CC BY
18
ПАТЧ-КЛАМП-СПЕКТРОСКОПИЯ КАК МЕТОД ЦИТОЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ КОРРЕЛЯТОВ ОСТРЫХ КОРОНАРНЫХ СОБЫТИЙ
Е.Д. АДАМОВИЧ, О.В. ГРАДОВ Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт энергетических проблем химической физики им. ВЛ. Тальрозе Российской академии наук, Москва, Россия
Введение. Известна роль ионных каналов в микрогидродинамической и реологической адаптации эндотелиальных клеток коронарных артерий, что предоставляет возможность «ремоделинга» субъединиц ионных каналов (транскрипционного) для улучшения этих характеристик. На данный момент как энергетические дисфункции (пример - гиперфосфорилирова-ние), так и аритмические индикаторы (такие, как подъём сегмента ST, характерный, по референсам GRACE, для 42% острых коронарных синдромов; равно как и иные изменения длины сегментов, не атрибутируемые к острым коронарным событиям) относят к электрофи-зиологичеким консекветам каналопатий, ассоциируемых в большинстве случаев с мутациями каналомных структур. Фибрилляция предсердий (мерцательная аритмия) также рассматривается как молекулярно-био-логически детерминируемая каналопатия. Поэтому крайне актуальными являются исследование и выявление количественных дескрипторов и предикторов подобных патологических состояний, интегрируемых в макроскопические индикаторы, определяемые в ус-
ловиях автоматизированного кардиометрического анализа алгоритмическим путем. Нами демонстрируется эффективность применения для этого методов патч-кламп-спектроскопии.
Материалы и методы. Были использованы файлы патч-кламп-регистрограмм отечественных и международных зарубежных групп, любезно предоставивших нам сырые данные для апробации принципов и алгоритмов обработки данных методами патч-кламп-спектро-скопии. Использовали методики PES, ARMA, MVSE, лом-бовские периодограммы, CWTFS-FRA, параметрические спектры и ряд специальных техник. Был создан репози-торий результирующих фингерпринт-файлов.
Результаты. Продемонстрирована возможность взаимно-однозначной (морфизм) или приближенной (fuzzy logics) идентификации перечисленных аномальных состояний каналов мембран, точно или предик-тивно физико-биохимически соответствующих острым коронарным состояниям и некоторым смежным цито-электрофизиологическим эффектам на модельных источниках ряда групп (лабораторных, а не клинических).
ЖЕНСКИЙ ПОЛ КАК ФАКТОР РИСКА РЕСТЕНОЗА ПОСЛЕ КАРОТИДНОЙ ЭНДАРТЕРЭКТОМИИ
А.С. БАХМЕТЬЕВ, М.Л. ЧЕХОНАЦКАЯ, О.Н. СЕМЕНОВА, А.С. КУРСАЧЕНКО ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России, Саратов, Россия
Цель. Выявить зависимость от пола и частоту встречаемости рестеноза оперированного сегмента после каротидной эндартерэктомии (КЭАЭ) у пациентов с ате-росклеротическим поражением в бассейне внутренней сонной артерии.
Материал и методы. Проанализированы данные 140 КЭАЭ у 140 пациентов (мужчин - 103, женщин - 37; средний возраст - 63,8 лет), выполненных в период с 2009 по 2015 гг. в сосудистых отделениях саратовской областной клинической больницы и клинической больницы им. Ю.Я. Гордеева. В послеоперационном периоде всем пациентам выполняли ультразвуковое ангиоска-нирование артерий ветвей дуги аорты с прицелом на оперированный сегмент. За рестеноз принимали повторно-образованную атеросклеротическую бляшку (АСБ), стенозирующую просвет оперированного сегмента на 25% и более. Симптомным рестеноз считали в том случае, если в предшествующие 6 месяцев у пациента зафиксирован как минимум один эпизод острого нарушения мозгового кровообращения в бассейне ип-силатеральной ВСА. Ультразвуковое исследование по стандартной методике проводили на приборах экспертного уровня Philips HD 11XE (Нидерланды) и Siemens SC2000 Prime (Германия).
