CC BY
0
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Возрастные аспекты микробиоценоза влагалища и распространенность условно-патогенных микоплазм у гинекологически здоровых женщин
Будиловская О.В.1, 2, Чеберя А.С.1, 3, Чеберя А.Р.1, 3, Васильева С.К.4, Воробьева Н.Е.5, Ширшова Н.Ю.5, Хуснутдинова Т.А.1, 2, Крысанова А.А.1, 2, Шалепо К.В.1 2, Савичева А.М.1, 2
1 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта», 194100, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 194100, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
3 Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации, 194044, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
4 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 197022, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
5 Санкт-Петербургское государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская поликлиника № 32», 197022, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
Резюме
Вагинальный микробиом, меняясь в течение жизни от периода новорожденности до постменопаузы, во многом определяет качество жизни женщины. У новорожденных девочек микробиом влагалища в основном зависит от присутствия трансплацентарных эстрогенов и схож с микробиомом матери. Вагинальный микробиом девочек скудный и по мере наступления пубертата начинает обогащаться лактобациллами. Основу микробиома влагалища женщин репродуктивного возраста составляют лактобациллы. У женщин в период менопаузального перехода или менопаузы изменения состава вагинальной микрофлоры связаны с истощением лактофлоры. Лактобациллы могут полностью не исчезать из вагинального биотопа, однако, как часто и в каком соотношении они присутствуют у женщин разных возрастных групп, не ясно. Условно-патогенные генитальные микоплазмы (молликуты) часто колонизируют урогенитальный тракт женщин, не предъявляющих каких-либо жалоб. Однако их обнаружение может вызывать обеспокоенность пациентов и врачей.
Цель исследования - определить возрастные аспекты микробиоценоза влагалища, видовой состав лактобацилл и распространенность условно-патогенных микоплазм у гинекологически здоровых женщин, проходящих периодический профилактический осмотр у гинеколога.
Материал и методы. Обследованы 203 женщины в возрасте 18-78 лет, обратившиеся к гинекологу для периодического профилактического осмотра. Все пациентки были разделены на 3 возрастные группы: 1-я группа (до 45 лет, репродуктивный возраст) - 101 женщина; 2-я группа (46-52 года, период менопаузального перехода) - 31 женщина; 3-я группа (старше 53 лет, менопауза) - 71 женщина. Всем пациенткам проведены молекулярно-биологические исследования.
Результаты. У 99% гинекологически здоровых небеременных женщин в возрасте до 45 лет в вагинальном биотопе присутствуют лактобациллы, при этом преимущественно лактобациллярный тип микробиоценоза выявлен в 66,3% случаев. У большинства женщин старших возрастных групп также обнаружены лактобациллы, но их концентрация и видовое разнообразие меньше, чем у женщин репродуктивного возраста. Lactobacillus iners - самый распространенный вид лактобацилл в исследуемой популяции. Доми-
Ключевые слова:
вагинальный
микробиом;
вагинальные
лактобациллы;
репродуктивный
возраст;
менопаузальный
переход;
постменопауза;
условно-
патогенные
генитальные
микоплазмы
нирование Lactobacillus crispatus чаще определялось у женщин репродуктивного возраста. Колонизация генитальными микоплазмами составила: Ureaplasmaparvum - у 26% женщин, Ureaplasma urealyticum - у 2% и Mycoplasma hominis - у 4,4%. Уреаплазмы обнаружены у женщин всех возрастных групп. Ureaplasma parvum чаще встречалась у женщин репродуктивного возраста, а Mycoplasma hominis была обнаружена только у женщин репродуктивного возраста, при этом в клинически значимом количестве у пациенток с выраженным дисбиозом влагалища. G. vaginalis чаще обнаруживалась у женщин в период постменопаузы. Вагинальный микробиом у женщин в период постменопаузы отличается большим разнообразием и меньшей концентрацией микроорганизмов.
Заключение. Распространенность условно-патогенных микоплазм зависит от возраста и сексуальной активности женщин. Уреаплазмы не связаны с нарушениями микробиоценоза влагалища. Высокая бактериальная нагрузка Mycoplasma hominis ассоциирована с дисбиотическими нарушениями вагинального биотопа у женщин репродуктивного возраста. Увеличение видового разнообразия вагинального микробиома в период менопаузального перехода и в постменопаузу связано со снижением уровня эстрогенов.
Финансирование. Работа выполнена в рамках инициативной темы. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Савичева А.М.; сбор анамнеза, клинический осмотр и получение исследуемого материала - Воробьева Н.Е., Ширшова Н.Ю.; выполнение лабораторных исследований - Будиловская О.В., Крысанова А.А., Хуснутдинова Т.А., Шалепо К.В.; сбор и обработка материала, статистическая обработка данных, написание текста - Будиловская О.В., Чеберя А.С., Чеберя А.Р., Васильева С.К.; редактирование - Савичева А.М., Ширшова Н.Ю. Все авторы внесли существенный вклад в проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией.
Одобрение этического комитета. Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта», протокол № 130 от 14.11.2023.
