CC BY
33
ДО к ЕА-EBV - у 69% и ДО к NA-EBV у 81% детей. У 32% больных ДНК ВЭБ выявлена в ПЦР при исследовании крови, у 83% - ПЦР слюны. Методом ИЦХ антигены ВЭБ выявляли в 67% случаев в лимфоцитах крови, а в 43% - носоглоточных мазках-отпечатках. Антитела к ЦМВ класса ^М выявлены у 37% детей, класса IgG - у 59%, из них одновременно М и G - у 21%. При исследовании крови методом ПЦР ни у одного ребенка не выявили ДНК ЦМВ, в то же время в слюне реакция была положительной в 47% случаев, в моче
- 38%. Методом ИЦХ антиген ЦМВ в крови выявляли в 3 раза реже чем в носоглоточных мазках-отпечатках (13% против 38%, р<0,05).
Вывод. Таким образом, диагностическая значимость различных лабораторных методов этиологической диагностики у часто болеющих детей сопоставима. Для оптимизации этиологической диагностики необходимо комплексное обследование пациентов методами, позволяющими выявлять как антигены и ДНК вирусов в разных биологических средах (кровь, слюна, мазки-отпечатки), так и антитела к ним. Для выявления активности хронической ВЭБИ оптимально исследование крови методами ИФА, ПЦР и ИЦХ. Для повышения эффективности диагностики перспективно дополнительное исследование слюны в ПЦР и носоглоточных мазков-отпечатков ИЦХ методом. Для оценки активности хронической ЦМВИ ПЦР и ИЦХ крови мало информативны, большую диагностическую значимость имеют ИЦХ носоглоточных мазках-отпечатках, ПЦР слюны, серологическое исследование крови.
ЛИТЕРАТУРА
1. Александрова Н.В. Способ диагностики инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр / Н.В. Александрова, Р.А. Насыров, В.В. Иванова, О.В.Родионова // Патент на изобретение №«2002103970 от 19.02.2005.
2. ИсаковВ.А. Герпесвирусные инфекции человека:
руководство для врачей / В.А. Исаков, Е.И. Архипова, Д.В. Исаков. СПб.: СпецЛит, 2006. 302 с.
3. Серебряная Н.Б. Новые подходы к терапии герпесвирусной инфекции / Н.Б.Серебряная, В.Н. Егорова. Санкт-Петербург: Новая альтернативная полиграфия, 2007. 28 с.
4. CartunRW. Immunohistochemistry of infectious diseases // The Journal of Histotechnology. 1995. Vol.18.-№3. Р.195-202.
5. Kanegane H. Infectious mononucleosis as a disease of early childhood inJapan caused by primary Epstein-Barr virus infection / H. Kanegane, С. Kanegane, А Yachie // Acta Paediatr. Jpn. 1997. Vol.39, №2. P.166-171.
6. Krugmann J. Longer failure-free survival interval of Epstein-Barr virus-associated classical Hodgkin's lymphoma: A single-institution study / J Krugmann, A Tzankov, A Gschwendtner // Mod Pathol Vol. 16.P.566-573, 2003.
I.V.Babachenko, A.S.Levine, O. V. Sedenko,
E.V. Sharipov, V.V. Vlasyuk,E.A.Murina, Z.A. Osipova EFFECTIVENESS OF VARIOUS METHODS OF DIAGNOSTIC ETIOLOGICAL AMONG SOME ILL CHILDREN WITH CHRONIC EPSTEIN-BARR AND TSITOMEGALOVIRUSNOY INFECTIONS.
FGU "NIIDIHealth",St.Petersburg
The study was conducted to assess the informativeness of different diagnostic methods in chronic during Epstein-Barr virus (VEBI) and tsitomegalovirusnoy infection (TSMVI) in children. The authors obtained results that led to the conclusion that the diagnostic significance of various laboratory methods for etiologic diagnosis of the ill children are often comparable. To optimize the etiological diagnosis should be a comprehensive study of patients in ways that identify as antigens and DNA viruses in different biological media (blood, saliva, swabs, fingerprints) and antibodies to it. To identify the activity of chronic study blood VEBI best methods ELISA, PCR and ITSH. To increase the efficiency of diagnosis promising a further study by PCR in saliva and nosoglotochnyh smears, fingerprints ITSH method. To assess the activity of chronic TSMVI PCR and blood ITSH little informative, great diagnostic significance have ITSH nosoglotochnyh-fingerprint smears, saliva samples by PCR, serological study of blood.
