CC BY
44
ШАПШНШШ (ТОМАШОГНИ
Выбор метода забора материала (десны собаки) для ее гистологического изучения
Смирнова С.С.
аспирант кафедры терапевтической стоматологии ГОУ ВПО УГМА Росздрава, г. Екатеринбург, врач-стоматолог ООО НПФ «Биодент»
Валамина И.Е.
к.м.н., доцент кафедры патологической анатомии, ведущий научный сотрудник ЦНИЛГОУВПОУГМА Росздрава, г. Екатеринбург
Мельникова Т.М.
м.н.с. ЦНИЛ ГОУ ВПО УГМА Росздрава, г. Екатеринбург
Исайкин А.И.
к.м.н., зав. клиникой экспериментальной биологии и медицины ГОУ ВПО УГМА Росздрава, г. Екатеринбург
Резюме
С целью определения наиболее оптимального метода забора материала изучены образцы десны 6 собак с использованием гистологического метода. Оценивали интенсивность кровоснабжения и толщину десны. Наиболее информативным способом забора материала и его подготовки для оценки кровоснабжения десны является глубокий забор ткани при помощи скальпеля и подготовка препарата без декальцинации. При необходимости комплексной оценки качества десны предпочтительнее забор слизисто-надкостничного лоскута путем тупого отслоения с надкостницей с последующей декальцинацией в трилоне В.
Ключевые слова:оценка качества десны, оценка васкуляризации десны, подготовка препаратов десны.
THE METHOD CHOICE OFTISSUES OBTAIN OF DOG'S GINGIVA FOR HISTOLOGIC STUDY Ron G., Smirnova S., Valamina I., Melnikova Т., Isaykin A.
Summary
To define the most optimum methods of tissues obtain, six pieces of dogs' gingiva have been studied using the histologic method. While studying the intensity of blood supply and gingiva's thickness were estimated. It has been found out that the most informative method of tissues obtain and their preparations to estimate the ginaiva's supply was deep obtain of tissues with the aid of a surgical blade and the material preparation without demineralization. When there's a necessity of a complex estimation of gingiva's quality, full-thickness (mucoperiosteum) flap obtain by elevation with mucoperiosteum elevator with the following decalcination in versen was preferable.
Keywords: estimation of gingiva's quality, the intensity of blood supply of gingiva;
Актуальность
Наименее травматичными методами при закрытии рецессий десны являются однослойные методики, в частности корональное или латеральное смещение лоскутов. При выполнении данных техник слизисто-надкостничный лоскут смещается на оголенный корень зуба с соседних с рецессией участков десны (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7). Так как лоскут переносится на некровоснабженную поверхность, то его выживание определяется исключительно качеством лоскута и его способностью переносить гипоксию. Интенсивность васкуляризации лоскута и его толщина — это те факторы, которые позволяют объективно оценить качество и кровоснабжение лоскута и, таким образом, потенциал его выживания при закрытии рецессии десны. Подсчет сосудов микроциркуляторного русла на единицу площади в гистологических препаратах переносимого лоскута при морфологическом исследовании представляет собой объективный метод оценки кровоснабжения лоскута дополнительно к определению его толщины. Однако при заборе материала для морфологического исследования возможны некоторые различия в технике забора и травматичности метода для животного, являющегося моделью в эксперименте. При этом информативность материалов, полученных разными методами забора, может быть различной. В статье дается описание возможных методов забора материала и предлагаются оптимальные методы с нашей точки зрения для оценки кровоснабжения десны и ее толщины.
Ронь Г.И.
д.м.н., профессор, академик АЕН РФ, зав. кафедрой терапевтической стоматологии ГОУ ВПО УГМА Росздрава, г. Екатеринбург
Прошми антологии. 2010. По 2
ГОЛШТНШШ (ТОМЛШОГНЯ
Цель исследования
Определить наиболее оптимальный метод забора гистологического материала (десны собаки) для оценки толщины лоскута и его кровоснабжения, исходя из информативности, простоты исследования и наименьшей травматичности для животного.
Материалы и методы исследования
Фрагменты десны у собак забирались нами в условиях клиники экспериментальной биологии и медицины Уральской Государственной Медицинской Академии. На исследование на животном (собака) было получено согласие этического комитета. Забор осуществлялся тремя различными методами. В первом случае забор ткани десны производился при помощи скальпеля (острое рассечение) на глубину
0,5-0,7 мм. Во втором случае скальпелем (острым методом) на глубину 1мм и более, насколько позволяют ткани, но не включая надкостницу. Третий образец забирался путем тупого отслоения полного слизисто-надкостничного лоскута после проведения разрезов до кости. Образцы забирались у одного и того же животного, в областях верхнечелюстной десны в проекции корней 1.3, 2.1, 2.3 зубов. Образцы представляли собой квадраты со стороной 5 мм. После забора материала в первом и втором случаях наложение швов не требовалось. Небольшое кровотечение, последовавшее за забором материала, было остановлено прижатием стерильной салфетки, смоченной физиологическим раствором. В третьем случае были наложены швы (Полипропилен 6-0) после пластики десны методом перемещения треугольных лоскутов. Швы были сняты на 7 день. Во всех случаях десна зажила первичным натяжением. Заживление раны в первом случае потребовало 5 дней, во втором случае — 8 дней, в третьем случае — 7 дней.
