CC BY
10
as a source for obtaining a flap. One vein accompanies the artery of the same name. All the veins of the omentum have a larger diameter than the arteries. In 15% of the cases greater omentum is quadrangular, in 25% of the cases is triangular and in 60% it is of irregular shape with two or more parts. In the one-part omentum, the left and right parts have the same blood supply. At the two-part structure, the right half is in more favourable condition in terms of the blood supply that enables to recommend its usage in transplantation surgery.
DOI 10.31718/2077-1096.21.2.175 УДК 616.716.4: 616.316:599.323.4
Швайковська О.О., Денисенко С.В., Костенко В.О. ВПЛИВ ВОДОРОЗЧИННОÏ ФОРМИ КВЕРЦЕТИНУ НА ПОКАЗНИКИ ОКИСНО-Н1ТРОЗАТИВНОГО СТРЕСУ В ТКАНИНАХ П1ДНИЖНЬОЩЕЛЕПНИХ СЛИННИХ ЗАЛОЗ ЩУР1В ЗА УМОВ ЛIПОПОЛIСАХАРИД-IНДУКОВАНОÏ
СИСТЕМНОÏ ЗАПАЛЬНОÏ В1ДПОВ1Д1
Полтавський державний медичний ушверситет
Метою роботи було з'ясування впливу водорозчинно'У форми кверцетину на показники окисно-штрозативного стресу в тканинах пднижньощелепних слинних залоз (СЗ) за умов лпополюахарид-'¡ндуковано'У системно!' запально'У в'дпов'д (СЗВ). Дослiдження проводили на 30 блих щурах-самцях лш Встар масою 180-220 г, розподлених на 3 групи: 1-ша - 1нтактн'1 тварини, 2-га - псля системного введення л'топол'юахариду Salmonella typhi, 3-тя - тваринам внутршньоочеревинно вводили водорозчинний комплекс кверцетину з полiвiнiлпiролiдоном (корвтин) у дозi 100 мг/кг (10 мг/кг у пе-рерахунку на кверцетин) раз на 3 доби, починаючи з 30 доби експерименту з застосуванням лпопо-лсахариду S. typhi. ОстаннШ вводили в дозi 0,4 мкг/кг маси протягом 1-го тижня 3 рази, протягом наступних 7-ми тижнв - 1 раз у тиждень. Виявлено, що застосування кверцетину за умов СЗВ об-межуе у тканинах СЗ утворення активних форм оксигену: знижуе нестимульовану продук^ю супероксидного анон-радикала, його iндуковану генера^ю при введены NADPH (мкросомами та NO-синтазою), NADH (мiтохондрiями), л'попол'юахариду S. typhi (NADPH-оксидазою лейкоцитiв). Введення кверцетину на тлi СЗВ знижуе ознаки штрозативного стресу в тканинах СЗ, що пдтвер-джуеться зменшенням у них iндуцибельно'У NO-синтазноУ активностi (без iстотних зм/'н активностi орнтиндекарбоксилази та р'тня спряженостi конститутивноУ iзоформи NO-синтази), зниженням концентрацИ високоактивного пероксинiтриту, але без в'рог'дного зрушення вмсту S-штрозот'юл'т.
Ключов1 слова: кверцетин, лтополюахарид, системна запальна вщповщь, окисно-ытрозативний стрес, слинн залози.
Робота е фрагментом НДР Робота «Роль транскрипцшних факторiв, системи циркадiанного осцилятора та метаболiч-них розладiв в утвореннi та функцiонуваннi патологiчних систем» (№ держреестрацп 0119U103898).
До порушень структури та функцп СЗ призво-дить низка соматичних захворювань, розвиток яких включае як ланку патогенезу системну за-пальну вщповщь (СЗВ). Так, аалоадешти, особливо штерсти^альну виявляються при хiрурriч-нш патологи рiзноТ локалiзацN, атеросклерозу артерiальнiй ппертензп, хрошчному гастриту холецистит та ш., а також при асоцшованш з вком патологи [1, 2].
