CC BY
79
УДК: 616.24-006.6-092-036.8:576.385
взаимосвязь маркеров АпоптозА (p53, BCL-2, BAx) с клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при немелкоклеточном раке легкого
д.С. Кобяков1, А.Ф. лазарев2, Е.л. лушникова3, л.М. непомнящих3
Бюджетное учреждение «Когалымская городская больница», г. Когалым1 Алтайский филиал РОНц им. Н.Н. Блохина РАМН, г. Барнаул2 ФГБУ «НИИрегиональной патологии и патоморфологии» СО РАМН, г. Новосибирск3 628480, Тюменская область, г. Когалым, ул. Молодежная, 19, e-mail: [email protected]
Исследована экспрессия р53, bcl-2 и bax во взаимосвязи с клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при немелкоклеточном раке легкого (НМКРЛ). Отмечается взаимосвязь экспрессии р53, bcl-2 и bax с клинико-морфологическими параметрами НМКРЛ: экспрессия bcl-2 и р53 выше при плоскоклеточном раке, экспрессия bax выше при аденокарциноме, экспрессия bcl-2 выше при отсутствии лимфогенных метастазов и при НМКРЛ I стадии. Показатели выживаемости больных НМКРЛ зависят от экспрессии p53, bcl-2 и не зависят от экспрессии bax, показатели выживаемости повышаются при экспрессии bcl-2 и снижаются при экспрессии p53. Уровень выживаемости больных НМКРЛ взаимосвязан с взаимным содержанием bcl-2, р53 и bax, он выше при иммунофенотипах -p53/+bcl-2 и -p53/+bcl-2/-bax и ниже при иммунофенотипах +p53/+bax и +p53/-bcl-2/+bax. При однофакторном регрессионном анализе bcl-2 и р53 являлись факторами прогноза. Многофакторный регрессионный анализ не выявил взаимосвязи bcl-2, р53 и bax с прогнозом НМКРЛ.
Ключевые слова: р53, bcl-2, bax, немелкоклеточный рак легкого, отдаленная выживаемость.
RELATIONSHIP BETWEEN APOPTOSIS MARKERS(P53, BCL-2, BAX) AND CLINICAL-MORPHOLOGICAL PARAMETERS
AND SURVIVAL IN NON-SMALL CELL LUNG CANCER D.S. Kobyakov1, A.F. Lazarev2, E.L. Lushnikova3, L.M. Nepomnyashchikh3 Kogalym Municipal Hospital, Kogalym1 Altai branch of the N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center, RAMS, Barnaul2 Research Institute of Regional Pathology and Pathomorphology of Siberian Division of the Russian Academy
of Medical Scienсеs, Novosibirsk3 19, Molodezhnaya Street, 628480-Kogalym, Tyumen region, Russia, e-mail: [email protected]
The purpose of the study was to analyze the relationship between expression of the р53, bcl-2 and bax genes and clinical-morphological parameters and survival in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Expression of bcl-2 and р53 was found to be higher in patients with squamous cell carcinoma, bax expression was higher in patients with adenocarcinoma and bcl-2 level was higher in patients with stage I NSCLC and in patients having no lymph node metastases. Survival of patients with NSCLC depended on the expression of p53, bcl-2 and depended no on the bax expression. Survival rates were increased in bcl-2 expression and decreased in p63 expression. Survival rate of patients with NSCLC was higher in -p53/+bcl-2 and -p53/+bcl-2/-bax immune phenotypes and lower in +p53/+bax and +p53/-bcl-2/+bax immune phenotypes. The unifactor regression analysis showed that bcl-2 and р53 were prognostic factors. The multifac-tor regression analysis revealed no relationship between bcl-2, р53, bax and prognosis of NSCLC.
Key words: р53, bcl-2, bax, non-small cell lung cancer, long-term survival.
Рак легкого (РЛ) занимает ведущее место в заболеваемости и смертности среди злокачественных новообразований. Не менее 80 % случаев РЛ приходится на немелкоклеточный рак легкого (НМКРЛ), отдаленные результаты лечения которого
остаются неудовлетворительными. В связи с этим ведется поиск предиктивных и прогностических морфологических параметров НМКРЛ.
