CC BY
44
ни: зб. наук. праць Харк. держ. зоовет. акад. -Харків, 2003. - Вип. 11 (35), част. 2. - С. 193197.
5. Патологія вагітності у тварин / В.П. Кошовий [та ін.]; за ред. В.П. Кошового. - Харків: Видавництво Шейніної О.В., 2009.
4. Кошевой, В.П. Функциональные особенности фето-плацентарного комплекса при А-витаминной недостаточности у коров / Кошевой В.П. // Совершенствование мер борьбы с болезнями с/х животных: сб. науч. тр. Харьк. с.-х. ин-т. - Харьков, 1984. - Т.30. - С. 50-55.
- 276 с.
6. Справочник по акушерству, гинекологии и перинаталогии : учебное пособие для системы послевузовского профессионального образования врачей / сост.: И.Б. Банухин [и др.]; под ред. акад. РАМН, проф. Г.М. Савельевой. - М. : Медицинское информационное агентство, 2006. - 716 с.
УДК 636.2.09:591.441](043.3)
Г аврилин П.Н., д-р вет. наук, профессор;
Лещева М.А., канд. вет. наук, доцент; Филиппова Ю.А., ассистент, Днепропетровский государственный аграрно-экономический университет, Украина ВОЗРАСТНЫЕ АСПЕКТЫ ФОРМИРОВАНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ЗОН ПАРЕНХИМЫ СЕЛЕЗЕНКИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Определены закономерности становления зональной специализации лимфоидной паренхимы в пределах отдельных сегментов селезенки крупного рогатого скота в онтогенезе. Узелки с центрами размножения впервые установлены в селезенке 10-суточных телят, а их максимальное развитие в 18-месячном возрасте. Постнатальное развитие лимфоидной паренхимы сегментов селезенки происходит преимущественно за счет интенсивного развития их узелковых компонентов, наиболее выражено в 30-суточном и 36-месячном возрасте.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: БЕЛАЯ ПУЛЬПА СЕЛЕЗЕНКИ, ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЕЛКИ, ПЕРИАРТЕРИАЛЬНЫЕ ЛИМФОИДНЫЕ МУФТЫ, РЕТИКУЛЯРНЫЕ ВОЛОКНА, КРУПНЫЙ РОГАТЫЙ СКОТ
UDC 636.2.09:591.441](043.3)
Gavrilin P.N., Doct.Vet.Sci., Professor;
Leschyova M.A., Cand.Vet.Sci., Associate Professor;
Filippiva Yu.A., Assistant
AGE-RELATED ASPECTS OF FORMING THE FUNCTIONAL ZONES OF CATTLE'S SPLEEN PARENCHIMA.
We defined the features of becoming the lymphoid parenchyma's zonal specialization within the limits of separate segments of cattle's spleen in ontogenesis. Small knots with the reproduction centers were first set in a spleen at the age of 10-day calves, and its maximal growth was in 18-monthly age. Postnatal growth of lymphoid parenchyma segments of the spleen is due to intensive growth of their knot components, and the most pronounced at the
age of 30 days and 36 months.
KEY WORDS: THE WHITE PULP OF THE SPLEEN, LYMPHATIC KNOTS, PERIMALIG-NANT LYMPHOMA CLUTCHES, RETICULAR FIBERS, CATTLE
42
В наше время исследования в области теоретической и клинической иммунологии достигли значительных успехов [1 , 6]. Ряд отечественных и зарубежных исследований раскрывают морфогенез центральных и периферических органов иммунной защиты, закономерности их развития и функционирования [5, 8, 9]. Достигнутые успехи способствуют лучшему пониманию индивидуальных особенностей реагирования органов иммунной системы в норме и при различных патологиях, при развитии первичных и вторичных иммунодефицитных состояний [9, 4 ,7]. Особенности строения и морфогенез селезенки достаточно хорошо изучены и освещены в научной литературе на примере человека, лабораторных и некоторых видов домашних и диких животных. Есть достаточное количество сообщений об особенностях постнатального морфогенеза селезенки и изменения ее структурных компонентов при действии различных факторов окружающей среды, лекарственных средств и патологий [3, 2]. Однако до настоящего времени остаются малоизученными гистологические и морфометрические особенности лимфоидной паренхимы органа у крупного рогатого скота (КРС) с точки зрения становления ее зональной функциональной специализации.
Методика. Работа выполнена в лаборатории гистологии, иммуноцитохимии и патоморфологии Научно-исследовательского центра биобезопасности и экологического контроля ресурсов АПК Днепропетровского государственного аграрно-экономического университета.
Объект исследований - плоды, телята и взрослый крупный рогатый скот (КРС) украинской красной породы.
