Внутриствольное строение внечерепной части ствола лицевого нерва у собак с мезоцефалическим типом строения черепа, обыкновенной лисицы и американской норки Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

Ветеринарные науки

Баданова Э.В. Внутриствольное строение внечерепной части ствола лицевого нерва у собак с мезоцефалическим типом строения черепа, обыкновенной лисицы и американской норки // Электронный научно-методический журнал Омского ГАУ. - 2015. -№2(2) июль-сентябрь. - URL http://e-journal.omgau.ru/index.php/2015-god/2/19-statya-2015-2/138-00027

УДК 599.742

Баданова Эмма Владимировна

Кандидат ветеринарных наук, ассистент ФГБОУВПО ОмГАУ имени П.А.Столыпина, г.Омск emma.badanova@yandex.ru

Внутриствольное строение внечерепной части ствола лицевого нерва у собак с мезоцефалическим типом строения черепа, обыкновенной лисицы

и американской норки

Аннотация: Внутриствольное строение лицевого нерва у собак, обыкновенной лисицы и американской норки, наряду со сходством, имеет особенности, характерные для каждого вида животного. Выявленные особенности связывают с приспособительным механизмом к полуводному образу американской норки.

Ключевые слова: лицевой нерв, обыкновенная лисица и американская норка, эндоневрий, периневрий, эпиневрий, миелиновые, безмиелиновые нервные волокна.

Введение. Успешное развитие звероводства могут быть обеспечены лишь при использовании новейших достижений науки и практики. В разрешении задач по увеличению поголовья разводимых зверей, улучшению качества пушной продукции и снижению себестоимости этой продукции невозможно без хороших знаний морфологии клеточных пушных зверей.

По данным [1], у мыши лицевой нерв на поперечных срезах по выходу из шилососцевидного отверстия состоит преимущественно из толстых миелиновых волокон и представлен одним пучком.

[2], [3], характеризует внутриствольную структуру лицевого нерва у белой мыши как более простую в строении, чем у кролика. По мнению автора, у собаки лицевой нерв имеет своеобразное строение, которое состоит в том, что кроме густых сплетений, формирующихся отдельными пучками в верхней и нижней губе, имеют место сплетения в области верхнего века, в височной и щечной областях.

[4] утверждает, что толстые миелиновые волокна имеют двигательную природу, средние волокна проводят нервные импульсы от рецепторов холода и тепла, тонкие волокна отвечают за болевую чувствительность.

[5] в лицевом нерве у домашних животных (крупный рогатый скот, лошадь) выявил преобладание толстых миелиновых волокон с насечками миелина и перехватами узла. Автором обнаружены также средние миелиновые и безмиелиновые нервные волокна.

[6], [7] отмечает, что двубрюшная ветвь у собачьих (обыкновенная лисица, песец) и куньих (американская норка, соболь) преимущественно состоит из миелиновых волокон

среднего диаметра. Безмиелиновые нервные волокна входят в состав нервов отдельными группами, или сопровождают миелиновые волокна.

В связи с вышеизложенным материалом, была поставлена цель: изучить внутриствольное строение лицевого нерва у собак, обыкновенной лисицы и американской норки.

Объекты и методы исследования. Материал для гистологических исследований брали от собак и пушных зверей в течение 3 - 12 часов после смерти. Изолированные нервные стволы длиной 1 - 2 см брали с обеих сторон до отхождения ветвей второго порядка. Свободный конец нервного ствола прошивали лигатурой и накладывали бирку, после чего материал фиксировали в 4-7% растворе нейтрального формальдегида. После фиксации материал проводили через ряд спиртов возрастающей концентрации и заливали в парафин [8], [9]. Поперечные срезы толщиной 7 - 10 мкм изготавливались на роторном микротоме.

Поперечные срезы нервов окрашивали гематоксилином Бемера и эозином [9]. Коллагеновые волокна соединительной ткани выявляли окраской по методу Ван Гизон [9]. Миелиновые нервные волокна окрашивали суданом черным В.

Толщину эпиневрия, периневрия, диаметр миелиновых волокон измеряли при помощи винтового окулярного микрометра «АМ-9» на световом бинокулярном микроскопе «Биолар». Площадь ствола лицевого нерва вычисляли при помощи микрометрической сетки.

При подсчете различных видов миелиновых волокон использовали классификацию, разработанную Казанскими нейроморфологами [10]. Нервные волокна по диаметру (мкм) были подразделены на четыре группы:

• безмиелиновые и маломиелиновые - 1,0 - 3,0;

• тонкие миелиновые - 3,1 - 5,0;

• средние миелиновые - 5,1 - 8,0;

• толстые миелиновые - свыше 8,1.

