Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10 Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Южно-Российский онкологический журнал. 2024. Т. 5, № 2. С. 14-24

4.0

https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-2

https://elibrary.ru/incomr

Южно-Российский

онкологический журнал

3.1.6. Онкология, лучевая терапия

South Russian Journal

ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ

of Cancer

Tом 5

№ 2, 2024

Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену

урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10

Е. М. Франциянц1, В. А. Бандовкина1, Е. И. Сурикова1, И. В. Каплиева1, Ю. А. Погорелова1, И. В. Нескубина1, Л. К. Трепитаки1, Н. Д. Черярина1, Н. Д. Ушакова1, О. Г. Ишонина1,2, М. А. Гусарева1, И. А. Удаленкова1

1 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

2 ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

valerryana@yandex.ru

РЕЗЮМЕ

Цель исследования. Изучение влияния нокаута по гену урокиназы у мышей обоего пола с перевитой меланомой

В16/F10 на функционирование звеньев фибринолитической системы.

Материалы и методы. Были использованы мыши обоего пола: основная группа генмодифицированная линия

C57BL/6-Plautm1.1Bug – ThisPlauGFDhu/GFDhu (uPA-/-); группа контроля – линия С57Bl/6 (uPA+/+). Животным по

стандартной методике перевивали меланому В16/F10 и через 3 недели роста в 10 % гомогенатах опухоли и ее перифокальной зоне ИФА методом определяли уровень: плазминогена (ПГ), плазмина (РАР), рецептора урокиназы uPAR, содержание (АГ) и активность (акт) uPA, t- PA и PAI-I (Cussabio, Китай).

Результаты. У интактных животных uPA-/- в коже оказалась существенно подавлена, по сравнению с uPA+/+ активность и содержание урокиназы (в 100–860 раз), однако у самок не изменился уровень uPAR, тогда как у самцов

снизился в 1,9 раза. Уровень плазмина у uPA-/- мышей был выше в 2,1–4,2 раза, по сравнению с uPA+/+ животными.

Рост меланомы В16/F10 у uPA-/- мышей был замедлен, тормозилось метастазирование, однако не увеличивалась

продолжительность жизни. Динамика изменений компонентов фибринолитической системы при росте меланомы

у uPA-/- мышей отличалась от uPA+/+: в образцах опухоли снижался уровень РАР более чем в 2 раза, не повышался

уровень и активность uPA, практически не реагировала PAI, однако, как и у uPA+/+ возрастала активность t- PA в 3,8–8,2 раза.

Заключение. Несмотря на подавление роста первичного узла опухоли и процессов метастазирования у мышей

uPA-/-, средняя продолжительность жизни не увеличивалась, что свидетельствует о сложных механизмах опухолевой болезни и наличии альтернативных биологических путей, позволяющих меланоме прогрессировать в условиях

нокаута гена урокиназы.

Ключевые слова: нокаут по гену урокиназы, мыши, меланома В16/F10, фибринолитическая система

Для цитирования: Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А. Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену

урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10. Южно- Российский онкологический журнал. 2024; 5(2):14-24.

https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-2, https://elibrary.ru/incomr Для корреспонденции: Бандовкина Валерия Ахтямовна – д.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных

опухолей ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

Адрес: 344037, Российская Федерация, г. Ростов-на-Дону, ул. 14 линия, д. 63

E-mail: valerryana@yandex.ru

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2302-8271

SPIN: 8806-2641, AuthorID: 696989

ResearcherID: AAG-8708-2019

Scopus Author ID: 57194276288

Соблюдение этических стандартов: работа с животными проводилась в соответствии с правилами «Европейской конвенции о защите

животных, используемых в экспериментах» (Директива 86/609/ЕЕС) и Хельсинкской декларации, а также в соответствии с «Международными

рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» и приказом Минздрава России

от 19.06.2003 г. № 267 «Об утверждении правил лабораторной практики». Комиссией по биоэтике ФГБУ «Национальный медицинский

исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24.12.2019 г., был одобрен протокол

исследования (протокол этического комитета № 15/75) по работе с мышами линии Balb/c Nude Финансирование: финансирование данной работы не проводилось

Конфликт интересов: все авторы заявляют об отсутствии явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи

Статья поступила в редакцию 13.10.2023; одобрена после рецензирования 01.04.2024; принята к публикации 09.05.2024

© Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А., 2024

14

South Russian Journal of Cancer. 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-2

https://elibrary.ru/incomr

ORIGINAL ARTICLE

Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma

E. M. Frantsiyants1, V. A. Bandovkina1, E. I. Surikova1, I. V. Kaplieva1, Yu. A. Pogorelova1, I. V. Neskubina1, L. K. Trepitaki1, N. D. Cheryarina1, N. D. Ushakova1, O. G. Ishonina1,2, M. A. Gusareva1, I. A. Udalenkova1

1 National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation 2 Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation valerryana@yandex.ru

ABSTRACT

Purpose of the study. Was to reveal the effect of urokinase gene knockout in male and female mice with transplanted B16/F10 melanoma on the functions of the fibrinolytic system units.

Materials and methods. Male and female mice were used: main group with genetically modified mice C57BL/6-Plautm1.

1Bug – ThisPlauGFDhu/GFDhu (uPA-/-); control group with С57Bl/6 (uPA+/+) mice. B16/F10 melanoma was transplanted by the standard methods to the animals, and levels of plasminogen (PG), plasmin (PAP), urokinase receptor uPAR, content (AG) and activity (act) of uPA, t- PA and PAI-I were measured with ELISA (Cussabio, China) in 10 % tumor homogenates and peritumoral area after 3 weeks of tumor growth.

Results. The activity and levels of urokinase in intact uPA-/- animals were significantly (by 100–860 times) inhibited, compared to uPA+/+, but uPAR levels were unchanged in females and were 1.9 times lower in males. PAP levels in uPA-/- mice were 2.1–4.2 times higher than in uPA+/+ animals. The growth of B16/F10 melanoma in uPA-/- mice was slower and metastasizing was suppressed, but their survival was not improved. The dynamics of changes in components of the fibrinolytic system in presence of melanoma growth differed in uPA-/- mice, compared to uPA+/+ animals: PAP levels in tumor samples decreased by over 2 times, uPA levels and activity were not increased, PAI was practically unchanged, but activity of t- PA elevated by 3.8–8.2 times, as well as in uPA+/+ mice.

Conclusion. Despite the suppression of the growth and metastasis of the primary tumor nodes in uPA-/- mice, their average survival was not improved, which indicates that the mechanisms of tumor are complex and there are alternative biological pathways supporting melanoma to survive in conditions of the urokinase gene knockout.