Развитие апоптоза происходит в результате последовательной активации каспаз (сериновых
ВЗАИМОСВЯЗЬ МАРКЕРОВ АПОПТОЗА (Р53, ВО-2, ВАХ) С КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ ПАРАМЕТРАМИ - 11
протеаз). Апоптоз запускается двумя путями: рецепторным (через активацию каспаз 8 и 10) и митохондриальным путем (через активацию ка-спазы 9). Оба пути на конечном этапе активируют эффекторные каспазы 3, 6 и 7. Вс1-2 является антиапоптотическим белком, а Ьах - проапоптоти-ческим белком митохондриального пути активации апоптоза, которая происходит через белок р53, а инактивация - через димеризацию с белком Ьс1-2. Белок р53 является транскрипционным фактором, регулирующим функцию большинства генов, выполняя супрессорную функцию (остановка клеточного цикла, репарация ДНК и апоптоз). Белки семейства Ьс1-2 (около 20 белков) расположены на наружной митохондриальной мембране, способны к димеризации - от вида димеризации (анти- и проапоптотических белков) и их баланса зависят проницаемость митохондриальной мембраны и вступление клетки в апоптоз. Анализ существующей литературы показал противоречивый характер связи маркеров апоптоза (р53, Ьах и Ьс1-2) с клинико-морфологическими параметрами, выживаемостью больных и прогнозом НМКРЛ [12, 17, 21]. Кроме того, взаимосвязи коэкспрессии р53,
Ьах и Ьс1-2 с выживаемостью больных при НМКРЛ посвящены единичные исследования.
Целью работы явилось исследование экспрессии р53, Ьс1-2 и Ьах во взаимосвязи с клинико-морфологическими параметрами и показателями 5-летней выживаемости при НМКРЛ.
Материал и методы
Исследованы 237 образцов операционного материала НМКРЛ, полученных за период с 2007 по 2009 г. в Алтайском краевом онкологическом диспансере, случаи РЛ с отдаленными метастазами и множественными опухолями исключены из исследования. Средний возраст пациентов составил 59 лет (35-75 лет), мужчин было 203 (86 %), женщин - 34 (14 %). Лобэктомия выполнена 166 (70 %), пневмонэктомия - 71 (30 %) пациенту. Все больные получали хирургическое лечение без дополнительной химиотерапии. Патогисто-логическая характеристика опухолей определена согласно классификации ТКМ 7-го пересмотра [18] (табл. 1).
Фрагменты опухолевой ткани фиксировали 18-24 ч в 10 % нейтральном забуференном формалине. После стандартной проводки операционного
Таблица 1
Экспрессия р53, Ьс!-2 и Ьах при НМКРЛ
Характеристика Кол-во случаев +р53 +Ьс1-2 +Ьах
Первичная опухоль
Т1 63 (27 %) 25 (40 %) 14 (22 %) 32 (51 %)
Т2-3 174 (73 %) 79 (45 %) 29 (17 %) 98 (56 %)
Наибольший размер
<3 см 98 (41 %) 36 (37 %) 21 (21 %) 50 (51 %)
>3 см 139 (59 %) 68 (49 %) 22 (16 %) 80 (56 %)
Лимфатические узлы
N0 150 (63 %) 62 (41 %) 34 (23 %) 85 (57 %)
N,-3 87 (37 %) 42 (48 %) 9 (10 %) 45 (52 %)
Стадия
120 (51 %) 51 (43 %) 30 (25 %) 68 (57 %)
П-Ш 117 (49 %) 53 (45 %) 13 (11 %) 62 (53 %)
Гистогенез
Аденокарцинома 109 (46 %) 39 (36 %) 13 (12 %) 69 (63 %)
Плоскоклеточный рак 128 (54 %) 65 (51 %) 30 (23 %) 61 (48 %)
Диф ференцировка
Высокая 58 (25 %) 23 (40 %) 15 (26 %) 33 (57 %)
Умеренная/низкая 179 (75 %) 81 (45 %) 28 (16 %) 97 (54 %)
материала готовили гистологические срезы толщиной 4 мкм. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином, ШИК-реактивом/альциановым синим, по Крейбергу. Для уточнения гистогенеза опухоли, а также с дифференциально-диагностической целью иммуногистохимическим методом определяли цитокератины 7 (клон SP52), 20 (клон SP33), High Molecular Weight (клон 34PE12), цитокератины 5/6 (клон D5 16B4) в автоматическом стейнере Ventana XT (контроль окрашивания - эпидермис кожи и слизистая оболочка желудка). Для карцином железистого генеза характерным было положительное окрашивание на цитокератины 7/20 и отрицательное на цитокератины High Molecular Weight и 5/6, наоборот, для плоскоклеточного рака -положительное окрашивание на цитокератины High Molecular Weight, 5/6 и отрицательное на цитокератины 7/20.
