CC BY
11
Р2-ИНТЕГРИНЫ1 LFA-1, MAC-1 - МИШЕНЬ ДЛЯ УСИЛЕНИЯ ИММУНИТЕТА ПРОТИВ ОПУХОЛИ
О.А. Бочарова1, Р.В. Карпова1, Е.В. Бочаров1, А.А. Вершинская1, М.А. Барышникова1, И.В. Казеев1, Ю.Н. Соловьев1, В.Г. Кучеряну2
ФГБУ«Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им Н.Н. Блохина» Минздрава России;
Россия, 115478 Москва, Каширское шоссе, 24; 2ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии»; Россия, 125315Москва, ул. Балтийская, 8
Контакты: Регина Васильевна Карповаplanta39@rambler.ru
Цель исследования — изучение экспрессии ß-интегринов LFA-1 (CD11a/CD18) и Mac-1 (CD11b/CD18) на клетках крови у мышей СВА в онтогенезе, а также под влиянием сухого экстракта мультифитоадаптогена в 1-й месяц постнатального развития.
Материалы и методы. Исследование проведено на мышах-самцах линии CBA (сублиния CBA/LacY). Животные опытной группы получали 0,3 % водный раствор сухого экстракта мультифитоадаптогена в течение 1-го месяца жизни (профилактическое применение). Препарат был изготовлен по технологии сублимирования из жидкой формы мультифитоадаптогена, включающего компоненты экстрактов 40 растений, в том числе Panax ginseng, Eleutherococcus senticosus, Rhodiola rosea, и другие адаптогены. В возрасте 4, 8, 22 мес определяли экспрессию CD11a- и CDHb-антигенов на клетках периферической крови в реакции непрямой иммунофлуоресценции. Статистический анализ результатов проводили с использованием программы Statistica 6.0.
Результаты. При развитии гепатокарцином у генетически предрасположенных мышей-самцов СВА наблюдали подавление продукции CD11a- и CDHb-антигенов на клетках крови. Введение сухого экстракта мультифитоадаптогена в 1-й месяц постнатального онтогенеза повышало экспрессию CD11a- и CDHb-антигенов. Активность исследуемого препарата в отношении данного показателя не отличалась от жидкой формы фитоадаптогена, показанной ранее.
Заключение. Улучшение продукции ß-интегринов LFA-1 и Mac-1 на клетках крови мышей, генетически предрасположенных к раку печени, при введении сухого экстракта препарата в 1-й месяц постнатального развития способствует адгезии эффекторов иммунитета с клетками опухолей.
Ключевые слова: ß-интегрины LFA-1 и Mac-1, адгезионные взаимодействия, противоопухолевый иммунитет, спонтанные гепатомы, фитоадаптогены
DOI: 10.17650/1726-9784-2019-19-1-53-58
LFA-1, MAC-1 LEUKOCITE INTEGRINS - TARGET FOR TUMOUR IMMUNITY MAGNIFICATION
O. A. Bocharova1, R. V Karpova1, E. V Bocharov1, A. A. Vershinskaya1, M.A. Baryshnikova1, I. V Kazeev1,
Y. N. Soloviev1, V.G. Kucheryanu2
N. N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation;
24 Kashirskoye Shosse, Moscow 115478, Russia; 2Institute of General Pathology and Pathophysiology; 8 Baltiyskaya St., Moscow 125315, Russia
The aim of this investigation was to evaluate the expression of LFA-1 (CD11a/CD18) and Mac-1 (CD11b/CD18) integrins on blood cells in CBA mice in ontogenesis as well as under the dry extract of multifitoadaptogen administration during the first month of postnatal development.
Materials and methods. The study was carried out on CBA male mice (CBA/LacY). The experimental mice received 0.3 % dry multi-phytoadaptogene extract water-solution during the first month of life (preventive administration). Preparation was produced by a desiccation technology of forty medical herbs (including Panax ginseng, Eleutherococcus senticosus, Rhodiola rosea) water-ethanol extracts components. The CD11a and CD11b antigens expressions on peripheral blood cells were analyzed by indirect immunofluorescence reaction at the age of 4, 8, 22 months. Statistical analysis was performed with the program Statistica 6.0.