Для цитирования: Будиловская О.В., Чеберя А.С., Чеберя А.Р., Васильева С.К., Воробьева Н.Е., Ширшова Н.Ю., Хуснутдинова Т.А., Крысанова А.А., Шалепо К.В., Савичева А.М. Возрастные аспекты микробиоценоза влагалища и распространенность условно-патогенных микоплазм у гинекологически здоровых женщин // Акушерство и гинекология: новости, мнения, обучение. 2024. Т. 12, № 2. С. 21-29. DOI: https://doi.org/10.33029/2303-9698-2024-12-2-21-29 Статья поступила в редакцию 26.03.2024. Принята в печать 29.04.2024.
Age-related aspects of vaginal microbiocenosis and the prevalence of opportunistic mycoplasmas in gynecologically healthy women
Budilovskaya O.V.1-2, Cheberya A.S13, Cheberya A.R.13, Vasilyeva S.K.4, Vorobyova N.E.5, Shirshova N.Yu.5, Khusnutdinova T.A.1-■ Krysanova A.A.1,2, Shalepo K.V.12, Savicheva A.M.1, 2
1 Research Institute of Obstetrics, Gynecology and ReproductoLogy named after D.O. Ott, 194100, St. Petersburg, Russian Federation
2 St. Petersburg State Pediatric Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation, 194100, St. Petersburg, Russian Federation
3 Kirov Military Medical Academy, Ministry of Defence of the Russian Federation, 194044, St. Petersburg, Russian Federation
4 Academician I.P. Pavlov First St. Petersburg State Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation, 197022, St. Petersburg, Russian Federation
5 City Clinic No. 32, 197022, St. Petersburg, Russian Federation
Abstract
The vaginal microbiome, changing throughout Life from the neonatal period to postmenopause, Largely determines the quality of life of a woman. In newborn girls, the vaginal microbiome is mainly dependent on the presence of transplacental estrogens and is similar to the maternal microbiome. The vaginal microbiome of girls is poor and, as puberty approaches, it begins to be enriched with lactobacilli. The basis of the vaginal microbiome of women of reproductive age is lactobacilli. In women undergoing the menopausal transition or menopause, changes in the composition of the vaginal microflora are associated with depletion of lactoflora. Lactobacilli may not completely disappear from the vaginal biotope, however, how often and in what proportion they are present in women of different age groups is not clear. Conditionally pathogenic genital mycoplasmas (mollicutes) often colonize the urogenital tract of women who do not present any complaints, but their detection may cause concern for patients and doctors.
The aim of the study was to determine the age aspects of vaginal microbiocenosis, the species composition of lactobacilli and the prevalence of opportunistic mycoplasmas in gynecologically healthy women undergoing periodic preventive examinations by a gynecologist.
Keywords:
vaginal
microbiome;
vaginal lactobacilli;
reproductive
age; menopausal
transition;
postmenopause;
opportunistic
genital
mycoplasmas
Material and methods. 203 women aged 18-78 years who visited a gynecologist for periodic preventive examinations were examined. All patients were divided into 3 age groups: group 1 - up to 45 years (reproductive age) - 101 women; group 2 - 46-52 years (menopausal transition period) - 31 women; group 3 - over 53 years old (menopause) - 71 women. All patients underwent molecular biological studies.
Results. In 99% of gynecologically healthy non-pregnant women under the age of 45, lactobacilli are present in the vaginal biotope, while the predominantly lactobacillary type of microbiocenosis was detected in 66.3% of cases. Lactobacilli were found in most women in older age groups, but their concentration and species diversity were less than in women of reproductive age. Lactobacillus iners is the most common species of lactobacilli in the study population. The dominance of Lactobacillus crispatus was more often determined in women of reproductive age. Colonization with genital mycoplasmas was: Ureaplasma parvum in 26% of women, Ureaplasma urealyticum in 2% and Mycoplasma hominis in 4.4%. Ureaplasma was found in women of all age groups. Ureaplasma parvum was more common in women of reproductive age, and Mycoplasma hominis was found only in women of reproductive age, and in clinically significant quantities in patients with severe vaginal dysbiosis. G. vaginalis was more often found in postmenopausal women. The vaginal microbiome in postmenopausal women is characterized by greater diversity and lower concentration of microorganisms.
Conclusion. The prevalence of opportunistic mycoplasmas depends on the age and sexual activity of women. Ureaplasma is not associated with disorders of the vaginal microbiocenosis. A high bacterial load of Mycoplasma hominis is associated with dysbiotic disorders of the vaginal biotope in women of reproductive age. An increase in the species diversity of vaginal microbiome during menopausal transition and postmenopause is associated with a decrease in estrogen levels.
Funding. The work was carried out within the framework of the initiative theme. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Contribution. Concept and design of the study - Savicheva A.M.; taking an anamnesis, clinical examination and obtaining test material - Vorobyova N.E., Shirshova N.Yu.; performing laboratory tests - Budilovskaya O.V., Krysanova A.A., Khusnutdinova T.A., Shalepo K.V.; collection and processing of material, statistical data processing, text writing - Budilovskaya O.V., Cheberya A.S., Cheberya A.R., Vasilyeva S.K.; editing - Savicheva A.M., Shirshova N.Yu. All the authors made a significant contribution to the research and preparation of the article, read and approved the final version before publication.
Approval of the Ethics Committee. The study was approved by the local Ethics Committee of the Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott, Protocol No. 130 dated 11/14/2023.