Keywords: urokinase gene knockout, mice, melanoma B16/F10, fibrinolytic system For citation: Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma. South Russian Journal of Cancer. 2024; 5(2):14-24. https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-2, https://elibrary.ru/incomr For correspondence: Valeriya A. Bandovkina – Dr. Sci. (Biol.), senior researcher at the laboratory for the study of pathogenesis of malignant tumors, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation Address: 63 14 line str., Rostov-on-Don 344037, Russian Federation

E-mail: valerryana@yandex.ru

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2302-8271

SPIN: 8806-2641, AuthorID: 696989

ResearcherID: AAG-8708-2019

Scopus Author ID: 57194276288

Compliance with ethical standards: the work with animals was carried out in compliance with the rules of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and other Scientific Purposes (Directive 86/609/EEC) and the Helsinki Declaration, as well as in compliance with the International Guiding Principles for Biomedical Research Involving Animals, and Order No. 267 of the Ministry of Health of the Russian Federation dated 06/19/2003 "On approval of the rules for laboratory practice". The Bioethics Commission of the National Medical Research Center of Oncology dated 12/24/2019, approved the research protocol (Protocol of the Ethical Committee No. 15/75) on working with Balb/c Nude mice Funding: this work was not funded

Conflict of interest: the authors declare that there are no obvious and potential conflicts of interest associated with the publication of this article The article was submitted 13.10.2023; approved after reviewing 01.04.2024; accepted for publication 09.05.2024

15

South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma ВВЕДЕНИЕ

экспрессированы. В таких животных моделях ге-

ны-супрессоры опухолей могут быть подавлены

Фибринолитическая система считается одним

с использованием традиционных методов, таких

из ведущих механизмов канцерогенеза, за счет

как ретровирусная инфекция, микроинъекция ДНК-

разрушения клеточных мембран, пролиферации,

конструкций и так называемый «направленный

миграции и инвазии клеток [1].

на гены» трансгенный подход. На сегодняшний

Активаторы плазминогена урокиназного типа

день трансгенные модели стали традиционными

(uPA) и тканевого типа (t- PA) представляют собой

и успешно применяются в исследованиях канцеро-

сериновые протеазы, которые превращают плазми-

генеза [12].

ноген в плазмин после связывания с рецептором

Для нас наибольший интерес представляли

uPA (uPAR) [2]. uPA обнаруживают на поверхности

мыши с нокаутом гена uPA, полученные с помощью

опухолевых клеток, а его сверхэкспрессия на конеч-

молекулярно- генетического метода, в ходе которого

ной стадии трансформации злокачественных кле-

изменения вносятся в нуклеотидную последова-

ток, способствует процессам метастазирования [3].

тельность гена uPA, в результате чего урокиназа

Активация фибринолитической системы и образо-

не связывается рецептором активатора плазми-

вание плазмина стимулирует металлопротеиназы,

ногена урокиназного типа (uPAR). Данные живот-

ангиогенные факторы роста, что разрушает физи-

ные- мутанты могут использоваться в изучении

ческий барьер на пути миграции опухолевых клеток

процессов воспаления, онкогенеза, механизмов

и стимулирует рост опухоли [4].

фибринолиза в опухоли и окружающих тканях.

Ряд исследователей считают, что понимание

Цель исследования: изучение влияния нокаута

молекулярных механизмов биологического дей-

по гену урокиназы у мышей обоего пола с пере-

ствия системы плазмин/плазминоген и ингиби-

витой меланомой В16/F10 на функционирование

рования ангиогенеза посредством блокирования

звеньев фибринолитической системы.

сериновых протеаз может позволить улучшить

терапевтические стратегии для регуляции роста

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

злокачественных опухолей и нарушений, связанных

с неоваскуляризацией [5, 6].

В исследовании были использованы генмодифи-

Ранее было показано, что у мышей линии С57Bl/6

цированные самки и самцы мышей линии C57BL/

с диким типом генов в динамике роста перевивной

6-Plautm1.1Bug – ThisPlauGFDhu/GFDhu (uPA-/-) с на-

меланомы В16/F10 происходят изменения звеньев

чальной массой самок 24–26 г, самцов – 31–33 г,

фибринолитической системы кожи, характеризую-

полученные из питомника лабораторных животных

щиеся повышенной активностью всех компонен-

«Пущино» Филиала Института биоорганической хи-

тов системы активации плазминогена, приводящей

мии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчин-

к повышенному содержанию в ней плазмина, а ко-

никова (Пущино, Московская область). Животные

морбидное заболевание – хроническая нейрогенная

с нокаутом по гену урокиназы (uPA-/-) могут исполь-

боль – оказывает модифицирующее влияние на

зоваться в исследованиях хронического воспаления

исследованные показатели [7–9].

ткани, механизмов фибринолиза, онкогенеза и роста

Экспериментальные модели опухолей дают воз-

сосудов в опухоли и окружающей ее ткани. В каче-

можность выяснить причины, изучить патогенез

стве контроля использовали мышей обоего пола

опухолевого процесса, разработать методы его про-

линии С57ВL/6 (uPA+/+) с начальной массой 21–23 г

филактики и лечения, при этом обоснованным яв-

полученных из ФГБУН «Научный центр биомедицин-

ляется использование различных линий животных,

ских технологий «Андреевка» ФМБА» (Московская

в том числе с генетически детерминированными

область). Животных содержали при естественном

характеристиками [10]. Модели генно- инженерных

режиме освещения со свободным доступом к воде

мышей успешно используются на протяжении

и пище. Исследование было проведено в соответ-

десятилетий при моделировании опухолевого

ствии с «Международными рекомендациями по

процесса [11]. Существуют определенные типы

проведению медико- биологических исследований

трансгенных мышей, использующиеся в иссле-

с использованием животных» и приказом Мин-

дованиях злокачественного процесса, у которых

здрава РФ № 267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении

онкогены могут быть конститутивно или условно

правил лабораторной практики».