Results. The development of genetically predisposed hepatocarcinomas in CBA male-mice was accompanied by a decrease in the expression of CD11a and CD11b antigens on blood cells. Dry multiphytoadaptogene extract administration during the first month of postnatal ontogenesis revealed the CD11a and CD11b antigens up-regulated expression. The effect of the dry multiphytoadaptogene extract is comparable to that for the liquid form of multifitoadaptogen previously identified.
Conclusion. Up-regulated LFA-1 and Mac-1 integrins expression on blood cells using dry multiphytoadaptogene extract administration during the first month of postnatal development is essential for enhance the contact interactions of immune effectors and cancer cells.
54 Оригинальные статьи
Key words: LFA-1, Mac-1 integrins, adhesive interaction, anti-tumour immunity, spontaneous hepatomas, CBA male-mice, phyto-adaptogenes Введение значимости коррекции нарушений для усиления кон- Р2-интегрины, к которым, в частности, относят- тактных взаимодействий иммунных эффекторов ся LFA-1 (lymphocyte function-associated antigen-1, с опухолевыми клетками является актуальным. CD11a/CD18) и Mac-1 (monocyte adhésion complex Цель исследования — изучение экспрессии Р2-ин-CD11b/CB18), играют существенную роль в привле- тегринов LFA-1 (CD11a/CD18) и Mac-1 (CD11b/CD18) чении активированных цитотоксических лейкоцитов на клетках крови у мышей СВА в онтогенезе, а также из периферической крови в опухолевую ткань. Контр- под влиянием СМФА в 1-й месяц постнатального рецепторами LFA-1 и Mac-1 являются гистонеспеци - развития. фические молекулы адгезии ICAM-1, участвующие также в поддержании гомотипической интеграции Материалы и методы тканей [1]. Работа проведена на мышах-самцах высокорако- Исследования ряда авторов показывают, что ослаб- вой линии СВА, сублинии СВА/Lac Y [10]. Источник ленная экспрессия ICAM-1 на мембранах опухолевых получения мышей: локальная колония НМИЦ он-клеток представляет собой механизм, подавляющий кологии им. Н.Н. Блохина. Животных содержали экспрессию LFA-1 и Mac-1, что снижает прикрепле- и выводили из эксперимента в соответствии с требо-ние иммунных эффекторов к клеткам-мишеням ваниями Европейской директивы по охране живот-и тем самым — внутриопухолевую инфильтрацию ных, используемых в научных целях. Контрольные лейкоцитов [2, 3]. Очевидно, изучение возможности животные получали только воду в качестве питья. восстановления адгезионных контактов при опухо- Животные опытной группы получали 0,3 % водный левом процессе может внести вклад в реализацию раствор СМФА в 1-й месяц постнатального развития противоопухолевого эффекта. (профилактическое применение). Препарат получа- Интерес в данном аспекте представляют фито- ли самки, начиная с последних сроков беременности адаптогены, которые продемонстрировали способ- до отъема детенышей в возрасте 3 нед. Затем 1 нед ность нормализовать межклеточную адгезию и уси- детеныши-самцы пили воду с препаратом самостоя-ливать реакции иммунитета против опухоли [4, 5]. тельно. В предыдущих исследованиях на модели спон- Мультифитоадаптоген представляет собой неток-танного гепатоканцерогенеза у мышей СВА было сичную фармацевтическую композицию на основе выявлено, что кратковременное в раннем онтогенезе компонентов экстрактов 40 растений, в том числе воздействие на примере комплексного мультифито- фитоадаптогенов (женьшеня, элеутерококка, аралии адаптогена (МФА) в форме жидкого экстракта при- и др.). В составе МФА определены тритерпеновые водит к усилению экспрессии интегринов LFA-1 сапонины, флавоноиды, эфирные масла, аминокис-и Mac-1 на клетках периферической крови. Оно со- лоты, витамины и другие соединения. Разработаны провождается признаками лейкоцитарной инфильт- способы его