CC BY
18
© Дзюбенко Н. В., Линчак О.В. УДК 616.018: 612.335+57.044 Дзюбенко Н. В., Линчак О.В.
ВПЛИВ ЦИТОСТАТИКА ПОХ1ДНОГО ДИГ1ДРОП1РОЛУ
НА СЛИЗОВУ ОБОЛОНКУ ШЛУНКУ ЩУР1В
НА ТЛ1 ОКСИДАТИВНОГО СТРЕСУ
КиТвський нацiональний унiверситет iMeHi Т. Шевченка (м. КиГв)
Дана робота е фрагментом НДР КиУвського нащ-онального унiверситету iменi Тараса Шевченка «Ме-ханiзми реалiзацiУ адаптацмно-компенсаторних ре-акцiй органiзму за умов розвитку рiзних патолопй», № державноУ реестрацiУ 0111U004648.
Вступ. На сьогодшшшй день проблема пошу-ку ефективних, малотоксичних i специфiчних щодо мал^шзованих клiтин препаратiв е надзвичайно актуальною. Не менш важливим е дослщження яко-мога бiльш раннiх етатв пухлинного переродження для максимальноУ устшност терапiУ [10-13]. За-пальний компонент присутшй в мiкросередовищi в бшьшост пухлинних тканинах, у тому чи^ й у тих, якi не пов'язаш iз запальним процесом [6]. Шлу-нок, як вiдомо, е чутливим органом травноУ систе-ми, який схильний до дм рiзних патогенiв, що над-ходять з харчуванням. У вщповщь на таю патогени, у шлунку виникае окислювальний стрес, який може бути пов'язаний з розвитком розладiв шлунка, таких як гастрит, виразка, функцюнальна диспепшя, рак шлунку.
Метою даноУ роботи було дослщження впливу похiдного дигщротролу (1,4-замiщений 5-амЫо-1,2-дигiдропiрол-3-он), далi Д1, що показав висо-ку антипролiферативну активнiсть на 60 пухлинних кттинних лiнiях [4,7-9], на слизову оболонку шлунку щурiв у стаж оксидативного стресу, викликаного хлоридом кобальту.
Об'ект i методи досл1дження. Дослщження проведет вщповщно до принципiв бюетики, зако-нодавчих норм та положень «бвропейськоУ конвенцiУ про захист хребетних тварин, що використовуються для дослщних та наукових цшей» (Стразбург, 1986) i «Загальних етичних принципiв експеримен^в на тваринах», ухвалених Першим Нацюнальним кон-гресом з бiоетики (КиУв, 2001).
Дослiдження проводили на 26 статевозртих не-лiнiйних бiлих щурах-самцях з початковою масою 270 г, як утримувались у стандартних умовах вiва-рiю. Д1 у дозi 2,3 мг/кг маси тiла (що за умов повно-го всмоктування створюе концентрацiю його в кровi 10-4М [4,7]) розчиняли в олп, що мiстить 15% ДМСО. Оксидативний стрес викликали хлоридом кобальту (II) у дозi 13 мг/кг маси тта (1/3 LD50), розчиненим у фiзiологiчному розчинi. Речовини вводилися в об'емах 0,1 мл щоденно протягом 10 днiв, розчин Д1 i вiдповiдний розчинник - per os, розчин СоС12*6Н2О i фiзрозчин - внутршньоочеревинно. Щурi були подi-леш на такi експериментальнi групи:
• контроль: олiя + 15% ДМСО + фiзрозчин;
• група Д1: розчин Д1 + фiзрозчин;
• група СоС12: олiя + 15% ДМСО + розчин СоС12;
• група СоС12 + Д1: розчин Д1 i розчин СоС12.
Через 1 добу топя останнього введення тварин
забивали пщ ефiрним наркозом. Для пстолопчного анапiзу використовувапи фундапьну частину шлунку, яку фксували в рщиш Буена протягом 14 дiб. Для гiстопогiчного анапiзу виготовляли парафiновi зрiзи товщиною 5-7 мкм, як забарвлювали гематоксилн еозином з дофарбуванням оранжем й i заключали в канадський бальзам [5]. Морфолопчш дослщження проводили за допомогою св^лового мiкроско-пу Дхюзкор40 з фотокамерою ДхюСатСатМЯс5 (Каг17е1зз).
Результати дослщження та Тх обговорен-
ня. У тварин контрольно! групи слизова оболонка шлунку мала типову пстолопчну структуру без ознак патолопчних процесiв [2,3]: м'язова та пщслизова оболонки розвинеш нормально, шпунковi залози слизовоУ оболонки розмщеш компактно, кпiтинний склад i спiввiдношення гоповнi: парieтапьнi кпiтини -в межах пстолопчноУ норми (рис. 1).
