CC BY
89
© КУРБАНОВ Р. Д., КАН Л.Э., БЕКМЕТОВА Ф.М., ШЕК А.Б.
УДК 577.151:616.12-005.4:616.12-009.72 (575.1)
ЗАВИСИМОСТЬ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ I/D ПОЛИМОРФНОГО МАРКЕРА ГЕНА АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА ОТ СЕМЕЙНОГО АНАМНЕЗА ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА У БОЛЬНЫХ НЕСТАБИЛЬНОЙ СТЕНОКАРДИЕЙ УЗБЕКСКОЙ
НАЦИОНАЛЬНОСТИ Р.Д. Курбанов, Л.Э. Кан, Ф.М. Бекметова, А.Б. Шек
Республиканский специализированный центр кардиологии, Ташкент, Узбекистан, директор - д.м.н., проф. Р.Д. Курбанов.
Резюме. Обследовано 170 лиц узбекской национальности, в основную группу вошли - 125 больных с нестабильной (прогрессирующей)
стенокардией IIB класс (E. Braunwald et al., 1989), среди которых 63 имели отягощённый семейный анамнез ИБС. Группу контроля составили 45 здоровых лиц. I/D полиморфизм гена АПФ определяли с использованием набора реагентов Diatom TM DNA Prep 200 (производство ООО
«Лаборатория ИзоГен»). При сравнении больных с неотягощенным семейным анамнезом с группой контроля не выявлено значимых различий по распределению генотипов и аллелей, тогда как у больных с отягощенным анамнезом достоверно чаще наблюдалось носительство D/D генотипа (ОШ=3,46; 95% ДИ 1,18-8,11; Р=0,035) и D-аллеля гена АПФ (ОШ=2,47; 95% ДИ 1,40-4,34; Р=0,002) по сравнению с группой здоровых. Наличие семейного анамнеза ИБС среди лиц узбекской национальности с нестабильной стенокардией ассоциируется с накоплением «D» аллеля I/D полиморфного маркера гена АПФ.
Ключевые слова: I/D полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента, нестабильная стенокардия, отягощенный семейный анамнез.
Курбанов Равшанбек Давлатович - д.м.н., проф., директор
Республиканского специализированного центра кардиологии,
Ташкент, Узбекистан; e-mail: [email protected].
Кан Лиля Эдиковна - стажёр-исследователь лаборатории ишемической болезни сердца Республиканского специализированного центра кардиологии Ташкент, Узбекистан; e-mail: [email protected].
Бекметова Феруза Матсапаевна - к.м.н., с.н.с. лаборатории ишемической болезни сердца Республиканского специализированного центра кардиологии Ташкент, Узбекистан; e-mail: [email protected].
В развитии ишемической болезни сердца (ИБС), наряду с фенотипическими факторами внешней среды [2,8], важную роль играет генетическая предрасположенность к заболеванию. Так как проведение одновременного анализа всех генов-кандидатов представляется на сегодняшний день сложной задачей, необходимо выделение группы генов с потенциально наибольшим вкладом в патогенез заболевания.
Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ) является ключевым ферментом ренин-ангиотензиновой системы (РАС), играющей важную роль в регуляции гемодинамики и артериального давления, контроле водносолевого обмена и клеточного роста. К настоящему времени накоплены достаточные экспериментальные и клинико-лабораторные данные, указывающие на прямую корреляцию между активностью АПФ и степенью выраженности атеросклероза [1].
Цель исследования: изучение распределения I/D полиморфного маркера гена АПФ у больных нестабильной стенокардией узбекской национальности в зависимости от наличия семейного анамнеза ИБС и в сравнении со здоровыми лицами.
Материалы и методы
Обследовано 125 больных узбекской национальности, с нестабильной стенокардией напряжения, II B класс (E. Braunwald et al., 1989), с гиперхолестеринемией - холестерин липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) >100 мг/дл. Группу сравнения составили - 45 здоровых лиц узбекской национальности без клинических и инструментальнодиагностических признаков ишемической болезни сердца (по данным теста с физической нагрузкой), не имеющих отягощенного семейного анамнеза ИБС. Обе группы были сопоставимы по полу и возрасту.
