CC BY
123
на 30 метров сходу») и силы; к 6 годам у мальчиков и к 7 годам у девочек при тестировании скоростно-силовой выносливости; в 7 лет у девочек в тесте на активную гибкость позвоночника. Такой период отрицательной динамики в развитии двигательных качеств у дошкольников к концу обучения в ДОУ отмечался и ранее [13]. Очевидно, это связано с усиленной подготовкой детей к обучению в школе, а физическая активность при этом
остается на прежнем уровне или даже снижается.
Учитывая все вышеизложенное, становится очевидной необходимость обновления (раз в 5 лет) региональных стандартов физического развития и физической подготовленности детского населения и совершенствования технологии их физического воспитания детей в ДОУ, с учетом морфофункциональных закономерностей развития ребенка и его индивидуальных особенностей.
ЛИТЕРАТУРА
1. АвтандиловГ.Г. Медицинская морфометрия. — М.: Медицина, 1990. — 384 с.
2. Башкиров П.Н. Учение о физическом развитии человека. - М.: Изд-во МГУ, 1962. - 340 с.
3. Гилясова М.Х. Физкультурно-оздоровительная работа в общеобразовательных учреждениях как приоритетная форма сохранения и укрепления здоровья школьников // Оздоровление нации и формирование здорового образа жизни населения: Материалы III Всерос. науч.-практ. конф. — Нальчик: ВНИиФКиС, 2007. — С.69-
4. Изаак С.И., Кабачков В.А., Тяпин А.Н. Научное обеспечение системы мониторинга физического развития и физической подготовленности детей, подростков и молодежи // Опыт работы в субъектах Российской Федерации по осуществлению мониторинга состояния физического здоровья детей, подростков и молодежи: сб. науч. тр. — М., 2002. — С.10-37.
5. Индреев М.Х., Киржинов М.М. Мониторинг физического состояния и актуальность ее организации в раннем возрасте // Оздоровление нации и формирование здорового образа жизни населения: Материалы III Всерос. науч.-практ. конф. — Нальчик: ВНИИФКиС, 2007.
6. Кузьмин А.Ф., Тихомирова Н.В. Здоровье и умственная работоспособность первоклассников в период адаптации к школьному обучению // IV Сибирский физио-
логический съезд: тез. докл. — Барнаул, 2008. — С.137.
7. Кучма В.Р., Миннибаев Т.Ш., Дьяконова О.М. и др. Состояние здоровья детей, проживающих на экологически неблагополучных территориях // Гигиена и санитария. — 1993. — № 11 — 0.38-41.
8. Кучма В.Р. Гигиена детей и подростков // Учебник: гигиена детей и подростков. — М.: Медицина, 2004. —
С.62-66.
9. Миклашевская Н.Н., Соловьева В. С., Година Е. З. Ростовые процессы у детей и подростков Москвы. — М., 1993.
— 234 с.
10. Михайлова Л.А. Системогенез и особенности транспорта кислорода у детей в условиях Сибири и Крайнего Севера // Сб. науч.-иссл. Работ КрасГМА. — Красноярск, 2002. — С.249-256.
11. Николаев В.Г., Шарайкина В.П., Синдева Л.В. и др. Методы оценки индивидуально-типологических особенностей физического развития человека: учеб.-метод. пособие. — Красноярск: Изд-во КрасГМА, 2005. — 111с.
12. Савченков М.Ф. Состояние здоровья населения г. Иркутска в связи с техногенным загрязнением окружающей среды. — Иркутск, 1991. — 75 с.
13. Тимошина И.Н. Влияние непрерывного физкультурного образования на уровень здоровья учащихся // Физическая культура: воспитание, образование, тренировка. — 2006. — № 3. — С.17-19.
14. Тяпин А.Н., Пузырь Ю.П., Захаров Л.А. и др. Физкультурный паспорт // Методическое руководство по тест-программе. — М., 1998. — 25 с.
Адрес для переписки:
664003 г. Иркутск, ул. Красного восстания, 1, ИГМУ, кафедра анатомии человека, ассистенту Герасимовой Ирине Николаевне. Контактный телефон: (3952)24-33-61.