Иммуногистохимическим методом определяли р53 (клон DO-7, Dako), bcl-2 (клон 124, Dako) и bax (клон SP47, SpringBio) в автоматическом стейнере Ventana XT, система визуализации ultraView. В каждом случае исследовали 1000 клеток в 5-7 полях зрения, при увеличении ><400. Определяли индекс метки - количество положительно окрашенных клеток от общего количества подсчитанных клеток в процентах (для р53 ядерное окрашивание, для bcl2 и bax - цитоплазматическое). Индекс метки р53, bcl2, bax более 10 % считался положительной экспрессией (+) антигена в опухоли, менее 10 % - отрицательной экспрессией (-) [4, 8, 10, 16]. Результат иммуногистохимической окраски определялся в виде окрашивания (от светло- до темно-коричневого оттенка) ядер (для р53) или цитоплазмы (для bcl-2 и bax) клеток.
Статистический анализ полученных данных осуществляли в программе STATISTICA 6.0. При проверке статистических гипотез применяли двусторонний точный критерий Фишера для таблиц 2^2, коэффициент корреляции рангов Спирмена. Определяли общую скорректированную выживаемость больных за пятилетний период после операции, использовали метод Каплана-Мейера, логарифмический ранговый тест, регрессионную модель Кокса. Достоверность полученных критериев оценивали при р<0,05.
Результаты исследования
При анализе уровня экспрессии р53, bcl-2 и bax в эпителиальных клетках НМКРЛ в зависимости от
морфологических параметров опухоли корреляции между этими показателями не обнаружено (р<0,3) (см. табл. 1). Выявлено статистически значимое увеличение количества случаев с +р53 при плоскоклеточном раке по сравнению с аденокарциномой (р<0,05). Отмечается значимое увеличение +bcl-2 в группе опухолей без поражения лимфатических узлов по сравнению с опухолями с наличием лим-фогенных метастазов (р<0,05), при НМКРЛ I стадии по сравнению с НМКРЛ II-IlI стадий (р<0,01), а также при плоскоклеточном раке по сравнению с аденокарциномой (р<0,05). Количество случаев с +bax значимо выше при аденокарциноме по сравнению с плоскоклеточным раком (р<0,05). При НМКРЛ гистогенез имел слабую корреляцию с р53 (r=0,15, р<0,05), bcl-2 (r=0,15, р<0,05) и bax (r=0,16, р<0,01), показатель N и стадия процесса - с bcl-2 (r=0,15, р<0,05 и r=0,18, р<0,01). Таким образом, гистогенез НМКРЛ взаимосвязан с экспрессией р53, bcl-2 (выше в плоскоклеточном раке) и bax (выше в аденокарциноме), что, вероятно, отражает взаимосвязь особенностей генетических нарушений и гистогенеза опухоли. При появлении лим-фогенных метастазов и при более поздних стадиях заболевания экспрессия белка bcl-2 снижается, что указывает и на снижение антиапоптотического влияния этого белка.