Рашше нами показано роль редоксчутливих транскрипцшних факторiв у мехаызмах розвитку окисно-штрозативного стресу в слинних залозах (СЗ) та деструкцп в них сполучноТ тканини [3-5]. Виявлено, що, застосування шпбп~ора ядерноТ транслокацп NF-kB амошю тролщиндитюкарба-мату за умов системного введення лтополюа-хариду Salmonella typhi обмежуе у тканинах пщ-нижньощелепних СЗ щурiв утворення активних форм оксигену та штрогену: знижуе швидкють продукцп супероксидного анюн-радикала, змен-шуе активнють NO-синтази та концентрацш пе-роксиштрит-йошв [5].
Введення ефекти шдуктора сигнальноТ сис-
теми Keap1 / Nrf2 / антиоксидант-респонсивний елемент етгалокатехш-3-галату при вщтворенш СЗВ також виявилось ефективним засобом ко-рекцп окисно-штрозативного стресу в тканинах шднижньощелепних СЗ щурiв, обмежуе в них деполiмеризацiю колагену, протеоглкашв та rni-копроте'^в, що пщтверджуеться зменшенням концентрацп |'хшх складових - втьного оксипро-лшу, гткозамшоглкашв i ^ацетилнейрамшово'Г кислоти [3, 4].
Нещодавно була доведена здатнють кверцетину гальмувати активацш NF-kB шляхом при-гшчення уб^тин-залежного протеасомного протеолiзу шпбторного бтка IkB [6]. Це створюе передумови для усунення можливост експресп NF-кВ-залежних гешв [7]. Бтьше того, кверцетин може захищати вщ шдукованого NF-kB окис-ного та штрозативного стресу завдяки опосеред-кованш Nrf2 шдукци гемоксигенази-1, що супро-воджуеться iнактивацiею NF-kB [8].
Проте закономiрностi позитивно!' дм кверцетину на тканини Сз залишаються з'ясованими недостатньо.
Метою роботи було дослщження впливу во-дорозчинно'Г форми кверцетину на показники окисно-штрозативного стресу, в тканинах пщни-жньощелепних СЗ за умов лтополюахарид-шдуковано'Г системно!' запально'1 вiдповiдi.
Матерiал та методи дослiдження
Дослiдження були проведет на 30 бтих щу-рах-самцях лшп Вiстар масою 180-220 г, розпо-дiлених на 3 групи: 1-шу - iнтактнi тварини, 2-гу - пiсля системного введення лтополюахариду Salmonella typhi (препарат «^рогенал», фiрма «Медгамал», Роая), 3-тю - тваринам внутрш ньоочеревинно вводили водорозчинний комплекс кверцетину з полiвiнiлпiролiдоном (корвн тин) виробництва ЗАТ НВЦ "Борщапвський ХФЗ", Украша) у дозi 100 мг/кг (10 мг/кг у пере-рахунку на кверцетин) раз на 3 доби [9], почи-наючи з 30 доби експерименту з застосуванням шрогеналу. Останнiй вводили в дозi 0,4 мкг/кг маси протягом 1-го тижня 3 рази, протягом на-ступних 7-ми тижшв - 1 раз у тиждень [10]. При проведены дослщження керувалися принципами бюмедично'Г етики. Тварин декаштували пщ ефi-рним наркозом.
Утворення супероксидного анюн-радикала
(О2 ) оцiнювали при проведены тесту з ытроси-жм тетразолieм з використанням спектрофотометру Ulab у гомогенатi тканин з шдукторами у виглядi NADH - для оцшки продукцп САР мто-хондрiальним електронно-транспортним ланцю-гом), NADPH - ендоплазматичним ретикулумом i NO-синтазою (NOS), пiрогеналу - NADPH-оксидазою лейкоцитiв [11].
Загальну активнiсть NO-синтази (NOS) ви-значали за рiзницею концентрацп нiтрит-iонiв до та жсля шкубацп гомогенату пщнижньощелеп-них СЗ у середовищ^ що мiстить L-арпжн та
NADPH [12]. Для визначення активност консти-тутивних iзоферментiв (cNOS) додавали 1% розчин амiногуанiдину гщрохлориду (98%, "Sigma-Aldrich, Inc.", США) [13]. Активнють шду-цибельно'Г iзоформи (iNOS) розраховували шляхом вiднiмання активност cNOS вiд загально'1 активностi NOS. Розраховували шдекс спряжен-ня cNOS як вiдношення активностi cNOS до ве-
личини продукци' О 2 NADPH-залежними елект-ронно-транспортними ланцюгами [14]. Концент-рацiю пероксинiтритiв лужних та лужно-земельних металiв [12] та S-нiтрозотiолiв [15] у гомогенатi пщнижньощелепних СЗ визначали спектрофотометрично.