16

Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 14-24

Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А. Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10

Исследование выполнено на 64 самцах и 64 сам-

Статистическую обработку полученных резуль-

ках мышей. Животные были разделены на группы

татов проводили при помощи программы Statistica

по 10 особей в каждой: интактные самки и самцы

10.0. Для всех количественных данных вычисляли

линии С57ВL/6 (uPA+/+); интактные самки и самцы

групповое среднее арифметическое (M) и стан-

линии C57BL/6-Plautm1.1Bug – ThisPlauGFDhu/GFDhu

дартную ошибку (m). Все полученные результаты

(uPA-/-); контрольная группа самки и самцы линии

были проверены на соответствие закону о нор-

С57ВL/6 (uPA+/+) через 3 недели после перевивки

мальном распределении (критерий Шапиро- Уилка

меланомы В16/F10; основная группа самки и самцы

(для малых выборок)). При соответствии выборки

линии C57BL/6-Plautm1.1Bug – ThisPlauGFDhu/GFDhu

нормальному распределению использовали пара-

(uPA-/-) через 3 недели после перевивки меланомы

метрическую статистику (критерий Стьюдента),

В16/F10. Срок исследования – через 3 недели после

при несоответствии – использовали непараметри-

перевивки меланомы В16/F10 – был выбран, так как

ческую статистику (критерии Вилкоксона- Манна-

это был этап массовой гибели для самцов мышей

Уитни). Статистически значимыми считали раз-

и начало гибели самок, кроме того через 3 недели

личия при р < 0,05.

были отмечены максимальные отличия в средних

объемах опухоли у животных uPA-/- и uPA+/+ линий.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Отдельно были выделены группы uPA-/- (по 12 осо-

бей каждого пола) и uPA+/+ (по 25 особей каждого

Установлено, что процесс канцерогенеза у ген-

пола) животных для исследования средней про-

модифицированных самок мышей (uPA-/-) по срав-

должительности жизни.

нению с контролем (uPA+/+) имел особенности,

В работе использовали клеточную линию мыши-

заключающиеся в сокращении доклинического

ной, метастазирующей в легкие меланомы В16/ F10,

периода развития меланомы и снижении средних

полученную из РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (г. Мо-

объемов опухолевых узлов на всех этапах наблю-

сква). Меланома В16/F10 перевивалась путем под-

дения (с 1 по 4 нед.). У самок опытной группы

кожного введения 0,5 мл взвеси опухолевой ткани

диагностировали единичные метастазы в легких,

в физиологическом растворе (1:10) в правую зад-

тогда как в контроле наблюдалось метастатиче-

нюю лапу мыши по стандартной методике [13].

ское поражение легких и печени. У самцов опухоли

При стандартной перевивке опухоль появляется

характеризовались достаточно активным, «скачко-

в 100 % случаев, достаточно быстро растет и на

образным» ростом, а их средний объем на 4 неделе

12–16 сутки роста метастазирует преимущественно

после перевивки не отличался от таковых значе-

гематогенно в легкие (60–90 %), реже – в печень

ний у мышей с нормальным геномом. У самцов

и селезенку [14]. Для проведения эксперимента

uPA-/- на всех этапах роста перевивной меланомы

использовали второй пассаж перевивки меланомы

В16/F10 видимые метастазы во внутренние органы

В16/F10 мышам линии С57ВL/6.

не выявлены, однако обнаружены кровоизлияния

Рост опухоли оценивали путем ежедневного

в легкие. Средняя продолжительность жизни у мы-

измерения диаметров ее в трех взаимно перпен-

шей uPA-/- и uPA+/+ не имела значимых отличий

дикулярных областях, с последующим расчетом

и составила у самок 34,67 ± 0,67 против 30,25 ± 1,67,

объема опухоли как произведение трех ее замеров.

а у самцов 23,33 ± 3,18 против 22,1 ± 0,82 соответ-

Интактных животных, а также мышей кон-

ственно [15].

трольных и основных групп через 3 недели после

Исходя из полученных ранее результатов раз-

перевивки меланомы декапитировали, на холоде

личий в росте злокачественных опухолей у живот-

выделяли: опухоль, перифокальную зону, кожу.

ных с нокаутом гена урокиназы и диким типом гена

Образцы механически гомогенизировали, из тка-

представляло интерес выяснить, какие отличия

ней получали 10 % гомогенаты, приготовленные на

в содержании и активности основных звеньев фи-

0,1М калий- фосфатном буфере рН 7.4, содержащем

бринолитической системы кожи характерны для

0,1 % Твин-20 и 1 % БСА В гомогенатах тканей им-

животных с нокаутом по гену урокиназы (табл. 1, 2).

муноферментыми методами определяли уровень:

По сравнению с животными контрольной груп-

плазминогена (РГ), плазмина (РАР), рецептора уро-

пы в коже интактных мышей uPA -/- обоего пола

киназы uPAR, содержание (АГ) и активность (акт)

регистрировались только следы uPA: отмечено

uPA, t- PA и PAI-I (Cussabio, Китай).

снижение уровней содержания и активности uPA

17

South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma в 100–860 раз (табл. 1, 2). У интактных самок

у мышей uPA+/+ только активности tPA в 2,5 раза,

uPA- /- привлекает внимание высокое содержание

несмотря на повышение его содержания в 1,7 раза.

РАР, превосходящее в 4,2 раза тот же показатель

Количество рецептора uPAR у uPA-/- мышей- самок

у самок мышей uPA+/+ при сниженном в 1,3 раза

было на том же уровне, что и у мышей uPA+/+, тогда

( р < 0,05) содержании ПГ.

как у самцов оказалось снижено в 1,9 раза. Значи-

У интактных uPA-/- самцов в коже были повыше-

тельные различия с нормой замечены и по PAI-I:

ны концентрации как РАР в 2,1 раза, так и в 1,8 раза

у самок uPA-/- активность PAI-I и его содержание ока-

ПГ по сравнению с показателями в коже интактных

зались ниже нормы в 15,0 и 3,0 раза соответственно,

мышей uPA+/+ (табл. 2).

у самцов в 4,9 раза и в 9,8 раза соответственно.

В условиях дефицита uPA при высоком содержа-

Так как средние размеры опухоли у самок

нии РАР ожидалось возрастание уровня второго

мышей uPA-/- через 3 недели эксперимента были

активатора ПГ – tPA, однако содержание и актив-

меньше, чем у самок uPA+/+ [15], далее провели

ность его была снижена только у самцов uPA-/-

сравнительный анализ звеньев фибринолитиче-

в 4,3 раза и в 1,7 раза соответственно. У самок

ской системы в образцах меланомы животных

uPA-/- выявлено снижение относительно данных

с нокаутом и мышей с диким типом генома.