© СТОМ Д.И., БОЯРОВА Н.А., ДАГУРОВ А.В., ВЯТЧИНА О.Ф., САКСОНОВ М.Н. - 2008
ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ГУМИНОВЫХ ВЕЩЕСТВ
Д.И. Стом, Н.А. Боярова, А.В. Дагуров, О.Ф. Вятчина, М.Н. Саксонов
(Иркутский государственный университет, ректор — д.х.н., проф. А.И. Смирнов; Научно-исследовательский институт биологии при Иркутском государственном университете, директор — к.б.н. Л.Р Изместьев, лаборатория водной
токсикологии, зав. — д.б.н., проф. Д.И. Стом)
Резюме. Изучали влияние препаратов гуминовых веществ на изменение гидрофобности поверхностей клеток и спор микроорганизмов и их адгезию к гидрофобным веществам. Установлено, что гуматы и поверхностно-активные вещества снижали адгезию клеток микроорганизмов на каплях эмульсий гидрофобных веществ и повышали гидрофиль-ность их поверхностей.
Ключевые слова: гуматы, микроорганизмы, олеофильные вещества, эмульсии, адгезия.
THE POSSIBLE MECHANISMS OF HUMIC SUBSTANCES BIOLOGIC EFFECT
D.I. Stom, N.A. Boyarova, A.V. Dagurov, O.F. Vyatchina, M.N. Saxonov (Irkutsk State University, Scientific Research Institute of Biology at Irkutsk State University)
Summary. The effect of humic substances samples on the change of hydrophobic properties of cell surface and spores of microorganisms and their adhesion to hydrophobic substances was studied. Humates and surface active substances are shown to decrease microorganism cell adhesion on the drops of hydrophobic substance emulsion and increase hydrophily of their surface.
Key words: humates, microorganisms, hydrophobic substances, emulsions, adhesion.
В последнее время появились сообщения о способности гуминовых веществ снижать уровень заболеваемости [4,9,13]. Важной особенностью действия гуми-новых веществ на организм является их относительная индифферентность к протекающим в организме процессам в норме, и эффективное корректирующее дей-
ствие при каких либо отклонениях, происходящих в организме [7]. Вместе с тем достоверных сведений о механизмах действия гуминовых веществ на биологические объекты до сих пор нет. Высказываются предположения, что в основе биологических эффектов гу-миновых веществ на организмы лежит их способность
солюбилизировать и диспергировать гидрофобные вещества [3,11]. В связи с этим целью данного исследования являлось изучение влияния препаратов гуминовых веществ на изменение гидрофобности поверхностей клеток и спор микроорганизмов и их адгезию к гидрофобным веществам.
Материалы и методы
В работе использовали штамм Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki 7-14 кс., выделенный при эпизоотии лиственничной мухи (Hylemyia laricicola) в Камчатской области [2]. Штамм получен из коллекции О.Ф. Вятчиной. Для проведения исследований брали также вегетативные клетки непатогенных штаммов микроорганизмов Yarrowia lipolytica и Rhodococcus erythropolis. Эти культуры входят в состав углеводородокисляющего микробиологического препарата «Деворойл» [10]. Препарат разработан в институте Микробиологии РАН и Научно-производственном предприятии «Биотехинвест» [9]. Нефтеокисляющие штаммы культивировали на синтетической среде №1 для углеводородокисляющих микроорганизмов следующего состава (%): KNO3 - 0,40; MgSO4 - 0,08; KH2PO4
- 0,06; Na2HPO4 - 0,14; водопроводная вода; pH 7,2 [8]. Бактериальные споры получали следующим способом. Культуру B. thuringiensis выращивали на РПА при температуре 28-30оС в течение 7 суток. При 98% высыпании спор, их смывали дистиллированной водой и доводили до нужного титра, оценивая оптическую плотность при Х=400 нм.
В работе использовали следующие гидрофобные вещества: гексадекан, рафинированное подсолнечное масло («Злато» 100%), маргарин «Домашний», свиной жир.
Эффекты ГВ сопоставляли с действием неионогенного поверхностно-активного вещества «Tween-20».