Статистичнi розрахунки проводили з використанням пакету програм Microsoft Office Excel з розширенням Real Statistics. Для перевiрки розподту на нормальнiсть було застосовано розра-хунок критерiю Шапiро-Уiлка. Якщо ряди вщпо-вiдали нормальному розподту, то для Тх порiв-няння використовували критерш t Стьюдента для незалежних вибiрок. У разi, коли результати не пщлягали нормальному розподту, статисти-чну обробку здiйснювали, використовуючи непа-раметричний метод - тест Мана-В^ж.
Результати дослiдження та ïx обговорення
Змiни показникiв окисно-нiтрозативного стресу в тканинах пiднижньощелепних СЗ при мо-делюваннi ЛПСчндукованоГ СЗВ ми обговорю-вали у попереджх працях [5, 10].
Введення кверцетину достовiрно зменшувало
нестимульовану продукцiю О2 у тканинах пщ-нижньощелепних СЗ за умов LPS-iндукованоï СЗВ (рис. 1) до 1.59±0.06 нмоль/сг (на 17.6%, p<0.05).
2,5 -
1,5 -
0,5 -
2
0
2
3
Рис. 1. Нестимульована продукция О 2 (нмоль/с г) у тканинах пднижньощелепних слинних залоз контрольних тварин (1), псля в/дтворення LPS-iндукованоï системноï запальноТ в1дпов1д1 (2) та введення на тлi iï моделювання кверцетину (3).
Рис. 2. NADPH-iндукована продук^я О 2 (нмоль/сг) у тканинах пiднижньощелепних слинних залоз контрольних тварин (1), тсля вiдтворення LPS-iндукованоíсистемноГзапальноГ в'дпов'д (2) та введення на тлi ГГмоделювання кверцетину (3).
&
^ 15
1
1
1 2 3
Рис. 3. NADH-iндукована продукция О 2 (нмоль/с г) у тканинах пiднижньощелепних слинних залоз контрольних тварин (1), тсля вiдтворення LPS-iндукованоí системноГ запальноГ в'дпов'д (2) та введення на тлi ГГ моделювання кверцетину (3).
4
3,5
1
0,5 0
ЧЬ
—|—
Рис. 4. LPS-iндукована продук^я О 2 (нмоль/с г) NADPH-оксидазою лейкоцитiв у тканинах пiднижньощелепних слинних залоз контрольних тварин (1), псля вiдтворення LPS-iндукованоí системноГ запальноГ вiдповiдi (2) та введення на тлi ГГ моделювання кверцетину (3).
5
0
3
2,5
с 2
1,5
2
3
Застосування кверцетину вiрогiдно зменшу-
вало NADPH-шдуковану продукцш О2 ^кро-сомами та NOS) у тканинах шднижньощелепних СЗ за умов LPS-шдуковано''' СЗВ (рис. 2) до 17.07±0.39 нмоль/с г (на 17.8%, p<0.01).
Введення кверцетину достовiрно зменшувало
NADH-iндуковану продукцiю О2 (мiтохондрiями) у тканинах шднижньощелепних СЗ за умов LPS-шдуковано''' СЗВ (рис. 3) до 20.69±0.49 нмоль/сг (на 19.6%, p<0.01).
Застосування кверцетину вiрогiдно зменшувало також LPS-шдуковану продукцiю О2 NADPH-оксидазою лейкоцитiв у тканинах пiдни-
жньощелепних СЗ за умов СЗВ (рис. 4) до 2.06±0.04 нмоль/с г (на 37.2%, p<0.01).
Проте здатнiсть кверцетину позитивно впли-вати на NO-синтазно-арпназу систему суттево не в^^зняеться вiд тако' дiï шролщиндитюкар-бамату амонiю та епiгалокатехiн-3-галату [3, 5].
За нашими даними, застосування кверцетину вiрогiдно зменшувало загальну активнють NOS та активнiсть и шдуцибельно' iзоформи у тканинах шднижньощелепних СЗ за умов СЗВ (див. табл.) на 26.0% (p<0.01) на 27.6% (p<0.01), вщ-повiдно.
