CC BY
9К концу эксперимента погибшие животные вскрывались для гистологического исследования внутренних органов, а выжившие находились под непрерывным наблюдением в течение 2 недель. После окончания наблюдений экспериментальных крыс забивали и подвергали аутопсии. Расчет ЛД50 проводился графическим методом Беренса.
Заключение. Изучение острой токсичности исследуемых соединений МАВ 118, МАВ 121, МАВ 124 по сравнению с эталонными препаратами показало, что данные соединения менее токсичны. Представленные соединения могут быть предложены для дальнейшего изучения их специфической местноанестезирующей активности.
ЛИТЕРАТУРА
1. Хабриев Р.У. - Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, М., 2005г.
2. Кузденбаева Р.С., Рахимов К.Д., Шин С.Н. Доклиничнское изучение острой токсичности и местноанестезирующей активности новых биологических веществ. - Гос. фарм. Комитет РК, Алматы: 2000, 28 стр.
3. Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - Издательство «Гриф и К» 2012г., 944 стр.
ЗАЛЕЖН1СТЬ ГОСТРО1 ТОКСИЧНОСТ1 ТА Д1УРЕТИЧНО1 АКТИВНОСТ1 В1Д Х1М1ЧНО1 СТРУКТУРИ В РЯДУ 7-ЗАМ1ЩЕНИХ 8-АМ1НО-3-МЕТИЛКСАНТИН1В
1Дученко Е. А., 1К-ортенко В. I., 2Самура Б. А., 3Романенко М. I., 3Ладогубець О. В.
1м. XapKie, Хартвська державна зооветеринарна академiя, 2 м. Хартв, Нащональний фармацевтичний ушверситет, 3 м. Запорiжжя, Запор1зький державний медичний ушверситет
Abstract: A vital problem of the contemporary pharmacology lies in creation of safer and more efficient medicinal products. Regulation of sodium balance and water, being one of the important homeostatic functions, is very essential for developing the methods of rational therapy through means of diuretics of renal function of kidneys.
This work is aimed at researching into dependence of acute toxicity and diuretic activity on chemical structure of the newly synthesized 7-substituted-8-amino-3-methylxanthines in experiments on rats.
Object and methods of research. The acute toxicity of 7-(2-hydroxy-3-p-methoxyphenoxy)propyl-8-substituted theophylline has been studied on the intact white nonlinear mice weighing 20-24 LD50 and has been calculated according to the method of Korber. Study of the diuretic activity of the above compounds has been carried out on white rats of Wistar line weighing 180-195g according to the method of Y.B. Berkhina.
Research outcome and discussion. The gained outcome of research into the acute toxicity of 7-substituted-8-amino-3-methylxanthines (compounds 1-11) has shown that LD50 of the synthesized compounds is in the range from 290 to 835 mg/kg. The most toxic (LD50=290 mg/kg) compound is the 6th one: 3-methyl-7-(2-hydroxy-3-p-methoxyphenoxy-)propyl-8-n-butylaminoethyl. Substitution in the 8th position of the molecule of 7-substituted-8-amino-3-methylxanthines n-butylamine (compound 6) of radical with 4-benzylpiperazine-1-ilne (compound 11), p-ethoxyphenyl-amic (compound 10) N,N-diethylaminoethylamine (compound 4), 4-methylpiperazine-1- ilne (compound 1), N,N-diethylaminoethylamine (compound 3), N-methyl-N-benzylamine (compound 2), (pyrrolidine-1- ilne (compound 7), m-tolylamine (compound 9), fi-hydroxyethylepiperazine-1- ilne (compound 8), (furil-2)methylamine (compound 5) causes a reduction of the acute toxicity of the aforesaid substances.
Analysis of the diuretic activity research outcome shows that derivatives of 7-substituted-8-amino-3-methylxanthines (compounds 1-11) increases excretion of urine in the range from 25.1% to 201.4% (p<0.05).