Из исследования исключали пациентов с инфарктом миокарда (ИМ), перенесенным в предшествующие 3 месяца, больных с сахарным диабетом (СД) II типа, требующих лечения инсулином, с артериальной гипертензией II-III степени (АД>159/99 мм рт.ст.), гипотонией (АД < 100/60 мм рт. ст.), выраженными нарушениями сердечного ритма и проводимости (синдром слабости синусового узла, атриовентрикулярная блокада II-III степени, синоатриальная блокада, частая желудочковая экстрасистолия, фибрилляция предсердий), хроническими обструктивными заболеваниями лёгких, с хронической сердечной недостаточностью выше I ФК (NYHA), хронической почечной и печёночной недостаточностью. Также исключали пациентов до включения в исследование длительно принимавших гиполипидемические препараты и ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента (ИАПФ).
Для объективной оценки уровня биомаркеров воспаления, критерием исключения также являлось наличие у пациентов острых или обострения хронических инфекционных, воспалительных и аутоиммунных заболеваний в течение 1 месяца после наступления полной клинической и лабораторной ремиссии.
Семейный анамнез: оценка семейного анамнеза проводилась на основе опроса больного с помощью стандартного опросника ВОЗ «Семейный анамнез». Регистрировали наличие у родственников 1 степени родства (родители, родные братья и сестры, дети) - смерти от инфаркта миокарда или
инсульта, перенесенные нарушения мозгового кровообращения или инфаркты миокарда, наличие артериальной гипертонии. Семейный анамнез считали отягощенным при наличии у больного двух или более пораженных родственников.
В исходном периоде проводилась верификация диагноза нестабильной стенокардии на основании: жалоб; характерной динамики болевого синдрома на фоне проводимой терапии; анамнеза - наличия стенокардии или инфаркта миокарда в анамнезе (давность не менее 3 месяцев); динамики ЭКГ (преходящая ST-депрессия более 1 мм, отсутствие элевации ST); отсутствия повышения тропонина I; суточного ХМЭКГ; ЭхоКС - выявление признаков локального нарушения сократимости (гипокинезия, дискинезия), оценка глобальной сократимости левого желудочка).
Ультразвуковое исследование сонных артерий - определяли толщину комплекса интима-медиа (КИМ) общей сонной артерии (ОСА) путем сканирования в В-режиме цветным допплеровским картированием потока на ультразвуковой системе «ALOKA - Multi View» (Япония) линейным датчиком с частотой 7 МГц [20м].
Ультразвуковое исследование сердца проводили на эхокардиографе «ALOKA - Multi-View» по стандартной методике, согласно рекомендациям Американской ассоциации эхокардиографии, определяли: конечно-
диастолический, конечно-систолический размеры левого желудочка (ЛЖ), фракцию выброса (ФВ), толщину задней стенки ЛЖ (ТЗСЛЖ) и межжелудочковой перегородки (ТМЖП) в диастолу. Все измерения проводили не менее, чем в 5 сердечных циклах, затем результаты усредняли.
Суточное холтеровское мониторирование ЭКГ выполнялось с целью верификации диагноза у больных нестабильной стенокардией по стандартной методике на аппарате Cardiolab, (ХАИ, Украина).
При изучении липидного спектра крови определяли содержание: общего холестерина (ХС), триглицеридов (ТГ), холестерина липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), холестерина липопротеидов низкой (ЛПНП) и очень
низкой плотности (ЛПОНП), коэффициента атерогенности. Забор крови осуществляли на следующий день после поступления пациентов в стационар в утренние часы, после 12-часового голодания, из локтевой вены, в горизонтальном положении больного. Определение липидов крови - общего холестерина, ХС липопротеидов высокой плотности, триглицеридов выполняли ферментативным методом на биохимическом анализаторе «Daytona» (RANDOX, Великобритания). Концентрация ХС ЛПНП определялась по формуле Фридвальда:
ХС ЛПНП= ХС - ХС ЛПВП - ТГ/5 (мг/дл);
Коэффициент атерогенности (КА) определяли по формуле:
КА = (ХС - ХС ЛПВП) / ХС ЛПВП (отн. ед).
За норму ОХС принимали его содержание в сыворотке крови <200 мг/дл, XC ЛПВП >30 мг/дл, ТГ<200 мг/дл, ХС ЛПНП <100 мг/дл.
Концентрация вчС-реактивного белка определялась
высокочувствительным методом иммунотурбидиметрии с латексным усилением на аппарате «Daytona» (RANDOX, Великобритания).