Таблица 1. Содержание и активность компонентов фибринолитической системы в коже, опухоли и перифокальной

зоне у самок мышей uPA -/- с меланомой В16/F10 через 3 недели после перевивки ( M±m) Опухоль через

Перифокальная

Показатели

Кожа интактных

Кожа через 3 недели

животных (норма)

роста меланомы

3 недели после

зона через 3 недели

перевивки

после перевивки

Самки uPA -/-

uPA-акт (ед/г тк)

0,010 ± 0,0013

0,009 ± 0,00092,3

0,025 ± 0,0023

0,01 ± 0,0013

uPA-АГ (нг/г тк)

0,220 ± 0,023

0,24 ± 0,0182,3

0,14 ± 0,0111,3

0,73 ± 0,061,2,3

uPAR (пг/г тк)

58,20 ± 4,3

56,2 ± 4,7

66,2 ± 5,33

59,5 ± 5,33

РАР (нг/г тк)

45,0 ± 3,43

18,75 ± 1,61

19,7 ± 1,41,3

24,4 ± 2,21,3

ПГ (нг/г тк)

7,70 ± 0,63

10 ± 0,971,3

8 ± 0,773

20 ± 1,71,2,3

tPA-акт (ед/гтк)

0,240 ± 0,023

0,16 ± 0,0141,2,3

1,95 ± 0,161

0,155 ± 0,0141,2,3

tPA-АГ (нг/гтк)

0,670 ± 0,053

0,34 ± 0,0281,2,3

0,69 ± 0,053

1,55 ± 0,131,2,3

PAI-I-акт (ед/гтк)

1,60 ± 0,13

1,85 ± 0,152,3

3,05 ± 0,291,3

5,25 ± 4,41,2,3

PAI-I-АГ (нг/гтк)

3,30 ± 0,33

2,2 ± 0,171,3

2,7 ± 0,243

2,8 ± 0,223

Самки uPA +/+

uPA-акт (ед/г тк)

1,6 ± 0,12

2,5 ± 0,21

2,8 ± 0,191

2,6 ± 0,171

uPA-АГ (нг/г тк)

31,7 ± 2,1

187,5 ± 131,2

335,5 ± 231

186,5 ± 12,51,2

uPAR (пг/г тк)

56,06 ± 4,5

65,36 ± 5,62

141,8 ± 11,71

112,0 ± 9,61

РАР (нг/г тк)

10,7 ± 0,7

19,9 ± 1,11,2

36,4 ± 1,51

18,9 ± 1,21,3

ПГ (нг/г тк)

10,25 ± 0,9

13,5 ± 1,11

16,7 ± 1,41,

11,03 ± 0,9

tPA-акт (ед/гтк)

0,6 ± 0,04

0,7 ± 0,032

2,2 ± 0,191

0,7 ± 0,063

tPA-АГ (нг/гтк)

0,4 ± 0,02

2,0 ± 0,151,2

12,3 ± 0,91

2,5 ± 0,131,3

PAI-I-акт (ед/гтк)

24,0 ± 0,16

24,0 ± 1,42

71,1 ± 4,21

81,0 ± 5,81

PAI-I-АГ (нг/гтк)

9,9 ± 0,4

24,5 ± 1,81,2

79,5 ± 6,31

71,6 ± 5,21

Примечание: 1 – различия статистически значимы относительно нормы у животных; 2 – по сравнению с опухолью; 3 – по сравнению

с аналогичными образцами у uPA+/+ животных ( р < 0,05)

18

Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 14-24

Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А. Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10

В образцах опухоли у самок uPA-/- по сравнению

uPA-/- в образцах меланомы такая стимуляция не

с образцами опухоли самок uPA+/+ оказались суще-

выявлена, за исключением роста активности, но

ственно ниже показатели определяемых факторов:

не содержания tPA.

активность и содержание uPA в 112 раз и в 2396

Также были отмечены различия исследован-

раз, уровень uPAR в 2,1 раза, РАР и ПГ в 1,8 раза

ных показателей в перифокальной зоне и непо-

и 2,1 раза, содержание tPA в 17,8 раза, активность

раженной опухолевым ростом коже. Так, в пери-

и содержание PAI-I в 23,3 раза и в 29 раза соответ-

фокальной зоне у самок uPA-/- через 3 недели

ственно. Только активность tPA не имела значимых

роста меланомы активность и уровень uPA были

отличий в образцах опухоли в зависимости от гена

меньше, чем в перифокальной зоне мышей uPA+/+

урокиназы.

в 260 и 255 раз соответственно, также была ниже

То есть через 3 недели после перевивки мела-

в 1,9 раза концентрация uPAR. Уровень tPA, как

номы В16/F10 у самок uPA+/+ в образцах опухоли

и его активность, были ниже, чем у животных без

по сравнению с соответствующей интактной кожей

нокаута в 1,6 раза и в 4,5 раза соответственно.

отмечено возрастание всех изученных показателей

Активность PAI-I и его содержание оказались сни-

фибринолитической системы, тогда как у самок

женными в 15,4 раза и в 25,6 раза. Несмотря на

Таблица 2. Содержание и активность компонентов фибринолитической системы в коже, опухоли и перифокальной

зоне у самцов мышей uPA -/- с меланомой В16/F10 через 3 недели после перевивки (M±m) Опухоль через

Перифокальная

Показатели

Кожа интактных

Кожа через 3 недели

животных (норма)

роста меланомы

3 недели после

зона через 3 недели

перевивки

после перевивки

Самцы uPA -/-

uPA-акт (ед/г тк)

0,010 ± 0,0013

0,009 ± 0,00072,3

0,013 ± 0,00111,3

0,015 ± 0,0011,3

uPA-АГ (нг/г тк)

0,250 ± 0,023

0,25 ± 0,0182,3

0,10 ± 0,0091,3

0,39 ± 0,031,3

uPAR (пг/г тк)

56,90 ± 4,33

67,4 ± 5,9

90,8 ± 7,61

67,55 ± 5,52

РАР (нг/г тк)

30,0 ± 2,53

18,13 ± 1,41,3

14,4 ± 0,91,3

18,13 ± 1,71

ПГ (нг/г тк)

12,50 ± 0,93

9,1 ± 0,771,3

10 ± 0,073

12,2 ± 0,8

tPA-акт (ед/гтк)

0,320 ± 0,023

0,17 ± 0,0151,2,3

1,22 ± 0,781,3

0,17 ± 0,0141,2,3

tPA-АГ (нг/гтк)

0,70 ± 0,053

0,66 ± 0,062,3

0,46 ± 0,041,3

0,88 ± 0,0712,3

PAI-I-акт (ед/гтк)

2,60 ± 0,23

1,77 ± 0,131,2,3

2,87 ± 0,213

2,37 ± 0,183

PAI-I-АГ (нг/гтк)

4,10 ± 0,33

2,43 ± 0,211,2,3

3,9 ± 0,333

4,8 ± 0,433

Самцы uPA +/+

uPA-акт (ед/г тк)

1,561 ± 0,10

1,65 ± 0,143

2,7 ± 0,21

1,9 ± 0,17

uPA-АГ (нг/г тк)