The most signifying diuretic activity has been shown by the compound 5: 3-methyl-7-(2-hydroxy-3-p-methoxyphenoxy-)propyl-8-(furil-2)methylaminoxanthine, which in the dose of 41.8 mg/kg enhances the water diuresis for 201.4% (p<0.01).
Introduction to the 8th position of the molecule of 7-substituted-8-amino-3-metylxanthines instead of furil-2-methylamine (compound 5) radical of m-tolylamine (compound 9), n-butylamine (compound 6) and p-ethoxyphenylamine (compound 10) fragments leads to a reduction in renal excretory function for 143.5%; 131.8% and 111%, accordingly. The comparator (hydrochlorothiazide) in the dose of 25 mg/kg enhances the water diuresis for 90.1%.
Thus, the most signifying diuretic effect is observed in the compound 5, which exceeds the effect of the comparator (hydrochlorothiazide) for 111.3% (p<0.05) and has been selected for further study of the specific activity.
Вступ. Важливою проблемою сучасно! фармакологи е створення i впровадження у медичну практику бшьш безпечних та ефективних лшарських засобiв, яю усувають порушення кттинного метаболiзму, юнного гомеостазу та здатних впливати на мехашзми, регулюючи загальну гемодинамшу, водно-натрiевий баланс в фiзiологiчних i патолопчних станах. Регулящя балансу натрда i води - одна i3 важливих гомеостатичних функцш дуже важлива для розробки методiв ращонально! терапи дiуретичними засобами ренально! функци нирок [2, 3].
Нирковий транспорт електролтв та води реалiзуеться на рiзних рiвнях вщ молекулярного до оргашзменого i знаходиться пiд контролем багаточис-лених регуляторних факторiв. Порушення балансу складу внутршл^инно! i позакттинно! рiдин мае важливу роль при рiзних захворюваннях людини [15].
Патологiчнi процеси в нирках проявляються при артерiальнiй гшертензи, хронiчнiй серцевiй недостатностi, нефротичному синдром^ хронiчнiй нирковiй недостатносн. нецукровому дiабетi та iнших хворобах [5, 13]. При лшуванш артерiально! гшертензи. порушень водно-електролiтного балансу проводиться фармакологiчна корекщя екскреторно! функци нирок за допомогою дiуретичних препаратiв. Незважаючи на досягнул успiхи у профiлактицi та лшуванш дiуретичними препаратами, багато питань ще! проблеми е актуаль-ними i потребують активних дослiджень. Поряд з вираженим дiуретичним ефектом сечогiннi засоби проявляють небажану побiчну дiю: гiпокалiемiю, гiпохлоремiчний алкалоз, метаболiчний ацидоз, пперлшщемда, гiперглiкемiю, азотемiю, порушення бiлкового обмiну та iн. [9], якi обмежують !х застосування в клiнiчнiй практищ [7, 13].
В зв'язку з цим важливим завданням експериментально! фармакологи е створення нових ефективних препаранв для полiпшення дiяльностi нирок та збшьшення сечовидiлення при патологiчних станах.
Нашу увагу привернули вперше синтезоваш органiчнi речовини в ряду 7-замщених-8-амiно-3-метилксантинiв [14]. Прогнозування бюлопчно! активносп 7-замщених-8-амшо-3-метилксантинiв проведено з використанням единого опису хiмiчно! структури i унiверсального математичного алгоритму встановлення залежностей «структура-актившсть» за програмою PASS (Prediction of Activity Spectra for Substances) за допомогою Java аплету сайту прогнозу спектра бюлопчно! активносп http://www. pharmaexpert.ru / PASSоnline / predict. php. Хiмiчнi структури сполук вводили за допомогою комп'ютерно! програми Chem Office 2006 (утилiта ChemDraw Ultra 10.0) та визначали спектр бюлопчно! активность Бюлопчна актившсть представлена в програмi та виражаеться якiсно «активне»/-«неактивне» (Pa/Pi) (Pa > 0,300) [8].