Источниками гуминовых веществ служили коммерческие препараты «Гумат-80» и «Powhumus». Первый представляет собой смешанный гумат K/Na, выпускаемый ООО «Аграрные технологии» г. Иркутск. Его получают путем механохимической обработки бурого угля и смеси К2СО3/ Na2C03 [6]. «Powhumus» - гумат калия (Humintech Ltd., Германия), производят по стандартной технологии мокрой щелочной экстракции из окисленного угля (леонардита). Для приготовления матричного раствора «Гумат-80» навеску соответствующего мелкодиспергированного воздушносухого препарата растворяли в воде и фильтровали через бумажный фильтр.
Влияние липофильных продуктов и гуминовых веществ на гидрофобность поверхности клеток и спор микроорганизмов определяли колориметрически по количеству спор и клеток, перешедших из бактериальной суспензии в ли-пофильную фазу [5].
Непосредственно перед опытами маргарин и свиное сало предварительно плавили, нагревая их на водяной бане до 42оС и 85оС соответственно. Для более четкого отличия гидрофобной фазы от гидрофильной растительное масло, жир и маргарин подкрашивали «Суданом — IV».
Влияние гумата и ПАВ на адгезию клеток Y. lipolytica на каплях эмульсий растительного масла и маргарина, подкрашенных суданом, определяли, смешивая олеофильные вещества и суспензию микроорганизмов (титр ~107 КОЕ/ мл) в соотношении 1:4. Затем смесь эмульгировали на магнитной мешалке две минуты и отстаивали десять минут. Микроскопирование проводили при увеличении х40. Диаметр капель липидов определяли при помощи окулярмик-рометра. Подсчитывали количество клеток, находящихся на каждой отдельной капле. Исходя из площади поверхности капель и количества находящихся на них клеток, оценивали величину адгезии (количество клеток микроорганизмов на 1 мкм капли гидрофобного вещества) по формуле:
S = nd2/2;
A = n/S,
где S — площадь поверхности одной капли эмульсии, d
— диаметр одной капли, n — количество клеток, адгезиро-
ванных к одной капле, А — величина адгезии.
Для статистической обработки полученных данных пользовались общепринятыми методами [2] с применением пакета программ Statgraf 3.0 и Excel 2003. Значимость различий определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Выводы сделаны при вероятности безошибочного прогноза р>0,95.
Результаты и обсуждение
Эксперименты показали, что инкубирование с гид-
микроорганизмов в гидрофобную фазу и снижение гид-рофильности их поверхностей. Усиление олеофильно-сти клеток микроорганизмов после их контакта с растительным маслом и свиным жиром было характерно для всех используемых в опытах микроорганизмов: B. thuringiensis subsp. kurstaki 7-14 кс., Y. lipolytica, R. erythropolis (табл. 1).
Результаты распределения клеток R. erythropolis в системе растительное масло — вода и влияние на этот процесс препарата «Powhumus» даны в таблице 2. Из нее видно, что больше всего клеток R. erythropolis обнаруживали в нижнем слое растительного масла, т.е. на границе раздела фаз масло — вода. Добавление гумата
Рис. 1. Адгезия клеток У. \ipolytica на каплях эмульсии растительного масла.
«Powhumus» в концентрации 1 г/л снижало содержание клеток R. erythropolis в каждом слое растительного масла на порядок, следовательно, гумат делал поверхность бактериальных клеток более гидрофильными, и благодаря этому обеспечивал их переход в водную фазу.
На следующем этапе исследований изучали влияние
Таблица 1
Индекс гидрофобности поверхности клеток микроорганизмов (В. thuringiensis, У. Иро1уйса и Я. егуШгороЩ после обработки гексадеканом, растительным маслом
и свиным жиром
Суспензии микроорганизмов обработаны: Индекс гидрофобности, %
Y. lipolytica R. erythropolis B. thuringiensis
гексадеканом 42±12,3 38±11,2 3б±10,3
растительным маслом 40±1б,7 32±13,3 29+11,2.