Таблиця
Вплив кверцетину на активнють NO-синтази в тканинах пiднижньощелепних слинних залоз за умов вiдтворення LPS-iндукованоï системноï запальноТ в'дпов'д (M+m, n=15)
Групи дослав Активнють NO-синтази, мкмоль(1\Ю 2 )/хвтбтка
Загальна Конститутивш 1ндуцибельна
1нтактш тварини 7.27±0.52 0.62±0.04 6.66±0.55
LPS-шдукована СЗВ 13.56±0.86 * 0.29±0.05 * 13.27±0.82 *
Застосування кверцетину на mi LPS-шдуковано''' СЗВ 10.04±0.60 ** 0.43±0.11 9.61±0.61 *,**
Примimка: 1) * - р<0.05 порiвняно з контролем (iнтактнi тварини); 2) ** - р<0.05 порiвняно з даними 2-Ï групи.
За цих умов активнють cNOS не зазнавала вiрогiдних змш.
1ндекс спряження cNOS у СЗ при введенш кверцетину на ™i LPS-шдуковано''' СЗВ також вн рогщно не змшювався (рис. 5), що вказуе на не-
безпеку вироблення cNOS О2 замють NO.
Звертае на себе увагу вщсутнють достовiрних вщмшностей мiж активнiстю орштиндекарбокси-лази у тканинах шднижньощелепних СЗ (рис. 6) при застосуванн кверцетину на ™i LPS-шдуковано''' СЗВ (257.4±29.1 нмоль/гхв) та вщ-повiдним результатом 2-'' групи.
0,05 -0,045 -0,04 -0,035 -0,03 -0,025 -0,02 -0,015 -0,01 -0,005 -0
2
3
Рис. 5.1ндекс спряження cNOS у тканинах пiднижньощелепних слинних залоз контрольних тварин (1), псля вiдmворення LPS-iндукованоï системноï запальноТ вiдповiдi (2) та введення на mлi iï моделювання кверцетину (3).
Рис. 6. Активнсть орнтиндекарбоксилази у тканинах пiднижньош,елепних слинних залоз контрольних тварин (1), псля вiдтворення LPS-iндукованоí системноГ запальноГ вiдповiдi (2) та введення на тлi ГГ моделювання кверцетину (3).
1
1
—1—
Рис. 7. Концентра^я пероксинiтритiв лужних та лужно-земельних металiв у тканинах пiднижньошелепних слинних залоз контрольних тварин (1), псля вiдтворення LPS-iндукованоГ системноГ запальноГ вiдповiдi (2) та введення на тлi ГГ моделювання кверцетину (3).
Застосування кверцетину суттево зменшува-ло утворення в тканинах пщнижньощелепних СЗ за умов СЗВ найбтьш токсичного метабол^у N0 - пероксиштриту, що пщтверджувалося зни-женням концентраци пероксиштри^в лужних та лужно-земельних металiв (рис. 7) - до 1.15±0.06
мкмоль/г, що на 55.1% (р<0.02) поступалося результату 2-1 групи.
Проте вмют S-нiтрозотiолiв у тканинах пщнижньощелепних СЗ за цих умов (рис. 8) становив 0.71±0.03 мкмоль/г, що вiрогiдно не в^знялося вщ даних 2-1 групи.
Рис. 8. Концентра^я S-нiтрозотiолiв у тканинах пiднижньошелепних слинних залоз контрольних тварин (1), тсля в'дтво-рення LPS-iндукованоГ системноГ запальноГ вiдповiдi (2) та введення на тлi ГГ моделювання кверцетину (3).
3
2,5
2
° 1,5
0,5
0
2
3
Вщомо, що активы форми оксигену та ытро-гену, що утворюються у динамiцi СЗВ, е засоба-ми регулювання редоксчутливих транскрипцш-них чинниш (NF-kB, Nrf2, AP-1 та ш.), змiни ак-тивностi яких впливають не лише на окисний обмш у СЗ, але i в шших органах [13, 14, 16, 17].