Общая 5-летняя скорректированная выживаемость больных НМКРЛ, получивших оперативное лечение, составила 40,4 ± 3,5 %. Показатели выживаемости больных НМКРЛ имели статистически значимые отличия в зависимости от экспрессии р53 (р=0,03) и bcl-2 (р=0,004) (табл. 2). Отдаленная выживаемость при +bax имела тенденцию к снижению, однако отличия не значимы. При анализе взаимосвязи уровня отдаленных результатов лечения больных НМКРЛ и коэкспрессии антигенов выявлено, что показатели 5-летней выживаемости уменьшались в ряду иммунофенотипов опухоли: 1) -p53/+bcl-2, -p53/-bcl-2, +p53/+bcl-2 и +p53/-bcl-2; 2) -p53/-bax, -p53/+bax, +p53/-bax и +p53/+bax; 3) +bcl-2/-bax, +bcl-2/+bax, -bcl-2/-bax и -bcl-2/+bax (рис. 1). При анализе парной коэкспрессии р53 и bcl-2 статистически значимые отличия показателей выживаемости больных получены только для иммунофенотипа -p53/+bcl-2 (р<0,001). При анализе парной коэк-спрессии р53 и bax больные с иммунофенотипом +p53/+bax имели наихудшие 5-летние показатели,
взаимосвязь маркеров алоптоза (р53, во-2, вах) с клинико-морфологическими параметрами
- 13
0,2
а
О 400 800 1200 1600 2000
Н?6+-|—ш- и ] ■ | д ||| -р53/-Ьах
Ч*—4____ь и о 1 пни на -н-а—К —р53/+Ьах
й ищи --+р53/~Ьах
6 8
Во + ++ •+ 6-НН- + • • • +р53/+Ьах
О 400 800 1200 1600 2000
Ж
6........Ц-—1 о -1 а...........++-н—+......им.....+-- -* +Ьо1-2/-Ьах +Ьс1-2/+Ьах
+++ Ьс1-2/ Ьах ■н-—Ьо1-2/+Ьах
О 400 800 1200 1600 2000
Рис. 1. Графики выживаемости больных НМКРЛ по Каплану-Мейеру: а - при иммунофенотипе р53/Ьс1-2; б - при иммунофенотипе р53/Ьах; в - при иммунофенотипе Ьс1-2/Ьах. По оси абсцисс - время жизни (в днях), по оси ординат - доля выживших больных
отличия значимы, по сравнению с иммунофено-типами -р53/-Ьах и -р53/+Ьах (р<0,05). При анализе парной коэкспрессии Ьс1-2 и Ьах отмечается тенденция к снижению выживаемости при +Ьах в опухолях с +Ьс1-2 или -Ьс1-2 иммунофенотипом. Таким образом, показатели выживаемости больных НМКРЛ выше при +Ьс1-2 опухолях, хуже - при +р53 опухолях и имеют тенденцию к снижению при +Ьах опухолях. В связи с этим были проанализированы отдаленные результаты лечения больных НМКРЛ при тройной экспрессии антигенов. Наилучший показатель выживаемости (60,4 ± 22,6 %) наблюдался при иммунофенотипе р53/+Ьс1-2/-Ьах, который был выявлен у 8 (3 %) больных НМКРЛ. Наихудший показатель выживаемости (23,9 ± 7,1 %) отмечен
при иммунофенотипе +р53/-Ьс1-2/+Ьах, который диагностирован у 45 (19 %) больных НМКРЛ. Однако при сравнении уровня выживаемости с тройной экспрессией антигенов р53, Ьс1-2 и Ьах статистически значимые отличия не получены. Таким образом, показатели выживаемости больных НМКРЛ взаимосвязаны как с экспрессией отдельных антигенов р53, Ьс1-2 и Ьах, так и с их коэкспрессией.
