CC BY
53
CM
ВЗАИМОСВЯЗЬ МЕЖДУ УРОВНЯМИ ЛИМФОИДНОЙ ИНФИЛЬТРАЦИИ ОПУХОЛИ И ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ТЕРАПИИ
А.А. Субботина, Н.Н. Тупицин, В.П. Летягин, И.В. Высоцкая
НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н. Блохина, ММА им. И.М. Сеченова
RELATIONSHIP BETWEEN THE LYMPHOID INFILTRATION OF A TUMOR AND THE EFFICIENCY OF NEOADJUVANT THERAPY
о e; о
X
X
A.A. Subbotina, N.N. Tupitsin, V.P. Letyagin, I.V. Vysotskaya
N.N. Blokhin Research Institute of Clinical Oncology, N.N.Blokhin Russian Cancer Research Center, Russian Academy of Medical Sciences; I.M. Sechenov Moscow Medical Academy
A relationship was found between the intratumoral immune reactions and the efficiency of multidrug therapy for breast cancer. Two indices, such as the rate of T-cell infiltration (the count of T cells in the slices) and the level of lymphocytic activation (interleukin-2 receptor expression), are of the greatest importance in producing a marked antitumor effect. These indices are independent. The rate of a T-cell reaction is of importance in treating breast cancer by the CAF scheme (to a lesser extent in the use of the CMFVP scheme). With lymphocytic activation (CD25 expression), therapy is effective irrespective of the scheme applied.
.a m
О
В числе иммунологических показателей местного противоопухолевого иммунитета нами оценены: общие уровни лимфоидной инфильтрации (СD45), выраженность Т-клеточ-ной инфильтрации (СD7), количество интрату-моральных В-клеток (СD20), а также активация интратуморальных лимфоцитов на основании мембранной экспрессии молекулы СD25 (рецептор интерлейкина 2).
Анализ проводился как в целом по группе больных раком молочной железы (РМЖ), так и в зависимости от примененной схемы неоадъю-вантной химиотерапии (CAF, CMFVP).
Взаимосвязь эффективности неоадъювантной химиотерапии РМЖ (вне зависимости от примененной схемы) с уровнями лимфоидной инфильтрации опухоли
Исследование проведено у 31 больной. Выраженность общей лимфоидной и мак-рофагальной инфильтрации оценивали на основании количества СD45+ лимфоцитов в опухолевых срезах. Все изученные случаи подразделили на 2 группы: незначительная или умеренная лимфоидная инфильтрация (18 больных) и выраженная лимфоидная инфильтрация (13 больных). Следует отметить, что частота вы-
Таблица 1. Взаимосвязь между уровнями
инфильтрации опухоли Т- клетка и эффектом неоадъювантной химиотерапии (число больных)
Т-клеточная Эффект терапии
инфильтрация отсутствует менее 25% более 25%
Незначительная 7(43,8) 8 (50) 1 (6,2)
Выраженная 2(13,3) 6 (40) 7 (46,7)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 7,5; р = 0,023.
раженных эффектов (регрессия опухоли более чем на 25%) была сходной в обеих группах сравнения. Так, при наличии значительной инфильтрации частота выраженных эффектов была несколько выше и составила 30,8% (4 из 13 больных), а при незначительной — 22,2% (4 из 18). Однако эти признаки не были взаимосвязаны (х2=0,49; р=0,78).
Совершенно иные данные были получены при анализе инфильтрации опухоли Т-клетка-ми, которую оценивали на основании мембранной экспрессии обще-Т-клеточного антигена СD7 с помощью моноклональных антител. Как и при анализе по количеству СD45, мы подразделили пациенток на 2 группы: с незначительной и с выраженной инфильтрацией опухоли Т-клетками (табл. 1).
При наличии масивной инфильтрации опухоли Т-клетками существенная регрессия опухоли под действием неоадъювантной химиотерапии наступала почти в половине случаев (46,7%), в то время как при незначительной реакции Т-клеток — лишь в 6,2% (у 1 из 16 больных). Полученные данные свидетельствуют о том, что предсуществующие в опухоли Т-клетки создают благоприятный фон (своего рода потенцирование) для противоопухолевого действия химиотера-и пии. Это очень важный пара-
метр, впервые отмеченный нами в данной работе. В дальнейшем мы остановимся на том, какая именно схема химиотерапии (САД СМБУР) работает в синергизме с Т-клеточной инфильтрацией.