свиным жиром 54±9,4 47±14,2 44±15,9
рофобными веществами клеток микроорганизмов, вызывает уменьшение оптической плотности их суспензий, что свидетельствует об усилении перехода клеток
Таблица 2
Влияние раствора препарата «Powhumus» (1 г/л) на распределение в слоях растительного масла клеток Я. егуШгоро1к
Вариант опытов Содержание клеток в отстоявшемся растительном масле, КОЕ/мл**
нижний слой средний слой верхний слой
Без гумата (1,7+0,2)*107 (0,1+0,04)*107 (3,8+0,б)*105
С гуматом (0,б+0,1)*10б (0,3+0,0б)*10б (0,5+0,08)*104
Примечание: ** - титр микроорганизмов определяли методом Коха.
Рис. 2. Влияние раствора «Powhumus» (1 г/л) на адгезию клеток Y. lipolytica на каплях эмульсии растительного масла.
различных концентраций растворов «Powhumus» и «Tween-20» на адгезию клеток Y. lipolytica на капли эмульсии гидрофобных веществ (рис. 1, 2).
лям эмульсии маргарина (табл. 3).
Твин, также как и гумат, оказывал влияние на адгезию микроорганизмов к каплям эмульсии растительного масла. Величина адгезии У. lipolytica при добавлении «Tween-20» зависела от его содержания в растворе. При низкой концентрации твина (0,001 мл/л) адгезия У. lipolytica практически не отличалась от контроля. Раствор «Tween-20» с концентрацией 1 мл/л снижал величину адгезии клеток (табл. 4).
Таким образом, обработка олеофильными веществами спор и клеток микроорганизмов повышала гидро-фобность их поверхностей. В системе двух несмешива-ющихся жидкостей (растительное масло — вода) наиболее высокая концентрация клеток R. erythropolis наблюдалась на границе раздела фаз масло-вода. Под действием гуминовых веществ снижалось количество клеток R. erythropolis, переходивших из полярной фазы (вода) в неполярную (растительное масло). Гуматы и поверхностно-активные вещества снижали адгезию клеток Y.lipolytica на каплях эмульсии гидрофобных веществ.
Работа выполнена при финансовой поддержке программ «Фундаментальные исследования и высшее образование» (проект НОЦ-17 «Байкал»), «Развитие научного потенциала высшей школы» (проект РНП.2.2.2.3.16062) и РФФИ №080498057р Сибирь.
Таблица 3
Влияние разных концентраций растворов «Powhumus» и «TWeen-20» на адгезию клеток односуточной культуры Y. lipolytica (~107 КОЕ/мл) на каплях эмульсии
маргарина
Состав эмульсии Величина адгезии, кл/мкм2
Маргарин + Y lipolytica 0,71+0,23
Маргарин + Y lipolytica + вода 0,б7+0,18
Маргарин + Y lipolytica + «Powhumus» 0,1 г/л 0,58+0,14
Маргарин + Y lipolytica + «Powhumus» 0,5 г/л 0,31+0,09
Маргарин + Y lipolytica + «Powhumus» 1 г/л 0,1+0,07
Маргарин + Y lipolytica + «Powhumus» 2 г/л 0,б4+0,1б
Маргарин + Y lipolytica + «Tween-20» 0,001 мл/л 0,б2+0,12
Маргарин + Y lipolytica + «Tween-20» 0,01 мл/л 0,59+0,13
Маргарин + Y lipolytica + «Tween-20» 0,1 мл/л 0,52+0,08
Маргарин + Y lipolytica + «Tween-20» 1 мл/л 0,22+0,0б
Сходные данные были получены и при постановке опытов на адгезию клеток культуры Y. lipolytica к кап-
Таблица 4
Влияние растворов «Powhumus» и «Tween-20» разных концентраций на адгезию клеток односуточной культуры Y. lipolytica (титр ~107 КОЕ/мл) на каплях эмульсии растительного
масла
Состав эмульсии Величина адгезии, кл/мкм2
Растительное масло + Y lipolytica 0,058+0,01б
Растительное масло + Y lipolytica + вода 0,053+0,014
Растительное масло + Y lipolytica + «Powhumus» 0,1 г/л 0,04б+0,009
Растительное масло + Y lipolytica + «Powhumus» 0,5 г/л 0,020+0,00б
Растительное масло + Y lipolytica + «Powhumus» 1 г/л 0,009+0,002
Растительное масло + Y lipolytica + «Powhumus» 2 г/л 0,044+0,00б
Растительное масло + Y lipolytica + «Tween-20» 0,001 мл/л 0,051+0,012
Растительное масло + Y lipolytica + «Tween-20» 0,01 мл/л 0,024+0,007
Растительное масло + Y lipolytica + «Tween-20» 0,1 мл/л 0,018+0,00б
Растительное масло + Y lipolytica + «Tween-20» 1 мл/л 0,015+0,004
ЛИТЕРАТУРА
1. Борзенков И.А., Ибатуллин P.P., Милехина Е.И. и др. Использование микроорганизмов при ликвидации нефтяных загрязнений почв // Конф. «Интродукция микроорганизмов в окружающую среду», Москва, 17-19 мая, 1994. — М 1994. — С.14-15.