Материалом для исследований служила селезенка (плоды 2-9-месячного возраста; телята 1 -, 10 -, 30 - и 120-суточного возраста; КРС 12 -, 18 -, 24-, 36-месячного возраста), полученная через 30-40 мин после убоя в условиях мясоперерабатывающего предприятия «Юбилейный» г. Днепропетровск и убойном пункте хозяйства ООО «Г айдамацьке».
Для достижения поставленной цели использовались гистологические, морфометрические и статистические методы исследований.
Органы фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. Проводка тканей осуществлялась в ксилоле. Для оценки тканевых структур изготавливали парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм на санном микротоме МС-2 с последующей окраской гематоксилином и эозином, по Ван-Гизон [10]. Импрегнацию срезов азотнокислым серебром по Футу проводили в модификации П.Н. Гаврилина с использованием замороженных срезов толщиной 10-20 мкм, изготовленных на микротоме-криостате «МК-25 М». Исследование гистологических объектов проводили с помощью аппаратно - программного комплекса , в состав которого входили: цифровой микроскоп «Leica DM 1000», цифровая камера «Leica DFC 295», персональный компьютер, оригинальная морфометрическая программа «Leica Qwin 3.0». Исследовали диаметр лимфатических узелков и их центров размножения, ширину мантийной, периартериальной и маргинальной зон лимфатических узелков. Измерения проводились в пяти полях зрения каждого гистологического препарата, исследовали три среза по каждому объекту. Для статистической обработки полученных данных использовали программу «Statistica 8.0.550 Portable».
Результаты и обсуждение. Относительная площадь (ОП) стромальных компонентов селезенки новорожденных телят составляет 11,15 ± 0,88, при этом толщина капсулы не превышает 144,29 ± 7,93 мкм, а соединительнотканных трабекул - 97,39 ± 6,77 мкм (рис. 1).
Эти трабекулы сильно разветвленные, наиболее крупные из них расположены в центральных участках органа, ближе к ее воротам, а мелкие - в краевых, наиболее удаленных от ворот участках. ОП паренхимы селезенки суточных телят составляет около 89,00%, из них на красную пульпу приходится 77,90 ± 0,26%, а на белую пульпу только 10,95 ± 1,42 % (табл.1).
43
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
94,68
94,5
93,21
93,89
1-дн 10-дн 30-дн 120-дн 12-мес 18-мес
Возраст животных
24-мес 36-мес
□ строма D паренхима
Рис. 1. Динамика относительной площади стромальных и паренхиматозных компонентов селезенки КРС в течение постнатального периода онтогенеза, %
Большая часть лимфоидной ткани приходится на периартериальные лимфоидные муфты (ПАЛМ) и лимфатические узелки (ЛВУЗ), при этом ширина ПАЛМ составляет 50,48 ± 6,16 мкм, а диаметр ЛВУЗ не превышает 94,81 ± 7,47 мкм.
Центры размножения в лимфатических узелках селезенки новорожденных телят еще не проявляются. Ретикулярная строма ПАЛМ представлена равномерной, середнепетлистой, сотовидной сетью арги-рофильных волокон, характерной для Т-зависимых зон периферических лимфоидных органов.
Структура соединительнотканного острова селезенки у 10-суточных телят практически не отличается от новорожденных, однако в значительной степени изменяется строение лимфоидных компонентов. Несколько увеличивается диаметр ЛВУЗ без центров размножения (до 108,37 ± 7,89 мкм) при относительно стабильных показателях ширины ПАЛМ (62,61 ± 7,25 мкм). Единичные ЛВУЗ с центрами размножения начинают появляться в селезенке 10-суточных телят их ОП не превышает 1,98 ± 0,23%, однако максимальную степень их развития отмечаем только в 30-суточном возрасте (рис. 2).
В этот период их ОП достигает максимального значения 1,85 ± 0,36 %, а диаметр составляет 351,84 ± 21,05 мкм. Каждый ЛВУЗ имеет четко выраженный светлый центр с диаметром 269,44 ± 10,55 мкм, мантийную и маргинальную зоны с диаметром 42,10 ± 4,38 мкм и 40,30 ± 6,12 мкм соответственно. Ретикулярная основа ПАЛМ представлена среднеячеистой, равномерной сотовидной сетью аргирофиль-ных волокон, напоминающей ретикулярную основу паракортикальных зон лимфатических узлов. На границе с маргинальной зоной сетка ретикулярных волокон уплотняется и становится мелкоячеистой. В ЛВУЗ сетка ретикулярных волокон равномерная и преимущественно средне -(ЛВУЗ без центров размножения) и крупноячеистая (с центрами размножения). Красная пульпа селезенки телят молочного периода представлена селезеночным клеточными тяжами и синусоидами, заполненными клетками миелоидного и лимфоидного ряда. В селезеночных тяжах ретикулярные волокна концентрируются в небольшие, расположенные под разными углами друг к другу, пучки. Соседние пучки обмениваются волокнами, в результате чего между ними образуется рыхлая великопетлистая сетка.