215,3 ± 16,8

181,6 ± 17,13

300,4 ± 24

210,3 ± 19

uPAR (пг/г тк)

110,3 ± 6,5

65,13 ± 5,71

73,48 ± 5,31

85,96 ± 7,21

РАР (нг/г тк)

14,52 ± 0,9

30,7 ± 2,9

48,8 ± 4,1

19,8 ± 1,7

ПГ (нг/г тк)

6,851 ± 0,5

15 ± 1,2

21,6 ± 1,9

13 ± 1,1

tPA-акт (ед/гтк)

0,551 ± 0,04

0,86 ± 0,07

2,4 ± 0,19

0,8 ± 0,06

tPA-АГ (нг/гтк)

2,981 ± 0,2

4,8 ± 0,381

11,6 ± 0,9

5,5 ± 0,42

PAI-I-акт (ед/гтк)

12,61 ± 1,02

52,5 ± 4,7

41,3 ± 3,8

59,4 ± 5,6

PAI-I-АГ (нг/гтк)

40,0 ± 3,5

28 ± 2,5

39 ± 3,4

54,8 ± 4,5

Примечание: 1 – различия статистически значимы относительно нормы у животных; 2 – по сравнению с опухолью; 3 – по сравнению

с аналогичными образцами у uPA+/+ животных ( р < 0,05)

19

South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma это уровень РАР и ПГ в перифокальной зоне самок

практически все исследованные параметры фиб-

uPA-/- оказался выше, чем у самок uPA+/+ в 1,3 раза

ринолитической системы, за исключением уровня

и в 1,8 раза соответственно.

рецептора, то в меланоме у самцов uPA-/- отмечен

То есть в перифокальной зоне у самок мышей

только рост активности tPA и uPAR.

uPA+/+ через 3 недели роста меланомы также прак-

В перифокальной зоне у самцов uPA-/- по срав-

тически все звенья фибринолитической системы

нению с перифокальной зоной самцов uPA+/+ были

(за исключением ПГ и tPA активности) превосходи-

ниже активность и уровень uPA в 127 раз и в 538 раз

ли показатели в коже интактных животных, тогда

соответственно и tPA в 25 раз и 11,4 раз соответ-

как у uPA-/- мышей в перифокальной зоне по срав-

ственно, а PAI-I в 25 раз и 8,8 раза соответственно.

нению с кожей интактных животных выявлен рост

При этом уровень uPAR, плазмина и ПГ в перифо-

только содержания ПГ, uPA и tPA без повышения их

кальной зоне не имел значимых отличий в зависи-

активностей, а также возросла активность PAI-I.

мости от состояния гена урокиназы. Оказалось, что

В непораженной опухолевым ростом коже у са-

при росте опухоли у uPA+/+ самцов в перифокаль-

мок uPA-/- были снижены практически все показа-

ной зоне повышалось содержание РАР, РГ, а также

тели фибринолитической системы за исключением

активности и содержания tPA и PAI-I по сравнению

отсутствия отличий в РАР и uPAR по сравнению

с кожей соответствующих интактных животных,

с образцами кожи у самок uPA+/+. Так, в образцах

тогда как у самцов uPA-/-либо не изменялись по

кожи при росте опухоли у самок uPA-/- активность

сравнению с интактной кожей, либо снижались.

и содержание uPA были ниже в 277,8 раза и в 781,3

В образцах непораженной кожи у самцов uPA- /-

раза; активность и содержание tPA в 4,4 раза

с меланомой В16/F10 по сравнению с показате-

и в 5,9 раза; активность и содержание PAI-I в 13 раз

лями в непораженной кожи у самцов uPA+/+ были

и 11,4 раза соответственно. Через 3 недели опухо-

ниже концентрации РАР и ПГ в среднем в 1,7 раза,

левого роста динамика изменений исследован-

активность и содержание uPA в 183 раза и в 726

ных показателей в непораженной коже у самок

раза, активность и содержание tPA в 5,1 раза и в 7,3

uPA+/+ по сравнению с интактными мышами в це-

раза, активность и концентрация PAI-I в 29,7 раз

лом соответствовала направленности в опухоли

и в 11,5 раза. Только уровень uPAR не имел зна-

и перифокальной зоне – наблюдалась активация

чимых отличий. При этом следует отметить, что

фибринолитической системы, тогда как у самок

у uPA+/+ самцов и у мышей с нокаутом по гену

uPA-/-, напротив, либо отсутствие изменений, либо

урокиназы одинаковым в непораженной коже

снижение уровня РАР, активности и содержания

при росте меланомы оказалось только отсутствие

tPA и содержания PAI-I по сравнению с интактными

изменения активности и содержания uPА, а также

мышами этой же линии.

снижение уровня PAI-I по сравнению с показате-

На этапе через 3 недели после перевивки объе-

лями здоровой кожи соответствующих интактных

мы первичных опухолей у самцов uPA-/- были

животных. Остальные из изученных параметров

меньше, чем у животных с диким типом генов [15].

изменялись разнонаправленно – у uPA-/- самцов

В образцах опухоли у самцов uPA-/- по сравне-

либо снижались (PAP, ПГ, tPA активность), либо

нию с аналогичными образцами у самцов uPA+/+

не изменялись (PAI-I активность, tPA содержание,

оказался снижен уровень плазмина в 3,4 раза

uPAR), тогда как у uPA+/+ выявлена активация

и плазминогена в 2,2 раза (табл. 2). Активность

(за исключение uPAR).

и содержание uPA у самцов с нокаутом гена уро-

киназы были ниже, чем у животных с диким ти-

ОБСУЖДЕНИЕ

пом гена в 208 раз и в 3004 раза соответственно,

а содержание и активность tPA были ниже в 25,2

В настоящее время известно, что урокиназа (uPA)

раза и в 2 раза соответственно. Кроме того, выяв-

секретируется во многих злокачественных клет-

лено снижение активности и концентрации PAI-I

ках, включая рак поджелудочной железы, молоч-

в 14,4 раза и в 10 раз соответственно.

ной железы, колоректальный рак и ее экспрессия

Только содержание uPAR не имело отличий

часто коррелирует с прогнозом течения заболева-

в зависимости от состояния гена урокиназы. То

ния [4, 16]. Биологическая роль этой протеиназы –

есть, если у самцов uPA+/+ в образцах опухоли по

связаться с рецептором uPAR, чтобы стимулировать

сравнению с интактной кожей (норма) возрастали

протеолитический каскад и превратить неактивные

20

Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 14-24

Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А. Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10

протеазы, такие как плазмин и матриксная метал-

регуляторных единицах с трансмембранными ре-

лопептидаза 9 (MMP-9), в активные формы, тем

цепторами [21].