биологической и физико-химической рации и деструкции гепатом, подавлением сывороточ- стандартизации [11—13]. Определены антиоксидантные, ного уровня иммуносупрессивных интерлейкинов 6 антистрессорные, гормономодулирующие, антиму-и 10. Эти результаты оказались существенными для тагенные, противоопухолевые и иммуномодулирую-снижения частоты спонтанного опухолеобразования щие, а также адгезиогенные и интерфероногенные и увеличения продолжительности и качества жизни свойства [14—17]. животных [6—9]. Сухой экстракт МФА был приготовлен из жидкой Однако до сих пор не определен фенотип клеток, формы с использованием технологии сублимиро-инфильтрирующих опухоль, и вопрос о том, экспрес- вания. сированы ли на этих клетках, в частности, молекулы У контрольных и опытных животных в возрасте лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Mac-1 при ис- 4, 8, 22 мес на лимфоцитах периферической крови пользовании МФА, до конца не выяснен. Наряду исследовали уровни экспрессии лейкоцитарных ин-с этим с фармакологической точки зрения более со- тегринов СD11a, CD11b методом непрямой иммуно-временной и перспективной является сухая форма флуоресценции. Оставшиеся животные находились экстракта, практически субстанция препарата. под наблюдением вплоть до их естественной гибели. В связи с этим исследование воздействия сухого Статистический анализ данных проводили с ис-экстракта мультифитоадаптогена (СМФА) на экс- пользованием программы Statistica 6.0, применяя прессию лейкоцитарных интегринов, а также оценка дисперсионный анализ One-way ANOVA. Данные
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSiAN JOURNAL 0F BIOTHERAPY 12020 том 19 | vol. 19
выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Для оценки различий между группами применяли критерий Ньюмена—Кейлса. Статистически значимым считали различие прир <0,05.
Результаты и обсуждение
В табл. 1 представлены результаты воздействия СМФА на экспрессию CD11a-антигена клетками крови у мышей-самцов СВА в онтогенезе. Из таблицы видно, что в возрасте 4 и 8 мес у мышей обеих групп количество клеток, экспрессирующих CD11a-антиген, статистически не различалось (р >0,5). К 22-месячному возрасту у мышей контрольной группы выявлено статистически достоверное снижение этого показателя с 45,9 ± 3,4 % (в возрасте 8 мес) до 36,5 ± 1,9 % (р8-22 = 0,03). У мышей опытной группы к 22 мес изменение экспрессии CD11a-антигена по сравнению с ранним периодом онтогенеза происходит статистически незначимо (52,3 ± 3,0 и 44,6 ± 2,1 % соответственно, р4-22 = 0,05). По сравнению с 8-месячным возрастом этот показатель статистически не различался (р8-22 = 0,2). Вместе с тем значение этого показателя оказалось выше в сравнении с аналогичным периодом онтогенеза (22 мес) у мышей контрольной группы (р1-2 = 0,01).
Результаты воздействия СМФА на экспрессию CD11b-антигена клетками крови мышей СВА в онтогенезе представлены в табл. 2. Согласно этим данным у мышей контрольной группы количество лимфоцитов крови, экспрессирующих CD11b-антиген, в возрасте 8 мес (12,1 ± 1,7 %) достоверно не отличалось
от такового у 4-месячных животных (13,4 ± 1,7 %; р4-8 = 0,6). В возрасте 22 мес этот показатель статистически достоверно снизился до 6,8 ± 1,1 % (р8-22 = 0,02; р4-22 = 0,004). У мышей опытной группы уровни экспрессии CD11b-антигена в возрасте 4 и 8 мес не различались (17,2 ± 1,5 % и 15,6 ± 1,4 %; р4-8 = 0,5), но имели тенденцию к повышению по сравнению с контрольными животными в аналогичные периоды онтогенеза (р1-2 = 0,1). К 22-месячному возрасту уровень экспрессии снизился до 12,1 ± 1,1 % (р8-22 = 0,06; р4-22 = 0,01). Вместе с тем в позднем онтогенезе в данной группе уровень экспрессии CD11b-антигена достоверно превышал значение у мышей контрольной группы в этом возрасте (р1-2 = 0,003).