Образцы ткани фиксировались в 10% растворе нейтрального формалина, проводились спиртами в возрастающей концентрации и заливались в парафин. Гистологические срезы окрашивались гематоксилином, эозином и пикрофук-сином по Ван Гизо ну. Образец № 3 (десна с надкостницей) был разделен на 2 равных фрагмента, из одного фрагмента (образец № 3) гистологически препараты готовились без проведения декальцинации; другой фрагмент — образец № 4 подвергался декальцинации в трилоне В для исключения риска повреждения ножей при микротомировании фрагмента.
Результаты
В образце № 1 представлен многослойный плоский ороговевающий эпителий и поверхностные отделы собственного слоя слизистой оболочки десны собаки. Хорошо определяются соединительно-тканные сосочки собственного слоя. Сосуды микроциркуляторного русла отсутствуют либо встречаются единичные профили капилляров.
В образце № 2 определяется вся гистоархитектоника слизистой десны. Соединительно-тканные сосочки глубоко врезаются в эпителий, в базальных отделах собственного слоя хорошо прослеживаются сосуды микроциркуляторного русла.
В образце № 3 (без декальцинации) также представлены все отделы слизистой оболочки, имеется фрагмент надкост-
ницы. Однако при микротомировании образца значительно страдает качество гистологического препарата.
В образце № 4 представлены все отделы слизистой оболочки и надкостница, проведение декальцинации в трилоне В оптимально сохраняет структуру образца, качество препарата подобно образцу № 2. Хорошо определяются профили сосудов, эндотелий, гладкомышечные клетки, что позволяет не только оценить калибр и тип сосудов, состояние сосудистой стенки, но и плотность расположения сосудов на единицу площади, измерить диаметр просветов, в целом дать комплексную оценку васкуляризации лоскута.
Рис. 1. Образец десны собаки при глубине забора 0,5-0,7 мм острым путем. Окраска гематоксилином-эозином. Увеличение в 200 раз
Рис. 2. Образец десны собаки при глубине забора 1 мм острым путем. Окраска гематоксилином-эозином. Увеличение в 200 раз
Рис. 3. Образец десны собаки при глуби не забора до кости (тупое отслоение). Представлена десна и надкостница. Окраска гематоксилином-эозином. Увеличение в 200раз
ГОАПШНШШ (TOMATO(10ГНЯ
Обсуждение
Оценить кровоснабжение десны на основании образца № 1 невозможно, так как в исследованном образце в основном представлен многослойный плоский орошвевающий эпителий, базальные отделы слизистой представлены скудно, фрагментарно.
Второй образец был наиболее удобен для исследования, так как не содержал надкостницы, декальцинация не требовалась, информативность же второго образца для оценки васкуляризации лоскута была высокой. При заборе второго образца не требовалось специальных знаний по перемещению лоскутов, не требовалось наложение швов, рана заживала быстро и без осложнений. Однако измерить толщину лоскута на основании данного препарата невозможно, так как образец не имеет фиксированной каким либо анатомическим ориентиром нижней границы. Таким образом, использование данного метода забора материала позволяет оценивать интенсивность васкуляризации лоскута, но не его толщину.
Третий образец (материал с надкостницей, не подвергавшийся декальцинации) был менее показателен за счет разволокнения материала при микротомировании из-за натяжения надкостничных волокон. Таким образом, качество гистологических срезов значительно страдало, что приводило к наличию артефактов и не позволило использовать данный образец ни для оценки интенсивности васкуляризации образца, ни для определения его толщины. Метод отслоения лоскута с надкостницей не может гарантировать отсутствие в образце фрагментов минерализованных тканей, что может повредить аппаратуру при исследова-
нии фрагмента, исходя из чего декальцинация желательна. Также данный забор для животного требует перемещения лоскутов, наложения швов на лоскуты. Травматичность для животного определяется способностями хирурга закрыть рану без натяжения (навыками в пластической хирургии).