Здатнють кверцетину пригнiчувати NF-kB-асоцiйованi вiльнорадикальнi процеси у тканинах [18] та посилювати Nrf2-mediated процеси, пов'язанi з експресiею залежних вщ антиокси-дант-респонсивного елементу геыв [17]. Згiдно з результатами нашого дослiдження, кверцетин ефективно обмежуе розвиток окисно-нiтрозативного стресу в тканинах СЗ шсля моделювання лтополюахаридчндуковано!' СЗВ. З iншого боку, цей флавонощ може гальмувати розвиток окисного стресу, пригшчуючи актив-нiсть ферметчв, що беруть участь у деградацп фосфолiпiдiв (фосфолiпази, лiпоксигенази, цик-лооксигенази) [9].
Висновки
1. Застосування водорозчинно!' форми кверцетину за умов лтополюахаридчндуковано!' системно!' запально!' вщпов^д обмежуе у тканинах пiднижньощелепних слинних залоз щурiв утво-рення активних форм оксигену: знижуе нестиму-льовану продукцш супероксидного анюн-радикала, його шдуковану генерацiю при вве-денн NADPH (мiкросомами та NOS), NADH (мн тохондрiями), лiпополiсахариду Salmonella typhi (NADPH-оксидазою лейкоцитiв).
2. Введення водорозчинно!' форми кверцетину на ™i лтополюахаридчндуковано!' системно!' запально!' вiдповiдi знижуе ознаки штрозативно-го стресу в тканинах пщнижньощелепних слинних залоз щурiв, що пщтверджуеться зменшен-ням у них шдуцибельно!' NO-синтазно!' активнос-тi (без iстотних змiн активност орштиндекарбок-силази та рiвня спряженост конститутивно!' iзо-форми NO-синтази), зниженням концентраци високоактивного пероксиштриту, але без вiрогi-дного зрушення вмiсту S-нiтрозотiолiв.
Лiтература
1. Afanas'yev VV, Mirzakulova UR. Slyunnyye zhelezy. Bolezni i travmy: rukovodstvo dlya vrachey [Salivary glands. Disease and Injury: A Guide for Physicians]; 2nd ed., rev. and add. Moscow: Geotar-Media; 2016. 320 p. (Russian)
2. Lobeyko VV. Osobennosti patologii slyunnykh zhelez u lits starshikh vozrastnykh grupp [Features of the pathology of the salivary glands in persons of older age groups]. Uspekhi gerontologii. 2014;(4):780-784. (Russian)
3. Yelins'ka AM, Shvaykovs'ka OO, Kostenko VO. Vplyv epihalokatekhinu-3-halatu na produktsiyu aktyvnykh form kysnyu i azotu v tkanynakh parodonta ta slynnykh zaloz shchuriv za umov systemnoyi zapal'noyi vidpovidi [Influence of epigallocatechin-3-gallate on production of reactive oxygen and nitrogen species in tissue of peridontium and salivary glands under systemic inflammatory response in rats]. Farmakolohiya ta likars'ka toksykolohiya. 2018;(1):32-38. (Ukrainian)
4. Yelins'ka AM, Shvaykovs'ka OO, Kostenko VO. Epigallocatechin-3-gallate prevents disruption of connective tissue in periodontium and salivary glands of rats during systemic inflammation. Wiad Lek. 2018;LXXI(4):869-873.
5. Yelins'ka AM, Shvaykovs'ka OO, Kostenko VO. Vplyv pirolidyndytiokarbamatu amoniyu na produktsiyu aktyvnykh form kysnyu i azotu v tkanynakh parodonta ta slynnykh zaloz shchuriv za umov systemnoho vvedennya lipopolisakharydu [Influence of ammonium pyrrolidine dithiocarbamate on the production of reactive oxygen and nitrogen species in tissues of periodontium and salivary glands in rats exposed to Salmonella typhi lipopolisaccharide]. Fiziol Zh. 2018;64(5):63-69. (Ukrainian)
6. Kang CH, Choi YH, Moon SK et al. Quercetin inhibits lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in BV2 microglial cells by suppressing the NF-kB pathway and activating the Nrf2-dependent HO-1 pathway. Int Immunopharmacol. 2013 Nov;17(3):808-813.
7. Liu X, Lin R, Zhao B et al. Correlation between oxidative stress and the NF-kB signaling pathway in the pulmonary tissues of obese asthmatic mice. Mol Med Rep. 2016 Feb;13(2):1127-1134.