Содержание аполипопротеинов А-1, В определяли на биохимическом автоанализаторе «Daytona» (RANDOX, Великобритания), с помощью метода иммунотурбидиметрии, с использованием моноспецифических антител к человеческому апо-В. Рассчитывали соотношение апо-В/апо-А. Значение коэффициента считали нормальным при величине соотношения < 1,0.
Определение концентрации липопротеина (а) (Лп (а)) (мг/дл) в сыворотке крови проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием моноспецифических антител к Лп (а) человека. Уровень ЛП (а) принимали за повышенный свыше 30 мг/дл.
Произведено генотипирование 170 образцов цельной крови. Геномную ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови по стандартному протоколу с использованием набора реагентов Diatom TM DNA Prep 200 (производство ООО «Лаборатория ИзоГен»). Генотипирование генов РАС проводили методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР) в лаборатории
функциональной геномики человека Института генетики и экспериментальной биологии растений АН РУз с использованием термоциклера PCR Systems 2700 (“Applied Biosystems”, США) и в лаборатории АГ и МГИ РСЦК на термоциклере GeneAmp PCR Systems 9700 («Applied Biosystems», США).
Последовательность праймеров была взята из работы F. Cambian et al.[6]:
ACE1 5 - CTG GAG ACC ACT CCC ATC CTT TC - 3'
ACE2 5'- GAT GTG GCC ATC ACA TTC GTC AGA T - 3'
При проведении статистического анализа полученных данных использованы возможности электронных таблиц Microsoft Excel, и пакета статистического анализа Statistica 6.0. Полученные результаты представлены в виде среднего арифметического и стандартного отклонения ^±SD), статистическая значимость полученных измерений при сравнении средних величин определялось по критерию Стьюдента (t) с вычислением вероятности ошибки (Р) при проверке нормальности распределения. Если распределение изучаемых переменных отличалось от нормального, применяли непараметрические критерии анализа: критерий Т Манна-Уитни для двух выборок. Для нахождения различий между качественными показателями использовали метод % . За статистически значимые изменения принимали уровень достоверности Р<0,05 (95%-й уровень значимости).
Результаты и обсуждение
Среди обследованных 170 лиц узбекской национальности в основную группу вошли - 125 больных с нестабильной (прогрессирующей)
стенокардией II B класс (Braunwald E.), в группу контроля - 45 здоровых лиц (табл. 1).
Таблица 1
Клинико-демографическая характеристика обследованных (М±8В, (п
______т_____________
Показатели
Больные НС (n=125)
Здоровые (n=45)
Возраст 54,8±9,5 53,5±9,8
Пол (муж/жен), п (%) 71/54 (57%/43%) 26/19 (58%/42%)
Отягощенный семейный анамнез, п (%) 63 (50,4%) 0
Сахарный диабет, п (%) 26 (20,8 %) 0
ЧСС, уд/мин 78,2±12,6*** 68,6±5,9
САД, мм Щ 136,0±21,4*** 120,7±8,1
ДАД мм Щ 86,5±11,7*** 77,2±5,2
Примечания: *** -р<0,001, достоверность различий относительно группы здоровых
лиц.
В группе больных нестабильной стенокардией 63 (50,4%) больных (I группа) имели отягощенный семейный анамнез ИБС (табл. 1).
Таблица 2
Сравнительная оценка исходных клинико-гемодинамических и биохимических показателей в исследуемых группах больных нестабильной стенокардией в зависимости от семейного анамнеза
(М±£В, п (%))
Показатели Больные с отягощенным семейным анамнезом, (I группа) Больные без семейного анамнеза, (II группа)
п 63 (50,4%) 62 (49,6%)
Возраст 53,1±10,3 56,4±8,4
Пол (муж/жен) 36/27 (57,1%/42,9%) 35/27 (56,5%/43,5%)
Длительность ИБС, лет 5,6±4,2 5,5±4,5
Г ипертоническая болезнь I ст. 60 (95,2%) 55 (88,7%)
Инфаркт миокарда в анамнезе 21 (33,3%) 24 (38,7%)
Сахарный диабет 14 (22,2%) 12 (19,4%)
В анамнезе ОНМК 5 (7,9%) 2 (3,2%)
Частота приступов стенокардии, за 1 нед 29,1±9,1 28,2±7,5
Количество потребляемого 20,3±8,0 20,1±5,2
нитроглицерина, за 1 нед
Частота сердечных сокращений, уд/мин 78,1±12,8 78,2±12,4
Систолическое АД, мм 136,3±19,5 135,9±23,4
Диастолическое АД мм Бg 86,4±11,3 86,6±12,2
КДО ЛЖ, мл 140,5±30,9 149,4±30,5
КСО ЛЖ, мл 53,2±23,8 58,5±21,8
ФВ ЛЖ, % 62,7±9,2 61,8±8,3
КИМ прав. 1,02±0,22 0,96±0,20
КИМ лев. 1,02±0,23* 0,93±0,22
Примечания: * - р<0,05 достоверность различий относительно группы больных без отягощенного семейного анамнеза.