For citation: Budilovskaya O.V., Cheberya A.S., Cheberya A.R., Vasilyeva S.K., Vorobyova N.E., Shirshova N.Yu., Khusnutdinova T.A., Krysanova A.A., Shalepo K.V., Savicheva A.M. Age-related aspects of vaginal microbiocenosis and the prevalence of opportunistic mycoplasmas in gynecologically healthy women. Akusherstvo i ginekologiya: novosti, mneniya, obuchenie [Obstetrics and Gynecology: News, Opinions, Training]. 2024; 12 (2): 21-9. DOI: https://doi.org/10.33029/2303-9698-2024-12-2-21-29 (in Russian) Received 26.03.2024. Accepted 29.04.2024.
Актуальность
Микробиом влагалища во многом определяется насыщенностью женского организма эстрогенами. С наступлением репродуктивного возраста повышение уровня эстрогенов способствует гиперплазии эпителия слизистой оболочки влагалища и увеличению содержания клеточного гликогена. Гликоген метаболизируется до молочной кислоты вагинальными лактобациллами, которые доминируют в составе вагинального биотопа в этот период жизни женщины. Снижение рН среды влагалища до 3,5-4,5 оптимально для адгезии, колонизации и выживания лактобацилл, что, в свою очередь, ограничивает рост многих патогенов [1]. В период менопаузального перехода снижается уровень эстрогенов, уменьшается концентрация лактобацилл и увеличивается видовое разнообразие вагинального микробиома. В период постменопаузы диапазон состава микробиома влагалища становится еще шире, и обилие видов микроорганизмов во влагалище в значительной степени варьирует у разных женщин. Микробиом влагалища играет решающую роль у женщин в период постменопаузы,
главным образом потому что может оказывать влияние на развитие вульвовагинальной атрофии, сухости влагалища и нарушения сексуального здоровья [2].
Применение молекулярно-биологических методов показало все разнообразие вагинального микробиома и то, что у одной женщины во влагалище может присутствовать сразу несколько видов лактобацилл, при этом, как правило, доминирует один вид. На основании таксономического состава и склонности одного из видов доминировать удалось определить довольно четкие границы между типами микробиоценозов и классифицировать микробиоту влагалища у женщин разных возрастных групп [3]. В результате секвенирования 16S РНК и кластеризации микроорганизмов все таксономические профили вагинальных микробных сообществ были разделены на так называемые типы состояний сообщества (Community State Type, CST). Микробиоценозы с доминированием лактобацилл были отнесены к 4 группам по доминирующему виду: в CST I - доминирующий вид L. crispatus, CST II - L. gasseri, CST III - L. iners и CST V - L. jensenii. К CST IV были отнесены нелактобациллярные типы микробиоценоза. Данное исследование подтвердило, что наиболее
распространенными видами вагинальных лактобацилл являются L. iners и L. crispatus, а у женщин в период постменопаузы чаще всего преобладают облигатные и факультативные анаэробные микроорганизмы [3].
Вагинальный микробиом у здоровых небеременных женщин различается в зависимости от этнической принадлежности: женщины африканского и латиноамериканского происхождения демонстрируют большее видовое разнообразие, в отличие от женщин европейского и азиатского происхождения. Беременность приводит к конвергенции микробиома с преобладанием лактобацилл у женщин всех этнических групп. И если у небеременных женщин повышенное видовое разнообразие микробиома влагалища может быть вариантом нормы, то во время беременности оно связано с повышенным риском преждевременных родов [4].
Широкое использование в рутинной практике мультиплексных тестов на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР), предназначенных для оценки микробиоценоза и скрининга инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), нередко включает в себя тестирование на M. hominis, U. urealyticum и U. parvum. Также в перечне лабораторных исследований предлагается культуральная диагностика с определением антибиотикочувствительности для M. hominis и Ureaplasma spp. (несмотря на то что культуральный метод не позволяет дифференцировать до вида род Ureaplasma). Это может навести клиницистов на мысль о показаниях к лечению антибиотиками женщин с наличием микоплазм. Рутинное тестирование на M. hominis, U. urealyticum и U. parvum наряду с высокой распространенностью, бессимптомной колонизацией и ограниченными доказательствами роли условно-патогенных микоплазм в развитии заболевания у небеременных женщин создает для клиницистов путаницу в отношении необходимости проведения лечения [5].
Виды Ureaplasma spp. и Mycoplasma hominis, представители класса Mollicutes, обычно идентифицируются как обычные бактерии-комменсалы в нижних отделах урогениталь-ного тракта здоровых людей. Молекулярно-биологические исследования у небеременных женщин показывают, что распространенность условно-патогенных микоплазм составляет: U. parvum - 31,3-67,3%, U. urealyticum - 5,9-9,2%, M. hominis - 6-14,3% [6-9]. Наиболее распространенным видом является U. parvum. Наличие U. urealyticum и U. parvum практически никогда не было связано с инфекционной патологией у женщин. M. hominis показывает высокую распространенность и более высокую бактериальную нагрузку у женщин с бактериальным вагинозом (БВ) (р<0,05). В то же время при хламидийной инфекции или кандидозном вульво-вагините микоплазмы могут выявляться, но в концентрации, схожей с их концентрацией у здоровых женщин [8].
