CC BY
33
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
микробного распознавания «свой-чужой» в ми-кросимбиоценозе кишечника человека, основанный на экспериментально установленной оппо-зитности (усиление/подавление) взаимодействия микросимбионтов в паре «доминант-ассоциант». Использование экзометаболитов микроорганизмов и применение в качестве индикаторной культуры би-фидобактерий вида B. longum позволило определить «свои» виды микроорганизмов (лактозоположитель-ные негемолитические E. coli и E. faecium), у которых происходило усиление функций (рост/размножения, антилизоцимной активности и биопленкообразо-вания) под действием бифидобактерий, а у «чужих» микросимбионтов (лактозоотрицательные гемолитические E. coli, K. рпеитошае, S. aureus и C. albicans) изученные свойства подавлялись.
Таким образом, полученные результаты показали, что при ассоциативном симбиозе не только сам хозяин в состоянии организовать собственную защиту от ассоциантов, различая «чужаков» при помощи рекогносцировочных механизмов врожденного иммунитета (ПРР клеток), но и при помощи своей нормофлоры, которая способна реализовать принцип «микробного распознавания» ассоциантов в системе «свой — чужой», являясь «первой линией» колонизационной защиты хозяина. Можно предположить, что выявленный феномен микробного распознавания базируется на участии метаболитов нормофлоры, образуемых ею после соинкубирова-ния с супернатантами ассоциантов, роль которых активно обсуждается в настоящее время (Shank A.E., Kolter R., 2009).
АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ И ПРОФИЛАКТИКИ ПРИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Г.А. Петрушанская, Л.В. Черкасова, Р.А. Бурханов
Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве» в САО города Москвы, Москва
Развившаяся в 1986 г. в Великобритании эпизоотия губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота спровоцировала увеличение числа болезни Крейтцфельдта-Якоба (БКЯ), вызванной заражением молодых людей через инфицированное мясо больных коров. На БКЯ приходится 90% всех прионных заболеваний.Способность инфекционного прионного белка преодолевать видовые барьеры доказана и в лабораторных условиях. По мнению эпидемиологов в ближайшее время следует ожидать дальнейшего подъема заболеваемости. В этой связи становиться весьма актуальной разработка и внедрение в практику методов определения инфекционного прионного белка в мясных продуктах, а также методов лабораторной клинической диагностики. Поскольку заражение животных может произойти в результате скармливания пищевыми добавками, приготовленных на основе мяса больных животных, представляется важным лабораторный контроль кормов и кормовых добавок на предмет содержания в них прионных белков. Сложность создания тест-систем обусловлена схожестью аминокислотного состава нормального и инфекционного прионного белка. Путем сложных иммунохи-мических методов очистки удалось получить строго специфические препараты для достоверной идентификации специфических эпитопов инфекционного прионного белка. На этой основе с помощью
иммуноферментного анализа (ИФА) и полимераз-ной цепной реакции (ПЦР) созданы тест системы, позволяющие определять прионный белок и его ген в следовых количествах.
Итальянские исследователи разработали вариант ПЦР в режиме реального времени, позволяющий определить ген прионных белков в кормах в количестве 10 пг при содержании различных животных добавок (ткани овец, свиней, коз, кур и рыб) в количестве 0,1% от общей массы корма (Bellagamba F. с соавт., 2006 г.). Использование митохондриальной ДНК позволяет повысить этот показатель до 0,01%. Высокая чувствительность и специфичность тест-систем достигается при совместном применении технологии ИФА и ПЦР в одном формате. Так, бельгийские и немецкие исследователи разработали вариант ПЦР-ИФА для количественного определения про-теазорезистентного прионного белка в ткани мозга больных БКЯ. Разработанный вариант оказался в 10 раз чувствительнее ИФА. Специфичность анализа составила 100% (Gofflot Sx соавт. 2005 г.).
ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ САЛЬМОНЕЛЛЕЗОМ НА ТЕРРИТОРИИ г. ШАХТЫ
С.Г. Плясовица, Н.А. Вяткина, И.В. Шумских, А.М. Орехова, Л.А. Аладышева
Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ростовской области» в городе Шахты
За последние 15 лет (период 1997—2011 гг.) эпидемиологические проявления заболеваемости сальмо-неллезом в городе претерпевают существенные изменения и имеют тенденцию к росту.
