CC BY
72
УДК 619:636.4
ВТОРИЧНЫЕ ИММУНОДЕФИЦИТЫ СВИНЕЙ: КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ПРИНЦИПЫ ИММУНОКОРРЕКЦИИ
ПОПОВ В.С.,
доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник лаборатории «Ветеринарная медицина» Федерального государственного бюджетного научного учреждения Курский научно-исследовательский институт агропромышленного производства, e-mail: viktor.stugen@yandex.ru.
САМБУРОВ Н.В.,
доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры разведения сельскохозяйственных животных и зоогигиена ФГБОУ ВО Курская ГСХА, e-mail: samburov_nv@rambler.ru.
ВОРОБЬЕВА Н.В.,
кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник лаборатории «Ветеринарная медицина» Федерального государственного бюджетного научного учреждения Курский научно-исследовательский институт агропромышленного производства, e-mail: v.nelli.v.@yandex.ru.
ЗОРИКОВА А.А.,
кандидат сельскохозяйственных наук, ведущий зоотехник дирекции по свиноводству ООО «ГК Агробелогорье».
Реферат. Развитие вторичных иммунодефицитных состояний организма у свиней их течение и профилактика одна из актуальных проблем промышленного свиноводства. Иммунодефициты у растущего молодняка свиней проявляются повышенной заболеваемостью. В условиях свинокомплекса у поросят-сосунов изучен видовой состав условно-патогенной микрофлоры и влияние иммуномодулирующего препарата в сочетании с антигенами на формирование клеточных факторов иммунитета у супоросных свиноматок. Результаты опыта показали взаимосвязь условно-патогенной микрофлоры с возникновением желудочно-кишечных заболеваний у поросят-сосунов и развития вторичных иммунодефицитов бактериальной этиологии. Предложен эффективный способ профилактики неспецифической и специфической иммунокоррекции организма супоросных свиноматок иммуностимулятором ме-таллосукцинат в сочетании с бактериальными антигенами. Применение металлосукцината в сочетании с антигенами увеличивает активность синтеза Т-лимфоцитов от 30,9% до 55,4%, при этом наблюдается положительная тенденция роста В-лимфоцитов в пределах 36,6% - 47,0% в периоды контрольных исследований.
Ключевые слова: поросята-сосуны, условно-патогенная микрофлора, металлосукцинат, иммунокоррекция.
SECONDARY IMMUNODEFICIENCY SWINE: CLINICAL AND IMMUNOLOGICAL CHARACTERISTICS AND PRINCIPLES OF IMMUNOCORRECTION
POPOV V. S.,
Doctor of Veterinary Medicine, senior scientific worker of veterinary laboratory, Federal state budgetary scientific establishment. Kursk scientific research Institute of agro-industrial production, e-mail: victor.stugen@yandex.ru.
SAMBUROV N. V.,
Doctor of Biology, professor, the department of breeding farm animals and zoo-hygiene, Kursk state agricultural I.Ivanov Academy, e-mail: samburov nv@rambler.ru. VOROBIEVA N.V.,
Candidate of Veterinary Medicine, senior scientific worker of veterinary laboratory, Federal state budgetary scientific establishment. Kursk scientific research Institute of agro-industrial production, e-mail: v.nelli.v.@yandex.ru.
ZORIKOVA A. A.,
Candidate of Agricultural Sciences, the leading livestock management in pig breeding LLC «GC Agrobelogore».
Essay. The development of secondary immunodeficiency states of the organism in pigs, their treatment and prevention of one of the urgent problems of the industrial pig farming. Immunodeficiencies growing young pigs are showing increased morbidity. The conditions at the pig suckling piglets investigated species composition of pathogenic microflora and the influence of immunomodulatory drug in combination with antigens in the formation of cellular immunity factors in pregnant sows. The test results showed the relationship of conditionally pathogenic microflora of gastrointestinal diseases in suckling piglets and development of secondary immunodeficiency bacterial etiology. An effective method of preventing non-specific and specific immune organism sows metallosuktsinat immunostimulant combined with bacterial antigens. The use metalsuccinate in combination with antigens enhances T-lymphocyte activity against the synthesis of 30,9% to 55,4%, with a positive trend in growth of B lymphocytes within 36,6% - 47,0% in the control study periods.
