чукотки (табл. 1). Уровень концентрации Лп(а) от 5 до 18 мг/дл следует считать условной нормой, а уровень 20 мг/дл и выше - границей риска развития ИБС. Метод определения Лп(а) в крови имеет высокую чувствительность и специфичность в отношении ИБС. Среди больных ИБС и лиц с наличием в крови факторов риска этого заболевания 67-93% имели уровень концентрации Лп(а) 14 мг/дл и выше, а в крови лиц без ИБС и наличия факторов ее риска у 52-86% Лп(а) отсутствовал или присутствовал в минимальных концентрациях (5-8,3 мг/дл).
Уровень биохимических показателей липидного обмена у больных ИБС коррелировал с уровнем концентрации Лп(а) в пределах 14-30 мг/дл по содержанию ОХС, ХС ЛПНП и ТГ и был выше, чем у лиц с низким уровнем Лп(а) - Лп(аО) (р<0,001). Уровень ОХС в крови прямо пропорционален концентрации Лп(а) в плазме крови. Так, при концентрации Лп(а) 5 мг/дл среди лиц без ИБС уровень ОХС составлял 4,7-5 ммоль/л и 5,2-6 ммоль/л среди лиц с ИБС, а при концентрации Лп(а) свыше 30 мг/дл уровень ОХС был на 20% выше (р<0,001). Уровень атерогенных липопротеидов ХС ЛПНП и ХС ЛПОНП у лиц с концентрацией Лп(а) 14 и 30 мг/дл был достоверно выше, чем в нулевой группе, а уровень ХС ЛПВП был, напротив, достоверно ниже.
Лп(а) является одной из атерогенных форм липопротеидов. Аналогично ЛПНП Лп(а) играет
Степень связи наличия Лп(а) и ИБС в обследованных
роль в метаболизме ХС, транспортируя его из кровеносного русла в сосудистую стенку [2]. Уровень ОХС, ХС ЛПНП во всех обследованных популяциях связан с концентрацией Лп(а) плазмы крови: при уровне Лп(а) 30 мг/дл он достоверно выше по сравнению с концентрацией 14 мг/дл, а при низкой (0-5 мг/дл) концентрации Лп(а) - достоверно ниже.
Таким образом, анализ взаимосвязи частоты развития ИБС и уровня концентрации Лп(а) в плазме крови показал, что Лп(а) следует использовать с высокой надежностью в клинической диагностике в качестве одного из прогностических тестов ИБС. При клинических и популяционных обследованиях населения целесообразно проводить определение содержания в плазме крови Лп(а), при этом Лп(а)-позитивных лиц (при концентрации выше 25-30 мг/дл), особенно имеющих отягощенную наследственность в отношении ИБС, следует относить в группу повышенного риска для осуществления за ними тщательного постоянного наблюдения.
В дальнейших исследованиях было проведено изучение особенностей биоразнообразия Лп(а) среди городской популяции Новосибирска с и без ЖКБ у 395 мужчин в возрасте 35-54 лети у 731 женщины в возрасте 25-64 лет. У мужчин в возрасте 35-54 лет с ЖКБ по сравнению с мужчинами без ЖКБ (табл. 2) обнаружено существенное превышение средних показателей Лп(а) плазмы крови как у Лп(а)-позитивных лиц-уровень Лп(а)> 5 мг/дл (32,7±6,0 и 20,7±0,9 мг/дл; р<0,05), так и у Лп(а)-негативных - уровень Лп(а)<5 мг/дл (0 и 0,1±0,04 мг/дл; р<0,01).
Таблица 1
(30-59 лет)
Группа Наличие 1 2 4
п Лп(а), ИБС р 3
мг/дл + -
Жители Новосибирска 384 30 26 118 0,203 15,8 0,001 66,7 65,8
0 13 227
Коренные жители Чукотки 319 30 33 145 0,178 8,77 0,01 71,7 46,9
0 13 128
Чукчи прибрежные: 127 18,8 10 48 0,178 3,84 0,05 76,9 57,9
мужчины 0 3 65
женщины 79 18,8 8 24 0,155 4,13 0,05 72,7 64,7
0 3 44
Эскимосы 74 30 6 27 0,165 2,02 0,09 66,7 58,5
16,4 3 38
Примечание
; 1 - коэффициент связи; 2 - критерий соответствия; 3 - чувствительность, % (а/а+с);
4 - специфичность, % (ё/Ь+ё).