2. Вятчина О.Ф. Штаммы Bacillus thuringiensis, выделенные при эпизоотии лиственничной мухи (Hylemyia laricicola) в Камчатской области // Сибирский экологический журнал. — 2004. — № 4. — С.501-50б.
3. Дагуров А.В., Стом Д.И., Вятчина О.Ф. и др. О механизме антидотного действия гуматов по отношению к нефтепродуктам // Бюлл. ВСНЦ СО РАМН. — 2005. — №Ъ — С.143-14б
4. Кайдановский М.А. Опыт применения препарата Лиг-фол при лечении мелких домашних животных // Зооиндустрия. — 2006. — Т 73, № 4. — С.44-46.
5. Калмыкова Г.В. Биологическое разнообразие бактерий Bacillus thuringiensis из естественных экосистем: Дисс... канд. биол. наук. — Иркутск, 2005.
6. Левинский Б.В. Все о гуматах. — 4-е изд., перераб. и доп.
— Иркутск: Корф-Полиграф, 2003. — 75 с.
7. Петров В.А. Основные итоги медико-биологического тестирования “Гумивита” как биологически активной добавки к пище: Отчет о НИР. — Владивосток, 2000. — 20 с.
8. Практикум по микробиологии / Под ред. А.И. Нетру-сова. — М.: Академия, 2005. — 604 с.
9. Ряднов А.А., Ряднова Т.А., Петухова Е.В., Саломатин
B.В. Влияние Лигфола на естественную резистентность поросят-отъемышей // Ветеринария. — 2007. — № 3. —
C.60-62.
10. Сидоров Д.Г., Борзенков И.А., Ибатулин P.P. и др. Полевой эксперимент по очистке почв от нефтяного загрязнения с использованием углеводородокисляющих микроорганизмов // Пр икладная биохимия и микробиология. - 1997. - Т 33, № 5. - С.497-502.
Адрес для переписки:
664003, Иркутск-3, ул. К.Маркса 1, Иркутский государственный университет, т.(3952)24-34-53, E-mail: [email protected]; E-mail: [email protected].
664003, Иркутск-3, ул. Ленина, 3, а/я 24, Научно-исследовательский институт биологии при Иркутском государственном университете, тел. (3952)34-34-37, факс (3952)34-00-07.
11. Стом Д.И., Дагуров А.В. Комбинированное действие нефтепродуктов и «Гумата» на дафний //Сибирский экологический журнал. - 2004. - № 1. - С.35-40.
12. Piegorsch W.W., Bailer A.J. Statistics for Environmental Biology and Toxicology (Interdisciplinary Statistics). — Chapman & Hall, 1997. - 579 p.