Key words. Piglets suckling, conditionally pathogenic microflora, metallosuktsinat, immunotherapy.
Введение. Практика современного промышленного нарушений метаболизма, проявляющихся иммуноде-свиноводства свидетельствует о массовом характере прессивным состоянием организма у супоросных сви-
номаток и поросят-сосунов. Различные ассоциации и активность условно-патогенной микрофлоры у поросят-сосунов и супоросных свиноматок, усиливают проявление физиологического иммунодефицита. Коррекция нарушенного состояния иммунной системы осуществляется с помощью иммунотропных лекарственных средств, лечебный эффект которых связан с преимущественным или селективным действием на иммунную систему организма. Иммуномодуляторы оказывают разнонаправленное воздействие на иммунную систему, в связи, с чем их применяют в комплексной профилактике бактериальных инфекций.
Важнейшей функцией иммунной системы является сохранение постоянства внутренней среды организма. Вторичные иммунодефицитные состояния имеют приобретенный характер и обусловлены воздействием на организм животных вирусов, бактерий, неадекватного обмена веществ. В зависимости от степени нарушений и локализации дефектов различают гуморальные имму-нодифициты (ИД), когда с регистрируются нарушения В-системы иммунитета, иммунодефицитные состояния с преимущественным дефектом Т-клеточного иммунитета и комбинированные ИД, сопровождающиеся поражением клеточных и гуморальных звеньев иммунитета [1, 2, 3]. При этом важным фактором в этиологии иммунодифицитов является видовой состав и активность условно-патогенной микрофлоры в организме поросят-сосунов и подсосных свиноматок. Специфическая иммунокоррекция (вакцинация) на таком фоне не достигает желаемого результата и может привести к отрицательному результату [4, 5, 6].
Цель работы заключалась в изучении видового состава условно-патогенной микрофлоры поросят-сосунов и влияние иммуномодулирующего препарата в сочетании с бактериальными антигенами на формирование клеточных факторов иммунитета у супоросных свиноматок.
Материал и методы. Исследования проведены на свинокомплексе ООО «Племенное» Воловского района Липецкой области. В первой серии опытов у 3-7 cуточных больных поросят (п=29) отбирались фекалии и кровь для бактериологических анализов, а у вынужденно забитых и павших поросят (п=50) с клиническими признаками диареи были отобраны образцы печени, почек, брыжеечных лимфоузлов, легких, селезенки, а из сердца крови.
Посевы патологического материала проводили на МПБ и чашки с МПА, среду Эндо, далее их инкубировали в термостате при 37°С в аэробных условиях. После 24-часовой инкубации изучали культуральные, морфологические и гемолитические свойства микроорганизмов. Повторный учет роста бактерий проводили через 24 часа. По 3 -5 типичных колонии микроорганизмов отсевали на МПА с 10% сыворотки крови барана для дальнейшего изучения. У выделенных чистых культур бактерий изучали морфологические, тинктори-альные, культурально-биохимические свойства по общепринятым методам. Патогенность выделенных культур определяли на белых мышах. Видовую принадлежность бактерий устанавливали с помощью определителя D. Bergey и М.А. Сидорова [7, 8].
Во второй серии опытов из супоросных свиноматок аналогов сформировали 4 группы животных (3 опытных и 1 контрольная) по 10 голов в каждой. Свиноматкам первой группы с интервалом в 10 дней на 60, 70 и 80 сутки супоросности вводили внутримышечно метал-
лосукцинат в дозе 5,0 мл [9]. В эти же сроки провели вакцинацию свиноматок второй группы против общих кишечных заболеваний (ОКЗ) инактивированной формалином вакциной, содержащей в своем составе антигены: E.coli 09:K99, E.coli 0138K:88, Salmonela dublin, Salmonela enteritidis, Salmonela typhimurium, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis. Свиноматок третьей группы иммунизировали по аналогичной схеме вакциной ППС в сочетании с металлосукцинатом в дозе 5,0 мл. Вакцина содержит в своем составе культуры Sal. cholerae suis, Sal. typhimurium, Pasteurella multocida (серовары А, В, Д) и стрептококков (серо-группы C и R). Четвертая группа была контрольной и вакцинации не подвергалась, им вводили изотонический раствор натрия хлорида в дозе 5,0 мл.