Результаты, полученные в недавнем исследовании, показали, что у бессимптомных женщин частота встречаемости U. parvum, U. urealyticum и M. hominis была выше, чем у пациенток с аэробным вагинитом (АВ), и составила 43,5; 5,9 и 8,9% у здоровых женщин по сравнению с 23,9; 4 и 6% у женщин, имевших АВ. Однако в группе пациенток с БВ распространенность U. parvum, U. urealyticum и M. hominis была выше, чем у здоровых женщин, и составила 59,9; 13,5 и 26,8% соответственно [9]. БВ - это состояние, характеризующееся
микробиотой с повышенным видовым разнообразием и преобладанием анаэробных микроорганизмов. В такой микробной ассоциации сложно установить этиологическую роль условно-патогенных микоплазм. При этом количественно они всегда уступают анаэробным микроорганизмам, ассоциированным с БВ. Исследователи предположили, что коммен-сальные генитальные микоплазмы имеют симбиотические отношения с бактериями, ассоциированными с БВ [9]. Однако имеются сообщения о выявлении M. hominis, U. parvum или U. urealyticum у пациенток с перитонитом, связанным с перитонеальным диализом, когда только благодаря использованию метагеномного секвенирования удалось идентифицировать возбудителя при перитоните и отрицательном бактериологическом исследовании на микоплазмы [10]. Систематический обзор, целью которого было изучение роли условно-патогенных микоплазм при неблагоприятных исходах беременности и родов, отдельно или в сочетании с БВ, не позволил сделать выводы о патологическом воздействии микоплазм на течение беременности [11].
Целью настоящего исследования было определить возрастные аспекты микробиоценоза влагалища, видовой состав лактобацилл и распространенность условно-патогенных микоплазм у гинекологически здоровых женщин, проходящих периодический профилактический осмотр у гинеколога.
Материал и методы
В исследование были включены 203 женщины в возрасте от 18 до 78 лет - работники медицинских учреждений, проходившие периодический профилактический осмотр у гинеколога в городской поликлинике № 32 г. Санкт-Петербурга. В исследование были отобраны пациентки, не предъявлявшие жалоб и признанные по результатам клинического осмотра практически здоровыми. Критериями исключения были: беременность, наличие жалоб, воспалительных и онкологических заболеваний. Все пациентки были разделены на 3 возрастные группы: 1-я группа (до 45 лет, репродуктивный возраст) - 101 женщина; 2-я группа (46-52 года, период менопаузального перехода) - 31 женщина; 3-я группа (старше 53 лет, менопауза) - 71 женщина. Исследуемым материалом служило отделяемое влагалища. Всем пациенткам проведены молекулярно-биологические исследования: тесты Фемо-флор-16, Плазмоген-УП для определения видов Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum и тест для видового типиро-вания лактобацилл (L. crispatus, L. iners, L. jensenii, L. gasseri, L. johnsonii, L. vaginalis и L. acidophilus).
Результаты
Общая бактериальная масса (ОБМ) является важным показателем микробиоты влагалища у женщин репродуктивного возраста. Она должна составлять не менее 6 Lg (или 106 ГЭ/мл). У женщин 1-й группы ОБМ в среднем составила 7 Lg, во 2-й группе - 6,8 Lg, а в 3-й группе - 5,4 Lg.
Использование теста Фемофлор позволило определить тип микробиоценоза. Заключение теста является корректным только для женщин репродуктивного возраста. Таким образом, в 1-й группе тип микробиоценоза «нормоценоз»,
когда лактобациллы составляют более 80% ОБМ, был определен у 67 женщин, что составило 66,3%; «умеренный дисбиоз» (лактобациллы составляют 20-80% ОБМ) - у 16 женщин (15,8%); «выраженный дисбиоз» (лактобацилл менее 20% ОБМ) - у 18 женщин (17,8%). При этом лактобациллы были обнаружены у всех женщин, кроме одной. Частота встречаемости лактобацилл составила 99% в группе женщин репродуктивного возраста.
Лактобациллы также присутствовали и у пациенток старших возрастных групп. В группе менопаузального перехода лактобациллы обнаружены у 28 женщин из 31 (90,3%). В группе женщин в постменопаузе лактобациллы были обнаружены у 49 из 71 (69%). При этом следует отметить, что лактобациллярный тип микробиоценоза, когда лак-тобациллы являются доминирующим видом вагинальной микробиоты, был выявлен у 18 (58%) женщин 2-й группы и у 13 (18,3%) женщин 3-й группы. Авторы определили концентрацию вагинальных лактобацилл у женщин разных возрастных групп, выраженную в Lg (от 0 до 10). Полученные данные представлены на рис. 1.
В образцах, содержащих лактобациллы, было проведено их видовое типирование. В большинстве образцов содержалось 2 вида лактобацилл и более. Видовое разнообразие лактобацилл чаще наблюдалось в группе женщин репродуктивного возраста, что составило 72%. Среди женщин 2-й и 3-й групп более 2 видов лактобацилл было выявлено в 64 и 60% проб соответственно.
Так как большинство образцов содержали несколько видов лактобацилл, был определен доминирующий вид, концентрация которого соответствовала общей лактобацилляр-ной массе либо его доля составляла 50% и более от общей концентрации лактобацилл в образце. Частота встречаемости видов лактобацилл во всех 3 группах была практически идентична. Вид L. iners был самым распространенным во всех 3 группах и составил 50, 44 и 52% соответственно. На втором месте по распространенности был вид L. crispatus -32, 20 и 26% соответственно. Вид L. gasseri был обнаружен в каждой возрастной группе с частотой 9, 28 и 18% соответственно. Наименее распространенным был вид L. jensenii (9, 12 и 4% соответственно). Частота выявления доминирующих видов лактобацилл показана на рис. 2.