44
Рис.2. Гистопрепарат селезенки 30-суточного теленка: А - окраска. гематоксилином и эозином, Б - импрегнация азотнокислым серебром за Футом, х 200. 1 - ЛВУЗ и его: а - ПАЛМ, б - мантийная зона, в - центр размножения, г - центральная артерия, 2 - красная пульпа
Структура соединительнотканной стромы селезенки у КРС в течение постнатального периода роста существенно не меняется. Ее ОП постепенно растет, что проявляется утолщением трабекул и капсулы до 24-месячного возраста животных, а до 36 -месячного возраста отмечается утолщение капсулы до 363,97 ± 10,26 мкм (табл. 2).
ОП красной пульпы, наоборот, имеет тенденцию к уменьшению и достигает минимального значения 75,39 ± 3,21 % у 36-месячных животных. Архитектоника и плотность расположения ретикулярных волокон неодинакова в красной и белой пульпе и составляющих последней. В ЛВУЗ без центров размножения наблюдается уплотнение сеток ретикулярных волокон, а в ЛВУЗ с центрами размножения отмечается разрежение и истончение ретикулярных волокон в центрах их размножения и утолщение в мантийных зонах. В красной пульпе волокна тонкие, слабо разветвленные, образуют мелкоячеистые сетки. Часть ячеек незамкнутая. ОП белой пульпы селезенки достигает абсолютного максимума у 18-месячных животных (21,50 ± 3,93 %), после чего неуклонно уменьшается в течение периода половой и физиологической зрелости (до 18,51 ± 3,13 % в 36- месячном возрасте). Динамика морфометрических показателей отдельных компонентов белой пульпы селезенки характеризуется неравномерностью их изменений. Харак-
терно, что ОП ЛВУЗ без центров размножения доминирует над лимфоидными узелками с центрами размножения.
До 36-месячного возраста в селезенке телят отмечается рост абсолютных промеров всех без исключения компонентов белой пульпы. В 36-месячном возрасте максимального диаметра достигают ЛВУЗ без центров размножения и составляет 601,12 ± 18,72 мкм. Диаметр центров размножения наименьший у животных 30-суточного возраста - 126,50 ± 5,39 мкм. Крупные центры размножения наблюдаются в селезенке КРС 36- месячного возраста - 522,20 ± 22,17 мкм, что свидетельствует об активных процессах пролиферации в ЛВУЗ. Структурные преобразования ретикулярного остова селезенки характеризуются появлением в мантийных зонах узелков плотных, четко выраженных и равномерно развитых по всему периметру сплетений с ретикулярными волокнами «ретикулярных корзин». Впервые это отмечается у 120- суточных телят. В дальнейшем в центрах узелков отмечается разрежение и фрагментация ретикулярных волокон. Кроме этого, во всех функциональных зонах селезенки отмечается утолщение аргирофильных волокон с одновременным увеличением размеров ячеек, которые они образуют, что особенно характерно для ПАЛМ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Проведенными исследованиями установлено, что гистогенез тканевых компонентов селезенки
45
КРС в течение постнатального периода онтогенеза характеризуется: на первом этапе (до 30-суточного возраста) - интенсивным развитием лимфоидных узелков, прежде всего с центрами размножения на фоне соответствующих существенных изменений количественных показателей других исследуемых компонентов; на втором этапе (до 12-месячного возраста) -
тенденцией к уменьшению основных составляющих паренхимы, за исключением лимфоидных узелков, сопровождается, соответственно, увеличение относительной площади стромы; на третьем этапе (до 36-месячного возраста) - отсутствием существенных изменений в соотношении стромальных и паренхиматозных компонентов органа.
