Закономерности прижизненной топографической анатомии тимуса плода человека на этапе второго ультразвукового скринингового обследования Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Таким образом, предложенный метод оценки опорной площади стопы позволяет выявить ее соматотипологические характеристики, а также своевременно поставить диагноз при наличии заболевания. Используемая методика компьютерной плантогра-фии обеспечивает объективизацию и документирование правомерности, принимаемого врачом диагностического решения.

Литература

1. Барбараш Н.Л., Кувшинов Д. Ю., Тульчинский М. Я. // Вестник РАМН. 2003, № б. С. 38-41.

2. Гавриков, К.В. и др. // Патент № 22533б3 РФ, МПК7 А б1

В. Бюл. 2005, № 1б.

3. Кашуба В.Л. Биомеханика осанки.- Киев: Олимпийская литература, 2003.

4. Пєрєпєлкш Л.И. Соматотипологические закономерности формирования стопы человека в постнатальном онтогенезе. Ав-тореф. дисс. ... докт. мед. наук. Волгоград, 2009.

5. Пєрєпєлкш Л.И. и др.// Биомеханика стопы человека: материалы 1 Межд. научн.-практ. конф., Гродно.// ГНУ НИЦПР НАНБ; отв. ред А.И. Свиридёнок. Гродно: ГрГУ. 2008. С. б3-б4.

6. Черноруцкий М. В. // Тр. VII съезда Российск. терап. - Л., 1925. С. 304-312.

THE INVESTIGATION OF SUPPORT SURFACE OF THE FOOT IN THE YUOTHFUL AGE

A.I. PEREPYOLKIN, A.I. KRAYUSCHKIN, V.B. MANDRIKOV, YE.S.

SMAGLYUK, R.H. SULEIMANOV

Volgograd State Medical University

A new method of plotting foot scanning was applied. 400 medical university students, both young men and girls, with different soma-totypes were observed with the help of this technology.

Key words: foot, students, area of bearing.

УДК б11. 438.013

ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПРИЖИЗНЕННОЙ ТОПОГРАФИЧЕСКОЙ АНАТОМИИ ТИМУСА ПЛОДА ЧЕЛОВЕКА НА ЭТАПЕ ВТОРОГО УЛЬТРАЗВУКОВОГО СКРИНИНГОВОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ

А.А. САРЕНКО, Э.Н. ГАЛЕЕВА, Л.М. ЖЕЛЕЗНОВ*

В работе установлены закономерности прижизненной топографической анатомии тимуса плодов человека на основе изучения 80 прижизненных ультразвуковых сканнограмм грудной полости плодов человека в возрасте 20-23 недели и распилов грудной клетки 20 плодов этого же возраста по методике Н.И. Пирогова. Установлены не только размерные характеристики органа, но и его скелетото- и синтопия. Полученные сведения являются анатомическим обоснованием оценки ультрасонографии тимуса.

Ключевые слова: тимус, онтогенез, анатомия.

Ряд анатомических параметров тимуса подробно представлен в ряде публикаций [3,4,б,7,8]. Изучению топографоанатомических взаимоотношений тимуса с окружающими структурами и элементами скелета практически не уделялось внимания. Ряд зарубежных исследователей при скрининговой фетомет-рии используют: периметр, поперечный диаметр тимуса на уровне среза через три сосуда сердца. По мнению Воеводина С.М. (1989), Пыкова М.И. и соавт. (2005) этих данных недостаточно при определении увеличения или уменьшения тимуса, так как ни один линейный параметр не может служить надежным критерием этих состояний. Кроме того, существует потребность в получении детальных морфометрических параметров данного органа в разных регионах России, выявлению проявлений индивидуальной анатомической и половой изменчивости на данном этапе онтогенеза. Второе скрининговое обследование беременных в соответствии с Приказом министра здравоохранения №457 от 28. 12. 2000г. проводится в срок 20-24 недели. Это соответствует окончанию раннего плодного периода онтогенеза человека, для которого характерно завершение процесса органогенеза и начало становления топографии внутренних органов [5].

Цель исследования - изучить закономерности прижизненной топографической анатомии тимуса плодов человека на этапе

* ГОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» Росз-драва, Кафедра анатомии человека, 460014, г. Оренбург, ул. Советская, 6, тел. 8 (3532) 77-30-09, e-mail: [email protected]

второго скринингового обследования беременных и их региональные особенности, оценить анатомическую изменчивость тимуса на данном этапе онтогенеза человека.

Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на 100 плодах возрастом 20-23 недели (по 50 мужского и женского пола) и включает в себя два раздела - секционный и клинический. На первом этапе с целью описания детальной топографии тимуса было изучено 20 плодов (по 10 мужского и женского пола) методом распилов по Н.И. Пирогову в нашей модификации. После фиксации плодов в 10% растворе формалина по возрастающей концентрации, с предварительной наливкой через пупочную вену, обнажались и маркировались остистые отростки грудных позвонков и выполнялись горизонтальные срезы с использованием макротома М-1. Для избегания смещения органов на получаемом срезе, на 2-3 мм ниже поверхности среза он армировался несколькими инъекционными иглами, проведенными параллельно его плоскости. Сагиттальные срезы выполнялись по срединной сагиттальной плоскости, фронтальные - через средние и передние подмышечные линии. Полученные срезы фотографировались и подвергались морфометрии.

Часть полученных блоков после промывки проводилась через батарею спиртов возрастающей концентрации, пропитывались раствором целлоидина, после чего из них готовили тотальные гистотопографические срезы, окрашенные по Ван-Гизону. На гистотопограммах с помощью бинокулярного микроскопа МБС-10 определялись детали макромикроскопической топографии и анатомии тимуса.

Для стандартизации морфометрии применялась многомерная система из горизонтальных, вертикальных, радиарных и круговых координат с точкой отсчета в центре позвонка исследованного уровня (патент РФ №21714б5 от 27.07.01, авторы И.И. Каган, Л.М. Железнов, И.Н. Фатеев).

Клинический раздел исследования выполнен на прижизненном изучении тимуса у 80 плодов в возрасте 20-23 недели. Они были разбиты на 4 группы (20,21,22, 23 недели по 10 плодов мужского и женского пола в каждой группе). С использованием ультразвукового сканера Accuvix XQ (Medison) и конвексного датчика C 2-бГС/50/72 определялись три линейных параметра тимуса: ширина, высота и толщина. При продольном сканировании грудной клетки в сечении на уровне восходящей части дуги аорты определялась высота и толщина органа. Объем тимуса определялся по формуле С.М. Воеводина (1989), а масса по формуле Л.Г. Кузьменко и соавторов (1994). Так же определялись периметр (как сумма сторон) и площадь среза тимуса. Для описания топографии определялись: кратчайшие расстояния от передней и задней поверхности тимуса до центра позвонка, от тимуса до легочной артерии, восходящей аорты и верхней полой вены, диаметры верхней полой вены, легочной артерии, их удаление от центра позвонка. Всего было изучено 20 морфометрических параметров.

Статистическая обработка проводилась с использованием лицензионного пакета прикладных программ Microsoft Exel.

Результаты и их обсуждение. Анализ горизонтальных срезов торсов плодов по Н.И. Пирогову наглядно продемонстрировал, что тимус постоянно определялся на срезах уровней с первого по четвертый (верхний край тела пятого) грудной позвонки. При этом на уровне Th1 к заднебоковым краям верхних полюсов долей вилочковой железы справа и слева прилежат внутренние яремные вены. Аналогичная картина сохраняется и на уровне второго грудного позвонка (рис. 1).

На уровне Th3 верхняя полая вена разделяется на правую и левую плечеголовные вены. Правая плечеголовная вена короткая, левая же длинная. Правая плечеголовная вена прилежит к правому блуждающему нерву, передней стенке плечеголовного ствола и правой латеральной поверхности вилочковой железы. Вилочковая железа расположена симметрично долями, соприкасаясь с задней поверхностью грудинно-реберного сочленения. Она закрывает все сосудисто-нервные образования, за исключением правой плечеголовной вены. Левая плечеголовная вена соприкасается со всей задней поверхностью вилочковой железы, переднемедиальным краем левого легкого, плечеголовным стволом, левой половиной передней стенки трахеи, левой подключичной артерией.

На уровне Th4 в срезе появляются главные бронхи. Размеры тимуса соотносятся с размерами среза сердца на данном уровне позади тимуса располагаются верхняя полая вена, восходящая

аорта, легочный ствол. Передняя поверхность тимуса прилежит к грудине (рис. 2).