Снижение количества лактобацилл зачастую сопровождается увеличением числа анаэробных микроорганизмов. Распространенность Gardnerella vaginalis среди женщин репродуктивного возраста составила 28,7%; в группе женщин, находящихся в периоде менопаузального перехода, -42%, а у пациенток в постменопаузе - 72%. При этом G. vaginalis ни разу не была преобладающим микроорганизмом вагинального биотопа у женщин репродуктивного возраста; во 2-й группе G. vaginalis доминировала лишь в одном образце, что составило 3%, а у женщин в постменопаузе была доминирующим видом в 11 образцах (15,5%). У женщин репродуктивного возраста с заключением теста Фемофлор «выраженный анаэробный дисбиоз» чаще преобладали Atopobium vaginae или Eubacterium spp.
Частота колонизации вагинального биотопа условно-патогенными микоплазмами составила для U. parvum 26%, для U. urealyticum - 2% и для M. hominis - 4,4%. Уреа-
♦♦ ф ♦♦ «а 7
♦ ♦
♦ * ♦
jT » ♦
9 Ла.
♦ ♦ % \ ♦ ♦ ♦
к-^ . ^—„-ж-лЯк—.
♦ ♦
♦ ♦
0 20 40 60 80 100 120 Количество женщин
— —**-♦
♦ ♦
-♦л—♦
0 5 10 15 20 25 30 35 Количество женщин
♦ ♦ ♦ ♦ ♦
♦
♦ ♦ ♦ ♦ ♦
20 40 60
Количество женщин
80
Рис. 1. Концентрация вагинальных лактобацилл (lg) у женщин разных возрастных групп: А - репродуктивный возраст; Б - менопаузальный переход; В - постменопауза
плазмы были обнаружены у женщин всех возрастных групп, но с различной частотой. Так, U. parvum была обнаружена у 39,6% у женщин 1-й группы (репродуктивного возраста), 25,7% женщин 2-й группы и у 7% женщин в постменопаузе (3-й группы). Частота выявления U. urealyticum составила 1,9; 3,2 и 1,4% соответственно в каждой группе. M. hominis была выявлена только у женщин репродуктивного возраста и обнаруживалась с частотой 8,9%. Данные по частоте колонизации вагинального биотопа условно-патогенными мико-плазмами представлены на рис. 3.
А
Б
В
0
%
6050 40 30 20 10
1-я группа 2-я группа 3-я группа
■ L. iners || L. crispatus | [. gasseri ■ L. jensenii
Рис. 2. Частота встречаемости доминирующих видов лакто-бацилл у женщин разных возрастных групп
%
40,00 35,00 30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00
U. parvum U. urealyticum M. hominis
Ш M. hominis ■ U. urealyticum ■ U. parvum
Рис. 3. Частота колонизации вагинального биотопа женщин разных возрастных групп условно-патогенными микоплазмами
0
Важным моментом считается количественное определение условно-патогенных микоплазм. При интерпретации результатов молекулярно-биологических тестов обнаружение M. hominis, U. parvum и U. urealyticum в количестве менее 104 ГЭ/мл (геном эквивалентов на миллилитр) считается клинически незначимым. Следует отметить, что в количестве более 104 ГЭ/мл M. hominis присутствовала только в образцах от женщин с выраженным анаэробным дисбиозом.
Обсуждение
Уровень эстрогенов важен как для состава микробиома, так и для эпителия влагалища. Прогрессирующее повышение уровня эстрогенов от периода полового созревания к репродуктивному возрасту запускает переход от низкого уровня гликогена, высокого микробного разнообразия, высокого рН среды влагалища и тонкого вагинального эпителия в период полового созревания к накоплению гликогена в увеличившемся слое эпителиальных клеток, необходимого для Lactobacillus spp., преобладающих в составе здорового микробиома, поддерживающих низкие значения рН вагинальной среды и обеспечивающих гомеостаз вагинального биотопа [1]. Изменения, возникающие в период менопау-зального перехода, становятся более выраженными в постменопаузе. Снижение уровня эстрогенов может оказывать существенное воздействие на развитие вульвовагинальной атрофии, симптомов сухости влагалища и приводить к нарушению сексуального здоровья [12].
Самым очевидным микробиологическим показателем состояния женской репродуктивной системы является уровень лактобацилл. В нашем исследовании лактобациллы были обнаружены у женщин всех возрастных групп, при этом и у 69% женщин в период постменопаузы. Полученные результаты сопоставимы с данными других исследований, где было показано, что лактобациллы присутствовали у 66% женщин в период постменопаузы. В частности, у 24% женщин были обнаружены как L. crispatus, так и L. iners, у 9% -
только L. crispatus, у 32% - только L. iners [13]. В нашем исследовании вид L. iners также был самым распространенным во всей популяции, вид L. crispatus занимал второе место по распространенности и чаще встречался у женщин в репродуктивном возрасте.