Кровь у свиноматок для лабораторных исследований отбирали до введения биопрепаратов, через 10 дней после первой и второй обработок и на 100 сутки супорос-ности. Количество Т-лимфоцитов определяли в реакциях спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК, %), а В-лимфоцитов - методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК, %) с эритроцитами мыши (И.М. Карпуть, 1993). Абсолютные количества клеток рассчитывали на основе данных об абсолютном количестве и проценте розеткообразующих лимфоцитов.
Результаты и обсуждение. Проведенный анализ видового состава возбудителей желудочно-кишечных заболеваний поросят-сосунов 1- 30-суточного возраста позволил сделать вывод о том, что одной из ведущих причин, обусловливающих возникновение ассоциированных желудочно-кишечных инфекций с симптомо-комплексом диареи, сопровождающимся нервными явлениями, является иммунодефицитное состояние организма животных, обусловленное активизацией условно-патогенной микрофлоры.
При бактериологическом исследовании материала от больных поросят установлено, что энтеропатогенные и энтеротоксигенные эшерихии, как возбудители моноинфекций, встречались в 41,7% случаев. Вместе с тем, в большинстве случаев выделялись ассоциации эшерихии -протей - цитробактер - стрептококки - 11,7%, эшерихии -цитробактер - протей - 18,2%, эшерихии - протей - 11,9%, эшерихии - цитробактер - 12,7% (рисунок 1).
Исследованиями патологического материала с диагностической целью от павших и вынужденно забитых поросят с диарейным синдромом выделены и идентифицированы более 239 культур микроорганизмов, которые по морфологическим и культурально-биохимическим свойствам относились в основном к следующим видам: Esherichia соИ (59,7%), Proteus vulgaris (11,3%), Citrobacter freundii (15,0%), Streptococcus faecalis (9,0%) (рисунок 2).
Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что большинство, выделенных культур микроорганизмов представлены ассоциациями в различных сочетаниях. В связи с этим приоритетным направлением предупреждения смешанных инфекций является иммунопрофилактика свиноматок и поросят с применением предварительной неспецифической иммуномодуляции животных или в сочетании с антигенами при специфической иммунокоррекции.
Изучение клеточной системы иммунитета подопытных свиноматок выявило стимулирующее действие металлосукцината как при моно применении, так и в сочетании с вакциной (рисунок 3).
Обработка животных первой опытной группы препаратом позволила через 10 суток повысить количество Т-лимфоцитов в крови на 36,4% по сравнению с фоновым уровнем или на 1,35 109/л выше, чем в контроле. После повторного введения металлосукцината количе-
ство Т-клеток выросло до 5,37 10 /л, что на 50,4% выше показателя до начала опыта. В дальнейшем к 100 суткам супоросности численность Т-лимфоцитов несколько снизилась и составила 5,19109/л.
45
41,7
18,2 11,9
11,7 12,7 """-в 4,33
%
эшерихии эшерихии, протеи, эшерихии, эшерихии, протеи эшерихии, другие ассоциации цитробактер, цитробактер, цитробактер
стрептокок протей
Рисунок 1 - Ассоциации условно-патогенной микрофлоры больных поросят
70 60 50 40 30 20 10 0
%
59,7
11,3 15 __■---__ 9
• • • • ---я 5
Escherichia coli Proteus vulgaris Citrobacter
freundii
Streptococcus другие культуры faecalis
Рисунок 2 - Ассоциации условно-патогенной микрофлоры павших и вынужденно убитых поросят
60 дней 70 дней 80 дней 100 дней
□ 1. МС 3,57 4,87 5,37 5,19
□ 2.ОКЗ 3,68 4,95 5,12 4,75
И3.ППС+МС 3,72 4,87 5,78 5,94
О 4.Контроль 3,76 3,52 3,58 4,12
Рисунок 3 - Динамика Т-лимфоцитов (10 /л) в крови супоросных свиноматок
0
3 2,5 2 1,5 1
0,5 0
60 дней 70 дней 80 дней 100 дней
□ 1. МС 1,97 2,91 2,97 2,81
□ 2.ОКЗ 1,94 2,85 2,74 2,73
■ 3.ППС+МС 2,02 2,76 2,97 2,98
□ 4.Контроль 1,96 2,72 2,79 2,34
Рисунок 4 - Динамика B-лимфоцитов (10 /л) в крови супоросных свиноматок
Вакцинация свиноматок второй группы вакциной ОКЗ оказала выраженную тенденцию к увеличению содержания Т-лимфоцитов. На 10 сутки после инъекции количество Т-клеток по сравнению с исходными данными повысилось на 34,5 %. Аналогичная картина наблюдалось и после повторного введения вакцины, когда число Т-лимфоцитов превышало фоновый показатель на 39,1 %. На 100 сутки супоросности, как и в первой группе, отмечали снижения содержание в крови Т-клеток до 4,75 • 109/л.