При сравнительном анализе обе группы больных не отличались по исходным клинико-гемодинамическим и биохимическим показателям (табл.
2, 3), однако в I группе отмечались более высокие значения КИМ сонных артерий (Р<0,05) и уровня вчСРБ (Р<0,05).
Таблица 3
Сравнительная оценка исходных показателей липидного обмена, биомаркеров липидного обмена и воспаления в исследуемых группах больных нестабильной стенокардией в зависимости от семейного ____________________________анамнеза (М±$В) _________________________
Показатели Больные с отягощенным семейным анамнезом (n=63) (I группа) Больные без семейного анамнеза (n=62) (II группа)
Общий ХС, мг/дл 218,8±49,3 213,9±39,2
ТГ, мг/дл 193,7±72,9 188,7±88,5
ХС ЛПНП, мг/дл 139,0±42,7 136,8±37,3
ХС ЛПВП, мг/дл 38,0±9,0 38,8±8,6
ХС ЛПОНП, мг/дл 40,5±17,4 41,4±22,0
КА, отн.ед. 4,9±1,7 4,7±1,3
Апо А, мг/дл 131,1±41,0 126,2±26,1
Апо В, мг/дл 102,0±28,2 99,6±28,2
АпоВ/АпоА, ед 0,8±0,3 0,8±0,3
ЛП (а), мг/дл 34,4±16,3 36,1±18,2
вчCPБ, г/л
12,0±10,8 *
8,2±8,4
Примечания: * - р<0,05, достоверность различий относительно группы больных без отягощенного семейного анамнеза (критерий Манна-Уитни).
По результатам генотипирования не отмечалось достоверных отличий в распределении генотипов, аллелей и носительства «повреждающей» аллели D I/D полиморфного маркера гена АПФ между больными нестабильной стенокардией (n=125) и здоровыми (табл. 4). В то же время у больных с семейным анамнезом ИБС, относительно группы здоровых лиц, отмечена достоверно более высокая распространённость генотипа D/D, D аллели и числа носителей «повреждающей» аллели D. Соответственно, при этом среди них реже встречались генотип I/I, частота аллели I и число носителей I аллели.
Таблица 4
Распределение I/D полиморфного маркера гена АПФ у больных нестабильной стенокардией узбекской национальности в зависимости
от семейного анамнеза
Генотипы, аллели Больные НС (n=125) С семейным анамнезом, (n=63) Без семейного анамнеза, (n=62) Здоровые (n=45)
D/D генотип 29 (23%) ОШ 2,42 ДИ 0,87-6,69 19 (30%) ОШ 3,46 ДИ 1,18-8,11 р=0,035 10 (16%) ОШ 1,54 ДИ 0,49-4,86 5(11%)
I/D генотип 54 (43%) ОШ 1,04 ДИ 0,52-2,07 30 (48%) ОШ 1,24 ДИ 0,58-2,69 24 (39%) ОШ 0,86 ДИ 0,40-1,89 19(42%)
I/I генотип 42 (34%) ОШ 0,58 ДИ 0,29-1,16 14 (22%) ОШ 0,33 ДИ 0,14-0,75 (р=0,014) 28 (45%) ОШ 0,94 ДИ 0,44-2,03 21(47%)
D аллель 112 (45%) ОШ 1,71 ДИ 1,03-2,84 р=0,051 68 (54%) ОШ 2,47 ДИ 1,40-4,34 р=0,002 44 (36%) ОШ 1,16 ДИ 0,65-2,06 29(32%)
I аллель 138 (55%) ОШ 0,59 ДИ 0,35-0,97 (р=0,051) 58 (46%) ОШ 0,41 ДИ 0,23-0,71 (р=0,002) 80 (65%) ОШ 0,86 ДИ 0,49-1,54 61(68%)
D-носители 83 (66%) ОШ 1,73 ДИ 0,86-3,46 49 (78%) ОШ 3,06 ДИ 1,33-7,05 Р=0,014 34 (55%) ОШ 1,06 ДИ 0,49-2,30 24(53%)
I-носители 96 (77%) ОШ 0,41 ДИ 0,15-1,15 44 (70%) ОШ 0,29 ДИ 0,10-0,85 (р=0,035) 52 (84%) ОШ 0,65 ДИ 0,21-2,05 40(68%)
Примечания: р - достоверность различий относительно группы здоровых лиц (в
скобках приведены значенияр здоровых относительно группы больных с отягощённым семейным анамнезом).