13. Steinberg C.E.W. Ecology of humic substances in freshwa-ters // Springer. - 2003. - Р.332.
© ШЕСТАКОВА Ж.Н., ГУРЬЕВА В.А. - 2008
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА РЕПРОДУКТИВНОГО ПОТЕНЦИАЛА У ПАЦИЕНТОК, ПРОЖИВАЮЩИХ В УСЛОВИЯХ ГОРОДА И СЕЛЬСКОЙ МЕСТНОСТИ
Ж.Н. Шестакова, В.А. Гурьева
(Алтайский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. В.М. Брюханов, кафедра акушерства и гинекологии ФПК и ППС, зав. — д.м.н., проф. В.А. Гурьева)
Резюме. Работа выполнена в рамках международной программы ВОЗ «Репродукция человека» с использованием обязательной и однородной для сотрудничающих центров документации. Установлена более негативная демографическая ситуация в Алтайском крае в сельской местности с более низкой рождаемостью и большей смертностью по сравнению с городом. Усугубляют эту ситуацию более высокая частота встречаемости бесплодного брака в сельской местности (19%), превышающая критические значения, определенные проблемной группой ВОЗ как 15%, между тем у городских жителей этого влияния нет (15,3%). Выявлены различия факторов риска женской инфертильности в городе и сельской местности. Большая распространенность инфертильности у сельских женщин обусловлена большим количеством повреждающих факторов (10) и меньшим числом факторов, уменьшающих риск (3), по сравнению с ситуацией в городе (8 и 7, соответственно). У сельских пациенток ведущими факторами риска женской инфертильности являются возраст — 31 и более лет, абдоминальные операции, внематочная беременность, отсутствие контрацепции перед планированием беременности и нарушения менструального цикла, у горожанок — заболевания щитовидной железы, использование ВМС и также как и в сельской местности нарушения менструального цикла.
Ключевые слова: эпидемиология, бесплодный брак, унифицированная методология ВОЗ, факторы риска, Алтайский край.
COMPARATIVE ESTIMATION OF REPRODUCTIVE POTENTIAL OF PATIENTS RESIDENTS OF A TOWN AND OF THE COUNTRY
J. N. Shestakova, V. A. Guryeva (Altay State Medical University)
Summary. The research was done under the international program of WHO “Human reproduction” with the help of compulsory and homogeneous documentation for cooperative centers. More negative demographic situation was established in the country in the Altai region in comparison with a town. The high rate of occurrence ofinfertile marriage in a rural area (19%), which exceeds the critical number determined by the task force ofWHO as 15 %, aggravates this situation; meanwhile there is no such influence among the townswomen (15,3%). The differences between the risk factors of female infertility were detected in a town and in a rural area. Wide prevalence of infertility among women in the country is caused by a great quantity of damaging factors (10) and the lesser number of factors decreasing the risk (3) in comparison with the situation in town (8 and 7 correspondingly). The important risk factors of female infertility among the rural patients are abdominal operations, ectopic pregnancy, an absence of contraception before planning a pregnancy, menstrual cycle disorder and belonging to the age group over 31; among citizens these are thyroid gland disease, the usage of intrauterine devices and menstrual cycle disorder.
Key words: epidemiology, infertile marriage, unified methodology of WHO, risk factors, Altay Region.
В существующих социально-экономических условиях состояние репродуктивного здоровья населения страны остается одной из наиболее острых медико-социальных проблем, являясь фактором национальной безопасности. Продолжают сохраняться имеющие место в последние годы негативные тенденции в показателях, характеризующих репродуктивное здоровье. Низкий уровень рождаемости и высокий показатель общей смертности населения способствуют снижению уровня воспроизводства населения [1,5]. Процессы депопуляции, характеризующие демографическую ситуацию в России, диктуют необходимость более пристального внимания к факторам, влияющим на рождаемость, среди которых важное место занимает бесплодный брак [7]. Распространенность бесплодия в России имеет тенденцию к увеличению — 8-17,8% [4,8]. По данным ВОЗ, бесплодный брак при частоте, достигающей 15%, оказывает на демографические показатели более значи-
тельное влияние, чем невынашивание беременности и перинатальные потери вместе взятые, в связи с чем эта проблема приобретает важное государственное значение [2].
Целью настоящего исследования явилась оценка демографической ситуации в Алтайском крае с определением уровня бесплодия и особенностей структуры бесплодного брака в городской и сельской местности. Работа выполнена в рамках международной программы ВОЗ «Репродукция человека» с использованием обязательной и однородной для сотрудничающих центров документации [9].
Материалы и методы
Изучение демографической ситуации в Алтайском крае проведено на основании материалов записей актов гражданского состояния («Запись акта о заключении брака», «Запись акта о расторжении брака», «Запись акта о рождении», «Запись акта о смерти»). Исследовались такие пока-