Таким образом, полученные результаты показали, что при профилактическом воздействии СМФА у опытных мышей число лимфоцитов, экспрессирующих молекулы LFA-1 (СD11a/CD18) и Мас-1 (СD11b/CD18), повышено по сравнению с контрольными животными.
Учитывая, что лигандами LFA-1 являются молекулы межклеточной адгезии 1САМ-1, 1САМ-2, можно полагать, что увеличение количества лимфоцитов, экспрессирующих лейкоцитарный интегрин CD11a, под воздействием СМФА способствует более высокой иммунореактивности таких животных в осуществлении киллинга клеток-мишеней эффекторами иммунитета ^К-клетками, цитотоксическими лимфоцитами) [18, 19].
Вместе с тем молекула Мас-1 экспрессируется на нейтрофилах, лимфоцитах и NK-клетках, являясь
Таблица 1. Уровень экспрессии CD11a-антигена лимфоцитами крови у мышей СВА при воздействии сухого экстракта мультифито-адаптогена в 1-й месяц постнатальногоразвития
Table 1. The CD11a antigen expression by blood lymphocytes in CBA mice under multiphytoadaptogen dry extract administration during the first month of postnatal development
CD 11a + лимфоциты, % CD 11a + lymphocytes, %
Группа животных
Animal group 4 мес 8 мес 22 мес P
1-я Контроль (интактные), n = 33 1 Control (intact), n = 33 49,4 ± 3,6 n = 11 45,9 ± 3,4 n = 10 36,5 ± 1,9 n = 11 P4-8 = 0,5 P8_22 = 0,03 P4_22 = 0,005
2-я Опыт (воздействие СМФА), n = 36 2 Experiment (MDE exposure), n = 362 52,3 ± 3,0 n = 12 49,0 ± 2,9 n = 12 44,6 ± 2,1 n = 12 P4-8 = 0,4 Ps-22 = 0,2 P4_22 = 0,05
P р,_2 = 0,5 P1—2 = 0,5 P i—2 = 0,01
Примечание. Здесь и в табл. 1, 2: СМФА — сухой экстракт мультифитоадаптогена; n — количество животных; р12— различие показателей между группами; p—s — различие показателей на 4-м и 8-м месяце; р — различие показателей на 8-м и 22-м месяце; р—22—различие показателей на 4-м и 22-м месяце.
Note. Here and in the table 1, 2: MDE — multifitoadaptogen dry extract; n — animals number;р12 — intergroup difference;р — 4—8 months difference; р^22 — 8—22 months difference; р—22 — 4—22 months difference.
Таблица 2. Уровень экспрессии CDllb-антигена лимфоцитами крови у мышей СВА при воздействии сухого экстракта мультифито-адаптогена в 1-й месяц постнатальногоразвития
Table 2. The CD11b antigen expression by blood lymphocytes in CBA mice under multiphytoadaptogen dry extract administration during the first month of postnatal development
Группа животных CD 11b + лимфоциты, %
4 мес 8 мес 22 мес P
1-я Контроль (интактные), n = 36 1 Control (intact), n = 36 13,4 ± 1,7 n = 12 12,1 ± 1,7 n = 12 6,8 ± 1,1 n = 12 рА-8 = 0,6 р8_22 = 0,02 р4_22 = 0,004
2-я Опыт (воздействие СМФА), n = 36 2 Experiment (MDE exposure), n = 36 17,2 ± 1,5 n = 12 15,6 ± 1,4 n = 12 12,1 ± 1,1 n = 12 Р4-8 = 0,5 р8_22 = 0,06 р4 22 =0,01
p р,_2 = 0,1 р,_2 = 0,1 р1-2 = 0,003
лигандом 1САМ-1. Поэтому аналогичные выводы уместны и в отношении повышенного уровня экспрессии CD11b-антигена у мышей опытной группы по сравнению с контрольными животными. В данном случае также возможна активация способности иммунных эффекторов инфильтрировать опухоль, контактировать с клетками-мишенями, что помогает гибели последних [20].
