CC BY
117
TPOX, TH01, D16S539, D13S317, D7S820 в составе стандартных групп CODIS, ESS, German Core Loci и ISSOL для коренных армян РА как при решении вопросов установлении кровного родства, так и при идентификации личности по следам на вещественных доказательствах в экспертизах по уголовным делам.
Ключевые слова: ДНК, популяция, частота встречаемости аллеля, полиморфизм, коренные жители Армении, национальная база данных Освещается получение национальных данных частот встречаемости микросателлитных STR-локусов, входящих в состав баз данных CODIS, ESS, German Core Loci и ISSOL, с целью получения достоверных данных при вероятностно-статистических расчетах в экспертизах по делам идентификации личности и установления кровного родства.
Роль судебно-генетических экспертиз в делах по раскрытию тяжких преступлений растет из года в год. Это обусловлено тем, что судебно-генетические экспертизы относятся к числу экспертиз, назначаемых по делам о наиболее тяжких преступлениях против личности, и результаты исследований следов на вещественных доказательствах нередко оказываются решающими при определении причастности лица к совершенному преступлению.
В настоящее время в области судебной генетики и криминалистики для идентификации личности применяют стандартные данные частот встречаемости генов в популяциях, к которым относятся: CODIS (Combined DNA Index System; данные США), ESS (European Standard Set; территориальные стандарты, используемые в Европе), German Core Loci (немецкие данные) и ISSOL (Interpol Standard Set of Loci; данные, представленные в руководствах Интерпола). Целью стандартной группы генетических локусов является получение адекватной генетической информации, которую можно сравнить при необходимости обмена данными.
Стандартизация локусных групп также связана с необходимостью введения в государствах национальных и международных баз данных ДнК. С этой точки зрения в области судебно-генетических экспертиз популяцион-но-генетические исследования групп людей разных национальностей, не имеющих кровно родственных связей, имеют как практическое, так и научное значение.
В наших ранних работах мы изучили полиморфизм STR-локусов F13A01, FESFPS и vWA армян, не имеющих кровно родственных связей и проживающих на территории Республики Армения. Анализ данных распределения аллелей STR-локусов среди коренных жителей Армении состоял из 188 граждан республики.
В данной работе увеличено количество исследуемых образцов до 237. Целью работы является изучение полиморфизма семи аутосомных коротких тандемных повторов STR-локусов, которые включены в стандартные группы CODIS, ESS, German Core Loci и ISSOL: vWA, CSF1PO, TPOX, TH01, D16S539, D13S317, D7S820.
Биологическим материалом для исследований являлась кровь и буккальный эпителий, собранные у граждан Армении - коренных армян, в отношении к которым по гражданским и уголовным делам проводились судеб-но-генетические экспертизы.
Полученные данные частот встречаемости аллелей микросателлитных аутосомных STR-локусов у лиц армянской национальности, проживающих на территории Республики Армения, сравнивались с соответствующими данными, приведенными в инструкциях наборов американского производителя «Промега», касающихся белокожих американцев.
Наши наблюдения показали, что для коренных армян во всех семи исследуемых локусах сохранено равновесие Харди - Вайнберга.
Из семи исследованных аутосомных микросател-литных локусов для белокожих американцев самым полиморфным является локус D7S820, где наблюдается полиморфизм по 9 аллелям, однако у лиц армянской национальности в 223 случаях не обнаружена встречаемость по 6-му и 14-му аллелям, то есть полиморфизм наблюдается по 7 аллелям.
В исследованной выборке ДНК лиц, не имеющих между собой кровно родственных связей, полиморфизм ло-куса CSF1PO наблюдался по 7 аллелям, в локусе TPOX -по 6 аллелям, D16S539 - по 8 аллелям и vWA - по 7 аллелям. Эти данные идентичны с данными белокожих американцев.
По локусу TH01 с точки зрения полиморфизма данные одинаковые, то есть у обоих популяций наблюдается вариабельность по 7 аллелям локуса, но при этом у армян не встречается 5-й аллель, в то время как у белокожих американцев не наблюдается 11-й аллель.