Б

Рис. 1. Синтопия тимуса на уровне ТЬ1 -А и на уровне ТЬэ - Б. Фото с препаратов горизонтальных распилов по Н.И. Пирогову.

Возраст плода 22 недели, вид сверху, увеличено в 3 раза. В центре снимка (А) просвет трахеи, кпереди - две доли тимуса. На снимке Б тимус занимает переднее положение, сразу позади него плечеголовные вены.

На срединных сагиттальных распилах нами было отмечено, что тимус не только плотно прилежал к передней стенки трахеи, но и вызывал её деформацию (рис.3).

Результаты секционных исследований наблюдений позволяют сделать заключение, что тимус является органом грудной клетки, претерпевающим наиболее бурное развитие. Его размерные характеристики близки к таковым сердца. На всех уровнях своего расположения он интимно прилежит к крупным сосудам средостения - верхние участки долей - к внутренним яремным венам плечеголовному стволу, левым общим сонным и подключичной артериям (горизонтальный уровень первого-второго грудных позвонков), средняя часть органа- к плечеголовным венам (уровень третьего грудного позвонка), нижняя часть органа (четвертый грудной позвонок - верхняя часть тела пятого грудного позвонка) - к верхней полой вене, восходящей аорте и легочному стволу. Среди важных анатомических характеристик этого органа следует отметить, что в срок 20-24 недели у него хорошо дифференцируются доли и дольки.

Общепринятая методика ультразвуковых исследований обычно использует трактовку сонографических изображений на уровне «трёх сосудов», что соответствует уровню четвертого (20-23недели гестации по нашим наблюдениям) или верхнему краю тела пятого грудного позвонка (24 недели гестации) (рис. 4). Основные морфометрические параметры тимуса для плодов мужского и женского пола представлены в табл. 1.

Б

Рис. 2. Синтопия тимуса на уровне ТЬ4. Фото с препаратов горизонтальных пироговских распилов. А - протокол № 2, возраст плода 22 недели, вид снизу, увеличено в 3 раза. Б - схема 1 - пищевод, 2 - левый главный бронх, 3 - правый главный бронх, 4 - легочная артерия, 5 - восходящая аорта, 6 -верхняя полая вена, 7 - тимус, 8 - легкие, 9 - тело позвонка, 10 -легочный ствол, 11- правый блуждающий нерв, 12 - левый блуждающий нерв.

Ультразвуковое исследование тимуса прежде всего подтвердило гетерохронный характер роста этого органа на этапе раннего плодного периода онтогенеза. Объем тимуса практически не увеличивался в срок 21-22 недели, а в 23 недели интенсивность прироста этого показателя составила более 15%. Также не изменялись в указанные сроки высота, толщина и ширина тимуса и его масса. Такой характер роста был отмечен нами и для дугих органов грудной полости - трахеи и главных бронхов, сердца, пищевода. Не было также и отмечено половых индивидуальных отличий изученных параметров у плодов мужского и женского пола. В целом, с 20 по 23 неделю высота тимуса увеличивалась на 21,4%, толщина - на 20%, ширина - на 18,7%. Масса тимуса возрастала на 47,5%. Доли тимуса при ультразвуковом сканировании четко дифференцировались только в 12% наблюдений, а дольки не прослеживались вовсе.

Для уточнения процессов становления топографии тимуса нами был исследован ряд количественных параметров, характеризующих синтопию этого органа. Первоначально были исследованы изменения диаметров верхней полой вены, восходящей аорты, легочного ствола с интервалом в 1 неделю в срок 20-23 недели гестации, а также кратчайшие расстояния от центра этих сосудов до центра позвонка изученного уровня (табл. 2).

Рис. 3. Деформация передней стенки начальной части передней стенки трахеи тимусом. Срединный сагиттальный распил, вид слева. Увеличено в 1,7 раза. Протокол №60, возраст 19 - 20 недель. А - фото с препарата.

Б - схема: 1 - трахея; 2 - вилочковая железа; 3- легкое; 4 - сердце; 5 -грудина; 6, 7 - доли печени; 8 - позвонки; 9 - диафрагма.