Вариантом нормы следует расценивать выявление нелак-тобациллярного типа микробиоценоза у небеременных женщин репродуктивного возраста, если они не предъявляют жалоб и не имеют клинических признаков вагинальной инфекции. В нашем исследовании нелактобациллярный тип микробиоценоза был выявлен у 17,8% женщин репродуктивного возраста. В исследовании J. Ravel и соавт. (2011) нелактобациллярный тип микробиоценоза был выявлен у 10,3% бессимптомных небеременных женщин европейского происхождения [14]. В некоторых исследованиях также сообщался важный вывод о том, что примерно от 20 до 30% женщин в определенный момент времени имеют разнообразный вагинальный микробиом с дефицитом лактобацилл, который не ассоциирован с наличием заболевания [15]. Множество факторов постоянно влияет на нормальный гомеостаз вагинальной микробиоты, включая сексуальное поведение, особенности гигиены и питания. Особый интерес вызывает использование пробиотиков и диет, а также применение менопаузальной гормональной терапии (МГТ), которые могут потенциально повлиять на состав вагинальной микробиоты [16].
Физиологическое снижение количества лактобацилл с возрастом, как правило, сопровождается увеличением уровня анаэробных микроорганизмов, в частности G. vaginalis. В нашем исследовании показано, что с возрастом увеличивалась распространенность G. vaginalis: среди женщин репродуктивного возраста G. vaginalis выявлялись с частотой 28,7%, в группе женщин, находящихся в периоде менопаузального перехода, - 42%, а у пациенток в постменопаузе - 72%. При этом следует отметить, что тип вагинального сообщества с преобладанием G. vaginalis был выявлен не у женщин репродуктивного возраста, а только
у пациенток старших возрастных групп, и составил 3 и 15,5% соответственно. Аналогичные данные были получены при определении типа вагинального микробиоценоза у здоровых женщин в постменопаузе, где число таких образцов составило около 15% [3].
Тип микробиоценоза влагалища со сниженным количеством лактобацилл у женщин в постменопаузе нередко ассоциирован с вульвовагинальной атрофией [12]. Роль лактобацилл в модуляции и восстановлении вагинального гомеостаза у женщин в постменопаузе была показана в недавнем исследовании микробиоты влагалища, в котором сообщалось, что бактериальный состав зависел от менопаузального статуса, где лактобациллы были доминирующим видом у женщин в пре- и перименопаузе по сравнению с женщинами в постменопаузе. Использование локальных эстрогенов у женщин в постменопаузе привело к повышению уровня лактобацилл во влагалище и уретре. Также лечение пробиотиками с лактобациллами у пациенток, страдающих генитоуринарным синдромом, снижало риск возникновения мочеполовых инфекций и улучшало самочувствие [17].
Распространенность U. parvum, U. urealyticum и M. hominis у женщин связана с сексуальной активностью. В нашем исследовании M. hominis была выявлена только у женщин репродуктивного возраста, также в этой возрастной группе U. parvum была более распространена. Исследования показывают, что у женщин в возрасте 30-35 лет комменсальные микоплазмы обнаруживаются наиболее часто, при этом их обнаружение вовсе не является показателем наличия вагинальной инфекции [18]. Исследование, посвященное связи структурных изменений микробиома влагалища с родом Ureaplasma (включая U. urealyticum и U. parvum) и/или колонизацией M. hominis у бессимптомных женщин, показало, что колонизация M. hominis была в значительной степени связана с изменениями микро-биома влагалища и снижением относительной численности рода Lactobacillus. Уреаплазмы оказались «безвредными» бактериями влагалища [19]. Подобный результат был получен и в нашем исследовании: повышенная бактериальная нагрузка M. hominis была ассоциирована с выраженным дисбиозом у женщин с отсутствием симптомов вагинальной инфекции.
Использование молекулярных методов для исследования микробиома значительно расширяет возможности обнаружения микроорганизмов и способствует пониманию роли бактериальных сообществ в сохранении жен-
ского здоровья. Полученные нами данные свидетельствуют о широкой распространенности условно-патогенных микоплазм у гинекологически здоровых женщин, особенно у женщин репродуктивного возраста. И если уреа-плазмы не связаны с нарушениями микробиоценоза влагалища, то M. hominis в значительной концентрации (более 104 ГЭ/г) ассоциированы с дисбиотическими нарушениями вагинального биотопа. Однако даже у пациенток с БВ выявление комменсальных генитальных микоплазм не требует специфического лечения, направленного на их элиминацию, а рекомендуется терапия для коррекции дисбиоза влагалища.
В 2018 г. Редакционный совет Европейских рекомендаций по ИППП опубликовал «Заявление о позиции» в отношении тестирования на M. hominis, U. urealyticum и U. parvum. После обзора опубликованной литературы, касающейся этиологической роли этих микроорганизмов в развитии вагинальных инфекций, в заявлении был сделан вывод о том, что в настоящее время нет доказательств пользы от рутинного тестирования на M. hominis, U. urealyticum и U. parvum, а также проведения лечения у взрослых мужчин и небеременных женщин. При обнаружении комменсальных генитальных микоплазм у женщин с симптомами БВ всегда следует проводить его лечение [20]. На данный момент предполагается, что выявление только Mycoplasma hominis или Ureaplasma spp. без оценки другой микрофлоры у женщин представляется бесполезным [21].