На основании предшествующих и настоящих исследований можно полагать, что у мышей при спонтанном гепатоканцерогенезе сниженная активность Т-лимфоцитов обусловлена недостатком экспрессии молекул лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Мас-1 на эффекторах иммунитета. Фито-адаптогены, обладающие адгезиогенным действием, способны нормализовать обозначенные показатели.
Таким образом, при введении СМФА в течение 1-го месяца постнатального онтогенеза высокогепа-
томным мышам, включая завершающий период диф-ференцировки нормальной ткани печени (5-15-й день постнатального развития), можно обеспечить длительный по времени эффект повышения экспрессии на клетках крови молекул лейкоцитарных инте-гринов LFA-1 и Mac-1.
Вместе с тем эффективность профилактического воздействия СМФА на уровень экспрессии лейкоцитарных интегринов сравнима с таковой для жидкой формы фитоадаптогена, выявленной в предыдущем исследовании [6].
Выводы
Улучшение продукции Р2-интегринов LFA-1 и Mac -1 на клетках крови мышей, генетически предрасположенных к раку печени, при введении сухого экстракта препарата в 1-й месяц постнатального развития способствует адгезии эффекторов иммунитета с клетками опухолей.
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
1. Schttenhelm L., Hilkens C.M., Morrison V.L. p2 Integrins as regulators of dendritic cell, monocyte, and macrophage function. Front Immunol 2017;20(8):1866-77.
DOI: 10.3389/fimmu.2017.01866.
2. Бочарова О.А. Адгезионная концепция в биологии злокачественного роста. Патологическая физиология и экспериментальная терапия 2014;58(2):87-93. DOI: 10.25557/00312991.2014.02.87-93. [Bocharova O.A. Adhesive concept in biology of malignant
growth. Patologicheskaya fiziologiya i ehksperimentalnaya terapiya = Pathological Physiology and Experimental Therapy 2014;58(2):87-93. (In Russ.)].
3. Takeichi T., Mocevicius P., Deduchovas O. et al. aLp2 integrin is indispensable
for CD8+ T-cell recruitment in experimental pancreatic and hepatocellular cancer. Int J Cancer 2012;130(9):2067-76. DOI: 10.1002/ijc.26223.
4. Бочарова О.А. Профилактическая онкология и фитоадаптогены. Вестник РАМН 2009;7:41-5. [Bocharova O.A.
Preventive oncology and phytoadapto-gens. Vestnik RAMN = Bull RAMS 2009;7:41-5. (In Russ.)].
5. Shikov A.N., Pozharitskaya O.N., Makarov V.G. Aralia elata var. mand-shurica(Rupr. & Maxim.) J.Wen:
an overview of pharmacological studies. Phytomedicine 2016;23(12):1409-21. DOI: 10.1016/j.phymed.2016.07.011.
6. Бочарова О.А., Карпова Р.В., Ильенко В.А. и др. Лейкоцитарные инте-грины при гепатоканцерогенезе мышей высокораковой линии СВА.
Российский биотерапевтический журнал 2013;12(3):53-6. [Bocharova O.A., Karpova R.V., Ilyenko V.A. et al. Leukocyte integrins at hepato carcino-genesis in high-cancer CBA strain of mice. Rossijskiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy 2013;12(3):53-6. (In Russ.)].