У груп тварин, що отримували похщне дигщрот-ролу Д1 у дозi 2,3 мг/кг маси тта морфолопчш змши шлунковоУ стЫки представпенi помiрним набряком пiдспизовоУ оболонки та власноУ пластинки слизовоУ
Рис. 1. Мiкрофотографiя 3pi3y фундального
вiддiлу шлунку щуpiв контрольно'!' групи. Забарвлення гематоксилин-еозин-оранж, збшьшення Х200.
Рис. 2. Мiкрофотографiя зрiзу фундального вiддiлу шлунку щурiв групи Д1. Запалення слизовоГ оболонки у виглядi лiмфоiнфiльтрацГГ, та поверхневоГ деструкцп залоз. Забарвлення гематоксилин-еозин-оранж, збiльшення Х200.
**
т>
1
**
контроль
Д1
СО
Д1+С0
Рис. 3. Товщина слизовоГ оболонки шлунка щурiв, що отримували Д1, СоС12 та 'Гх комбшащю (** р<0,01).
оболонки, поодинокими зонами з ознаками запалення у виглядi лiмфоIдноI iнфiльтрацiI (рис. 2). Однак, товщина слизово! оболонки пщ впливом по-хiдного дигiдропiролу достовiрно зменшувалась, порiвняно з контролем (рис. 3). Подекуди спосте-рiгалися дтянки поверхнево! десквамацiI епгге-лiю залоз, !х скелетизацiI та поверхнево! деструк-цi! (рис. 2). Парieтальнi клггини шлункових залоз у групi Д1 розвиненi нормально, не вiдрiзнялись вщ таких у контролi.
Введення хлориду кобальту викликало бiльш зна-чн морфологiчнi змiни слизово! оболонки шлунку: спостер^ався виражений набряк пщслизово! оболонки, товщина слизово! оболонки вiрогiдно зрос-тала (рис. 3). У тварин групи СоС12 спостерiгалась велика юлькють дiлянок з ознаками запалення у ви-глядi вогнищево! лiмфоiнфiльтрацi!. У поверхневого епiтелiя було вiдмiчено десквамацiю як апiкальних епiтелiоцитiв, так i залоз в цiлому.
При дм хлориду кобальту на значнм поверхнi мала мюце поверхнева скелетизац1я та по-верхнева деструкц1я залоз, нашарування на поверхн епiтелiю (рис. 4). Парieтальнi клiтини та !х ядра були значно збтьше-н у розмiрах, що свiдчить про посилення процесiв синтезу та попршення виведення продуктiв обмiну.
На пстолопчних препаратах шлунку щурiв, що отримували хлорид кобальту су-мiсно з похщним дигiдропiролу Д1 товщина слизово! оболонки поверталась до контр-ольних значень (рис. 3). Набряк та лiмфо-!дна iнфiльтрацiя у пщслизовм оболонцi i власнiй пластинцi слизово! були виражен помiрно (рис. 5). Пошкодження поверхневого епiтелiю, представлен дiлянками поверхнево! десквамацi! епiтелiю залоз, !х скелетизацi! та поверхнево! деструкцп, за iнтенсивнiстю були подiбними до таких у грут Д1. У шлунку щурiв групи Д1+ СоС12
Рис. 4. Мiкрофотографiя фундального вщдшу шлунку щурiв групи СоС12. Деструкщя залоз слизовоГ оболонки шлунку та нашарування на поверхнi епiтелiю, крововиливи. Забарвлення гематоксилин-еозин-оранж, збшьшення Х200.
Рис. 5. Мiкрофотографiя зрiзу фундального вiддiлу шлунку щурiв групи Д1 + СоС12. Лiмфо iнфiльтрацiя слизовоГ. Забарвлення гематоксилин-еозин-оранж, збшьшення Х200.
подекуди спостер1галися двохядерн! кл1тини, що св1дчить про посилення секрецИ соляноУ кислоти, яке е одним з патогенетичних чинниюв формування деструктивно-запальних процес1в у слизовм обо-лонц1 [1].
Висновки
Похщне диг1дроп1ролу Д1 в1рог1дно зменшувало товщину слизово1 оболонки шлунку щур1в, спричи-няло незначну десквамац1ю еп1тел1ю поверхневих в1ддт1в шлункових залоз, частково 1х скелетизац1ю, викликав локальну пом1рну л1мфо1нф1льтрац1ю пщ-слизово1 основи слизово1 оболонки.
Хлорид кобальту спричиняв досить значне по-шкодження слизово1 оболонки у вигляд1 великих д1лянок десквамацИ еп1тел1ю залоз, поверхнево1 де-струкцИ залоз та нашарування на поверхн1 еп1тел1ю, виражену л1мфо1нф1льтрац1ю п1дслизово1 основи слизовоУ оболонки, зростання товщини слизово1 I II набряк.