При проведении однофакторного регрессионного анализа с выживаемостью больных НМКРЛ были связаны экспрессия р53 (%2=4,6, Р=0,38, стандартная ошибка - 0,18, р=0,03) и экспрессия Ьс1-2 (х2=8,5, Р=0,75, стандартная ошибка - 0,28, р=0,008). Показатель N (отсутствие или наличие
Таблица 2
показатели 5-летней общей скорректированной выживаемости у больных нМКрл в зависимости от экспрессии p53, bcl-2, bax
Характеристика Кол-во случаев Показатели 5-летней выживаемости
p53
-p53 133 (56 %) 46,2 ± 4,7 %
+p53 104 (44 %) 32,4 ± 5,1 %
bcl-2
-bcl-2 194 (82 %) 35,6 ± 3,8 %
+bcl-2 43 (18 %) 58,4 ± 8,8 %
bax
-bax 107 (45 %) 44,8 ± 5,2 %
+bax 130 (55 %) 36,8 ± 4,7 %
p53 и bcl-2
-p53/+bcl-2 23 (10 %) 70,1 ± 12,5 %
-p53/-bcl-2 110 (46 %) 38,9 ± 5,1 %
+p53/+bcl-2 20 (8 %) 32,6 ± 12,7 %
+p53/-bcl-2 84 (36 %) 30,3 ± 5,6 %
p53 иbax
-p53/-bax 56 (24 %) 47,4 ± 7,3 %
-p53/+bax 77 (32 %) 43,5 ± 6,4 %
+p53/-bax 51 (22 %) 38,8 ± 7,5 %
+p53/+bax 53 (22 %) 25,3 ± 6,8 %
bcl-2 и bax
+bcl-2/-bax 20 (8 %) 58,9 ± 13,3 %
+bcl-2/+bax 23 (10 %) 56,2 ± 10,8 %
-bcl-2/-bax 87 (37 %) 39,5 ± 5,7 %
-bcl-2/+bax 107 (45 %) 32,4 ± 5,1 %
взаимосвязь МАРКЕРОВ АПОПТОзА (P53, BCL-2, BAX) С КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ ПАРАМЕТРАМИ
- 15
метастазов в лимфатические узлы), размер опухоли (до 3 см или более), дифференцировка (высокая или умеренная/низкая) имели независимую взаимосвязь с выживаемостью больных НМКРЛ при многофакторном регрессионном анализе (х2=95,5, р<0,001). Таким образом, однофакторный анализ показал, что р53 и Ьс1-2 являются значимыми прогностическими факторами, однако в совокупности с клинико-морфологическими данными по системе ТКМ маркеры апоптоза не взаимосвязаны с прогнозом НМКРЛ.
Обсуждение
По нашим данным не найдена корреляция между маркерами апоптоза р53, Ьс1-2 и Ьах, что согласуется с результатами других исследований [1, 6, 8, 16] и указывает на их независимую экспрессию в НМКРЛ. Однако в некоторых исследованиях показана обратная корреляция между р53 и Ьс1-2 при НМКРЛ [3, 10]. В клеточных структурах НМКРЛ содержание р53, Ьс1-2 и Ьах взаимосвязано с гистогенетическим происхождением опухоли: экспрессия р53 и Ьс1-2 выше при плоскоклеточном раке по сравнению с аденокарциномой, экспрессия Ьах выше при аденокарциноме по сравнению с плоскоклеточным раком. Полученные результаты подтверждаются данными мировой литературы [1, 9, 10, 14, 15]. В нашем исследовании выявлена высокая экспрессия белка Ьс1-2 в опухолях без лимфогенных метастазов и при НМКРЛ I стадии. Аналогичные результаты получены рядом зарубежных исследователей [3, 6], однако в сообщении ^ Shibata et а1. представлены противоположные данные [16].