Результаты. Рестеноз оперированного сегмента после КЭАЭ выявлен у 60 пациентов (49,2%). Большинство случаев рассматриваемого осложнения диагностировано среди пациентов, которым была проведена классическая КЭАЭ (42 пациента). На долю эверсионной КЭАЭ пришлось 18 пациентов. При анализе распределения по полу обнаружили, что в процентном отношении количество женщин превалировало над мужчинами. Так, мужчин с рестенозами было 37 (36% от общего количества мужчин), женщин - 23 (62% от общего количества женщин). На долю гемодинамически-значимых ресте-нозов (сужение просвета оперированного сегмента более 50%) пришлось 8 мужчин и 5 женщин. Отметим, что группа пациентов мужского пола и группа пациентов женского пола были сопоставимы по возрасту и сопутствующим заболеваниям. Также мы не выявили корреляции распространения рестеноза и их симптомности (наличия эпизодов острого нарушения мозгового кровообращения в послеоперационном периоде) в зависимости от методики КЭАЭ.
Выводы. Рестеноз после КЭАЭ более 25% в нашей работе встретился в 49% случаев. Женский пол является фактором риска рестеноза внутренней сонной артерии после КЭАЭ вне зависимости от методики операции.
СТРУКТУРА И РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ СТЕНОЗИРУЮЩЕГО АТЕРОСКЛЕРОЗА В ВЕРТЕБРО-БАЗИЛЯРНОМ БАССЕЙНЕ
А.С. БАХМЕТЬЕВ \ О.Г. ДВОЕНКО \ В.В. МАТВЕЕВ 2, О.Н. СЕМЕНОВА \ А.С. КУРСАЧЕНКО \
В.А. СУХОРУЧКИН 1
1ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России, Саратов, Россия 2 Частная клиника IMMA, Москва, Россия
Цель. Выявить частоту и характер распространения стенозирующего атеросклеротического поражения в бассейне позвоночных артерий (ПА) на экстра краниальном уровне у взрослых пациентов.
Материал и методы. В исследование включены 1888 пациентов (3776 ПА у 1265 женщин и 623 мужчин, средний возраст 52,45±11,8 лет), проходивших плановое триплекс-ное сканирование брахиоцефальных артерий (ТС БЦА) по стандартной методике на базе отделения ультразвуковой и функциональной диагностики Клинической больницы им. С.Р. Миротворцева СГМУ в период с апреля 2012 по июль 2017 гг. Исследование проводилось на приборах экспертного класса Siemens SC2000 Prime и Philips HD11 XE. Стенозом в бассейне ПА считали наличие сужения просвета артерии более чем на 20% при измерении одним из способов, применяемых в ультразвуковой диагностике сосудов (продольное или поперечное сканирования). В месте максимального сужения оценивались гемодинамические параметры. Все пациенты со стенозирующим атеросклерозом ПА осмотрены сосудистым хирургом и неврологом. Из исследования исключены пациенты с невизуализируемым хотя бы с одной стороны устьем ПА, лица с диссекцией ПА, а также с выраженной экстравазальной компрессией сосуда.