У свиноматок третьей опытной группы, которым для иммунизации применяли вакцину ППС в сочетании с металлосукцинатом, после первого введения препарата количество Т-лимфоцитов регистрировалось в пределах 4,87 109/л, что на 30,9% выше фонового значения. На 80 и 100 сутки супоросности численность Т-клеток была наибольшей при сравнении с показателями первой и второй опытных групп.
Результаты животных контрольной группы заметно отличались от опытных. Так на 70 сутки супоросности установлено снижение содержания в крови Т-лимфоцитов до 3,52 109/л, затем (80 сутки) небольшое увеличение. К концу же опыта показатель значительно уступал опытным группам.
Количественные изменения уровня В-лимфоцитов в крови свиноматок представлены в таблице 4. Как показывает её анализ, до применения биопрепаратов численность В-клеток по группам отличалась незначительно. Через 10 суток после обработок количество В-лимфоцитов повышалось у животных первой группы на 47,7 %, второй - на 46,9 %, третьей - на 36,6 %, четвертой - на 38,8 %. Повторное введение металлосукцината и вакцин свиноматкам на исследуемый показатель оказало разноплановое влияние. В группе получавших ме-таллосукцинат прирост В-клеток на 80 сутки составил 0,06 109/л, контрольной - 0,07- 109/л, тогда как у животных обработанных вакциной ОКЗ наблюдали снижение на 0,11- 109/л. Сочетанное применение вакцины ППС и металосукцината (3 опытная группа) увеличивало количество В-лимфоцитов до 2,97 109/л (прирост 7,6%),
Список использованных источников
что является абсолютно лучшим показателем среди всех групп. Следует отметить, что содержание В-клеток у животных этой группы оставалось высоким и к 100 суткам супоросности, что оказалось не характерным для двух других опытных групп и контроля. В целом за период опыта количество В-лимфоцитов у свиноматок первой группы увеличилось на 42,6%, второй - на 40,7%, третьей - на 47,5%, контрольной - на 32,2%.
Таким образом, применение металлосукцината при вакцинации свиноматок оказалось вполне обоснованным, поскольку в основе любого патологического или хронического инфекционно-воспалительного процесса лежат изменения в функциональном состоянии иммунной системы. В случаях, когда показано применение антибиотиков, противовирусных средств или других химиотерапевтических препаратов, необходимо назначать и иммуномодуляторы. Наличие в арсенале ветеринарных специалистов иммунотропных препаратов открывает принципиально новые возможности коррекции у животных иммунодефицитных состояний различного генеза, повышает эффективность традиционной терапии и профилактики болезней.
Выводы.
1. Этиологическая структура желудочно-кишечных болезней поросят-сосунов представлена главным образом Esherichia соИ: 41,7-59,7% и ассоциациями в различных сочетаниях.
2. Применение металлосукцината в сочетании с антигенами увеличивает активность синтеза Т-лимфоцитов от 30,9% до 55,4%, при этом наблюдается положительная тенденция роста В-лимфоцитов в пределах 36,6% - 47,0% в периоды контрольных исследований.
3. Установлено повышение степени напряженности противобактериального иммунитета у свиней при применении иммуномодулятора в сочетании с антигенами Sal. choleraesuis, Sal.typhimurium, P. multocida сероваров А, В, Д и Streptococcus серогрупп C и R.