Массивной В-клеточной инфильтрации ткани опухоли
(CD20+) в анализируемой группе больных не было. Пациенты подразделялись на 2 категории: с практически полным отсутствием или единичными В-клетками в срезах (16 больных) и с умеренной В-клеточной инфильтрацией опухоли (15 больных). Чувствительность опухолей к химиотерапии была примерно одинаковой у больных обеих групп. Так, при отсутствии реакции В-клеток частота хороших эффектов (более 25% регрессии опухоли) составила 31,3% (5 из 16 больных), а в группе с наличием В-клеточной реакции — 20% (3 из 15 больных). Признаки не взаимосвязаны между собой — Х2=0,58; р=0,75.
Чрезвычайно интересным было сопоставить взаимосвязь уровней активации интрату-моральных лимфоцитов с противоопухолевым эффектом неоадъювантной терапии. У большинства пациенток показатели активации (экспрессия CD25 на лимфоцитах) были минимальными или соответствующие клетки практически отсутствовали в опухолевых срезах (20 больных), в 11 случаях в опухолевых срезах присутствовала отчетливая пропорция CD25 + лимфоцитов. При наличии активированных интратуморальных лимфоцитов отчетливый противоопухолевый эффект наблюдался у 54,5% (6 из 11) пациенток, в то время как при отсутствии CD25+ клеток эффективность химиотерапии была в 5 раз ниже — 10,0% (2 из 20 больных; табл. 2).
Таким образом, при наличии в ткани РМЖ отчетливой пропорции активированных лимфоцитов (CD25 + ) эффективность неоадъ-ювантной химиотерапии существенно повышается, т.е. активация показателей интрату-морального иммунитета потенцирует эффект лекарственного воздействия. Эта закономерность во многом напоминает отмеченную нами в отношении интратумораль-ных Т-лимфоцитов, однако связь является еще более достоверной.
Мы провели анализ взаимосвязи уровней активации лимфоцитов (CD25+ клетки) с выраженностью Т-клеточной интратуморальной реакции и не установили достоверной взаимосвязи между этими признаками (табл. 3).
При наличии активированных лимфоцитов в ткани опухоли выраженная Т-кле-точная реакция наблюдалась несколько чаще (63,6%), чем при их отсутствии (40%), однако признаки не взаимосвя-
Таблица 2.
заны. Это говорит о том, что каждый из анализируемых показателей — выраженность интратуморальной Т-клеточной инфильтрации и активация интратуморальных лимфоцитов — имеет самостоятельное значение в потенцировании противоопухолевого эффекта химиотерапии.
Чтобы установить, какая из примененных схем неоадъювантной химиотерапии является наиболее эффективной с учетом иммунологических показателей интратуморальных иммунных реакций, мы проанализировали раздельно клинико-иммунологические ассоциации у больных, получавших CAF, и у больных, получавших лечение по схеме CMFVP.
Взаимосвязь эффективности неоадъювантной химиотерапии (схема CAF) РМЖ с уровнями лим-фоидной инфильтрации опухоли Исследование проведено у 16 больных. Выраженность общей лимфоидной и мак-рофагальной инфильтрации оценивали на основании количества CD45+ лимфоцитов в опухолевых срезах. Все изученные случаи подразделены на 2 группы: незначительная или умеренная лимфоидная инфильтрация (9 больных) и выраженная лимфоидная инфильтрация (7 больных). Частота выраженных эффектов (регрессия опухоли более чем на 25%) была сходной в обеих группах. Так, при наличии значительной инфильтрации частота выраженных эффектов была несколько выше и составила 42,9% (3 из 7 больных), а при незначительной — 33,3% (3 из 9 больных). Однако эти признаки не были взаимосвязаны (х2 =1,8; р=0,41). Иные данные были получены при анализе инфильтрации опухоли Т-клетками,
Взаимосвязь между наличием активированных (CD25+) лимфоцитов в ткани опухоли и эффектом неоадъювантной химиотерапии (число больных)
сч
CD25+ клетки отсутствует Эффект терапии менее 25% более 25%
Отсутствуют 5 (25) 13 (65) 2 (10)
Присутствуют 4(36,4) 1 (9,1) 6 (54,5)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 10,7; р = 0,005.
Таблица 3.
Взаимосвязь между наличием активированных (CD25+) лимфоцитов в ткани опухоли и выраженностью интратуморальной Т-клеточной реакции (число больных)
CD25+ клетки слабая Т-клеточная реакция выраженная
Отсутствует 12 (60) 8 (40)
Присутствует 4(36,4) 7(63,6)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 1,6; р = 0,21.
о с; о
X
X
-О
са О
еч
Таблица 4. Взаимосвязь между уровнями
инфильтрации опухоли Т-клетками и эффектом неоадъювантной химиотерапии по схеме CAF (число больных)
о с; о
X
X
-О
са О
Т-клеточная инфильтрация отсутствует Эффект терапии менее 25% более 25%
о Незначительная 2(28,6) 4(57,1) 1 (14,3)
Выраженная 0 (0,0) 4(44,4) 5(55,6)
г Примечание. В скобках — процент. х2 = 4,5; р = 0,066.