По локусу D13S317 у коренных армян наблюдается полиморфизм по 8 аллелям, а у белокожих американцев полиморфность по 7 аллелям данного локусам.
ВЫВОДЫ
Сравнительный анализ по исследуемым семи ми-кросателлитным STR-локусам, которые входят в состав стандартных групп CODIS, ESS, German Core Loci, ISSOL, армян и белокожих американцев свидетельствует о достоверных генетических различиях в популяциях. Необходимо продолжить работы по остальным локусам, входящим в состав стандартных групп, для получения окончательных результатов о приемлемости или категоричной неприемлемости применения частот встречаемости аллелей STR-локусов белокожих американцев при вероятностно-статистических расчетах как при установления кровного родства, так и при идентификации личности.
ВЫДЕЛЕНИЕ ЛИПИДНЫХ ФРАКЦИИ КРОВИ И ПОТА ЧЕЛОВЕКА, ОТВЕЧАЮЩИХ ЗА ИНДИВИДУАЛЬНОСТЬ ЕГО ЛИЧНОГО ЗАПАХА, МЕТОДОМ ХИМИЧЕСКОЙ ЭКСТРАКЦИИ_
П. Б. Панфилов, З. Ю. Панфилова, Ю. С. Фиронова
ФГКУ ЭКЦ МВД России, Москва В серии опытов российскими учеными (Т. Ф. Моисеева и др.) было установлено, что за индивидуальный запах человека отвечают вещества липидной природы. Для изучения класса этих веществ впервые в научной и экспертной практике был разработан метод химической экстракции, позволяющий выделять указанные вещества в максимально очищенном виде.
Ключевые слова: ольфакторный метод, пробопод-готовка, запаховые следы, липиды, индивидуальный запах, химическая экстракция Широко применяемый в экспертной практике крио-генно-вакуумный способ пробоподготовки не избавляет пахучие образцы от посторонних пахучих помех, а также иных легко летучих компонентов и примесей, характеризующихся негативным воздействием на уровень восприятия искомого ольфакторного сигнала в исходной смеси обонятельным анализатором используемых биодетекторов. На базе ольфакторной экспертной лаборатории ЭКЦ МВД России был разработан метод получения индивидуализирующих субъекта пахучих образцов из его пота и крови путем химической экстракции специфических
липидных фракций, содержащихся в указанных средах человека.
Всего проведен анализ 100 проб пота и крови от 50 доноров. Для анализа полученных при помощи химической экстракции проб использовали ТСХ и хромато-масс-спектрометрию для оценки примесей и дальнейшей оценки липидных фракций. Для контроля использовали эталоны сфингомиелина (Sigma, США).
Во всех полученных пробах имеются запаховых следы человека. При помощи хромато-масс-спектрометрии в них установлено присутствие незначительного количества примесей одинакового состава (следовые количества примесей, присутствующих в используемых растворителях и воспринятые растворителями с поверхностей полимерных пробирок и шприцов). Для объектов, частично подвергшихся высокотемпературному воздействию, получены данные о следовом количестве продуктов пиролиза (38 %) или об их полном отсутствии (62 %).
В результате исследования нами установлено, что во всех пробах отсутствуют жирные кислоты, триглице-риды, холестерин, сквалены.
Для аналитической ТСХ использовались пластины Merck (Германия). Первое элюирование проводили в стандартной системе для обнаружения всех классов липидов хлороформ: метанол: вода (65:25:4), после получения данных о наличии сфинголипидов применяли вторую систему элюирования толуол: метанол (7:3), что позволило их разделить в 90 % случаев на три фракции, в 5 % - на четыре, в 2 % - на пять и в 3 % - на две фракции. Для анализа проводили сравнение с эталонами сфингомиелина (Sigma, США) и качественные реакции с нингидрином, реагентами Васьковского и Драгендорфа.
ВЫВОДЫ
1. За индивидуальный запах человека отвечают полярные липиды, относящиеся к классу сфинголипидов, а именно церамиды.
2. Впервые в мировой практике инструментальным методом определен диагностический признак наличия за-паховых следов человека как биологического вида.
3. Разработанный метод химической экстракции позволяет эффективно очищать запаховые пробы и значительно расширяет возможности использования ольфак-торного экспертного метода по отношению к объектам биологического происхождения.
■ ВЫЯВЛЕНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ЗАПАХА ЧЕЛОВЕКА В ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТАХ ЕГО КРОВИ И ИСКУССТВЕННОЙ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ СРЕДЕ RPMI 1640 & HEPES_
П. Б. Панфилов, З. Ю. Панфилова, Ю. С. Фиронова
ФГКУ ЭКЦ МВД России, Москва В серии опытов российскими учеными (Т. Ф. Моисеева и др.) было установлено, что за индивидуальный запах человека отвечают вещества липидной природы. Для изучения класса этих веществ впервые в научной практике были изучены форменные элементы крови, а также сама культуральная среда, в которую помещались лимфоциты, на наличие пахучих компонентов, определяющих личный запах человека.
Ключевые слова: ольфакторный метод, культу-ральная среда, запаховые следы, липиды, индивидуальный запах, лимфоциты, эритроциты Источник «личного запаха», рассматриваемый ранее российскими учеными как стабильные вещества липид-ной природы, оставался неопределенным. По этой при-
чине в настоящем исследовании были изучены форменные элементы крови, а также сама культуральная среда, в которую помещались лимфоциты, на наличие пахучих компонентов, определяющих личный запах человека.
Для исследования было отобрано шесть доноров, у которых из вены были получены образцы крови в количестве 5 мл без добавления антикоагулянтов, после чего указанные образцы перемешивали с физраствором и пропускали полученную смесь через лейкофильтр, центрифугировали в пробирках типа «Эппендорф». Осажденные эритроциты отбирались и промывались от плазмы крови несколько раз физраствором. Контроль за целостностью клеток осуществляли наблюдением под микроскопом. Далее эритроциты помещали в условия вакуума, после чего снова контролировали их целостность до ее полного исчезновения. Как только целых клеток не оставалось, содержимое на предметных стеклах помещали в прибор для осуществления сбора запаховых проб известным в экспертной практике криогенно-ваку-умным способом.
Для выделения лимфоцитов применяли стандартную методику с использованием фиколл-урографина, полученные и отмытые клетки помещали в культураль-ную среду К.РМ1 1640 с НЕРЕ8 и разведенным в ней глу-таматом. После этого полученные пробирки помещали в термостат с температурой 36,6 оС. При этом для эксперимента было создано две группы лимфоцитов в куль-туральной среде, где в первой они активно делились и насыщали раствор (что контролировали при помощи камеры Горяева), а во второй - находились в стабильном состоянии, не меняя численного состава. Контроль за процессами жизнедеятельности в исходных средах осуществляли каждые 3 часа. Далее, отделив лимфоциты при помощи лейкофильтра, культуральную среду выливали на стерильный хлопковый сорбент, сами же клетки промывали физраствором несколько раз; полученные с ними фильтры просушивали, после чего раздельно собрали запаховые пробы с фильтров (с осажденными там лимфоцитами), а также с культуральной среды.
По полученным запаховым пробам с эритроцитов, лимфоцитов и культуральной среды проводили диагностические и идентификационные ольфакторные исследования, по результатам которых во всех пробах выявлены запаховые следы человека, происходящие от доноров.
ВЫВОДЫ
1. Клеточное содержимое эритроцитов и лимфоцитов является источником пахучих веществ, отвечающих за индивидуальный запах человека.
2. Индивидуализирующие субъекта пахучие вещества остаются в процессе жизнедеятельности и сигнализации лимфоцитов независимо от того, происходит ли их деление или нет.
ДИНАМИКА СОХРАННОСТИ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ЗАПАХА ЧЕЛОВЕКА В ОБРАЗЦАХ ТРУПНОЙ КРОВИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СПОСОБОВ ИХ ЗАБОРА_
П. Б. Панфилов, З. Ю. Панфилова, Ю. С. Фиронова
ФГКУ ЭКЦ МВД России, Москва Индивидуализирующие компоненты, отвечающие за личный запах человека, генетически детерминированы и постоянно находятся в составе его пота и крови. Выявлена зависимость качества представляемых на ольфакторное исследование образцов трупной крови от способа их забора.