При сумюнм дм похщного диг1дроп1ролу Д1 I хлориду кобальту ознаки запалення, десквамац1я еп1те-л1ю та деструкц1я шлункових залоз, викликан СоС12, зменшувались.
Таким чином, хлорид кобальту, шдукуючи окси-дативний стрес, викликае запалення, пошкодження каптярного русла, порушення ц1л1сност1 еп1тел1ю, спричиняе зниження функцюнальноУ активност1 сли-зовоУ оболонки шлунка. Д1 при дм на слизову обо-лонку шлунка на тл1 оксидативного стресу дещо зменшуе токсичний вплив останнього за рахунок зниження р1вня запального процесу I актив1заци компенсаторно-пристосувальних реакц1й оргаызму у вс1х в1дд1лах.
Перспективи подальших досл1джень. Пла-нуеться досл1дити вплив похщного п1ролу Д1 у по-р1внянн1 з 5-фторурацилом на тл1 оксидативного стресу.
Лiтература
1. Аруин Л. И. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника / Л. И. Аруин, Л. Л. Капуллер, В. А. Исаков. -
М.: Медицина, 1998. - 496 с.
2. Афанасьев Ю. И. Гистология. / Ю. И. Афанасьев, Н. А. Юрина, Е. Ф. Котовский // М.: Медицина, 2003. - 737с.
3. Бойчук Н. В., Исламов Р. Р., Улумбеков Э. Г., Челышев Ю. А. Гистология (введение в патологию) / под. ред. Э. Г. Улумбекова,
Ю. А. Челышева / Н. В. Бойчук, Р. Р. Исламов, Э. Г. Улумбеков, Ю. А. Челышев // М.:ГЕОТАР МЕДИЦИНА, 1998. - 960 с.
4. Гарманчук Л. В. Цитотоксичний вплив на пухлинш кжтини invitro аген^в з протипухлинним та антиметастатичним ефектом. /
Л. В. Гарманчук, Н. В. Сенчило, В. В. Ыкулша, Х. Д. Непийвода, Т. В. Нколаенко, 6. О. Деню, Л. I. Остапченко // Фiзика живого. - 2011. - Т. 19, № 2. - С.51-53.
5. Горальський Л. П. Основи пстолопчноУ технки i морфо-функцюнальш методи дослщжень у нормi та при патологи. Навчаль-
ний поЫбник. / Л. П. Горальський, В. Т. Хомич, О. I. Кононський // Житомир: Полюся, 2005. - 288 с.
6. Имянитов Е. Н. Общие представления о таргетнойтерапии / Е. Н. Имянитов // Практ. Онкология. - 2010. - Т. 11, №3. - С.123-
130.
7. Кузнецова Г. М. Протипухлинна дiя цитостатичноУ сполуки похщного дигщротролу при хемочндукованому канцерогенезi
товстоУ кишки щурiв. / Г. М. Кузнецова // Проблеми еколопчноУ та медичноУ генетики i клЫчноУ iмунологiУ. - 2011. - Вип. 5 (107). - С. 66-74.
8. Кузнецова Г. М. Взаемозв'язок показниюв пухлинного росту i ростовоУ активной прилеглих до колоректальних пухлин тканин
кишечника щурiв, що зазнавали впливу цитостатиюв похщного дигщротролу i 5-фторурацилу за умов ДМГчндукованого канцерогенезу / Г. М. Кузнецова, О. В. Оглобля, Т. А. Воловненко, В. К. Рибальченко // Фiзика живого. - 2011. - Т. 19, No 1. - С.33-39.
9. Кузнецова Г. М. Порiвняння впливу цитостатичних сполук похщного дигщротролу i 5-фторурацилу на слизову оболонку
кишечника щурiв / Г. М. Кузнецова, Г. В. Островська, В. К. Рибальченко // Современные проблемы токсикологии. - 2011. -№1-2. - С.47-51
10. Олийниченко П. И., Булкина З. П., Синиборода Т. И. Справочник по полихимиотерапии опухолей / П. И. Олийниченко, З.П. Булкина, Т. И. Синиборода - К: Здоровье, 2000. - 301 с.
11. Пат. на корисну модель № 22204 (UA), Аб1К31/40. Сполука 1,4-замщених 5-амшо-1,2-дигщротрол-3-ошв, що мае проти-ракову активнють / ДубЫна Г. Г., Воловенко Ю. М. - Опубл. 25.04.2007, Бюлл. №5.
12. Телетаева Г. М. Профилактика и лечение желудочно-кишечных ослонений лекарственной терапии (тошнота и рвота, муко-зиты, диарея) / Г. М. Телетаева // Практическая онкология, 2009. - Т. 10, №3. - С.158-167.