Заключение
Таким образом, проведенное нами исследование показало, что у гинекологически здоровых женщин репродуктивного возраста наиболее распространен лакто-бациллярный тип микробиоценоза, но может определяться и нелактобациллярный тип. Условно-патогенные мико-плазмы чаще колонизируют урогенитальный тракт бессимптомных женщин репродуктивного возраста, при этом большая бактериальная нагрузка M. hominis определена только у женщин с дефицитом лактобацилл; для Ureaplasma spp. такой ассоциации выявлено не было. Увеличение видового разнообразия вагинального микробиома в период менопаузального перехода и в постменопаузу связано со снижением уровня эстрогенов. Для этого периода характерно уменьшение числа лактобацилл, увеличение количества анаэробных микроорганизмов, в частности G. vaginalis, и снижение частоты встречаемости условно-патогенных микоплазм.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Будиловская Ольга Викторовна (Olga V. Budilovskaya)* - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник группы экспериментальной микробиологии, ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО, ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: o.budiLovskaya@gmaiL.com https://orcid.org/0000-0001-7673-6274
* Автор для корреспонденции.
Чеберя Александра Сергеевна (Alexandra S. Cheberya) - лаборант-исследователь лаборатории микробиологии ФГБНУ
«НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; студент V курса ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова», Санкт-Петербург,
Российская Федерация
E-mail: alexa-vorobjeva.09@yandex.ru
https://orcid.org/0009-0008-1091-5753
Чеберя Александр Романович (Alexander R. Cheberya) - лаборант-исследователь лаборатории микробиологии, ФГБНУ
«НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; студент V курса, ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова», Санкт-Петербург,
Российская Федерация
E-mail: sanekcheberya@yandex.ru
https://orcid.org/0009-0006-9058-6720
Васильева Софья Константиновна (Sophia K. Vasilyeva) - студент V курса, ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: skv.spb253@mail.ru https://orcid.org/0009-0000-8610-2419
Воробьева Надежда Евгеньевна (Nadezhda E. Vorobyova) - кандидат медицинских наук, врач - акушер-гинеколог СПб ГБУЗ «Городская поликлиника № 32», Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: sergiognezdo@yandex.ru https://orcid.org/000-0001-2345-6789
Ширшова Наталья Юрьевна (Natalya Yu. Shirshova) - кандидат медицинских наук, врач - акушер-гинеколог, главный врач СПб ГБУЗ «Городская поликлиника № 32», Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: shirnat1@yandex.ru https://orcid.org/0000-0001-2345-6789
Хуснутдинова Татьяна Алексеевна (Tatiana A. Khusnutdinova) - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник группы экспериментальной микробиологии, ФГБУН «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО, ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: husnutdinovat@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-2742-2655
Крысанова Анна Александровна (Anna A. Krysanova) - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник группы экспериментальной микробиологии, ФГБУН «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО, ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: krusanova.anna@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-4798-1881
Шалепо Кира Валентиновна (Kira V. Shalepo) - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник группы экспериментальной микробиологии, ФГБУН «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; доцент кафедры клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО, ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: 2474151@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-3002-3874
Савичева Алевтина Михайловна (Alevtina M. Savicheva) - заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделом медицинской микробиологии, ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»; заведующий кафедрой клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО, ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: savitcheva@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-3870-5930
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Amabebe E., Anumba D.O.C. The vaginal microenvironment: the physiologic role of Lactobacilli. Front Med (Lausanne). 2018; 5: 181. DOI: https://doi.org/10.3389/ fmed.2018.00181 PMID: 29951482; PMCID: PMC6008313.
2. Auriemma R.S., Scairati R., Del Vecchio G., Liccardi A., Verde N., Pirchio R., et al. The vaginal microbiome: a long urogenital colonization throughout woman life. Front Cell Infect Microbiol. 2021; 11:686167. DOI: https://doi.org/10.3389/ fcimb.2021.686167 PMID: 34295836; PMCID: PMC8290858.
3. France M.T., Ma B., Gajer P., Brown S., Humphrys M.S., Holm J.B., et al. VALENCIA: a nearest centroid classification method for vaginal microbial communities based on composition. Microbiome. 2020; 8 (1): 166. DOI: https://doi.org/10.1186/ s40168-020-00934-6 PMID: 33228810; PMCID: PMC7684964.
4. Dominguez-Bello M.G. Gestational shaping of the maternal vaginal microbiome. Nat Med. 2019; 25 (6): 882-3. DOI: https://doi.org/10.1038/s41591-019-0483-6
5. Plummer E.L., Vodstrcil L.A., Bodiyabadu K., Murray G.L., Doyle M., Latimer R.L., et al. Are Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum associated with specific genital symptoms and clinical signs in nonpregnant women? Clin Infect Dis. 2021; 73 (4): 659-68. DOI: https://doi.org/10.1093/cid/ ciab061 PMID: 33502501.
6. Song J., Wu X., Kong Y., Jin H., Yang T., Xie X., et al. Prevalence and antibiotics resistance of Ureaplasma species and Mycoplasma hominis in Hangzhou, China, from 2013 to 2019. Front Microbiol. 2022; 13: 982429. DOI: https://doi.org/10.3389/ fmicb.2022.982429 PMID: 36187990; PMCID: PMC9520197.
7. Leli C., Mencacci A., Latino M.A., Clerici P., Rassu M., Perito S., et al. Prevalence of cervical colonization by Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis and Mycoplasma genitalium in childbearing age women by a commercially available multiplex real-time PCR: an Italian observational multicentre study. J Microbiol Immunol Infect. 2018; 51 (2): 220-5. DOI: https://doi.org/10.1016/j. jmii.2017.05.004 Epub 2017 Jun 28. PMID: 28711440.