7. Бочарова О.А., Бочаров Е.В., Карпова Р.В. и др. Снижение возникновения гепатом при воздействии фито-адаптогена у высокораковых мышей СВА. Российский биотерапевтический журнал 2014;13(2):73-6. [Bocharova O.A., Bocharov E.V., Karpova R.V. et al. Reduced occurrence of hepatomas in phytoadaptogen exposed high-cancer CBA strain of mice. Rossijs-kiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy 2014;13(2):73-6. (In Russ.)].
8. Бочаров Е.В., Карпова Р.В., Вершин-ская А.А. и др. Лимфоцитарная инфильтрация гепатокарцином мышей высокораковой линии СВА при воздействии мультифитоадаптогена
в раннем постнатальном онтогенезе. Российский биотерапевтический журнал 2015;14(2):85-90. [Bocharov E.V., Karpova R.V., Vershinskaya A.A. et al. Hepatocarcinomas infiltration lymphocytes in high-cancer CBA mice when multiphytoadaptogen exposed in early postnatal ontogenesis. Rossijskiy biotera-pevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy 2015;14(2):85-90. (In Russ.)].
9. Бочаров Е.В., Карпова Р.В., Бочарова О.А. и др. Воздействие мультифитоадаптогена в раннем постнатальном онтогенезе, улучшающее выживаемость и соматическое состояние мышей высокораковой линии. Российский биотерапевтический журнал 2017;16(1):76—81. [Bocharov E.V., Karpova R.V., Bocharova O.A. et al. Multiphytoadaptogen effect in early postnatal ontogenesis improves survival and mice somatic condition of high-cancer CBA strain of mice. Rossijskiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy 2017;16(1):76-81. (In Russ.)]. DOI: 10.17650/1726-97842017-16-1-76-81.
10. Модянова Е.А., Бочарова О.А., Маленков А.Г. Профилактическое
действие контактинов-кейлонов на спонтанный канцерогенез у линейных мышей. Экспериментальная онкология 1983;5(3):39—42. [Modyanova E.A., Bocharova O.A., Malenkov A.G. The kontaktins-chalones preventive action on spontaneous carcinogenesis in mice inbred strains. Ehks-perimentalnaya onkologiya = Experimental oncology 1983;5(3):39—42. (In Russ.)].
11. Бочарова О.А., Барышников А.Ю. Фитоадапгогены в онкологии. Зоо-МедВет 2004. 138 с. [Bocharova O.A., Baryshnikov A.Y. Phytoadaptogens
in oncology. ZooMedVet 2004. 138 p. (In Russ.)].
12. Шейченко В.И., Бочарова О.А., Шейченко О.П. и др. Аналитические возможности метода ЯМР для определения компонентов препарата Фи-томикс-40. Заводская лаборатория. Диагностика материалов 2006;72(8):15—23. [Shejchenko V.I., Bocharova O.A., Schejchenko O.P. et al. Analytical opportunities of NMR method for determination of Fitomix-40 preparation composition. Zavodskaya laboratoriya. Diagnostika materialov = Factory laboratory. Material diagnostics 2006;72(8):15—23. (In Russ.)].
13. Шейченко О.П., Бочарова О.А., Крапивкин Б.А. и др. Исследование комплексного фитоадаптогена методом ВЭЖХ. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии 2012;10:52-9. [Shejchenko O.P., Bocharova O.A., Krapivkin B.A. et al. Study of complex phytoadaptogen
by HPLC method. Voprosy biologi-cheskoy, meditsinskoy i farmatsevtich-eskoy khimii = Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry 2012;10:52-9. (In Russ.)].
14. Бочарова О.А., Пожарицкая М.М., Чекалина Т.Л. и др. Роль адгезионных нарушений в патогенезе лейкоплакии и возможности их коррекции неспецифическим иммуномодулятором. Иммунология 2004;25(1):36-43. [Bocharova O.A., Pozharitskaya M.M. Adhesive impairments in the pathogene-sis ot leukoplakia and potentialities
of their correction by immunomodulator. Immunologiya = Immunology 2004;25(1):36-43. (In Russ.)].