Таблица 1
Динамика морфометрических изменений компонентов стромы и паренхимы селезенки КРС в постнатальный период онтогенеза, мкм; М+ш
Возраст животных, дн Показатели 1 10 30 120
Промеры, мкм Толщина стромы Капсула 144,29 ±7,93 151,24 ±8,22 161,84 ±7,60 202,94 ±10,76*
Трабекула 97,39 ±6,77 105,59 ±6,69 116,49 ±5,04 165,41 ±7,36**
Белая пульпа Ширина ПАЛМ 50,48 ±6,16 62,61 ±7,25 71,03 ±4,84 106,51 ±4,40**
Диаметр ЛВУЗ без центров размножения 94,81 ±7 47** 108,37 ±7,89 162,71 ±5,23** 307,60 ±12,45***
Ширина зон ЛВУЗ с центрами размножения Центр размно- жения - 126,50 ±5,39 269,44 ±10,55*** 383,02 ±12,06**
Мантийная зона - 17,61 ±2,78 42,10 ±4,38** 79,53 ±5,30**
Маргинальная зона - 24,03 ±8,20 40,30 ±6,12 92,30 ±8,52**
Диаметр ЛВУЗ с центрами размножения - 168,14 ±16,37 351,84 ±21,05** 554,85 ±25,88**
Таблица 2
Динамика морфометрических изменений компонентов стромы и паренхимы селезенки КРС в постнатальный период онтогенеза, мкм; М+ш
Возраст животных, мес Показатели 12 18 24 36
Промеры, мкм Толщина стромы Капсула 255,04 ±9,82* 275,13 ±13,30 304,59 ±8,22 363,97 ±10,26*
Трабекула 219,00 ±9,55* 233,28 ±13,40 250,09 ±10,85 298,37 ±12,15*
Белая пульпа Ширина ПАЛМ 94,43 ±6,51 99,92 ±7,31 109,33 ±7,24 114,22 ±6,05
Диаметр ЛВУЗ без центров размножения 402,94 ±14,39** 592,36 ±27,00** 585,79 ±20,94 601,12 ±18,72
Ширина зон ЛВУЗ с центрами размножения Центр размножения 464,55 ±13,58** 468,20 ±15,90 518,32 ±10,06 522,20 ±22,17
Мантийная зона 104,16 ±5,25* 115,09 ±8,24 111,08 ±6,52 120,98 ±5,80
Маргинальная зона 131,46 ±7 77** 155,71 ±5,85 162,50 ±6,57 161,76 ±7,32
Диаметр ЛВУЗ с центрами размножения 700,17 ±27,89* 739,00 ±26,94 791,89 ±23,15 804,94 ±28,02
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Самусев, Р.П. Морфогенез гемомикроциркуляторного русла иммунных органов че-
ловека в пре- и постнатальном онтогенезе / Р.П. Самусев., Г.И. Путышева., И.Т. Гегин. //
46
Тезисы докладов Х1 сьезда анатомов, гистологов и эмбриологов. - Полтава, 1992. - С. 211.
2. Хлыстова, З.С. Развитие иммунной системы в онтогенезе человека / З.С. Хлыстова. // Архив патологи. - 1991. - Т.53. - №11. - С. 1117.
3. Шмальгаузен, И.И. Рост и дифференци-ровка / И.И. Шмальгаузен. / Рост и дифферен-цировка. - К.: Наукова думка, 1984. - Т.2. -168 с.
4. Моталов, В.Г. Структурнофункциональная характеристика и закономерности морфогенеза селезенки человека в постнатальном онтогенезе: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня доктора мед. наук: спец. 14.00.02 «анатомія людини» / Г.В. Моталов. -Москва, 2002. — 30 с.
5. Онтогенетические аспекты стромальнопаренхиматозных взаимоотношений в селезенке / А.И. Рябикина., А.А. Капитонова ., З.Ч. Морозова З.Ч. // - Морфология. - 2008. Т.132. - №2. - С. 58.
6. Молдавская, А.А. Морфологические изменения структуры капсулы селезенки в
условиях хронической алкогольной интоксикации / А.А. Молдавская, А.В. Долин. // -Морфологические ведомости. - 2007. - № 1-2. - С. 86-88.
7. Diesem, C.D. Age determinantion and structural changes in calves / C.D. Diesem, M. Hockman, J. K. Burt. // J. Amer.vet.mеd.ass. -1967. - Vol. 158. - № 9. - P. 1524 - 1547.
8. Сапин, М.Р. Имунная система человека/ М.Р. Сапин, Л.Е. Этинген. // - М.: Морфологические ведомости. - 1996. - 304 с
9. Принципи зональної структурно-функціональної організації та морфогенезу компартментів паренхіми лімфатичних вузлів ссавців / П.Н. Гаврилін., Н.Г. Перепечаєва., НМ. Тішкіна. // - Вісник Сумського НАУ. -2009. - Вип.10 (20). - С. 110-115.
10. Горальський, Л.П. Основи гістологічної техніки і морфоофункціональні методи дослідження у нормі та при патології. / Л.П. Горальський, В.Т. Хомич, О.І. Кононський. - Житомир: Полісся, - 2005. - 288 с.
47