Комп'ютерний прогноз фармаколопчно! активностi за програмою PASS 7-замщених-8-амiно-3-метилксантинiв свщчить про широкий спектр бiологiчно! ди, а вiрогiдна наявнiсть дiуретично! активносп послужила пiдставою для проведення даних дослiджень.
Метою роботи було дослщження залежностi гостро! токсичностi та дiуре-тичноl активностi вiд хiмiчно! структури серед вперше синтезованих 7-замiще-них-8-амiно-3-метилксантинiв у дослщах на щурах.
Об'ект та методи дослщження. Об'ектом дослщження були сполуки у ряду 7-замщених-8-амшо-3-метилксантишв (спол. 1-11), синтез яких здшснено на кафедрi бiологiчноl хiмi! Запорiзького державного медичного унiверситету пiд керiвництвом доктора фармацевтичних наук, професора Романенко М.1.
Структура синтезованих сполук тдтверджена за допомогою сучасних фiзико-хiмiчних
методiв елементного ан^зу, УФ-, 1К-, ПМР- и масс-спектро-метри, зус^чним синтезом, а чистота синтезованих речовин контролювалася методом тонкошарово1' хроматографи. Даш речовини е бiлими кристалiчними порошками, без запаху, з прким смаком. Даш сполуки не розчинш у вод^ легко розчиннi у диметилфомамщ, диметилсульфоксидi, практично не розчиннi в ефiрi, етанолi, хлороформi [14].
Дослщження гостро1 токсичнiстi 7-(2-гщрокси-3-п-метоксифенокси)про-пш-8-замiщених теофшну проведено на iнтактних бiлих нелшшних мишах масою 20-24 г ЛД50 вираховували по методу Кьорбера [11]. Вивчення дiуретичноï активностi даних сполук проводили на бших щурах лшп Вiстар вагою 180-195 г за методом СБ. Берхiна [1, 4]. Дослщжуваш речовини в дозi 0,05 ЛД50 та препарат порiвняння гщрохлорпазид вводили внутрiшньошлунково за допомогою металевого зонду. При проведеннi експериментальних дослщжень тварини знаходились в стандартних умовах згщно з нормами i принципами Директиви Ради €С по питанням захисту хребетних тварин, яких використовували для експериментальних та других наукових дослщжень [4].
Одержанi результати обраховаш методами варiацiйноï статистики. Даш представлен у видi середнього арифметичного та стандартноï помилки. Вiро-гiднiсть рiзниць мiж середнiми значеннями визначали за критерiем Стьюдента при нормальному розподшенш. Порiвняння груп за якiсною ознакою проводили за допомогою критерiю x2. Результати дослiдження обробленi iз застосуванням статистичних пакетiв програм «Microsoft Office Excel 2003», «IBM SPSS Statistics v. 20», «STATISTICA 6.0». Статистично значущими вважали вiдмiнностi при рiвнi значущостi не менше 0,05 [6, 9].
Результати дослщжень та ïx обговорення. Одержанi результати дослщження гостроï токсичностi 7-замiщених-8-амiно-3-метилксантинiв (спол.1-11) наведеш в табл. 1. Аналiз даних свщчить, що ЛД50 синтезованих сполук знаходиться в iнтер-валi вiд 290 до 835 мг/кг. Найбшьш токсичною (ЛД50=290 мг/кг) була сполука 6 - 3-метил-7-(2-гщрокси-3-п-метоксифенокси-)пропш-8-н-бутиламшоксантин. Замi-на у 8-му положенш молекули 7-замiщених-8-амiно-3-метилксантинiв н-бутил-амшого (спол. 6) радикала на 4-бензилпшеразин-1-шьний (спол. 11), п-етоксифенiламiновий (спол. 10) N.N-диетиламшоетиламшовий (спол. 4), 4-метилпшеразин-1-iльний (спол. 1), N.N-диметиламiноетиламiновий (спол. 3), ^метил-К-бензиламшовий (спол. 2), (шролщин-Ыльний (спол. 7), м-толшамшовий (спол. 9), ß-гiдроксиетилпiперазин-1-iльний (спол. 8), (фурiл-2)метиламiновий (спол. 5) приводить до зменшення гостроï токсичностi цих речовин.