Сравнение особенностей I/D полиморфизма гена АПФ между I (n=63) и II (n=62) группами больных показало, что у больных с отягощённым семейным анамнезом достоверно чаще встречался D аллель (54% против 36%) (ОШ=2,13; ДИ 1,29-3,54; Р=0,005) и было выше число D-носителей (78% против 55%) (ОШ=2,88; ДИ 1,33-6,27; Р=0,012). В то же время генотип I/I встречался чаще (45% против 22%) у пациентов без семейного анамнеза ИБС (ОШ=4,25; ДИ1,96-9,2; Р<0,001), тогда как по частоте распределения D/D и I/D генотипов различия носили недостоверный характер.
Особенностью настоящего исследования являлось сравнение распределения аллелей изучаемых генов у больных в зависимости от семейного анамнеза ИБС. Это позволило сравнить распространённость генетических маркеров среди лиц, у которых, возможно, преобладающим являлось влияние «фенотипических» факторов внешней среды с «камертоном» группы больных с решающим вкладом генетических факторов.
Известно, что ангиотензиноген и АПФ являются ключевыми элементами РАС и вносят большой вклад в развитие сердечно-сосудистых заболеваний. Роль I/D полиморфизма гена АПФ в развитии острой ишемии миокарда, реализуемая через соответствующий фермент, многогранна.
Экспериментальные исследования свидетельствуют о связи D/D генотипа гена АПФ с избыточной вазоконстрикцией, склонностью к тромбообразованию, нарушением эндотелиальной функции [5,10]. В связи с
этим был проведен ряд работ по анализу связи между I/D полиморфизмом гена АПФ и развитием ССЗ. Анализ 145 независимых исследований (выборка составила 49 959 человек) позволил выявить, что наличие варианта D/D гена АПФ ассоциируется с повышением риска развития ряда атеросклеротических и сосудистых заболеваний [4]. Наличие гомозигот по D аллелю соответствует повышению риска развития ИБС в 1,3 раза в среднем по 30 исследованиям. По данным НА. Малыгиной с соавт., генотип D/D и аллель D гена АПФ могут служить одним из критериев для выделения групп повышенного риска развития ИМ и ИБС [3].
В исследовании REGRESS, по данным двухлетнего наблюдения за 782 мужчинами со стабильной стенокардией, получавших терапию правастатином, частота развития инфаркта миокарда оказалась достоверно выше среди больных с генотипом D/D гена АПФ и у пациентов имеющих одновременно генотип D/D гена АПФ и генотип C/C гена рецептора ангиотензина II [11]. Результаты настоящего исследования показали, что среди больных нестабильной стенокардией отмечается накопление повреждающего D аллеля РАС, в большей степени выраженные у больных с семейным анамнезом ИБС. Одновременно, в группе больных с отягощенным семейным анамнезом отмечались более высокие значения КИМ сонных артерий и вчСРБ, который является предиктором неблагоприятного исхода [7,9]. Возможная взаимосвязь этих факторов с накоплением «D» аллеля I/D полиморфного маркера гена AПФ требует дальнейшего изучения.
Таким образом, наличие семейного анамнеза ИБС среди узбеков с нестабильной стенокардией ассоциируется с более высокой частотой носительства «повреждающего» D аллеля I/D полиморфного маркера гена AQ^ увеличением толщины комплекса интима-медиа сонных артерий и уровня высокочувствительного С-реактивного белка.