8. Kim Y, Kim CS, Joe Y et al. Quercetin Reduces Tumor Necrosis Factor Alpha-Induced Muscle Atrophy by Upregulation of Heme Oxygenase-1. J Med Food. 2018 Jun;21(6):551-559.
9. Khmil' DO, Kostenko VO. Poyednanyy vplyv L-arhininu ta vodorozchynnoyi formy kvertsetynu na markery okysno-nitrozatyvnoho stresu v shkiri shchuriv za umov nadlyshkovoho nadkhodzhennya v orhanizm nitratu natriyu [Combined effect of L-arginine and water-soluble form of quercetin on markers of oxidative-nitrosative stress in skin of rats exposed to excessive sodium nitrate]. Fiziol Zh. 2017; 63(6):53-59. (Ukrainian)
10. Yelins'ka AM, Shvaykovs'ka OO, Kostenko VO. Sources of production of reactive oxygen and nitrogen species in tissues of periodontium and salivary glands of rats under modeled systemic inflammation. Problemy ekologii ta medytsyny. 2017;21(3-4):51-54.
11. Kostenko VO, Tsebrzhins'kii OI. Produktsiya superoksydnoho anion-radykala ta oksydu azotu u tkanyni nyrok pislya khirurhichnoho vtruchannya [Production of superoxide anion radical and nitric oxide in renal tissues sutured with different surgical suture material]. Fiziol Zh. 2000;46(5):56-62. (Ukrainian).
12. Akimov OYe, Kostenko VO. Functioning of nitric oxide cycle in gastric mucosa of rats under excessive combined intake of sodium nitrate and fluoride. Ukr Biochem J. 2016; 88(6):70-75.
13. Yelins'ka AM, Akimov OYe, Kostenko VO. Role of AP-1 transcriptional factor in development of oxidative and nitrosative stress in periodontal tissues during systemic inflammatory response. Ukr Biochim J. 2019;91(1):80-85.
14. Yavtushenko IV, Kostenko VO. Vplyv induktoriv transkryptsiynoho chynnyka Nrf2 na rozvytok okysno-nitrozatyvnoho stresu v tkanyni velykykh pivkul' holovnoho mozku shchuriv pislya modelyuvannya cherepno-mozkovoyi travmy [Influence of Nrf2 transcription factor inducers on the development of oxidative-nitrosative stress in the tissue of cerebral hemispheres in rats after modeled traumatic brain injury]. Ukrayins'kyy zhurnal medytsyny, biolohiyi ta sportu. 2020; 5(4):117-123. (Ukrainian).
15. Gaston B, Reilly J, Drazen JM et al. Endogenous nitrogen oxides and bronchodilator S-nitrosothiols in human airways. Proc Natl Acad Sci USA. 1993;90(23):10957-10961.
16. Yavtushenko IV, Kostenko VO. Pryhnichennya transkryptsiynykh chynnykiv NF kappa B ta AP-1 obmezhuye rozvytok okysno-nitrozatyvnoho stresu v tkanyni velykykh pivkul' holovnoho mozku shchuriv pislya vidtvorennya [Inhibition of transcription factors NF kappa B and AP-1 limits the progression of oxidative-nitrosative stress in the tissue of cerebral hemispheres in rats after modelled traumatic brain injury]. Aktual'ni problemy suchasnoyi medytsyny: Visn Ukr med stomatol akad. 2020; 20(1):80-85. (Ukrainian).
17. Yelins'ka AM, Liashenko LI, Kostenko VO. Quercetin potentiates antiradical properties of epigallocatechin-3-gallate in periodontium of rats under systemic and local administration of lipopolisaccharide of Salmonella typhi. Wiad Lek. 2019 Aug 31 ;72(8):1499-1503.
18. Kang CH, Choi YH, Moon SK et al. Quercetin inhibits lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in BV2 microglial cells by suppressing the NF-kB pathway and activating the Nrf2-dependent HO-1 pathway. Int Immunopharmacol. 2013 Nov;17(3):808-813.
Реферат
ВЛИЯНИЕ ВОДОРАСТВОРИМОЙ ФОРМЫ КВЕРЦЕТИНА НА ПОКАЗАТЕЛИ ОКИСЛИТЕЛЬНО-НИТРОЗАТИВНОГО СТРЕССА В ТКАНЯХ ПОДНИЖНЕЧЕЛЮСТНЫХ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ КРЫС В УСЛОВИЯХ ЛИПОПОЛИСАХАРИД-ИНДУЦИРОВАННОГО СИСТЕМНОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОТВЕТА Швайковская А.А., Денисенко С.В., Костенко В.А.