8. Foschi C., Salvo M., D'Antuono A., Gaspari V., Banzola N., Cevenini R., et al. Distribution of genital Mollicutes in the vaginal ecosystem of women with different clinical conditions. New Microbiol. 2018; 41 (3): 225-9. Epub 2018 Apr 5. PMID: 29620787.
9. Rumyantseva T., Khayrullina G., Guschin A., Donders G. Prevalence of Ureaplasma spp. and Mycoplasma hominis in healthy women and patients with flora alterations. Diagn Microbiol Infect Dis. 2019; 93 (3): 227-31. DOI: https://doi. org/10.1016/j.diagmicrobio.2018.10.001 Epub 2018 Oct 4. PMID: 30344067.
10. Wang C., Wang J., Yan J., Chen F., Zhang Y., Hu X. Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum, and Ureaplasma urealyticum: hidden pathogens in peritoneal dialysis-associated peritonitis. Int J Infect Dis. 2023; 131: 13-5. DOI: https://doi. org/10.1016/j.ijid.2023.03.032 Epub 2023 Mar 21. PMID: 36948449.
11. Jonduo M.E., Vallely L.M., Wand H., Sweeney E.L., Egli-Gany D., Kaldor J., et al. Adverse pregnancy and birth outcomes associated with Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum: a systematic review and metaanalysis. BMJ Open. 2022; 12 (8): e062990. DOI: https://doi.org/10.1136/bmjopen-2022-062990 PMID: 36028274; PMCID: PMC9422885.
12. Brotman R.M., Shardell M.D., Gajer P., Fadrosh D., Chang K., Silver M.I., et al. Association between the vaginal microbiota, menopause status, and signs of vulvovaginal atrophy. Menopause. 2014; 21 (5): 450-8. DOI: https://doi. org/10.1097/GME.0b013e3182a4690b PMID: 24080849; PMCID: PMC3994184.
13. Mitchell C.M., Srinivasan S., Zhan X., Wu M.C., Reed S.D., Guthrie K.A., et al. Vaginal microbiota and genitourinary menopausal symptoms: a cross-sectional analysis. Menopause. 2017; 24 (10): 1160-6. DOI: https://doi.org/10.1097/ GME.0000000000000904 PMID: 28640154; PMCID: PMC5607086.
14. Ravel J., Gajer P., Abdo Z., Schneider G.M., Koenig S.S., McCulle S.L., et al. Vaginal microbiome of reproductive-age women. Proc Natl Acad Sci USA. 2011; 108 (suppl 1): 4680-7. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1002611107 Epub 2010 Jun 3. PMID: 20534435; PMCID: PMC3063603.
15. Aldunate M., Srbinovski D., Hearps A.C., Latham C.F., Ramsland P.A., Gugasyan R., et al. Antimicrobial and immune modulatory effects of lactic acid and short chain fatty acids produced by vaginal microbiota associated with eubiosis and bacterial vaginosis. Front Physiol. 2015; 6: 164. DOI: https://doi.org/10.3389/ fphys.2015.00164 PMID: 26082720; PMCID: PMC4451362.
16. Barrientos-Duran A., Fuentes-Lopez A., de Salazar A., Plaza-Diaz J., Garcia F. Reviewing the composition of vaginal microbiota: inclusion of nutrition and probiotic factors in the maintenance of eubiosis. Nutrients. 2020; 12 (2): 419. DOI: https://doi. org/10.3390/nu12020419 PMID: 32041107; PMCID: PMC7071153.
17.Qi W., Li H., Wang C., Li H., Fan A., Han C., et al. The effect of pathophysiological changes in the vaginal milieu on the signs and symptoms of genitourinary syndrome of menopause (GSM). Menopause. 2020; 28 (1): 102-8. DOI: https://doi.org/10.1097/ GME.0000000000001644 PMID: 32810079.
18.Doroftei B., Ilie O.D., Armeanu T., Anton E., Scripcariu I., Maftei R. The prevalence of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis infections in infertile patients in the Northeast Region of Romania. Medicina (Kaunas). 2021; 57 (3): 211. DOI: https://doi.org/10.3390/medicina57030211 PMID: 33652790; PMCID: PMC7996858.
19. Hong X., Yin J., Wang W., Zhao F., Ding X., Yu H., et al. The associations between low abundance of Mycoplasma hominis and female fecundability: a pregnancy-planning cohort study. BMC Microbiol. 2022; 22 (1): 121. DOI: https:// doi.org/10.1186/s12866-022-02545-7 PMID: 35513786; PMCID: PMC9069813.
20. Horner P., Donders G., Cusini M., Gomberg M., Jensen J.S., Unemo M. Should we be testing for urogenital Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum and Ureaplasma urealyticum in men and women? A position statement from the European STI Guidelines Editorial Board. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2018; 32 (11): 1845-51. DOI: https://doi.org/10.1111/jdv.15146 Epub 2018 Jul 6. PMID: 29924422.
21. Donders G.G.G., Ruban K., Bellen G., Petricevic L. Mycoplasma/ureaplasma infection in pregnancy: to screen or not to screen. J Perinat Med. 2017; 45 (5): 505-15. DOI: https://doi.org/10.1515/jpm-2016-0111 PMID: 28099135.