самым наделяя опухолевые клетки способностью

В нашем исследовании показано, что на фоне су-

разрушать компоненты внеклеточного матрикса,

щественного подавления урокиназы уровень рецеп-

активировать рост и метастазирование опухолевых

тора uPAR в интактной коже у самок не изменился,

клеток [17–19]. Следовательно, роль uPA в мигра-

а у самцов хотя и выявлено почти двукратное сни-

ции, инвазии и метастазировании опухолевых кле-

жение его концентрации, однако его содержание

ток несомненна [18].

в опухоли и окружающих ее тканях на фоне роста

Ранее мы получили подтверждение влияния

меланомы В16/F10 не имеет значимых отличий от

нокаута гена урокиназы на опухолевый процесс,

показателей у животных с диким типом генома.

а именно существенное подавление роста объема

Известно, что uPAR конкурирует с uPA за участие

опухоли и ее метастазирование у животных обоего

во многих не протеолитических биологических про-

пола [15]. Нами было установлено, что у интактных

цессах, таких как миграция, адгезия, пролиферация

uPA-дефицитных мышей линии C57BL/6-PlautmI.IBug-

клеток и ангиогенез [22]. То есть, у мышей uPA-/-

ThisPlau6FDhu/GFDhu в коже подавлен практически

функции uPA могли выполняться uPAR. В нашем

весь каскад регуляторов ПГ (за исключением содер-

исследовании у самок uPA-/- уровень урокиназного

жания рецептора урокиназы uPAR и содержания tPA

рецептора в исследованных образцах не изменялся

только у самок). Мы предполагали обнаружить уве-

по отношению к показателям у интактных живот-

личение активности ряда ферментов, однако у ин-

ных, тогда как у самцов в образцах опухоли воз-

тактных uPA-/- мышей регистрировалось увеличен-

растал, что сопровождалось большими объемами

ное содержание только плазмина. При дефиците uPA

меланомы у самцов по сравнению с самками.

у мышей C57BL/6-PlautmI.IBug- ThisPlau6FDhu/GFDhu

Ряд исследований подтверждает, что снижение

в нашем эксперименте активность плазмина могла

экспрессии uPAR на клеточной поверхности смягча-

найти и другие мишени. Мы считаем, что повышение

ет развитие характерных признаков рака, вызван-

у нокаутных мышей содержания РАР является свое-

ных мутациями PIK3CA и KRas при колоректаль-

образной компенсацией, способствуя при резком

ном раке [23], а взаимодействуя с uPA и IGF1R, uPAR

снижении урокиназы расщеплению ее рецептора.

способен усиливать злокачественный потенциал

Несмотря на существенное подавление фибрино-

тройного негативного рака молочной железы [24].

литической системы у мышей uPA-/-, перевивная

Клинические наблюдения подтверждаются экспе-

меланома росла, и хотя имела существенно мень-

риментальными исследованиями, в которых нокаут

шие объемы (особенно у самок) и редко метаста-

гена uPAR у мышей приводит к остановке G2/M,

зировала (у самцов отсутствовали видимые мета-

тем самым подавляя пролиферацию клеток [25].

стазы), продолжительность жизни животных двух

Имеются исследования о возможности применения

линий не имела значимых различий. Кроме того,

ингибиторов uPA для замедления роста опухоли

уровень плазмина в коже у интактных uPA-/- мышей

и метастазирования [26].

превышал показатели у животных линии С57ВL/6.

Считают, что сверхэкспрессия uPAR в клетках ме-

Эти моменты свидетельствуют о наличии альтер-

ланомы человека контролирует инвазивный и глико-

нативных биологических путей которыми «пользу-

литический фенотип. Уже установленные пути, опо-

ется» меланома для своего выживания в условиях

средованные uPAR, включают интегрин- зависимую

нокаута гена урокиназы.

ассоциацию uPAR как минимум с четырьмя система-

Одним из альтернативных путей в условиях

ми IL-TKR: EGFR, IGFR, PDGFR и MET [27]. Результаты

нокаута гена урокиназы может быть uPAR, извест-

наших исследований показали существенное уве-

ный как CD-87, который высоко экспрессируется

личение уровня uPAR в образцах опухоли и ее пери-

в различных опухолевых клетках, а различные

фокальной зоны у мышей uPA+/+, тогда как у самок

сигналы, регулируемые uPAR, играют важную роль

uPA-/- такая закономерность не прослеживалась,

в пролиферации и метастазировании неоплазмы,

и только у самцов uPA-/- в образцах опухоли воз-

связанном с опухолью гликолизе, а также микро-

растала концентрация рецептора урокиназы. Слож-

окружении опухоли и ее ангиогенезе [20]. Имеются

ность различных молекулярных путей позволяет

данные о том, что именно uPAR регулирует мигра-

злокачественным клеткам продолжать пролифе-

цию клеток меланомы за счет сборки в сложных

рировать и мигрировать даже в условиях дефицита

21

South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma урокиназы, используя uPA-независимые пути про-ЗАКЛЮЧЕНИЕ

теолитической активации факторов ангиогенеза.

Это было подтверждено проведенными нами ранее

Тот факт, что у мышей uPA-/-, несмотря на крайне

исследованиями факторов ангиогенеза у животных

малые объемы первичной опухоли и редкое мета-

с нокаутом по гену урокиназы, демонстрирующими

стазирование, опухолевая болезнь вызывала ги-

повышенное содержание в непораженной коже

бель животных на тех же сроках, что и у животных

VEGF-A и особенно VEGF-С у самок мышей uPA-/- [28].

uPA+/+, свидетельствует о существенном влиянии

В то же время стоит понимать, что нокаут по гену

опухолевой болезни на все регуляторные системы

урокиназы является своеобразным искусственно

организма вне зависимости от размера неоплазмы.

вызванным генетическим коморбидным заболева-

Наше исследование подтвердило положение о том,

нием, в результате которого происходит угнетение

что применение препаратов, ингибирующих пути

фибринолитической системы не только в кожных

урокиназы, может быть перспективно в лечении

покровах, но и в других органах и системах. Участие

заболевания за счет замедления роста объема

фибринолитической системы в различных физио-

неоплазмы и ее метастазирования, но не является

логических процессах, заживлении ран, а также в со-

панацеей, так как действие злокачественной опу-

хранении нейронов мозга после различных ишеми-

холи на организм гораздо более сложное, поэтому

ческих повреждений свидетельствует о возможной

требуются дальнейшие исследования патогенеза

недостаточности этих процессов у животных uPA-/-.

злокачественного роста.