«393 /13.0cmMI0.91 2Є-10 2010

СЗ-7ІМ ( Сеп ТІЬО.5 10:17:15 [20] С50 / 85(Ш РА1 0 / Р90 НАЯ/РЭЮ

* Р6 : о

+ Э 0.42ст

хЭ 0.37ст ПО 0.22ст

Рис. 4. Эхограмма горизонтального среза через три сосуда.

1 - легочная артерия; 2 - восходящая аорта; 3 - верхняя полая вена;

4 - тимус (между стрелками); 5 - позвоночник; 6 - легкие.

Возраст плода 21 неделя, мальчик.

Из приведенных данных видно, что в изученные сроки относительно равномерно и однонаправлено изменяются расстоя-

ния от тимуса до окружающих костных структур - позвонка, поверхностей грудной клетки. Динамика изменений расстояний от тимуса до сосудов - верхней полой вены, восходящей аорты, легочной артерии была менее выражена, хотя и тоже возрастала и является практически одинаковой для всех трёх сосудов.

Таблица 1

Основные прижизненные морфометрические параметры (Х±&^ ) тимуса плодов человека на этапе второго скринингового обследования

Параметры Срок гестации

20 недель 21 неделя 22 недели 23 недели

Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10)

Высота тимуса, см 1,39±0,39 1,47±0,16 1,58±0,11 1,58±0,16 1,65±0,14 1,58±0,1 1,74±0,19 1,7±0,16

Толщина тимуса, см 0,5±0,15 0,56±0,07 0,56±0,14 0,6±0,1 0,58±0,08 0,6±0,09 0,61±0,04 0,61±0,11

Ширина тимуса, см 1,39±0,27 1,39±0,14 1,61±0,21 1,6±0,18 1,6±0,17 1,61±0,13 1,65±0,11 1,63±0,09

Периметр тимуса, см 3,73±0,7 3,87±0,69 4,59±0,52 4,21±0,27 4,6±0,62 4,25±0,48 4,65±0,57 4,26±0,53

Площадь среза тимуса, см2 0,84±0,4 0,81±0,22 1,16±0,29 1,07±0,29 1,16±0,24 1,07±0,19 1,04±0,18 1,02±0,11

Объем тимуса см3 0,56±0,48 0,58±0,13 0,69±0,12 0,77±0,18 0,76±0,15 0,77±0,13 0,89±0,13 0,85±0,32

Масса тимуса, г 0,78±0,67 0,81±0,18 0,97±0,17 1,07±0,25 1,07±0,21 1,07±0,19 1,17±0,18 1,19±0,45

Таблица 2

Некоторые прижизненные количественные синтопические параметры (Х±8х ) тимуса плодов человека на этапе второго скринингового обследования

Параметры Срок гестации

20 недель 21 неделя 22 недели 23 недели

Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10) Муж. (п=10) Жен. (п=10)

Кратчайшее расстояние от передней поверхности тимуса до центра позвонка 2,81±0,43 2,88±0,46 3,3±0,54 3,34±0,41 3,39±0,46 3,57±0,23 3,8±0,41 3,7±0,42

Кратчайшее расстояние от задней поверхности тимуса до центра позвонка 2,16±0,3 2,35±0,56 2,62±0,55 2,58±0,33 2,6±0,45 2,78±0,31 3,0±0,38 2,79±0,41

Кратчайшее расстояние от тимуса до легочной артерии 0,18±0,03 0,19±0,03 0,18±0,03 0,18±0,03 0,21±0,05 0,2±0,03 0,2±0,02 0,21±0,02

Кратчайшее расстояние от тимуса до восходящей аорты 0,17±0,04 0,17±0,04 0,16±0,03 0,16±0,02 0,23±0,15 0,19±0,03 0,21±0,06 0,2±0,02

Кратчайшее расстояние от тимуса до верхней полой вены 0,17±0,04 1,17±0,03 0,19±0,04 0,17±0,03 0,21±0,06 0,21±0,05 0,23±0,1 0,22±0,09

Расстояние от передней поверхности грудной клетки до тимуса 0,25±0,05 0,28±0,08 0,29±0,08 0,3±0,07 0,31±0,09 0,32±0,09 0,34±0,07 0,31±0,06

Расстояние от тимуса до задней поверхности грудной клетки 2,82±0,27 3,09±0,36 3,26±0,71 3,29±0,54 3,36±0,44 3,35±0,34 3,6±0,3 3,47±0,27

Заключение. В срок 20-21 неделя тимус плода человека практически не растет, что наглядно выявлено при ультразвуковом исследовании. Установленные на секционном материале сложные топографоанатомические взаимоотношения тимуса с крупными сосудами грудной полости хорошо просматриваются при ультразвуковом исследовании плода и могут быть количественно описаны. В срок 20-23 недели их прирост характеризуется незначительными темпами и однонаправленностью. На данном

этапе развития плода не удалось выявить половые различия в количественных параметрах тимуса человека. Полученные данные могут сравниваться с результатами, полученными в других регионах России.