Выживаемость больных НМКРЛ с +р53 достоверно ниже по сравнению с -р53. Наши результаты совпадают с литературными данными [2, 7, 8, 13, 17, 21]. Однако в других исследованиях не установлена взаимосвязь экспрессии р53 с выживаемостью больных НМКРЛ [3, 5, 10, 14, 16, 19] или получены противоположные результаты [11]. Снижение выживаемости больных НМКРЛ при +р53 объясняется высокой корреляцией (более 70 %) иммуногистохимически выявляемого му-тантного белка р53 и наличием точечных мутаций в гене р53 [19]. При возникновении мутаций в гене р53 изменяется не только функция белка р53 в отношении апоптоза, но и удлиняется время распада белка р53, в результате чего становится возможным его определение методом иммуногистохимии.
В проведенном исследовании выявлено, что показатели выживаемости больных НМКРЛ с +bcl-2 достоверно выше по сравнению с -bcl-2, что совпадает с данными мировой литературы [1-3, 8, 12-14]. Тем не менее в некоторых публикациях не показано взаимосвязи экспрессии bcl-2 с уровнем выживаемости больных НМКРЛ [5, 7, 10, 16, 20] или представлены противоположные результаты [6, 15]. Данный факт труднообъясним, поскольку bcl-2 - это антиапоптотический белок, однако инициация митохондриального апоптоза зависит не только от экспрессии bcl-2, но и от совокупного влияния всех белков семейства bcl-2. Кроме того, при +bcl-2 отмечаются снижение пролиферативной активности [8] и увеличение площади некрозов в опухоли [2].
Выживаемость больных НМКРЛ не связана с экспрессией bax, что совпадает с большинством литературных данных [1, 2, 6, 20]. Взаимосвязь увеличения выживаемости больных с высокой экспрессией bax выявлена в единичных исследованиях - при распространенном НМКРЛ [4] и при аденокарциноме легкого [9]. Вероятно, влияние на выживаемость экспрессии bax взаимосвязано с суммарным влиянием других белков семейства bcl-2.
Нами установлено, что на выживаемость больных НМКРЛ влияет также коэкспрессия р53, bcl-2 и bax. В частности, при иммунофенотипе -p53/+bcl-2 выживаемость НМКРЛ наилучшая. Аналогичные результаты получены Y. Ohsaki et al. [14], H. Ishida et al. [8] и R.M. Apolinario et al. [1], которые показали, что при иммунофенотипе +p53/-bcl-2 показатели выживаемости при НМКРЛ наихудшие, однако в нашем исследовании не получено значимых отличий. Кроме того, R.M. Apolinario et al. [1] сообщают, что при иммунофенотипе +bax/-bcl2 выживаемость наихудшая, что также согласуется с нашими данными (в нашем исследовании отличия не значимы). Противоположные данные опубликованы R.S. Lai et al. [10], которые не выявили различий в выживаемости больных НМКРЛ во взаимосвязи с коэкспрессией р53, bcl-2 и bax. Таким образом, для получения более точных актуариальных кривых выживания больных НМКРЛ необходимо учитывать взаимную коэкспрессию маркеров апоптоза р53, bcl-2 и bax.
При однофакторном регрессионном анализе выявлено, что р5 3 и bcl-2 являются
прогностическими факторами при НМКРЛ. Однако при многофакторном регрессионном анализе молекулярно-биологические данные об экспрессии маркеров апоптоза р53, bcl-2 и bax не были взаимосвязаны с прогнозом НМКРЛ в совокупности с клинико-морфологическими данными по системе TNM. Данные метаанализов также подтверждают ограниченную прогностическую значимость экспрессии р53 и bcl-2 [12, 17, 21].
Заключение
В проведенном исследовании установлено, что маркеры апоптоза р53, bcl-2 и bax взаимосвязаны с клинико-морфологическими параметрами и уровнем выживаемости больных при немелкоклеточном раке легкого. Экспрессия bcl-2 и р53 выше при плоскоклеточном раке, экспрессия bax выше при аденокарциноме, экспрессия bcl-2 выше при отсутствии лимфогенных метастазов и при раке легкого I стадии. Показатели выживаемости больных НМКРЛ взаимосвязаны с экспрессией p53, bcl-2 и не зависят от экспрессии bax, они выше при экспрессии bcl-2 и ниже при экспрессии p53. Уровень выживаемости больных НМКРЛ связан с взаимным содержанием bcl-2, р53 и bax. Он возрастает при иммунофенотипах -p53/+bcl-2 и -p53/+bcl-2/-bax и снижается при иммунофенотипах +p53/+bax и +p53/-bcl-2/+bax. При однофакторном регрессионном анализе bcl-2 и р53 являлись факторами прогноза. Многофакторный регрессионный анализ не выявил взаимосвязи bcl-2, р53 и bax с прогнозом НМКРЛ.