Key words: chronic Epstein-Barr virus infection, chronic cytomegalovirus infection, diagnosis.
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2009
УДК 616.36-002.2:615.24/.342-009.16
Д.К. Васильева, Л.А.Алексеева, Л.Г.Горячева, Т.В.Бессонова ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ НИЗКОЙ И СРЕДНЕЙ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ КРОВИ У ДЕТЕЙ КАК ЛАБОРАТОРНОГО КРИТЕРИЯ СТЕПЕНИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТАХ В И С
ФГУ "НИИ детских инфекций", Санкт-Петербург
Парентеральные вирусные гепатиты во всем мире по-прежнему остаются одной из ведущих медико-социальных проблем. В связи с успешной вакцинацией против гепатита В заболевае-
мость этим гепатитом заметно снижается, но на первый план выдвигаются хронические гепатиты (ХГ), как основные заболевания печени с их неблагоприятным исходом в цирроз и гепатокар-
циному. Хронические гепатиты вирусной этиологии часто протекают как первично-хроническое заболевание и долгие годы не сопровождаются манифестными симптомами, такими как желтушность покровов, увеличение селезенки, подчеркнутая венозная сеть на животе и т. д., которые появляются поздно, знаменуя собой уже переход в цирротическую фазу. У детей ХГ сопровождаются скудными клиническими проявлениями и минимальной биохимической активностью и часто выявляются случайно при обследовании, например перед операцией, проведением эндоскопии и т. д. [2,5]. Однако существует ряд симптомов, которые позволяют заподозрить инфекцию при наличии соответствующего анамнеза. Наиболее часто отмечаются признаки астено-вегетативного и диспептического синдромов (немотивированное длительное недомогание, слабость, быстрая утомляемость, нерезко выраженные, но упорные диспепсические и абдоминальные жалобы, тошнота, изжога) [2, 3, 5]. Данная симптоматика является, очевидно, проявлением интоксикационного синдрома. Однако значение эндогенной интоксикации в патогенезе хронических вирусных гепатитов у детей изучено недостаточно.
Целью настоящей работы явилось изучение биохимических критериев эндогенной интоксикации и установление ее роли в патогенезе ХГ вирусной этиологии у детей.
Материалы и методы. На базе НИИ детских инфекций в 2006-2009 гг. проведено клинико-лабораторное обследование 23 детей в возрасте от 3 до 18 лет с хроническим гепатитом В и С (ХГВ и ХГС). Длительность заболевания составляла от 1 года до 18 лет. Вертикальный путь передачи встречался у 45% больных, а источником инфицирования в 15% случаев явились операции и гемотрансфузии. Употребление наркотических веществ имело место у 1 ребенка - 5%. В 35% случаев сбор анамнеза не позволил установить возможный источник инфицирования. Верификация диагноза осуществлялась по результатам многократного обнаружения в сыворотке крови суммарных антител к вирусу гепатита С, HBsAg, НВсогАВ, HBeAg, HBeAB методом ИФА и обнаружению RNA HCV или DNA HBV методом полимеразной цепной реакции. У всех пациентов с ХГС было проведено генотипирование в результате, которого выявлены 3а, 1в и 3а+1в генотипы вируса. Так же всем больным 2-х кратно осуществлялось ультразвуковое сканирование органов
брюшной полости на аппарате Siemens БопоНпе G 60. Наряду со стандартными биохимическими исследованиями (аланинаминотрансфера-за (АлАТ), аспартатаминотрансфераза (АсАТ), билирубин, щелочная фосфатаза, протеинограм-ма сыворотки крови) изучены лабораторные показатели тяжести эндогенной интоксикации путем определения спектральных характеристик веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) в плазме и эритроцитах крови и их соотношения (коэффициент распределения - К). Исследование выполнено по методу Малаховой М.Я. [4] в собственной модификации [1]. Спектральную оценку ВНСММ проводили после первичного осаждения высокомолекулярных компонентов 15% трихлоруксус-ной кислотой на спектрофотометре СФ-2000. Измерения проводили на 18 длинах волн, начиная с 234 нм и заканчивая 302 нм, с интервалом (шаг длины волны) 4 нм с дальнейшим суммированием полученных результатов. конечный результат рассчитывали по формулам: ВНСММ (пл) = (Е234+Е238+...+Е302) х 4 у.ед.; ВНСММ (эр) = (Е234+Е238+...+Е302) х 4 у.ед.