В динамике заболеваемости сальмонеллезом цикличность выражена нечетко. С 1997 по 2011 гг. прослеживаются периоды подъема и снижения заболеваемости с интервалами 1—3 года. Наименьший уровень заболеваемости — в 2004 г. (8,31 на 100 тыс.). 2005 г. — начало очередного подъема заболеваемости, затем период относительной стабильности в 2006— 2008 гг., (23,38—24,62 на 100 тыс) и период роста заболеваемости в 2009-2011 гг. (43,78-67,95 на 100 тыс.).
Возрастная структура заболеваемости саль-монеллезом имеет тенденцию к «повзрослению». В 1998-2000 гг. наиболее высокие уровни заболеваемости среди детей (58,7-60,3%), период стабильности заболеваемости (2006-2008 гг.) — заболеваемость детей — 32,8-38%, в годы подъема заболеваемости (2009-2011 гг.) доля детей — 23,4-46,7%.
В этиологической структуре заболеваемости доминируют сероварианты сальмонелл серогруп-пы Д — сальмонелла энтеритидис, биохимический вариант Jena и серогруппы В — сальмонелла тифи-муриум, биовариант а и b.
Доля сероварианта группы В (Salmonella typhimurium) только в 1998-2000 гг. превышала уровень других вариантов сальмонелл и составляла в структуре заболеваемости 49,5-57,1%.
Число циркулирующих серовариантов других групп сальмонелл в последние годы отличается многообразием (более 16). Эпидемиологическая значимость этих сероваров невелика, их доля в этиологической структуре заболеваемости 1,48-17% в разные годы.
Полиэтиологичность сальмонеллезов на территории города, циркуляция нескольких серовари-антов сальмонелл, свидетельствует о действии хронического полифакторного децентрализованного
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
пищевого пути передачи, обусловленного поступлением в город пищевых продуктов малыми неконтролируемыми партиями, часто изготовленными мелкооптовыми производителями, в условиях, не исключающих активизацию возможных источников инфекции. Высокий уровень регистрации сальмо-неллезов, вызванных Salmonella enteritidis, серовари-анта Jena не исключает действие на территории единого фактора передачи.
В условиях роста заболеваемости сальмонеллезом, важна своевременная диагностика и расшифровка заболеваний, определение факторов и путей передачи, повышение эффективности и своевременности лечебных и противоэпидемических мероприятий, поэтому совершенствование методов диагностики заболеваемости и микробиологического мониторинга за санитарно-гигиеническим фоном, является важной задачей практической и научной медицины.
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ В ОЦЕНКЕ ЭПИДСИТУАЦИИ ПО САЛЬМОНЕЛЛЕЗУ НА ТЕРРИТОРИИ г. ШАХТЫ
С.Г. Плясовица, Н.А. Вяткина, И.В. Шумских, А.М. Орехова, Л.П. Шишкина
Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ростовской области» в городе Шахты
Город Шахты входит в число городов Ростовской области с высокими уровнями заболеваемости острыми кишечными инфекциями (ОКИ), в том числе и сальмонеллезом.
Нами изучены биологические свойства сальмонелл, циркулирующих на территории города в рамках микробиологического мониторинга.
По данным микробиологического мониторинга и оценке биологических свойств сальмонелл, циркулирующих на территории города, за период 1997—2011 гг. определяется более 16 серовариантов сальмонелл. Доминируют сероварианты сальмонелл серогруппы Д — сальмонелла энтеритидис (Salmonella enteritidis), биохимический вариант Jena и серовариант серогруппы В — сальмонелла тифи-муриум (Salmonella typhimurium), биовариант а и b.
При этом доля сероварианта группы В (Salmonella typhimurium) только в 1998—2000 гг. превышала уровень других вариантов сальмонелл и составляла в структуре заболеваемости 49,5—57,1%, этот период характеризуется высоким уровнем заболеваемости сальмонеллезом среди детей с максимумом в возрастной группе до 2х лет. Заболеваемость, вызванная сальмонеллами энтеритидис (Salmonella enteritidis) в период (1998-2000 гг.) была ниже, 38-47,4%.