Ь
а
с
Выявлено существенное повышение частоты встречаемости высоких уровней Лп(а), а также более редкая встречаемость низких уровней Лп(а) плазмы крови у мужчин 35-54 лет с ЖКБ по сравнению с мужчинами без ЖКБ [3]. У обследованных мужчин отмечена значимая прямая корреляция между Лп(а)-позитивными уровнями и ЖКБ, не зависящая от возраста: гегатег=0,11; р<0,05. Среди мужчин 35-54 лет в целом при уровне Лп(а) выше 28 мг/дл ЖКБ обнаруживается чаще, чем при Лп(а)<28 мг/дл: 0Я=3,13 (95% С1 1,1-8,9; р<0,05). Средние показатели Лп(а) плазмы крови в целом у женщин в возрасте 25-64 лет с ЖКБ составляли 13,4±1,8 мг/дл и у женщин без ЖКБ - 8,7±0,5 мг/дл (р<0,01). У женщин с ЖКБ значительно реже (43,5%) встречались низкие уровни Лп(а) (Лп(а) <5 мг/дл) по сравнению с женщинами без ЖКБ (60,1%; р<0,01). При анализе корреляции между наличием ЖКБ и уровнями Лп(а) в целом у женщин была установлена значимая прямая зависимость (гс гатег_0, 12; р<0,01), значимая как при однофакторном логистическом регрессионном анализе (0Я=1,9; 95% С1 1,2-3,1; р<0,05), так и при многофакторном анализе с включением в модель возраста и ИМТ: 0Я=2,1 (95% С11,4-3,7; р<0,001). Отмечено, что среди женщин 25-64 лет при уровне Лп(а) в целом выше 24 мг/дл ЖКБ обнаруживается
чаще, чем при Лп(а)<24 мг/дл: 0Я=2,0 (95% С1
1,1-3,7; р<0,05).
Несмотря на то что Лп(а) является генетически обусловленным маркером ИБС [6,14,22], было отмечено, что наличие или отсутствие определенной ИБС не зависит от уровня Лп(а) плазмы крови ни у мужчин, ни у женщин с ЖКБ.
У Лп(а)-позитивных мужчин с ЖКБ отмечены тенденции к повышению уровней ОХС (230,3+12,6 и 212,3+3,1 мг/дл у мужчин с ЖКБ и без ЖКБ соответственно), ХС ЛПНП, ТГ. У Лп(а)-позитивных мужчин с ЖКБ выявлена сильная прямая корреляция между уровнями ОХС и Лп(а) (г=+0,86; р<0,01). Среди Лп(а)-позитивных женщин с ЖКБ ГХС встречалась в 58,3% случаев, а среди Лп(а)-позитивных женщин без ЖКБ - в 34,2% случаев (0Я=1,7; 95% С1 1,3-2,3; р<0,01). У Лп(а)-по-зитивных женщин с ЖКБ выявлена значимая прямая корреляция между уровнями Лп(а) и ОХС (г=+0,32) и ХС ЛПНП (г=+0,30).
В результате проведенных исследований было установлено, что Лп(а) является одной из атеро-генных форм липопротеидов. Вариационные ряды распределения уровней Лп(а) у пациентов с ИБС или с ЖКБ смещены вправо по сравнению с таковыми у лиц без этих заболеваний. У пациентов с ИБС или с ЖКБ высокие уровни концентрации Лп(а) (>30 мг/дл) встречаются значительно чаще, а
Таблица 2
Распределение уровня концентрации Лп(а) плазмы крови у мужчин и у женщин с ЖКБ и без ЖКБ
Уровень Лп(а), мг/дл Мужчины с ЖКБ (п=19) Мужчины без ЖКБ (п=376) Женщины с ЖКБ (п=85) Женщины без ЖКБ (п=646)
Средний уровень, мг/дл Доля лиц, % Средний уровень, мг/дл Доля лиц. % Средний уровень, мг/дл Доля лиц, % Средний уровень, мг/дл Доля лиц, %
0-5 0 57,6 0,1 59,2 0 43,5 0 60,1
6-10 - - 8,3 4,3 9,2 2,4 8,3 3,8
11-20 16,4 10,6 15,3 22,3 14,5 32,9 15,0 21,4
21-30 23,6 15,9 26,0 6,4 25,2 8,2 23,9 6,0
31-40 - - 34,9 4,5 36,0 4,7 34,5 4,8
41-50 47,0 10,6 45,1 2,7 45,3 2,4 44,2 2,5
51-60 - - 54,1 0,3 55,3 3,5 55,0 0,8
61-70 63,5 5,3 - - 62,2 1,2 - -
71-80 - - - - 73,5 1,2 72,9 0,3
81 -93 - - 81 0,3 - - 87,7 0,3
Мода* 47,0 10,6 13,8 24,7 13,8 43,8 13,8 23,5
Медиана 24,4 - 16,4 - 16,2 - 16,1 -
Лп(а)+а - 42,1 - 40,7 - 56,5 - 39,9
Лп(а)^ - 57,9 - 59,3 - 43,5 60,1
Примечание. * - мода и медиана рассчитаны для показателей Лп(а)+; а - Лп(а)+ соответствует значениям Лп(а)>5 мг/дл; б - Лп(а) - соответсвует значениям Лп(а)< 5 мг/дл.
низкие уровни (0-5 мг/дл) - реже, чем у лиц без этих заболеваний. Повышенный уровень Лп(а) у обследованных мужчин и женщин ассоциирован как с ИБС, так и с ЖКБ независимо от основных факторов риска хронических неинфекционных заболеваний. Уровень концентрации Лп(а) плазмы крови достоверно ассоциирован с биохимическими показателями липидного обмена у лиц с ИБС или с ЖКБ. Условной нормой следует считать уровень Лп(а) 5-18 мг/дл; границей риска ИБС является уровень Лп(а) 20 мг/дл, границей риска ЖКБ у мужчин - уровень 28 мг/дл, у женщин - 24 мг/дл.