Результаты. Стенозирующее поражение в бассейне ПА на экстракраниальном уровне было выявлено у 165 (8,73%) пациентов (198 ПА у 78 женщин и 87 мужчин, средний возраст - 55,7±7,3 лет). В общей структуре преобладали устьевые стенозы в месте отхождения ПА от подключичной артерии (101 пациент - 61,2% от количества пациентов со стенозирующим поражением; 140 ПА). Отметим, что в большинстве случаев (96 ПА) протяженность атероскле-
ротической бляшки (АСБ) не превышала 10 мм и являлась локальной. Также следует отметить, что располагаются АСБ в устье преимущественно по задней стенке. Эхоструктурно, как правило, это стабильный гиперэхогенный атеросклеро-тический субстрат. Средняя степень стенозирования устья ПА - 43,3%. На долю гемодинамически-значимых стенозов пришлось 42 случая. У 45 (27,3%) пациентов АСБ являлась пролонгированной. В большинстве случаев от устья артерии до уровня С3-С4 позвонков со средней степенью сте-нозирования 42,3% в устье и 48% на уровне сегмента У2. Средняя пролонгация АСБ - 39,7 мм. Атеросклеротические окклюзии выявлены в 19 (11,5%) случаях (19 ПА). Во всех случаях визуализировался окклюзированный просвет ПА на уровне устья артерии и сегмента У1 с распространением на сегмент У2. Лишь в одном случае просвет ПА на уровне сегмента У2 был проходим с наличием ретроградного кровотока. Важно отметить отчетливую корреляцию клинических проявлений со степенью стеноза. Так, у 11 из 19 пациентов с окклюзированной ПА в предшествующие два года до проведения ТС БЦА были эпизоды острого нарушения мозгового кровообращения. Гемодинамически-значимый стеноз устья ПА (более 60%) в большинстве случаев коррелировал с наличием выраженных головокружений. Корреляции выраженности атеросклеротического поражения с полом и возрастом выявлено не было.
Выводы. В популяции взрослых пациентов стенози-рующее поражение в бассейне ПА на экстракраниальном уровне встретилось в 8,73% случаев. Подавляющее количество АСБ локализовано в устье ПА. Атеросклеротическая окклюзия ПА выявлена в 19 случаях (1%).
ТРИПЕПТИД СТИМУЛИРУЕТ ЭКСПРЕССИЮ КОННЕКСИНА 37 В ЭНДОТЕЛИИ СОСУДОВ ПРИ АТЕРОСКЛЕРОЗЕ И РЕСТЕНОЗЕ
И.И. БОЛОТОВ \ К.Л. КОЗЛОВ1, Н.С. ЛИНЬКОВА 12 1Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург, Россия 2Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Существующие лекарственные средства, применяемые в терапии атеросклероза и рестеноза у лиц старших возрастных групп, имеют ограничения вследствие побочных эффектов. Поэтому поиск новых эффективных и безопасных средств лечения сердечно-сосудистой патологии для лиц пожилого и старческого возраста особенно актуален. Регуляция старения эндотелия сосудов короткими пептидами открывает новые перспективы разработки вазо- и геропротекторных лекарственных препаратов, обладающих высокой эффективностью и отсутствием побочных эффектов.
Целью работы явилось изучение влияния пептида КБй на экспрессию коннексина 37 в эндотелии сосудов в норме, при атеросклерозе и рестенозе.
Материалы и методы исследования. Для создания культур клеток материал аорты без патологических изменений получен от эмбриона человека (21 неделя гестации) в НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Ткань аорты человека при атеросклерозе и рестенозе (диаметр 0,2 см, 4 фрагмента) получена при операции аор-
токоронарного шунтирования у пациентов пожилого возраста. Операции проводили в клинике сердечно-сосудистой хирургии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург). Культуры эндотелиоцитов выращивали в среде, содержащей 87,5% M199, 10% эмбриональной бычьей сыворотки, 1,5% НЕРЕБ, 1% PES, L-глутамин. Клетки культивировали до 3-го пассажа. Все культуры были разделены на группы: 1 - контрольная (добавление физраствора в культу-ральную среду), 2 - с добавлением пептида KED в концентрации 20 нг/мл. Для оценки взаимодействия эндотелиоцитов был выбран коннексин 37 - маркер межклеточных контактов. В работе использовали первичные моноклональные антитела к коннексину 37 (1:200, Dako) и вторичные антитела, конъю-гированные с флуорохромом Alexa Fluor 568 (1:1000, Abcam). Ядра клеток докрашивали Hoechst 33258 (Sigma). Микроскопию клеток проводили в инвертированном конфокальном микроскопе Olympus BX40. Для анализа результатов использовали программу «ВидеоТест-Морфология 5.2». В каждом случае анализировали 5 полей зрения при увеличении 200. Площадь экспрессии рассчитывали, как отношение площади,