Помимо расчета суммарного количества ВНСММ в плазме и эритроцитах крови, строили спектрограмму на персональном компьютере и рассчитывали коэффициент распределения (К), равный соотношению ВНСММ (пл) / ВНСММ(эр). Полученные результаты сравнивали с показателями условной нормы. Анализ полученных данных проводили по группам в зависимости от длительности заболевания: 1 группа - больные с сроком инфицирования от 1 года до 5 лет, 2 группа - от 5 до 10 лет, 3 группа - с длительностью свыше 10 лет. Кроме того, проведен анализ данных в зависимости от биохимических показателей цитолиза. Больные с нормальным уровнем АлАТ составили группу 4, с увеличением данного показателя до 1,5 раз -группу 5, и более чем в 2 раза - группу 6.
Результаты и обсуждения. В клинической картине заболевания у 52% обследованных выявлены признаки астено-вегетативного и дис-пептического синдромов. Уровень трансаминаз крови у 61% был в пределах нормы, а у 39% пациентов увеличен в 1,5—2,5 раза. Нарушений пигментного обмена не обнаружено. При исследовании белково-синтетической функции печени у 39% наблюдалась гипоальбумин- и гипер-гаммаглобулинемия.
У всех больных выявлены лабораторные признаки эндогенной интоксикации в виде увеличения ВНСММ крови (табл.).
Таблица
Уровень веществ низкой и средней молекулярной массы при хронических вирусных гепатитах у детей
Средние значения ВНСММ плазмы, эритроцитов и коэффициента распределения в общей группе пациентов достоверно превышали нормальные показатели. Отмечены изменения уровня ВНСММ даже при отсутствии клинических проявлений эндогенной интоксикации. Так, у пациента Б., 14 лет, наблюдающегося с диагнозом: ХГС, генотипа 1в, в фазе репликации вируса (RNA HCV (+) в реакции PCR), несмотря на отсутствие жалоб и отклонений со стороны внутренних органов выявлено увеличение ВНСММ крови, свидетельствующее о наличии признаков экзо- и эндогенной интоксикации. Показатели ВНСММ плазмы составили 14,3 у.е., эритроцитов 23,52 у.е., коэффициента распределения (0,61).
Проведение клинико-биохимических сопоставлений позволило выявить зависимость степени эндогенной интоксикации от длительности течения заболевания и активности процесса. Так, у больных с длительностью болезни свыше 10 лет, достоверно увеличены ВНСММ плазмы и К распределения, по сравнению с пациентами, у которых длительность болезни составляла от 1 года до 5 лет или от 5 до 10 лет. Достоверных различий в уровне ВНСММ эритроцитов между этими группами не выявлено, хотя отмечена тенденция к их нарастанию у больных со сроком заболевания от 1 года до 5 лет. Приведем конкретные примеры. Больная С., 18 лет, срок инфицирования
- 11 лет, уровень АлАТ в пределах нормы - 36 ед/л, имеется репликация вируса в крови, высокая вирусная нагрузка (RNA HCV в реакции PCR количественно более 1 млн. МЕ/мл). Ранее неоднократно проводились курсы противовирусной терапии, несмотря на которую размножение вируса сохраняется. На момент обследования жалоб активно не предъявляет, при объективном осмотре по внутренним органам - без особенностей. Уровень ВНСММ в
плазме 12,11 у.е., эритроцитах 19,93 у.е., коэффициент распределения 0,61. Учитывая наличие лабораторных признаков экзо- и эндогенной интоксикации данная пациентка нуждается в проведении коррекционной патогенетической терапии. Пациентка М., 10 лет, давность заболевания 1 год. АлАТ - норма (19,1 ед/л), репликативная фаза. Уровень ВНСММ в плазме 9,52 у.е, эритроцитах 33,83 у.е., коэффициент распределения 0,29. Возможно, наличие повышенного уровня ВНСММ в эритроцитах на ранних стадиях болезни связано с компенсаторным увеличением сорбционной способности гликокаликса эритроцитов.