ЛИТЕРАТУРА
1. ApolinarioR.M., van der ValkP., de Jong J.S., Deville W., van Ark-Otte J., Dingemans A.M., van Mourik J.C., Postmus P.E., Pinedo H.M., Giaccone G. Prognostic value of the expression of p53, bcl-2, and bax oncoproteins, and neovascularization in patients with radically resected non-small-cell lung cancer // J. Clin. Oncol. 1997. Vol. 15 (6). Р. 2456-2466.
2. Borner M.M., Brousset P., Pfanner-Meyer B., Bacchi M., Vonlan-then S., HotzM.A., AltermattH.J., Schlaifer D, Reed J.C., Betticher D.C. Expression of apoptosis regulatory proteins of the Bcl-2 family and p53 in primary resected non-small-cell lung cancer // Br. J. Cancer. 1999. Vol. 79 (5-6). Р. 952-958.
3. Fontanini G., Vignati S., Bigini D., Mussi A., Lucchi M., Angeletti C.A., BasoloF., Bevilacqua G. Bcl-2 protein: a prognostic factor inversely correlated to p53 in non-small-cell lung cancer // Br. J. Cancer. 1995. Vol. 71 (5). Р. 1003-1007.
4. Gessner C., Liebers U., Kuhn H., Stiehl P., Witt C., Schauer J., Wolff G. BAX and p16INK4A are independent positive prognostic markers for advanced tumour stage of nonsmall cell lung cancer // Eur. Respir. J. 2002. Vol. 19 (1). Р. 134-140.
5. Gregorc V., Darwish S., Ludovini V., Pistola L., De Angelis V., Mi-haylova Z., Bellezza G., SidoniA., CavaliereA., BucciarelliE., Massaro G., Tonato M. The clinical relevance of Bcl-2, Rb and p53 expression in advanced non-small cell lung cancer // Lung cancer. 2003. Vol. 42 (3). Р. 275-281.
6. Groeger A.M., Esposito V., De Luca A., Cassandro R., Tonini G., Ambrogi V, Baldi F., Goldfarb R., Mineo T.C., Baldi A., Wolner E. Prognostic value of immunohistochemical expression of p53, bax, Bcl-2 and Bcl-xL in resected non-small-cell lung cancers // Histopathology. 2004. Vol. 44 (1). Р. 54-63.
7. Han H., Landreneau R.J., Santucci T.S., Tung M.Y., Macherey R.S., Shackney S.E., Sturgis C.D., Raab S.S., Silverman J.F. Prognostic value of immunohistochemical expressions of p53, HER-2/neu, and bcl-2 in stage I non-small-cell lung cancer // Hum. pathol. 2002. Vol. 33 (1). Р. 105-110.
8. Ishida H., Irie K., Itoh T., Furukawa T., Tokunaga O. The prognostic significance of p53 and bcl-2 expression in lung adenocarcinoma and its correlation with Ki-67 growth fraction // Cancer. 1997. Vol. 15 (6). Р. 1034-1045.
9. Jeong S.H., Lee H.W., Han J.H., Kang S.Y., Choi J.H., Jung Y.M., Choi H., Oh Y.T., ParkK.J., Hwang S.C., Sheen S.S., Oh Y.J., Kim J.H., Lim H.Y. Low expression of Bax predicts poor prognosis in resected non-small cell lung cancer patients with non-squamous histology // Jpn. J. Clin. Oncol. 2008. Vol. 38 (10). Р. 661-669. doi: 10.1093/jjco/hyn089.