1. Стратегия и принципы иммунокоррекции и иммуномодулирующей терапии / Ю.Н. Федоров, В.И. Клюкина, М.Н. Романенко, О.А. Богомолова, А.Н. Денисенко // Вестник Новгородского государственного университета. -2015.- № 86, ч. 1.- С. 84-87.
2. Самбуров Н.В. Физиологические и иммунологические аспекты применения иммуномодуляторов // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. -2006.- № 1.- С. 41-43.
3. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология.-1999.- № 1.- С. 14-17.
4. Этиологическая структура желудочно-кишечных болезней поросят в специализированных свиноводческих хозяйствах / С.В.Борисенко, Ю.Н. Бригадиров, И.А. Никулин и др. // Вестник Воронежского государственного аграрного университета. - 2013. - № 4.- С. 168-171.
5. Роль иммунного и метаболического статуса в возникновении желудочно-кишечных заболеваний поросят / Ю.Н. Бригадиров, Б.Т. Артёмов, П.Е. Лаврищев и др. // Вестник РАСХН. - 2009. -№ 4.- С. 65- 67.
6. Skrebnev S.A. Effectiveness of the immune-metabolic preparations in the reproductive cycle of pregnant sows / S.A. Skrebnev, E.N. Skrebneva, V.N. Masalov, B.L.Belkin, V.V. Sazonova // Vestnic OrelGAU.- 2015. - № 1 (52). - Р. 90-92.
7. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. - М.: Колос, 1995.- 319 с.
8. Bergey D. Manual of determinative bacteriology / D. Bergey. -Baltimore: Williams and Wilkins Company. - 1974. -1264 p.
9. Патент РФ № 2351323 от 10.04.2009 г. «Способ получения комплексного препарата для профилактики и лечения нарушений обмена веществ, микроэлементозов, повышения резистентности организма животных». Лебедев А.Ф., Евглевский А.А., Попов В.С. и др. Бюл. № 10.
List of sources used
1. The strategy and principles and immune therapies / Y.N. Fedorov, V.I. Klyukina, M.N. Romanenko, O.A. Bogomolov, A.N. Denisenko // Vestnik Novgorod State universiteta.- 2015.- № 86, hours. 1.- P. 84-87.
2. Samburov N.V. The physiological and immunological aspects of the use of immunomodulators // Reports of the Russian Academy of Agricultural Sciences. -2006.- № 1.- P. 41-43.
3. Khaitov P.M., Pinegin B.V. Secondary immunodeficiencies: clinical features, diagnosis, treatment // Immunologiya.-1999.- № 1.- P 14-17.
4. Borisenko S.V. The etiological structure of gastrointestinal diseases of pigs in specialized pig farms / S.V.Borisenko, Y.N. Brigadierov, I.A. Nikulin, N.A. Borisenko, N.A. Khrenova // Bulletin of Voronezh State Agrarian University. - 2013.-№ 4.- P. 168-171.
5. The role of the immune and metabolic status in the occurrence of gastro-intestinal diseases, for piglets /Y.U. Brigadierov., BT Artemov, P.E. Lavrischev, A.G. Shakhov, M.I. Retsky, Y.N. Masyanov, L.Y. Sashnina, V.I. Shushlebin // Bulletin of Agricultural Sciences. - 2009. -№ 4. -P. 65- 67.
6. Skrebnev S.A. Effectiveness of the immune-metabolic preparations in the reproductive cycle of pregnant sows / S.A. Skrebnev, E.N. Skrebneva, V.N. Masalov, B.L.Belkin, V.V. Sazonova // Vestnic OrelGAU.- 2015. - № 1 (52).-
Р. 90-92.
7. Sidorov M.A. Determinant of zoopatogennyh microorganisms / M.A. Sidorov, D.I.Skorodumov, V.B. Fedotov. -M .: Kolos, 1995.- 319 p.
8. Bergey D. Manual of determinative bacteriology / D. Bergey. -Baltimore: Williams and Wilkins Company. - 1974.1264 p.
9. RF Patent № 2351323 from 10.04.2009, «The process for preparing a complex of the drug for the prevention and treatment of metabolic disorders, microelementoses, increasing resistance of the organism of animals». A.F. Lebedev, A.A. Yevglevsky, V.S. Popov et al. Bull. № 10.