В остальные периоды, с 2001 г., доминирует се-ровариант серогруппы Д — сальмонелла энтерити-дис (Salmonella enteritidis), 55-92,2%. При этом ежегодно в 70-81,7% случаев сальмонелла энтеритидис (Salmonella enteritidis) определяется как биологический вариант Jena. Число циркулирующих серо-вариантов других групп сальмонелл в последние годы отличается многообразием. Регистрируются сальмонеллы группы В (Salmonella derbi и essen), группы С2 (Salmonella munchen и newport) и сальмонелла группы С1 (Salmonella virchov и montevideo). Эпидемиологическая значимость этих сероваров невелика, их доля в этиологической структуре заболеваемости колеблется в пределах 1,48-27% в разные годы.
Полиэтиологичность сальмонеллезов на территории города циркуляция нескольких серовариантов сальмонелл, свидетельствует о действии полифакторных путей передачи. Высокий уровень регистрации сальмонеллезов, вызванных Salmonella enteritidis, преобладание в этой группе сероварианта Jena не исключает действие на территории единого фактора передачи.
Микробиологический мониторинг является одним из важных параметров оценки эпидситуации по ОКИ. Микробиологическое слежение за заболеваемостью ОКИ позволяет определить территориальные особенности эпидемического процесса, установить возрастные, сезонные различия в проявлениях заболеваемости, обусловленные этиологической структурой, оценить общие закономерности
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДЕТЕКЦИЯ ГЕНОВ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ В ШТАММАХ VIBRIO CHOLERAE, ВЫДЕЛЕННЫХ НА ТЕРРИТОРИИ ВОЛГОГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ
М.В. Подшивалова, Я.А. Лопастейская, М.Н. Свиридова, Ю.А. Кузютина, И.Б. Захарова
ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора
Эпидемиологические исследования в ряде эндемичных по холере регионов показывают, что в последнее десятилетие заметно выросло число изо-лятов V. cholerae с множественной лекарственной резистентностью. В настоящей работе основное внимание было уделено изучению состава детерминант антибиотикорезистентности интегронов класса 1 (In1) и трансмиссивных генетических элементов (SXT элемент) в штаммах V. cholerae, выделенных на территории Волгоградской области.
Для ПЦР-анализа интегронов сконструирован набор олигонуклеотидных праймеров, специфичных консервативным фрагментам генов интеграз intI, области кассетных вставок, а также участкам генов qacEdl и sull. Для типирования конъюгатив-ного SXT элемента в качестве мишеней выбраны ген интегразы intSXT, ген устойчивости к сульфаметок-сазолу sullI, ген устойчивости к стрептомицину strB и детерминанты устойчивости к триметоприму — гены дигидрофолатредуктаз dfr18 и dfrAl, характерные для SXTMOlO и SXTET, соответственно.
ПЦР-анализ штаммов V. cholerae Ol, O139 и не О1/ О139 серогрупп, показал присутствие последовательностей Inl с вставками генных кассет от 400 до 2200 п.н. в геномах штаммов, выделенных на территории региона в 1990-х гг. и позднее. Наиболее распространенным типом кассетной вставки является aadAl; обнаружены также интегроны структуры intl-blaPl-qacEdl-sull, intl-dfrAl-orf-qacEdl-sull и intI-aac (6')-oxa2.
SXT элемент был обнаружен в 2 штаммах Ol eltor, l штамме Ol39 серогруппы и 2 штаммах не Ol/Ol39. Типирование штаммов в мультилокусной ПЦР продемонстрировало, что штамм V. cholerae Ol39 B-l9l содержит типичный SXTM0l0. В штамме V. cholerae Ol El Tor B-l96 был детектирован элемент SXTET — типа. SXT элемент штамма V. cholerae Ol El Tor B-l6l был полностью лишен кластера генов устойчивости к антибиотикам. В 2 штаммах V. cholerae не Ol/Ol39 (l8/84l и 34-I) был выявлен SXT элемент, сходный по структуре с SXTM0l0 (intSXT+ dfrl8+), имеющий