13. Dancey J. Issues and progress wit hprotein kinase inhibitors for cancer treatment / J. Dancey, E. A. Sausville // Nature Rev. Drug Discovery. - 2003. - V.2, №4. - P.296-313.
УДК 616.018: 612.335+57.044
ВПЛИВ ЦИТОСТАТИКА ПОХ1ДНОГО ДИГ1ДРОП1РОЛУ НА СЛИЗОВУ ОБОЛОНКУ ШЛУНКА ЩУР1В НА ТЛ1 ОКСИДАТИВНОГО СТРЕСУ
Дзюбенко Н. В., Линчак О. В.
Резюме. Доогмджено вплив цитостатично! сполуки похщного дтдротролу Д1 на слизову оболонку шлунка здорових щурiв i у тварин з ^С^-ви^и^ним оксидативним стресом. Показано, що Д1 при дИ' на слизову оболонку шлунка на "mi оксидативного стресу дещо зменшуе токсичний вплив останнього за рахунок зниження рiвня запального процесу i активiзацi! компенсаторно-пристосувальних реакцм оргаызму у вЫх в^тах.
Ключовi слова: слизова оболонка шлунка, похщне дигщротрола, CoCl2. Вкник проблем бюлоп'Гi медицини - 2015 - Вип. 4, Том 1 (124) 89
УДК 616.018: 612.335+57.044
ВЛИЯНИЕ ЦИТОСТАТИКА ПРОИЗВОДНОГО ДИГИДРОПИРРОЛА НА СЛИЗИСТУЮ ОБОЛОЧКУ ЖЕЛУДКА КРЫС НА ФОНЕ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА
Дзюбенко Н. В., Линчак О. В.
Резюме. Исследовано влияние цитостатической соединения производного дигидропирола Д1 на слизистую оболочку желудка здоровых крыс и у животных с СоС12-вызванным оксидативным стрессом. Показано, что Д1 при воздействии на слизистую оболочку желудка на фоне оксидативного стресса несколько уменьшает токсическое воздействие последнего за счет снижения уровня воспалительного процесса и активизации компенсаторно-приспособительных реакций организма во всех отделах.
Ключевые слова: слизистая оболочка желудка, производное дигидропиррола, CoCl2.
UDC 616.018: 612.335+57.044
INFLUENCE OF CYTOSTATIC COMPOUND DIHYDROPYRROL DERIVATIVE ON RAT STOMACH MUCOSA UNDER OXIDATIVE STRESS CONDITION
Dziubenko N. V., Lynchak O. V.
Abstract. Influence of cytostatic compounds derived dyhidropirolu D1 on gastric mucosa of healthy rats and in animals with CoCl2-induced oxidative stress. D1 at a dose of 2.3 mg/kg edema presented moderate submucosal membrane of gastric mucosa and lamina propria mucosa, isolated areas with signs of inflammation in the form lymphoid infiltration. However, the thickness of the mucous membrane under the influence of the original dyhidropirol significantly reduced compared to control. Areas of desquamation of surface epithelium glands, their skeletyzatsiyi and surface degradation were present. Parietal cells of the gastric glands in the D1 group developed normally, no different from those in control.
The introduction of cobalt chloride caused more important morphological changes of gastric mucosa: submucosal edema was observed, shell thickness mucosa significantly increased. Animals of CoCl2 group observed a large number of sites with evidence of inflammation in the form of focal lymphoinfiltration. In the surface epithelium was observed as epithelial desquamation and glands in general. The action of cobalt chloride on a large surface occurred skeletyzation surface and surface degradation glands layers on the surface epithelium. Parietal cells and their nuclei were significantly increased in size, indicating a strengthening of the synthesis output and worsening metabolic products.
In histological preparations of stomach of rats with D1 + CoCl2 mucosal thickness returned to control values. Edema and lymphoid infiltration of the submucosal membrane and lamina propria mucosa were expressed moderately. Damage to the surface epithelial desquamation intensity were similar to those in the group D1. In the stomach of rats D1 + CoCl2 sometimes observed binuclear cells, indicating that the increased secretion of hydrochloric acid, which is one of the pathogenetic factors of forming destructive inflammatory process in the mucosa.
Thus, cobalt chloride, inducing oxidative stress, causing inflammation, damage to the capillary, violation of the integrity of the epithelium causes a reduction in the functional activity of the gastric mucosa. D1 when exposed to gastric mucosa against the backdrop of oxidative stress decreases somewhat toxic effects latter by reducing inflammation and activation of compensatory-adaptive reactions in all departments.
Keywords: stomach mucosa, dihydropyrrol derivative, CoCl2.
Рецензент - проф. Старченко 1.1.
Стаття надшшла 09.10.2015 р.