THE DEPENDENCY OF DISTRIBUTION I / D POLYMORPHIC MARKER GENE ANGIOTENSIN CONVERTING ENZYME FROM THE
FAMILY HISTORY OF CORONARY ARTERY DISEASE IN PATIENTS
WITH UNSTABLE STENOCARDIA
OF UZBEK NATIONAL
R.D. Kurbanov, L.E. Kan, F.M. Bekmetova, A.B. Shek Republican Specialized Center of Cardiology, Tashkent, Republic of Uzbekistan
Abstract. Were examined 170 persons of Uzbek nationality, the main group included 125 patients with unstable (progressive) angina class II B (E. Braunwald et al., 1989), 63 of them had a family history of CHD. The control group included 45 healthy individuals. I / D polymorphism of the ACE gene was determined using reagent Diatom TM DNA Prep 200 (produced by "Laboratory IsoGene"LTD). When comparing patients with uncomplicated family history with the control group were not revealed significant differences in the distribution of genotypes and alleles, whereas in patients with a burdened history more frequent had D / D genotype (OR = 3.46, 95% CI 1,18-8 , 11, P = 0.035) and D-allele of the ACE gene (OR = 2.47, 95% CI 1,40-4,34, P = 0.002) compared to controls. The presence of family history of coronary heart disease among Uzbeks with unstable stenocardia is associated with the accumulation of «D» allele I / D polymorphism of the gene ACE.
Key words: I / D polymorphism of the gene angiotensin-converting enzyme, unstable stenocardia, burdened family history.
Литература
1. Аронов Д.М. Система ангиотензинпревращающий фермент -ангиотензин II, атеросклероз и ингибиторы
ангиотензинпревращающего фермента // Терапевт. архив. - 2000. -№12. - С. 5-7.
2. Д
евришбекова З.М., Иванченко Д.Н., Кательницкая Л.И. Генетически обусловленные факторы риска развития инфаркта миокарда
// Профилактика заболеваний и укрепление здоровья. - 2008. - №2. -С.9-12.
3. Малыгина Н.А., Костомарова И.В., Криводубская Т.Ю. и др. Анализ полиморфизма гена ангиотензинпревращающего фермента у больных ишемической болезнью сердца и гипертонией // Кардиология.
- 2000. - № 4. - С. 19-22.
4. Целуйко В.И., Литвинова И.А., Кравченко Н.А. Полиморфизм гена ангиотензинпревращающего фермента у больных с гипертрофической кардиомиогштией // Украинский кардиологический журнал. - 2000. - № 3. - С. 37-41.
5. Buikema H., Pinto Y.M., Rooks G. et al. The deletion polymorphism of the angiotensin-converting enzyme gene is related to phenotypic differences in human arteries // Eur. Heart J. - 1996. - Vol. 17, №5. - P. 787-794.
6. Cambien F., Poirier O., Lecert L. et al. Deletion polymorphism in the gene of angiotensin-converting enzyme in a potent risk factor for myocardial infarction // Nature. - 1992. - Vol. 359. - P. 641-644.
7. H averkate F., Thompson S., Pyke S. Production of C-reactive protein and risk of coronary events in stable and unstable angina // Lancet. - 1997. - Vol. 349. - P. 462-466.
8. K annel W.B., McGee D., Gordon T. A general cardiovascular risk profile: The Framingham Study // Am. J. Cardiol. - 1976. - Vol. 38. - P. 46-51.
9. Lozano T., Ena J., Almenar V. et al. Evaluation of patients with acute chest pain of uncertain origin by means of serial measurement of high-
sensitivity C-reactive protein // Rev. Esp. Cardiol. - 2007. - № 60(8). - P. 817-824.
10. Taniguchi I., Yamazaki T., Wagatsuma K et al. The DD genotype of angiotensin converting enzyme polymorphism is a risk factor for coronary artery disease and coronary stent restenosis in Japanese patients // Jpn. Circ. J. - 2001. - Vol. 6. - P. 897-900.
11. Van Geel P.P., Y.M. Pinto A.H., Zwinderman et al. Synergistic effects of angiotensin converting enzyme and angiotensin-II type 1 receptor gene polymorphisms on ischaemic events // XX Congress of the European society of Cardiology. - 2001. - Abstract. - P. 386.