Ключевые слова: кверцетин, липополисахарид, системный воспалительный ответ, окислительно-нитрозативный стресс, слюнные железы.
Целью работы было изучение влияния водорастворимой формы кверцетина на показатели окис-лительно-нитрозативного стресса в тканях поднижнечелюстных слюнных желез (СЖ) в условиях ли-пополисахарид-индуцированного системного воспалительного ответа (СВО). Исследования проводились на 30 белых крысах-самцах линии Вистар массой 180-220 г, разделённых на 3 группы: 1-ю - ин-тактные животные, 2-ю - после системного введения липополисахарида Salmonella typhi, 3-ю - животным внутрибрюшинно вводили водорастворимый комплекс кверцетина с поливинилпирролидоном (корвитин) в дозе 100 мг/кг (10 мг/кг в пересчете на кверцетин) раз в 3 суток, начиная с 30 суток эксперимента с применением липополисахарида S. typhi. Последний вводили в дозе 0.4 мкг/кг в течение 1-й недели 3 раза, в течение следующих 7-ми недель - 1 раз в неделю. Выявлено, что применение кверцетина в условиях СВО ограничивает в тканях СЖ образования активных форм кислорода: снижает нестимулированную продукцию супероксидного анион-радикала, его индуцированную генерацию при введении NADPH (микросомами и NO-синтазой), NADH (митохондриями), липополисахарида S. typhi (NADPH-оксидазой лейкоцитов). Введение кверцетина на фоне СВО снижает признаки нитрозативно-го стресса в тканях СЖ, что подтверждается уменьшением в них активности индуцибельной NO-синтазы (без существенных изменений активности орнитиндекарбоксилазы и уровня сопряженности конститутивной изоформы NO-синтазы), снижением концентрации высокоактивного пероксинитрита, но без достоверного сдвига содержания S-нитрозотиолов.
Summary
EFFECT OF WATER-SOLUBLE QUERCETIN ON INDICATORS OF OXIDATIVE-NITROSATIVE STRESS IN TISSUES OF SUBMANDIBULAR SALIVARY GLANDS OF RATS UNDER LIPOPOLYSACCHARIDE-INDUCED SYSTEMIC INFLAMMATORY RESPONSE
Shvaikovska O.O., Denisenko S.V., Kostenko V.O.
Key words: quercetin, lipopolysaccharide, systemic inflammatory response, oxidative-nitrosative stress, salivary glands.
The aim of this study was to investigate the effect of the water-soluble form of quercetin on the indicators of oxidative-nitrosative stress in the tissues of the submandibular salivary glands (SG) under conditions of lipopolysaccharide-induced systemic inflammatory response (SIR). The study was performed on 30 white Wistar male rats weighing 180-220 g, divided into 3 groups: 1st group included intact animals, 2nd group included animals, subjected to the systemic administration of lipopolysaccharide of Salmonella typhi, 3rd group involved animals, which received water-soluble quercetin complex with polyvinylpyrrolidone (corvitin) in a dosage of 100 mg/kg (10 mg/ g in terms of quercetin) intraperitoneally every 3 days, starting on the 30 day of the experiment with using S. typhi lipopolysaccharide. The latter was administered in a dose of 0.4 ^g/kg body weight 3 times during the 1st week, and then once a week for the next 7 weeks. The study has demonstrated that applying quercetin under SIR restrains the production of reactive oxygen species in SG tissues: it reduces unstimulated production of superoxide anion radical and its induced generation with the administration of NADPH (by microsomes and NO-synthase), NADH (by mitochondria), S. typhi lipopolysaccharide (by leukocyte NADPH-oxidase). The administration of quercetin under SIR condition diminishes the signs of nitrosative stress in SG tissues, as evidenced by decrease in inducible NO-synthase activity without significant changes in ornithine decarboxylase activity and the level of coupling of constitutive isoform of NO-synthase, decreased concentration of highly active peroxynitrite, but, however, without significant shift in S-nitrosothiols content.