Информативность четвертого образца (материал с надкостницей, подвергавшийся декальцинации) была аналогичной образцам № 2 для оценки кровоснабжения десны, однако методу забора материала были присущи все недостатки, как и в случае 3 образца. Проведение декальцинации три-лоном В, в отличие от декальцинации концентрированной серной кислотой, не ухудшает качество информативности гистологического препарата, хотя и является более трудоемким и затратным процессом, требующим наличия специальных реагентов, в отличие от исследования без декальцинации. Для выживания лоскута на оголенной поверхности корня также имеет значение толщина лоскута. Достоверно оценить толщину лоскута с помощью окуляр-микрометра можно только в образце № 4, где верхней границей для измерения является наружная поверхность эпителия десны, а нижней — поверхностные отделы надкостницы.
Вывод
Таким образом, для оценки интенсивности васкуляризации десны наиболее целесообразен глубокий забор ткани при помощи скальпеля. В этом случае в исследуемом материале определяется достаточное количество собственно слизистой, что позволяет оценить интенсивность кровоснабжения лоскута, а также забор ткани десны таким методом минимизирует травму для животного.
Если же необходима комплексная оценка качества десневой ткани, что подразумевает исследование не только интенсивности кровоснабжения десны, но и измерение ее толщины, то необходим забор слизисто-надкостничного лоскута путем тупого отслоения после рассечения ткани до кости, с проведением декальцинации образцов в трилоне В. Данная техника позволит получить наиболее информативный материал для исследования при минимальном количестве артефактов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Февралева А.Ю., Давидян A.JL Устранение рецессий десны: планирование, лечение, прогноз. — Москва. ПолиМе-диаПресс. — 2007. — 150 с.
2. Cohen E.S. Атлас косметической и реконструктивной пародонтальной хирургии (2 издание). — Lippincott, 1989. —424 с.
3. Neweman M.G., Takei Н.Н., Klokkevold PR. Carranzas clinical periodontology. (Tenth Edition). — W.B/Saunders Co., 2006. — 1286 c.
4. Sato N. Пародонтальная хирургия: клинический атлас. — Quintessence. — 2000. — 447 с.
5. Вольф Е.М. & К.Г. Ратейцхак. Пародонтология, перевод с нем под. ред. проф. Е.М.Барера. — М.: Медпресс-ин-форм. — 2008. — 548 с.
6. Дмитриева Л.А. Пародонтит. — Москва Медпресс-ин-форм. — 2007. — 500 с.
7. Neweman M.G., Takei &Н, Klokkevold PR. Carranzas clinical periodontology. (Tenth Edition). — W.B/Saunders Co., 2006. — 1286 c.
«КРИСТАЛЛ-УРАЛ»
ПРОДАЖА , |
СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ ^
МАТЕРИАЛОВ И ИНСТРУМЕНТОВ
Ждем Вас по новому адресу и ознакомиться с катим ассортиментом г Екатеринбург, ул. 8 Марта, ВО Тел ./факс: (343) 257-ЗЫ2, £57-31-14
Жцри Ваших заявок по тел.: (343) 257-31 -12, 257-31-14 будем рады взаимовыгодному сотрудничеству!
Прошміі (томішогнн. 2010. No 2
ДОБРО ПОЖАЛОВАТЬ В ТРЕТЬЕ ИЗМЕРЕНИЕ! ВМЕСТЕ С GALILEOS
Широкий спектр задач за одно сканирование. Исключительное качество диагностики.
УРАЛКВАДРОМЕД
Россия, 620026, г, Екотеринбург, ул. Бажова, 1 93, офис 4 1 О Теп ./факс: (343) 262-71-60 Тол.: (343) 262-В7-50, 262-75-52, 262-88-51, 262-47-93,
262-37-в1
E-mail; info^jqm.ru Сайт: www,UQM,ru
Фнлиол в Челябинске;
454QV1, г, Челябинск, уп. Плеханова, д. 1 9, кв. 4 Тел./фокс: {351] 264-24-27, тел. 266-20-69 E-moil; CbelffvadroMecf^lnbax.ru
www.sirona.ru
Трехмерная диагностика от компании ЗЕНОИА устанавливает совершенно новые стандарты в стоматологической практике: полностью диагностируемый объем при небольшой дозе облучен ия. И мпл антологи я, челюстно-лицевая хирургия, ортопедия -широкое применение с возможностью получения превосходных трехмерных изображений, проведения панорамной, цефало-метрической и Т5А-съемки с отображением большого объема с высоким разрешением деталей. Уникальное интуитивно понятное программное обеспечение позволяет легко перейти от 30-сканирования к диагностике и планированию имплантологического лечения. Экспорт информации в формате 01С0М позволяет просто и эффективно использовать полученные данные в любом другом диагностическом программном обеспечении. Вы можете быть уверенными, что: Все получится. Вместе с 51гопа.
unit!