Не выявлено прямой взаимосвязи спектральных характеристик ВНСММ крови со стандартными биохимическими показателями, хотя при увеличении концентрации АлАТ в 1,5-2,5 раза отмечена тенденция к увеличению ВНСММ плазмы и коэффициента распределения. Так, у больного С., 17 лет, наблюдающегося по поводу хронического гепатита С (фаза репликации вируса (RNA HCV (+) в реакции PCR) обнаружено умеренное увеличение показателей АлАТ до 83,2 ед/л. При этом уровень ВНСММ в плазме достигал 14,82 у.е, в эритроцитах 22,02 у.е., коэффициент распределения
0,67, что свидетельствует о наличии признаков экзо- и эндогенной интоксикации.
Выводы. Таким образом, результаты лабораторного исследования свидетельствуют о значении эндогенной интоксикации в патогенезе хронических вирусных гепатитов у детей. Изменения ВНСММ крови выявлены даже при отсутствии клинических симптомов интоксикации, что позволяет рекомендовать включение их спектрального анализа в алгоритм обследования больных ХГ для оценки степени эндогенной интоксикации и коррекции патогенетической терапии.
ЛИТЕРАТУРА:
1. АлексееваЛ.А. Лабораторная оценка тяжести интоксикационного синдрома при бактериальных инфекциях у детей / Л.А. Алексеева, Т.В. Бессонова, О.В. Тихомирова и др. А.А. Вильниц, О.И. Ныркова // Клиническая лабораторная диагностика. 2006. N° 6. С.35-40.
2. Запруднов А.М. Клинико-эпидемиологические особенности гепатитов В и С у беспризорных и безнадзорных детей / А.М. Запрунов, А.Р. Очирова, Л.А. Харитонова, Л.И. Воеводина // Детские инфекции. 2006. N 4. С.17-21.
3. Комиссаров С.Н. Сравнительная клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронических гепатитов С и В с учетом регенераторной спо-
Группы обследованных пациентов Количество обследованных больных (чел.) Средние значения показателей эндогенной интоксикации, (Хср. ± m ) у.е.
ВНСММ плазмы ВНСММ эритроцитов К распределения
Норма 7,24±0,48 20,14±0,89 0,35±0,03
Общая группа 23 11±0,46* 24,93±0,87* 0,45±0,02*
1 группа 6 9,15±0,41** 26,92±2,06 0,35±0,03**
2 группа 11 10,8±0,63** 23,97±0,89 0,45±0,03**
3 группа 6 13,2±0,61** 24,72±2,14 0,54±0,03**
4 группа 14 10,55±0,48 25,58±1,16 0,42±0,02
5 группа 6 12,2±1,20 24,4Ш,45 0,51±0,05
6 группа 3 10,67±1,38 22,96±3,15 0,49±0,10
* - достоверное отличие от нормы (Р < 0,05)
** - достоверное отличие между группами 1-3 (Р < 0,05)
собности печени: автореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.10 / С.Н. Комиссаров; СПбГМА им. И.И. Мечникова. СПб. 2008. 21 с.
4. Малахова М.Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации: Пособие для врачей. СПб. 1995. 23 с.
5. Рейзис. А.А. Гепатит С у детей и подростков // Лечащий врач. 2003. №3. С. 12-14.