Вiдповiдно до класифшаци К.К.Сидорова [10] токсичностi синтетичних речовин при внутршньочеревному введеннi вс дослiдженi 7-замiщенi-8-амiно-3-метилксантини (спол. 1-11) вщносяться до практично нетоксичних речовин.
Таблиця 1. Гостра токсичнiсть 7-замiщених-8-амiно-3-метилксантинiв
0 0" АЛ
H—N 1-n-ch2-ch-ch2-0-(O/ 0СНз
0 ,
Г ^N^ R CH3
№ Шифр R ЛД50, мг/кг
1 Y-2569 4-метилшперазин-1-ш) 405,0 ±18,4
2 Y-2589 N-метил-N-бензиламiно 515,0 ±19,9
3 Y-2928 N.N-диметиламiноетиламiно 428,0 ±15,8
4 Y-2929 N.N-диетиламiноетиламiно 365,0 ±19,8
5 Y-3013 (фурiл-2)метиламiно 835,0 ±19,9
6 Y-3129 н-бутиламшо 290,0 ±18,4
7 Y-3130 (пiролiдин-1-iл) 545,0 ±21,3
8 Y-3189 (ß-пдроксиетилпшеразин-1 -iл-) 695,0 ±21,2
9 Y-3328 .-толшамшо 515,0 ±18,5,
10 Y-3330 и-етоксифеншамшо 344,0 ±14,6
11 Y-4541 4-бензилпiперазин-1-iл) 302,0 ±23,7
Аналiз результатiв дослiдження дiуретичноï активностi (табл. 2) показуе, що похщш 7-замiщених-8-амiно-3-метилксантинiв (спол. 1-11) збшьшують екскрецiю сечi в межах вщ 25,1% до 201,4% (p<0,05).
Таблиця 2. Дiуретична активнють 7-замiщених-8-амiно-3-метилксантинiв
Сполука № Шифр Доза, мг/кг Дiурез через
2години 4 години
M±m, мл % до контролю M±m, мл % до контролю
1 у-2569 20,3 2,23±0,17* 155,9 4,46±0,11* 157,6
2 Y-2589 25,8 3,27±0,12* 228,7 5,27±0,12 * 186,2
3 Y-2928 21,4 2,90±0,13* 202,8 4,51±0,14* 159,4
4 Y-2929 18,3 2,74 ±0,11* 181,6 5,64±0,26** 199,3
5 Y-3013 41,8 3,94±0,17** 275,5 8,53±0,22** 301,4
6 Y-3129 14,8 3,14±0,16* 219,6 6,56±0,27* 231,8
7 Y-3130 27,3 2,53±0,14* 176,9 3,54±0,23 125,1
8 Y-3189 34,8 2,37±0,11* 165,7 4,17 ±0,20 147,3
9 Y-3328 31,0 2,97±0,21* 207,7 6,89±0,23** 243,5
10 Y-3330 17,2 3,39±0,17* 237,1 5,97±0,15* 211,0
11 Y-4541 15,1 2,70±0,21* 188,8 5,24±0,23* 185,2
Гвдрохлорпазид 25,0 2,72±0,09* 190,2 5,38±0,13* 190,1
Контроль - 1,43±0,13 100 2,83±0,28 100
Примпта: * р<0,05 та ** р<0,001 ввдносно контролю.
Найбшьш виражену дiуретичну активнiсть виявила сполука 5 - 3-метил-7-(2-пдрокси-3-и-метоксифенокси-)пропш-8-(фурш-2)метиламшоксантин, яка в до^ 41,8 мг/кг збшьшувала водний дiурез на 201,4% (p<0,01).