Список источников

1. Ismail AA, Shaker BT, Bajou K. The Plasminogen-Activator Plasmin System in Physiological and Pathophysiological Angiogenesis. Int J Mol Sci. 2021 Dec 29;23(1):337. https://doi.org/10.3390/ijms23010337

2. Brungs D, Chen J, Aghmesheh M, Vine KL, Becker TM, Carolan MG, et al. The urokinase plasminogen activation system in gastroesophageal cancer: A systematic review and meta-analysis. Oncotarget. 2017 Apr 4;8(14):23099–23109.

https://doi.org/10.18632/oncotarget.15485

3. Wyganowska-Świątkowska M, Tarnowski M, Murtagh D, Skrzypczak-Jankun E, Jankun J. Proteolysis is the most fundamen-tal property of malignancy and its inhibition may be used therapeutically (Review). Int J Mol Med. 2019 Jan;43(1):15–25.

https://doi.org/10.3892/ijmm.2018.3983

4. Shantha Kumara H, Poppy A, Gamage DN, Mitra N, Yan X, Hedjar Y, et al. Compared to preoperative plasma levels post-operative urokinase-type plasminogen activator-1 levels are persistently elevated for 6 weeks after minimally invasive colorectal resection. J Gastrointest Oncol. 2023 Feb 28;14(1):187–197. https://doi.org/10.21037/jgo-22-113

5. Ogino R, Yokooji T, Hayashida M, Suda S, Yamakawa S, Hayashida K. Emerging Anti-Inflammatory Pharmacotherapy and Cell-Based Therapy for Lymphedema. Int J Mol Sci. 2022 Jul 9;23(14):7614. https://doi.org/10.3390/ijms23147614

6. Elmoselhi AB. Advantages of Understanding the Molecular Mechanisms of Angiogenesis in Various Physiological and Pathological Conditions. Int J Mol Sci. 2023 Mar 12;24(6):5412. https://doi.org/10.3390/ijms24065412

7. Кит О. И., Франциянц Е. М., Котиева М. М., Каплиева И. В., Трепитаки Л. К., Бандовкина В. А. и др. Динамика

тканевой системы регуляторов плазминогена при меланоме кожи на фоне хронической боли у самок мышей.

Трансляционная медицина. 2018;5(2):38–46. https://doi.org/10.18705/2311-4495-2018-5-2-38-46, EDN: XRHEOL

8. Кит О. И., Франциянц Е. М., Козлова Л. С., Каплиева И. В., Бандовкина В. А., Погорелова Ю. А. и др. Урокиназа и ее

рецептор в меланоме кожи, воспроизведенной на фоне хронической нейрогенной боли, у мышей обоего пола в

сравнительном аспекте. Вопросы онкологии. 2020;66(4):445–450.

https://doi.org/10.37469/0507-3758-2020-66-4-445-450, EDN: HMDEUV

9. Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Погорелова Ю. А., Ткаля Л. Д., Черярина Н. Д. Активность компонентов системы активации плазминогена и некоторых факторов неоангиогенеза в динамике развития перевиваемой

меланомы В16/F10. Современные проблемы науки и образования. 2015;(5):617. EDN: YTIGLR

10. Кит О. И., Франциянц Е. М., Козлова Л. С., Каплиева И. В., Бандовкина В. А., Погорелова Ю. А. и др. Урокиназа и ее

рецептор в меланоме кожи, воспроизведенной на фоне хронической нейрогенной боли, у мышей обоего пола в

сравнительном аспекте Вопросы онкологии. 2020; 66(4):445–450.

https://doi.org/10.37469/0507-3758-2020-66-4-445-450

22

Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 14-24

Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Сурикова Е. И., Каплиева И. В., Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К., Черярина Н. Д., Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г., Гусарева М. А., Удаленкова И. А. Звенья фибринолитической системы у мышей с нокаутом по гену урокиназы на фоне роста меланомы В16/F10

11. Frese KK, Tuveson DA. Maximizing mouse cancer models. Nat Rev Cancer. 2007 Sep;7(9):645–658.

https://doi.org/10.1038/nrc2192

12. Lampreht Tratar U, Horvat S, Cemazar M. Transgenic Mouse Models in Cancer Research. Front Oncol. 2018;8:268.

https://doi.org/10.3389/fonc.2018.00268

13. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Научный центр экспертизы

средств медицинского применения Минздравсоцразвития России. Том Часть 1. Москва: Гриф и К, 2012, 944 с.

EDN SDEWMP

14. Dingemans KP, van Spronsen R, Thunnissen E. B16 melanoma metastases in mouse liver and lung. I. Localization. Invasion Metastasis. 1985;5(1):50–60.

15. Франциянц Е. М., Каплиева И. В., Сурикова Е. И., Нескубина И. В., Бандовкина В. А., Трепитаки Л. К. и др. Влияние нокаута по гену урокиназы на рост меланомы в эксперименте. Сибирский научный медицинский журнал.

2019;39(4):62–70. https://doi.org/10.15372/SSMJ20190408, EDN: PLXEYI 16. Leth JM, Ploug M. Targeting the Urokinase-Type Plasminogen Activator Receptor (uPAR) in Human Diseases With a View to Non-invasive Imaging and Therapeutic Intervention. Front Cell Dev Biol. 2021;9:732015.

https://doi.org/10.3389/fcell.2021.732015

17. Mahmood N, Mihalcioiu C, Rabbani SA. Multifaceted Role of the Urokinase-Type Plasminogen Activator (uPA) and Its Receptor (uPAR): Diagnostic, Prognostic, and Therapeutic Applications. Front Oncol. 2018;8:24.

https://doi.org/10.3389/fonc.2018.00024

18. Ding Y, Niu W, Zheng X, Zhou C, Wang G, Feng Y, et al. Plasminogen activator, urokinase enhances the migration, invasion, and proliferation of colorectal cancer cells by activating the Src/ERK pathway. J Gastrointest Oncol. 2022 Dec;13(6):3100–

3111. https://doi.org/10.21037/jgo-22-1215

19. Zhai BT, Tian H, Sun J, Zou JB, Zhang XF, Cheng JX, et al. Urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) as a therapeutic target in cancer. J Transl Med. 2022 Mar 18;20(1):135. https://doi.org/10.1186/s12967-022-03329-3