TO THE 25-TH ANNIVERSARY OF LP(A) LIPOPROTEIN - THE IHD MARKER STUDY IN NOVOSIBIRSK
A.V. Tikhonov, I.N. Grigorieva
In the present study Lp(a) has been discerned as one of the atherogenic forms of lipo-proteins. The introduced method of quantitative determination of Lp(a) in the blood plasma has a high sensitivity and specificity as IHD diagnostic test system. The increased Lp(a) level associated both with IHD and GSD independently from conventional risk factors of chronic non-infectious diseases in the observed male and female populations. Lp(a) level 5-18 mg/dl is considered to be a conditional norm, the limit of IHD risk is the Lp(a) level 20 mg/dl, risk of GSD for the men - level 28 mg/dl, for the women - 24 mg/dl.for the men - level 28 mg/dl, for the women - 24 mg/dl.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адамова И.Ю., Афанасьева О.И., Беневоленская Г.Ф., Покровский С.Н. Получение поликлональных антител, специфичных к липопротеиду (а) плазмы крови человека//Иммунология. 1990. №4. С. 71-72.
2. Ежов В.Т., Кухарчук B.C., Покровский С.П. // Тер. архив. 2001. №2. С. 28-35.
3. Григорьева И.Н. Липиды, липопротеиды и дополнительные факторы риска желчнокаменной болезни. Автореф. дис. ...д-рамед. наук. Новосибирск,2001.
4. Иммунологические методы / Под ред. Фримель Г.: Пер. с нем. М., 1987. 472 с.
5. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и ли-попротеидов и его нарушения. СПб., 1999. 512 с.
6. Тихонов А.В. Атерогенность сывороточного липоп-ротеида(а) и его роль как генетического маркера в диагностике ишемической болезни сердца. Автореф. дис.... д-ра мед. наук. Новосибирск, 1996.
7. Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины. М., 1998. 352 с.
8. Цветков В.П. Иммуноэлектрофорез и препаративный электрофорез в агаре // Иммунохимический анализ: Сборник. М., 1968. С. 120-142.
9. Berg К. A new serum type system in man: the Lp system // Acta Path. Micro-biol. ScancL. 1963. Vol. 59. P. 369-382.
10. Harpel P., Gordon В., Parker T. Plasmin catalyzes blinding of lipoprotein(a) to immobilized fibrinogen and fibrin//Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1989. P. 3847-3851.
11. Hatch F.T., Lees R.S. Practical methods for plasma lipoprotein analysis//Adv. LipidRes. 1968. Vol. 6. P. 68.
12. Havel R.J., Eder H.A., Bragdon J.H. The distribution and chemical composition of ultracentrifugally separated lipoproteins in human serum // J.Clin. Invest. 1955. Vol. 34. P. 1345-1353.
13. Ilyas Kamboh M., Rewers M. Plasma Apolipoprotein A-I, Apo B, and Lp(a) Concentrations in Normoglycemic Hispanics and Non-Hispanics Whites from the San Luis Valley, Colorado // Am. J. Epidemiol. 1997. Vol. 146. №12. P. 1011-1018.
14. Kostner G. Is there a physiological role of Lp(a) // In: Scanu A. (Eds.) Lipo-protein(a): 25 years of progress. New York, 1990. P. 180-204.
15. Loscalzo J.,Weinfeld M., Fless G. et al. Lipoprotein(a), fibrin binding and plasminogen activation. //Arteriocle-rosis. 1990. Vol. 10. P. 240-245.
16. Mancini G., Carbonara A., Heremans J. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immuno-difusionV // Immunochemistry. 1965. Vol. 2. № 6. P. 235-254.
17. Ouchterlony O. Diffusion-in-gel methods for immunological analysis //Ackroyd J.(Eds.) Immunological methods. London, 1964. P. 54-91.
18. Scanu A. Lipoprotein(a): A genetically determined cardiovascular pathogen in search of a function // J. Lab. Can. Med. 1990. Vol. l. № 16. P. 142-146.
19. Tompson G. A handbook of hyperlipidaemia // Merck & Co, Inc. London, 1990. P. 255.
20. Utermann G., Menzel H., Kraft H. et al. Lp(a) glycoprotein phenotypes. Inheritance and relation to Lp(a)lipop-rotein concentrations in plasma // J. Clin. Invest. 1987. Vol. 80. P. 458-465.
21. Walton K.W., Valente A.J. A study of the AG-factors in British west midland population // Vox Sund. 1976. Vol. 31. P. 258-264.
22. Yamamoto A., Horibe H., Goto Y. Analysis of serum lipid levels in Japanese men and women according to body mass index. Increase in risk of atherosclerosis in postmenopausal women// Atherosclerosis. 1999. Vol. 143 (1). P. 55-73.