Литература

1. Воеводин С.М. Возможности эхографического исследования тимуса у новорожденного // Вопр. Охр. Мат. Дет.-1989.- № 4.- С. 38.

2. Пыков М.И., Ефимов М.С., Будаева Е.К., Дементьев А.А., Любаева Е.В. Эхографическая характеристика вилочковой железы у здоровых новорожденных в раннем неонатальном периоде // Ультразвук. функцион. диагн.- 2005.- № 5.- С.- 78-83.

3.Медведев М.В. Пренатальная эхография.

Дифференциальный диагноз и прогноз // 2-е изд. перер. М.: Реал Тайм.- 2009.- С.- 132-135.

4.Гребеняк О.А. Антенатальные аспекты развития иммунной системы плода при физиологической и осложненной беременности. Автореф. Дисс. ... канд. мед. наук.- Волгоград.-2008.

5. Железнов Л.М. Галеева Э.Н., Лященко Д.Н., Михайлов

С.Н., Яхина И.М. Топографическая анатомия органов грудной полости человека в раннем плодном периоде //Морфология.-2008.-T.134,N 5.-С.39-42.

6.Пуйда С.А., Ворнин Д.В., Чубкин И.В., Некрасова Е.С. Пренатальная диагностика редкх врожденных пороков и синдромов. XLII. Киста тимуса // Прена. Диагн.- 2010.- Т. 9.- № 1.- С.- 35-40.

7. Zalel Y.; Gamzu R.; Mashiach S.; Achiron R., The development of the fetal thymus: An in utero sonographic evaluation// Prenat. Diagn.- 2002.- V. 22.- № 9.- P.- 114-117.

8.Cho J. Y., Min J. Y., Lee Y.H. et al. Diameter of the normal fetal thymus on ultrasound. // Ultrasound Obstet. Gynecol.- 2007.- V. 29.- P. 634- 638.

9.Gamez F., Santolaya—Forgas J., De Leon J.A. et al., Normative data of the transverse diameter of the developing fetal thymus// Ultrasound Obstet. Gynecol.- 2008.- V. 32.- P. 293.

THE REGULARITIES OF THE INTRAVITAL TOPOGRAPHIC ANATOMY OF THE THYMUS HUMAN”S FETUSES ON THE STAGE OF SECOND ULTRASONIC SCREENING INSPECTIONS.

A.A. SARENKO, A.N. GALEEVA, L.M. ZHELEZNOV Orenburg State Medical Academy, Chair of Anthroponomy

The article presents the established regularities of intravital topographic anatomy of the human foetus thymus on the basis of studying 80 intravital ultrasonic scan of human foetuses' chest cavities at the age of 20-23 weeks and saw cuts of 20 foetuses' chest cavities of the same age by N.I. Pirogov's method. Not only size characteristics of this organ have been established, but its syntopy and skeletopy as well. The received dates are anatomic substantiation of thymus ultrasonography assessment.

Key words: thymus, ontogenesis, anatomy.

УДК 591.463.05: 678.048:616-003.96

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ СЕМЕННИКА КРЫС ПРИ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ, ИНДУЦИРОВАННОМ АДАПТАЦИЕЙ К НИЗКИМ ТЕМПЕРАТУРАМ

И.Ю. САЯПИНА*

В рамках данного исследования проведён количественный анализ генеративной и инкреторной функций семенников при окислительном стрессе, индуцированном адаптацией к низким сезонным температурам. Установлено, что окислительный стресс вызывает уменьшение численности клеток Лейдига. Оставшиеся клетки Лей-дига проявляют признаки функционального напряжения, и обеспечивают синтез тестостерона на уровне интактных животных, вследствие чего выраженные нарушения генеративной функции семенников при адаптации к низким температурам отсутствуют. Через 8 недель после завершения адаптации численность клеток Лейдига восстанавливается, однако длительный окислительный стресс угнетает функциональную активность клеток Лейдига, что приводит к снижению выработки тестостерона. Генеративная функция семенников в условиях дефицита тестостерона нарушается.