20. Lv T, Zhao Y, Jiang X, Yuan H, Wang H, Cui X, et al. uPAR: An Essential Factor for Tumor Development. J Cancer.

2021;12(23):7026–7040. https://doi.org/10.7150/jca.62281

21. Ragone C, Minopoli M, Ingangi V, Botti G, Fratangelo F, Pessi A, et al. Targeting the cross-talk between Urokinase receptor and Formyl peptide receptor type 1 to prevent invasion and trans-endothelial migration of melanoma cells. J Exp Clin Cancer Res. 2017 Dec 8;36(1):180. https://doi.org/10.1186/s13046-017-0650-x 22. Chen JS, Chang LC, Wu CZ, Tseng TL, Lin JA, Lin YF, et al. Significance of the urokinase-type plasminogen activator and its receptor in the progression of focal segmental glomerulosclerosis in clinical and mouse models. J Biomed Sci. 2016 Feb 4;23:24. https://doi.org/10.1186/s12929-016-0242-7

23. Ahn SB, Mohamedali A, Pascovici D, Adhikari S, Sharma S, Nice EC, et al. Proteomics Reveals Cell-Surface Urokinase Plasminogen Activator Receptor Expression Impacts Most Hallmarks of Cancer. Proteomics. 2019 Nov;19(21–22):e1900026.

https://doi.org/10.1002/pmic.201900026

24. Huber MC, Mall R, Braselmann H, Feuchtinger A, Molatore S, Lindner K, et al. uPAR enhances malignant potential of tri-ple-negative breast cancer by directly interacting with uPA and IGF1R. BMC Cancer. 2016 Aug 8;16:615.

https://doi.org/10.1186/s12885-016-2663-9

25. Gogineni VR, Nalla AK, Gupta R, Dinh DH, Klopfenstein JD, Rao JS. Chk2-mediated G2/M cell cycle arrest maintains radia-tion resistance in malignant meningioma cells. Cancer Lett. 2011 Dec 26;313(1):64–75.

https://doi.org/10.1016/j.canlet.2011.08.022

26. Hosen SMZ, Uddin MN, Xu Z, Buckley BJ, Perera C, Pang TCY, et al. Metastatic phenotype and immunosuppressive tumour microenvironment in pancreatic ductal adenocarcinoma: Key role of the urokinase plasminogen activator (PLAU). Front Immunol. 2022;13:1060957. https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.1060957

27. Laurenzana A, Chillà A, Luciani C, Peppicelli S, Biagioni A, Bianchini F, et al. uPA/uPAR system activation drives a glycolytic phenotype in melanoma cells. Int J Cancer. 2017 Sep 15;141(6):1190–1200. https://doi.org/10.1002/ijc.30817

28. Кит О. И., Франциянц Е. М., Каплиева И. В., Сурикова Е. И., Нескубина И. В., Бандовкина В. А. и др. Динамика факторов

ангиогенеза у мышей линии C57BL/6-PLAUTMI. IBUG-THIS PLAU6FDHU/GFDHU при меланоме, развивающейся на

фоне хронической нейрогенной боли. Вопросы онкологии. 2020;66(4):439–444.

https://doi.org/10.37469/0507-3758-2020-66-4-439-444, EDN: RIXXPH

23

South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 14-24

Frantsiyants E. M., Bandovkina V. A., Surikova E. I., Kaplieva I. V., Pogorelova Yu. A., Neskubina I. V., Trepitaki L. K., Cheryarina N. D., Ushakova N. D., Ishonina O. G., Gusareva M. A., Udalenkova I. A. Units of fibrinolytic system in mice with urokinase gene knockout in presence of growing B16/F10 melanoma Информация об авторах:

Франциянц Елена Михайловна – д.б.н., профессор, заместитель генерального директора по научной работе, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская

Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0003-3618-6890, SPIN: 9427-9928, AuthorID: 462868, ResearcherID: Y-1491-2018, Scopus Author ID: 55890047700

Бандовкина Валерия Ахтямовна – д.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2302-8271, SPIN: 8806-2641, AuthorID: 696989, ResearcherID: AAG-8708-2019, Scopus Author ID: 57194276288

Сурикова Екатерина Игоревна – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-4318-7587, SPIN: 2401-4115, AuthorID: 301537, ResearcherID: AAG-8748-2019, Scopus Author ID: 6507092816

Каплиева Ирина Викторовна – д.м.н., руководитель лабораторией изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3972-2452, SPIN: 5047-1541, AuthorID: 734116, ResearcherID: ААЕ-3540-2019, Scopus Author ID: 23994000800

Погорелова Юлия Александровна – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2674-9832, SPIN: 2168-8737, AuthorID: 558241, ResearcherID: AAE-4168-2022, Scopus Author ID: 37026863400

Нескубина Ирина Валерьевна – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-7395-3086, SPIN: 3581-8531, AuthorID: 794688, ResearcherID: AAG-8731-2019, Scopus Author ID: 6507509066

Трепитаки Лидия Константиновна – к.б.н., научный сотрудник лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: http://orcid.org/0000-0002-9749-2747, SPIN: 2052-1248, AuthorID: 734359, ResearcherID: AAG-9218-2019, Scopus Author ID: 55357624700

Черярина Наталья Дмитриевна – врач-лаборант лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, ФГБУ «Национальный

медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3711-8155, SPIN: 2189-3404, AuthorID: 558243, Scopus Author ID: 56204439400

Ушакова Наталья Дмитриевна – д.м.н., профессор, врач анестезиолог-реаниматолог отделения анестезиологии и реанимации, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-0068-0881, SPIN: 9715-2250, AuthorID: 571594, Scopus Author ID: 8210961900

Ишонина Оксана Георгиевна – к.б.н., заведующий отделом подготовки и переподготовки специалистов, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская

Федерация; доцент кафедры медицинской биологии и генетики ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5300-1213, SPIN: 4051-5165, AuthorID: 612417, Scopus Author ID: 37115461900

Гусарева Марина Александровна – к.м.н., заведующий отдела радиотерапии, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский

центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9426-9662, SPIN: 9040-5476, AuthorID: 705242

Удаленкова Ирина Александровна – к.м.н., врач-онколог отделения противоопухолевой лекарственной терапии, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0075-6935, SPIN: 2175-4570, AuthorID: 974753

Вклад авторов:

Франциянц Е. М., Бандовкина В. А., Каплиева И. В. – разработка концепции и дизайна эксперимента, написание исходного текста, анализ

и интерпретация данных, окончательное утверждение рукописи для публикации; Сурикова Е. И., Черярина Н. Д. – статистическая обработка результатов, техническое редактирование и подготовка рукописи к публикации; Погорелова Ю. А., Нескубина И. В., Трепитаки Л. К. – проведение эксперимента, выполнение ИФА-анализа; Ушакова Н. Д., Ишонина О. Г. – научное редактирование, доработка текста, подбор литературы, оформление библиографии; Гусарева М. А., Удаленкова И. А. – научное редактирование, доработка текста.

Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.

24