Уведення у 8-ме положення молекули 7-замщених-8-амшо-3-метилксанти-тв замють фурiл-2-метиламiнового (спол. 5) радикала м-толшамшового (спол. 9), н-бутиламшового (спол. 6) та и-етоксифеншамшового (спол. 10) фрагмеппв призводить до зменшення видшьно! функцп нирок на 143,5%; 131,8% i 111% вiдповiдно. По зменшенню впливу на видiлення сечi iнших 7-замщених-8-амiно-3-метилксантинiв залежно вщ рiзних замiсникiв, що знаходяться в 8-му поло-женш молекули цього ряду можна розташувати у наступн1й послщовносп: N.N-диетиламiноетиламiновий (спол. 4), N-метил-N-бензиламiновий (спол. 2), 4-бензилтперазин-1-шьпий) (спол. 11), N,N-диметиламiноетиламiновий (спол. 3), 4-метилпiперазин-1-iльний (спол. 1), яю викликають у щурiв збiльшення водного дiурезу в iнтервалi вiд 57,6% до 99,3% вщповщно. Препарат порiвняння пдро-хлортiазид в дозi 25 мг/кг збiльшуe водний дiурез на 90,1%.
Можна припустити, що дiуретичний ефект вперше синтезованих похщних 7-замщених-8-амiно-3-метилксантинiв реалiзуeться за рахунок збшьшення екскрецн iонiв натрда з сечею та стимуляцieю ренально! функцн нирок [2].
Таким чином, найбшьш вираженою дiуретичною дieю володie сполука 5, яка перевищуе дiю препарата порiвняння гiдрохлотiазида на 111,3% (p<0,05) i була вщбрана для подальшого вивчення специфiчноl активность
Висновки.
1. Вс дослiдженi речовини в ряду 7-замщених-8-амшо-3-метилксантишв вiдносяться до практично нетоксичних речовин.
2. 3-Метил-7-(2-пдрокси-3-и-метоксифенокси-)пропш-8-(фурш-2)метилам>ноксантин (спол. 5) збiльшуe дiурез на 201,3% i перевищуе дiуретичний ефект препарата порiвняння гiдрохлортiазиду на 111,3%.
Перспективи подальших дослiджень. Похщт 7-замщених-8-амшо-3-ме-тилксантитв е перспективною групою речовин для синтезу та проведению фар-маколопчного скришнгу з метою створення на !х основi дiуретичних засобiв для фармаколопчно! корекцл дiяльностi нирок.
Л1ТЕРАТУРА
1. Берхин Е.Б. Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Е.Б.Берхин // Хим. фарм. журн. - 1977 - Т.11, № 5.- С. 3-11.
2. Глезер Г.А. Диуретики: руководство для врачей / Г.А. Глезер. - М.: Интербук-бизнес. 1993. - 352 с.
3. Джеймс А. Шейман. Патофизиология почки / Джеймс А. Шейман: пер. с анг. - /2-е изд., ucnp. // J. - М.:- СПб: Бином; Невский Диалект, 1999. - 206 с.
4. Доктшчш досл^дження лкарських засобiв / за ред. О.В. Стефанова. - Кт'в : Авщета, 2001. - 528 с.
5. Експериментальна артерiальна гiпертензiя: вплив лшарських засобiв /
М.1.Завгородний, Р.С.Довгань, О.О.Нагорна та iншi // Кшв: ПВП «Задруга», 2014. - 272 с.
6. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использо-ванием EXCEL / С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич // Кшв : Морион, 2000. - 320 с.
7. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. - /изд. 15-е, перераб., испр. и доп.]. - М.: Новая Волна, 2009. - 1206 с.
8. Методолопчне обгрунтовання ошташзаци комп'ютерного прогнозу бюлопчно! активносп вперше синтезованих сполук для проведення скринiнгу фiзiологiчно активних речовин / Б.А. Самура, В.1. Кортенко, М.1. Романенко // Методичнi рекомендацп.-К. - 2015. - 16 с.