Таблица 5. Взаимосвязь между наличием активированных (CD25+) лимфоцитов в ткани опухоли и эффектом неоадъювантной химиотерапии по схеме CAF (число больных)
CD25+ клетки отсутствует Эффект терапии менее 25% более 25%
Отсутствуют 2(18,2) 7 (63,6) 2(18,2)
Присутствуют 0 (0,0) 1 (20,0) 4 (80,0)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 5,7; р = 0,045.
которые оценивали на основании мембранной экспрессии обще-Т-клеточного антигена CD7 с помощью моноклональных антител. Для анализа были выделены 2 группы пациенток: с незначительной и с выраженной инфильтрацией опухоли Т-клетками (табл. 4).
При наличии массивной инфильтрации опухоли Т-клетками существенная регрессия опухоли под действием неоадъювантной химиотерапии наступала в более чем половине случаев (55,6%), в то время как при незначительной реакции Т-клеток — лишь 14,3% (1 из 9 больных). Эти данные почти точно повторяют результаты, полученные по группе в целом. Вместе с тем признаки не являются достоверно взаимосвязанными. Вероятно, это обусловлено малочисленностью больных в группе.
Массивной В-клеточной инфильтрации ткани опухоли (CD20+) в анализируемой группе больных не было. Пациенты подразделились на 2 категории: с практически полным отсутствием или единичными В-клетками в срезах (8 больных) и с умеренной В-клеточной инфильтрацией опухоли (8 больных). Чувствительность опухолей к химиотерапии была одинаковой в обеих группах — 37,5% (по 3 больных в каждой группе). Признаки не взаимосвязы между собой (х2 = 0,25; р = 0,29).
Как и по группе в целом, проведено сопоставление взаимосвязи уровней активации ин-тратуморальных лимфоцитов с противоопухолевым эффектом неоадъювантной химиотерапии по схеме САЕ У 11 пациенток показатели активации (экспрессия CD25 на лимфоцитах) были минимальными или соответствующие клетки в опухолевых срезах практически от-
сутствовали, у 5 больных в опухолевых срезах присутствовала отчетливая пропорция CD25+ лимфоцитов. При наличии активированных инт-ратуморальных лимфоцитов отчетливый противоопухолевый эффект наблюдался у 80,0% (4 из 5) пациенток, в то время как при отсутствии CD25+ клеток эффективность химиотерапии была в 4 раза ниже — 18,2% (2 из 11 больных; табл. 5).
Итак, уровни CD25 + клеток и эффект противоопухолевой химиотерапии по схеме CAF оказались достоверно взаимосвязаны. Иными словами, при наличии в ткани РМЖ отчетливой пропорции активированных лимфоцитов (CD25 + ) эффективность неоадъювантной химиотерапии по схеме CAF существенно повышается, т.е. активация показателей интра-туморального иммунитета потенцирует эффект лекарственного воздействия. Эти данные свидетельствуют о том, что результаты, полученные по всей группе больных, реализуются и при проведении неоадъювантной химиотерапии по схеме САЕ
Взаимосвязь эффективности неоадъювантной химиотерапии (схема CMFVP) РМЖ с уровнями лимфоидной инфильтрации опухоли Исследование проведено у 15 больных. Выраженность общей лимфоидной и мак-рофагальной инфильтрации оценивали на основании количества CD45+ лимфоцитов в опухолевых срезах. Все изученные случаи подразделили на 2 группы: незначительная или умеренная лимфоидная инфильтрация (9 больных) и выраженная лимфоидная инфильтрация (6 больных). Частота выраженных эффектов (регрессия опухоли более чем на 25%) была сходной в обеих группах. Так, при наличии значительной инфильтрации частота выраженных эффектов составила 16,7% (1 из 6 больных), а при незначительной — 11,1% (1 из 9 больных). Эти признаки не были взаимосвязаны (х2 = 0,22; р = 0,9).
Несколько иные данные были получены при анализе инфильтрации опухоли Т-клетка-ми, которую оценивали на основании мембранной экспрессии обще-Т-клеточного антигена CD7 с помощью моноклональных антител. Как и в предыдущем анализе, мы разделили пациенток на 2 группы: с незначительной и с выраженной инфильтрацией опухоли Т-клетками (табл. 6).
Незначительная
Выраженная
Таблица 7.