10. Lai R.S., Wang J.S., Hsu H.K., Chang H.C., Lin C.H., Lin M.H. Prognostic evaluation of the expression of p53 and bcl-2 oncoproteins in patients with surgically resected non-small cell lung cancer // Jpn. J. Clin. Oncol. 2002. Vol. 32 (10). Р. 393-397.
11. Lee J.S., Yoon A., Kalapurakal S.K., Ro J.Y., Lee J.J., Tu N., Hit-telman W.N., Hong W.K. Expression of p53 oncoprotein in non-small-cell lung cancer: a favorable prognostic factor // J. Clin. Oncol. 1995. Vol. 13 (8). Р. 1893-1903.
12. Martin B., Paesmans M., Berghmans T., Branle F., Ghisdal L., Mascaux C., Meert A.P., Steels E., Vallot F., Verdebout J.M., Lafitte J.J., Sculier J.P. Role of Bcl-2 as a prognostic factor for survival in lung cancer: a systematic review of the literature with meta-analysis // Br. J. Cancer. 2003. Vol. 89 (1). Р. 55-64.
13. Moldvay J., Scheid P., Wild P., Nabil K., Siat J., Borrelly J., Marie B., Farre G., Labib T., Pottier G., Sesboue R., Bronner C., Vignaud J.M., Martinet Y., Martinet N. Predictive survival markers in patients with surgically resected non-small cell lung carcinoma // Clin. Cancer Res. 2000. Vol. 6 (3). Р. 1125-1134.
14. Ohsaki Y., Toyoshima E., Fujiuchi S., Matsui H., Hirata S., Mi-yokawa N., Kubo Y., Kikuchi K. bcl-2 and p53 protein expression in non-small cell lung cancers: correlation with survival time // Clin. Cancer Res. 1996. Vol. 2 (5). Р. 915-920.
15. Poleri C., Morero J.L., Nieva B., Vazquez M.F., Rodriguez C., de Titto E., Rosenberg M. Risk of recurrence in patients with surgically resected stage I non-small cell lung carcinoma: histopathologic and immu-nohistochemical analysis // Chest. 2003. Vol. 123 (6). Р. 1858-1867.
16. Shibata Y., Hidaka S., Tagawa Y., Nagayasu T. Bcl-2 protein expression correlates with better prognosis in patients with advanced non-small cell lung cancer // Anticancer res. 2004. Vol. 24 (3b). Р. 1925-1928.
17. Steels E., Paesmans M., Berghmans T., Branle F., Lemaitre F., Mascaux C., Meert A.P., Vallot F., Lafitte J.J., Sculier J.P. Role of p53 as a prognostic factor for survival in lung cancer: a systematic review of the literature with a meta-analysis // Eur. Respir. J. 2001. Vol. 18 (4). Р. 705-719.
18. TNM classification of malignant tumours / Eds. L. Sobin, M. Gospodarowicz, C. Wittekind. 7th edition. Oxford: Wiley-Blackwell, 2009. Р. 138-146.
19. Tomizawa Y., Kohno T., Fujita T., KiyamaM., SaitoR., NoguchiM., Matsuno Y., Hirohashi S., YamaguchiN., Nakajima T., Yokota J. Correlation between the status of the p53 gene and survival in patients with stage I non-small cell lung carcinoma // Oncogene. 1999. Vol. 18 (4). Р. 1007-1014.
20. YarenA., OztopI., Kargi A., Ulukus C., Onen A., SanliA., Binicier O., Yilmaz U., AlakavuklarM. Bax, bcl-2 and c-kit expression in non-small-cell lung cancer and their effects on prognosis // Int. J. Clin. Pract. 2006. Vol. 60 (6). Р. 675-682.
21. Zhu C.Q., Shih W., Ling C.H., Tsao M.S. Immunohistochemical markers of prognosis in non-small cell lung cancer: a review and proposal for a multiphase approach to marker evaluation // J. Clin. Pathol. 2006. Vol. 59 (8). Р. 790-800.
Поступила 8.04.14