* Амурская государственная медицинская академия, 675000, г. Благовещенск ул. Горького, 95. Тел. 4162-525356, e-mail: [email protected]

Ключевые слова: семенники, количественный анализ, функциональная активность, окислительный стресс, адаптация, низкие температуры.

В последние годы активно изучается феномен окислительного стресса (ОС) в биологических системах. Большое количество исследований посвящено изучению влияния ОС на мужскую репродуктивную систему человека и животных. Как показывает анализ печатных работ, при изучении ОС в органах мужской репродуктивной системы преимущество имеют экспериментальные методы исследования, позволяющие моделировать ОС различного генеза, и изучать его повреждающее действие на систему репродукции на различных уровнях организации. Экспериментальные исследования показали, что именно через ОС реализуются токсические эффекты на семенники большинства природных и промышленных токсикантов [4,5,8,15], лекарственных препаратов [10]. Было установлено, что ОС в семенниках способствует развитию глубоких изменений сперматогенеза в виде нарушения созревания и массовой гибели гамет [8,10], доказана связь между ОС и апопто-зом герминативных клеток. Кроме нарушения генеративной функции, ОС угнетает инкреторную активность семенников, приводя к уменьшению количества клеток Лейдига, или интерстициальных гландулоцитов, и снижению концентрации тестостерона в плазме крови [5,10,15]. Многие авторы отмечают, что кроме прямого повреждающего действия на герминативные клетки и эндокринный аппарат яичек, ОС может изменять функциональную активность семенников опосредованно, через нарушения в регуляторной системе гипоталамус - гипофиз - гонады [5,10].

Ряд экспериментальных исследований доказывает, что ОС способен трансформировать действие экстремальных факторов среды в нарушения структуры и функции системы репродукции. Например, ОС в семенниках и придатках крыс, вызванный гипоба-рической гипоксией в условиях высокогорья [11], приводил к нарушениям сперматогенеза, ухудшению количественных и качественных показателей спермограммы; описывается ОС в семенниках при ультрафиолетовом облучении [13]. Хорошо известно, что при адаптации организма человека и животных к низким сезонным температурам ОС является стереотипной реакцией. Тем не менее, вопросы функционирования семенников при ОС, индуцированном низкими температурами, остаются малоизученными: в исследовании [4] содержатся сведения об активации реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ) в семенниках крыс в зимний период, а в работе [3] сообщается о снижении концентрации тестостерона в плазме крови при хроническом холодовом стрессе у крыс. Морфологические работы по изучению функциональной активности семенников в условиях ОС, вызванного адаптацией организма к холоду, с использованием количественных гистологических методов, в доступной литературе отсутствуют.

Цель исследования - провести количественный анализ генеративной и инкреторной активности семенников крыс при ОС, индуцированном адаптацией организма к низким сезонным температурам.

Материалы и методы исследования. Исследование было проведено на 90 нелинейных половозрелых белых крысах-самцах с массой тела 200-250 г., которые были разделены на III группы. I группа (группа контроля) состояла из интактных крыс, содержавшихся в стандартных температурных условиях вивария. У крыс II и II экспериментальных групп моделировали ОС путём общего охлаждения животных в течение 28 дней при температуре -15°С по 3 часа ежедневно. Крысы II группы выводились из эксперимента на следующий день после его окончания, крысы III группы выводились из эксперимента через 56 дней, что соответствует длительности сперматогенеза у крыс. Забой животных проводили под тиопенталовым наркозом путём дислокации шейных позвонков. Все манипуляции проводились в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных».

Для количественного гистологического исследования фрагменты семенников из экваториальной зоны толщиной около 10 мм фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали и заливали в парафин согласно стандартной гистологической схеме, парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином.

Количественный анализ функциональной активности семенников проводили при помощи аппаратно-программного комплекса, состоящего из программного обеспечения для количественного анализа ВидеоТесТ - Морфология 5.0., цифровой камеры