D.K. Vasilyeva, L.A. Alekseeva, L.G. Goryacheva, T.V. Bessonova.
SIGNIFICANCE IDENTIFYING LOW AND MEDIUM MOLECULAR MASS BLOOD IN CHILDREN AS A LABORATORY CRITERIA FOR THE GRADE OF ENDOGENOUS INTOXICATION CHRONIC VIRAL HEPA-TITIS B AND C.
FGU "SRI childhood infections", St. Petersburg
To study the biochemical criteria of endogenous intoxication and to establish its role in the pathogenesis of chronic hepatitis B viral etiology in children, a laboratory examination of 23 children aged 3 to 18 years with chronic hepatitis B and C (CHB and CHC). Duration of disease ranged from 1 to 18 years. The results showed the high importance of endogenous intoxication in the pathogenesis of chronic hepatitis. Shown that changes in blood content of substances of low and medium molecular mass detected even in the absence of clinical symptoms of intoxication, which allows them to recommend the inclusion of a study in patients with chronic hepatitis algorithm for the survey to assess the degree of endogenous intoxication and correction of pathogenetic therapy.
Key words: chronic viral hepatitis, children, substances of low and medium molecular mass.
НАУКА И ПРАКТИКА
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2009
УДК 612.015.3:612.398:612.273.2]-053.1-092.9
О.Е. Гусева, О.А. Лебедько, С.С. Тимошин
ОЛИГОПЕПТИД H-ARG-TYR-D-ALA-PHE-GLY-OH КОРРИГИРУЕТ ПОСТГИПОК-СИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ СИНТЕЗА ДНК В ЭПИТЕЛИОЦИТАХ ТРАХЕИ И БИОГЕНЕЗА СВОБОДНЫХ РАДИКАЛОВ В ЛЕГКИХ НОВОРОЖДЕННЫХ БЕЛЫХ КРЫС
Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства;
Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск
Патология респираторной системы занимает ведущее место в структуре заболеваемости детей и представляет собой одну из основных причин летальных исходов у новорожденных. Пренатальная гипоксия является ведущим фактором риска формирования пневмопатий новорожденных, осуществляющим дезинтеграцию структурно-функционального становления органов дыхания [1, 2]. Ранее нами было показано, что пренатальная гипоксия вызывает активизацию перекисного окисления липидов и угнетение синтеза ДНК в эпителиоцитах трахеи новорожденных крыс [3].
Одной из актуальных проблем современной медицины является поиск и создание нового поколения лекарственных средств, реализующих принципы "молекулярной лингвистики". В связи с ключевым значением оксидантов в повреждении клеточных структур бронхов и легких [4, 5] особый интерес представляет изучение свойств олигопептидов, как возможных регуляторов антиоксидантной защиты органов дыхания . В исследованиях [6] показано, что опиоидный Дм - агонист Н-А^-Туг^-А1а-РЬе-Gly-OH (условное название "седатин"), являю-
щийся синтетическим аналогом эндогенного пептида дерморфина, обладает выраженной антиоксидантной антирадикальной активностью. Поскольку повышение активности антиок-сидантной защиты является одним из ключевых механизмов цитопротективного эффекта, уместно предположить наличие последнего у олигопептида.
В связи с вышеизложенным, цель работы состояла в исследовании влияния олигопептида на ДНК-синтетическую активность эпителиоцитов трахеи и биогенез свободных радикалов в системе органов дыхания новорожденных белых крыс, подвергнутых пренатальной гипоксии.
Материалы и методы. Эксперименты проводили на 182 новорожденных белых крысах. Крысы группы "гипоксия" - перенесшие пренатальную гипоксию. Состояние гипоксии моделировали ежедневным 4-часовым пребыванием самок-крыс в барокамере СБК-49 (высота 9000 м.), с 14-й по 19-й день беременности. Крысы группы "гипоксия + олигопептид" - перенесшие пренатальную гипоксию и получившие олигопептид с 2 по 6 сутки постнатального развития, в режиме ежедневного в/брюшинного