9. Побочное действие лекарств /С.М. Дроговоз, А.П. Гудзенко, Я.А. Бутко [та ш.] //Х.: «СИМ», 2010. - 480 с.
10 Сернов Л.Н. Элементы экспериментальной фармакологии / Л.Н. Сернов, В.В. Гацура. - М., 2000. - 352 с.
11. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения / К.К. Сидоров // Токсикология новых пром. хим. в-в. - М.: 1973. - Вып. 13. - С.47-60.
12. Ng G.Y. Aminophylline as an adjunct diuretic for neonatesa case series / G.Y. Ng, E.H. Baker // Int. J. Cardiol. - 2006.- Vol. 110, № 1. - P. 122-124.
13. Possible involvement of organic anion and cation transporters in renal excretion of xanthine derivatives, 3- methylxanthine and eufylline / M. Nadai, M. Kato, Yoshizumi [et al.] // J. Life Sci. - 2007. - Vol. 22, №15. - P. 1175-1182.
14. Synthesis, physicalchemical and biological properties of 8-aminosubstituted 7- p-hydroxy (oxo)alkyl (aryl)- xanthenes/ N.I. Romanenko, V.I. Kornienko, O.A. Pakhomova, [et al.] // Xth International Symposium on the Chemistry of Natural Compounds Nov. 2013. Tashkent-Bukhara, Republic of Uzbekistan. P. 269.
15. The effect of aminophylline on renal colic: a randomized double blind controlled trial / H. Djaladat, P. Tajik, S.A. Fard, S. Alehashemi // South. Med. J. -2007. -Vol.100, Msll. - P. 1081-1084.
ИОД АДДУКТЫСЫ НЕГ1З1НДЕГ1 СУБСТАНЦИЯЛАРДЫ КАПИЛЯРЛЬЩ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ЭД1С1МЕН ЗЕРТТЕУ
PhD докторант 12Бекешева К Б., техн. гылымдарыныц кандидаты 2Каржаубаева Р. А., фарм. гылымдарыныц, докторы, доцент 1Устенова Г. О.,
PhD 12Калыцова Э. С., техника жэне технология магистрi 2Баринов Д. В.,
1С. Д. Асфендияров атындагы Казац улттыц медициналъщ университет, 050000, Алматы,
2Инфекцияга царсы гылыми зерттеу орталыгы 050060, Алматы,
Abstract. This article is devoted to development of methods of iodide anions quantitative determination in substance solutions containing iodine adducts by capillary electrophoresis.
Kipicne
Фармацевтикальщ гылымныц непзп проблемаларыньщ бiрi ^лттыщ кдушиздш ушш жаца дэршк заттар мен препараттарды дамыту болып табылады. Ж^палы ауруларды алдын алуга жэне емдеуге антибиотикалыщ эсерi бар аддукт непзшдеп дэршк заттардыц кещнен таралуда. Алайда, антибиотиктердщ белгш топтарына инфекциялыщ ауруларды ^оздыратын агенттердщ т^ра^тылыгыныц артуынан, жаца микроб^а ^арсы дэршк заттарды дамыту мэселес мацызды болып табылады [1]. Молекулярлыщ иод негiздегi биологиялыщ белсендi координациялыщ ^осылыстарды алу жаца дэрiлiк заттарды алуда бiр багыты болып табылады. Сондыщтан бiздiц осы багыттагы ма^сатымыз иод аддуктысы негiзiндегi жаца субстанцияларды синтездеп алу жэце олады жан-жа^ты кешендi зерттеу болып табылады [2]
Бугшп тацда капилярлыщ электрофорез эдю кYрделi ^оспаларды бeлiп алуга табигаты эр тYрлi ионогендi жэне бейтарап ^оспаларды талдауда ^ар^ынды дамып келе жат^ан эдiстердiц бiрi болып табылады. Сонымен ^атар дэрiлiк заттарды жогары тиiмдiлiкпен алынган нэтижелердi талдауга ^амтамасыз етедi [3, 4].