15. Бочаров Е.В., Кучеряну В.Г., Крыжановский Г.Н. и др. Влияние комплексного фитоадаптогена
на МФТП-индуцированный паркин-сонический синдром у мышей. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2006;141(5):495-8. [Bocharov E.V., Kucheryanu V.G., Kry-zhanovsky G.N. et al. The effect of complex phytoadaptogen on MPTP-induced Parkinson's syndrome in mice Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine 2006;141(5):495-8. (In Russ.)].
16. Бочарова О.А., Давыдов М.И., Кли-менков А.А. и др. Перспективы применения фитоадаптогена в лечении распространенного рака желудка. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2009;148(7):96-9. [Bocharova OA, Davydov M.I., Klimen-kov A.A. et al. Prospects of using phytoadaptogen in the treatment of diffuse stomach cancer. Byulleten' eksperimen-tal'noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine 2009;148(7):96-9. (In Russ.)].
17. Куренная О.Н., Карпова Р.В., Бочарова О.А. и др. Антимутагенез мультифитоадаптогена в клетках дрожжей-сахаромицетов. Генетика 2013;49(12):1364-9.
DOI: 10.7868/S0016675813120059. [Kurennaya O.N., Karpova R.V., Bocharova O.A. et al. Antimutagenesis of multiphytoadaptogene in yeast saccharomyces. Genetika = Russian Journal of Genetfcs 2013;49(12):1364-9. (In Russ.)].
18. Li N., Yang H., Wang M. et al. Ligand-specific binding forces of LFA-1 and Mac-1 in neutrophil adhesion and crawling. Mol Biol Cell 2018;29(4):408-18. DOI: 10.1091/mbc.E16-12-0827.
19. Sharma A., Lawry S.M., Klein B.S. et al. LFA-1 Ligation by high-density ICAM-1 is sufficient to activate IFN-y release by innate T-lymphocytes. J Immunol 2018;201(8):2452-61.
DOI: 10.4049/jimmunol.1800537.
20. Sasada T., Suekane S. Variation of tumor-infiltrating lymphocytes in human cancers: controversy on clinical significance. Immunotherapy 2011;3(10):1235—51. DOI: 10.2217/imt.11.106.
ORCID авторов/ ORCID of authors
О.А. Бочарова/O.A. Bocharova: https://orcid.org/0000-0002-6365-2888 Р.В. Карпова/R.V. Karpova: https://orcid.org/0000-0003-4893-1472 Е.В. Бочаров/E.V. Bocharov: https://orcid.org/0000-0003-2342-9881 В.Г. Кучеряну/V.G. Kucheryanu: https://orcid.org/0000-0002-5071-3581
Вклад авторов
О.А. Бочарова: разработка дизайна исследования, планирование работы, анализ рукописи; Р.В. Карпова, Е.В. Бочаров: получение и анализ данных, написание текста рукописи;
A.А. Вершинская: получение и анализ данных;
М.А. Барышникова, Ю.Н. Соловьев: анализ рукописи; И.В. Казеев: получение и анализ данных;
B.Г. Кучеряну: обзор публикаций по теме исследования. Authors' contributions
0.A. Bocharova: developing the research design, study planning, manuscript analysis; R.V. Karpova, E.V. Bocharov: data collection and analysis, writing the manuscript; A.A. Vershinskaya: data collection and analysis;
M.A. Baryshnikova, Y.N. Soloviev: manuscript analysis;
1.V. Kazeev: data collection and analysis;
V.G. Kucheryanu: reviewing of publications of the article's theme.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Financing. The study was performed without external funding.
Соблюдение правил биоэтики. Исследование выполнено в соответствии с этическими нормами обращения с животными, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для исследовательских и иных научных целей. Compliance with principles of bioethics. The study was performed in accordance with ethical principles adopted by the European Convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes.
Статья поступила: 01.10.2019. Принята к публикации: 19.12.2019. Article submitted: 01.10.2019. Accepted for publication: 19.12.2019.