При наличии массивной Таблица 6. инфильтрации опухоли Т-клет-ками существенная регрессия опухоли под действием не-оадъювантной химиотерапии наступала в трети случаев (33,3%), в то время как при незначительной реакции Т-клеток подобных эффектов не наблюдалось ни в одном случае. Эти данные соответствуют результатам, полученным по группе в целом и по группе больных, леченных по схеме САК Вместе с тем признаки не являются достоверно взаимосвязанными. Вероятно, это обусловлено малочисленностью больных в группе и более низкой эффективностью схемы CMFVP в сравнении со схемой САК Массивной В-клеточной инфильтрации ткани опухоли (CD20 + ) в анализируемой группе больных не было. Пациенты подразделялись на 2 категории: с практически полным отсутствием или единичными В-клетками в срезах (8 больных) и с умеренной В-клеточной инфильтрацией опухоли (7 больных). Чувствительность опухолей к химиотерапии по схеме CMFVP была выше у больных с отсутствием В-клеточной реакции. Так, при отсутствии реакции В-клеток частота хороших эффектов (более 25% регрессии опухоли) составила 25,0% (2 из 8 больных), а в группе с наличием В-клеточной реакции — 0%. Признаки не взаимосвязаны между собой (х2 = 3,9; р = 0,14).
Как и по группе больных, лечение по схеме САК мы проанализировали взаимосвязь уровней активации интратуморальных лимфоцитов с противоопухолевым эффектом неоадъювант-ной химиотерапии по схеме CMFVP. У 9 пациенток показатели активации (экспрессия CD25 на лимфоцитах) были минимальными или соответствующие клетки в опухолевых срезах прак-
Взаимосвязь между уровнями инфильтрации опухоли Т-клетками и эффектом неоадъювантной химиотерапии по схеме CMFVP (число больных)
Т-клеточная Эффект терапии
инфильтрация отсутствует менее 25% более 25%
5(55,6)
4 (44,4)
0 (0,0)
2 (33,3)
2 (33,3)
2 (33,3)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 3,5;р = 0,12.
■
Взаимосвязь между наличием активированных (CD25+) лимфоцитов в ткани опули и эффектом неоадъювантной химиотерапии по схеме CMFVР (число больных)
CD25+ клетки отсутствует Эффект терапии менее 25% более 25%
Отсутствуют 3(33,3) 6(66,7) 0 (0,0)
Присутствуют 4(66,7) 0 (0,0) 2 (33,3)
Примечание. В скобках — процент. х2 = 7,9; р = 0,02.
тически отсутствовали, у 6 в опухолевых срезах присутствовала умеренная пропорция CD25 + лимфоцитов. При наличии активированных интратуморальных лимфоцитов отчетливый противоопухолевый эффект наблюдался у 33,3% (2 из 6) пациенток, в то время как при отсутствии CD25+ клеток эффективность химиотерапии была низкой и выраженных противоопухолевых эффектов не наблюдали (табл. 7).
Уровни CD25+ клеток и эффект противоопухолевой химиотерапии по схеме CAF были достоверно взаимосвязаны. Иными словами, при наличии в ткани РМЖ отчетливой пропорции активированных лимфоцитов (CD25+) эффективность неоадъювантной химиотерапии по схеме CMFVP существенно повышается, т.е. активация показателей интратуморального иммунитета потенцирует эффект лекарственного воздействия. Эти данные свидетельствуют о том, что результаты, полученные по всей группе больных, реализуются и при проведении не-оадъювантной химиотерапии по схеме CMFVP.
ej
о с; о
X
X
-О
m
О
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
1. Артамонова Е.В. Роль иммунофенотипирования опухолевых клеток в диагностике и прогнозе рака молочной железы. Автореф. дис. ... докт. мед. наук. М., 2003.
2. Барышников А.Ю., Тоневицкий А.Г. Моноклональные антитела в лаборатории и клинике. М., 1997. с. 99—105.
3. Володько Н. А. Местные клеточные иммунные реакции при раке молочной железы (клинико-
иммуноморфологическое исследование). Автореф. дис. ... канд. мед. наук. Киев, 1988.
4. Тупицын Н.Н. Экспрессия лейкоцитарных и родственных им антигенов на клетках рака молочной железы человека. Экспер онкол 1990;12(2):54—8.
5. Cavanaugh P.G., Jia L., Zon Y., Nicolson G.L. Transferrin receptor overexpression enchances transferrin responsiveness and metastatic growth of rat
mammary adenocarcinoma cell lines. Breast Cancer Res Treat 1999;56(3):203—17.
6. Cavanaugh P.G., Nicolson G.L. Selection of highly metastatic rat MTLn2 mammary adenocarcinoma cell variant using in vitro growth response to transferrin. J Cell Physiol 1998;174(1): 48—57.
7. Goding J.W., Dubljevic V., Sali A. CD71 workshop panel report. In: Leucocyte typing VI. Kishimito T. et al. (eds.). NY, 1997. p. 524—7.