Подсчет миелиновых волокон и измерение их диаметра проводились по взаимоперпендикулярным диаметрам поперечного сечения нерва; выборка составляла 100 нервных волокон.

Метод распучковывания и разволокнения нервов. При изучении внутриствольного строения внечерепной части ствола лицевого нерва использовали метод распучковывания и разволокнения нервов по методу В. П. Воробьева (1925).

Отрезки нервного ствола длиной 0,8 - 1 см прикрепляли на спичку без головки и фиксировали в течение трех суток в 1,5% растворе нейтрального формальдегида. Перед разволокнением нерв промывали в проточной воде, затем его помещали на обезжиренное предметное стекло, фиксировали на рабочем столике бинокулярного микроскопа МБС-1. С помощью остроотточенных препаровальных игл снимали эпиневрий и периневрий. Затем пучок нерва окрашивали железным гематоксилином по Вейгерту в течении 3 - 5 минут. После окраски нерв вновь фиксировали на рабочем столике микроскопа, разволокняли его препаровальной иглой и укладывали веерообразно в виде «кисточки». Во время работы нервные волокна постоянно смачивали дистиллированной водой. После подсыхания кисточку заключали в бальзам под покровное стекло.

Морфометрические измерения изготовленных препаратов проводили при помощи программы ScreenMeter, разработанной Е. О. Юдиным и Ю. С. Гайдученко (удостоверение на рационализаторское предложение за № 404 от 16 июня 2005г.). В миелиновых нервных волокнах измеряли диаметр волокон, расстояние между перехватами узлов и насечками миелина. В безмиелиновых нервных волокнах измеряли их диаметр и площадь ядер

нейролеммоцитов. Площадь ядер нейролеммоцитов вычисляли по формуле эллипса:

^ =

4

а - длина эллипса, Ь - ширина эллипса.

Ядра нейролеммоцитов классифицировали по их форме на веретеноообразные, овальновытянутые и округлые. Для оценки формы ядер использовали показатели эксцентриситета, принимая ядра за эллипс:

Va2-b2

s =-

a

s - эксцентриситет, а - большая полуось эллипса, b - меньшая полуось эллипса. При этом если показатель эксцентриситета больше 0,9 - веретеновидная форма, между 0,8 - 0,9 -овальновытянутая форма, если меньше 0,8 округлая форма.

Биостатистические методы. Для оценки расхождения между эмпирическими и теоретически ожидаемыми по нормальному закону частотами распределения признаков применяли Р - критерий Колмогорова-Смирнова. Оценку достоверности различий между медианами проводили с использованием критерия Манна Уитни.

Корреляционный анализ проводили с использованием коэффициента ранговой корреляции Спирмана по Г. Г. Автандилову, [11]. Показатели со значением коэффициента ранговой корреляции от 0 до ±0,3 считали слабой, от ±0,3 до ±0,7 умеренной, от ±0,7 до ±1,0 сильной.

Полученные результаты обработаны с помощью прикладных программ: Microsoft Office Excel 2003, Statistica 6.0. на ПК «Intel Celeron 2400».

Результаты собственных исследований.

Внечерепная часть ствола лицевого нерва представлена одним пучком, который на поперечных срезах у собаки имеет овально-вытянутую, а у обыкновенной лисицы и американской норки овальную форму. По мере разветвления ствола нерв становится многопучковым (от 4 до 8 пучков). Эпиневрий лицевого нерва представлен плотной соединительнотканной оболочкой, которая состоит из поверхностного и глубокого слоев. Наиболее развит глубокий слой эпиневрия. В большинстве случаев на поперечных срезах целостность поверхностного слоя эпиневральной оболочки нарушалась, тем не менее, на изготовленных препаратах видна ее неравномерная толщина.

В эпиневрии ствола лицевого нерва собаки проходят кровеносные сосуды (от одного до шести). В нем содержится большое количество клеток фибробластического ряда и адипоцитов, которые выявляются в его глубоком слое (рис. 1). Толщина эпиневрия слева составляет 207,7±13,8 мкм, справа - 211,7±5,71 мкм, а его толщина левой и правой сторон отличается недостоверной разницей ( Р > 0,05).

Эпиневрий ствола лицевого нерва у обыкновенной лисицы имеет сходное строение с таковым собаки (рис.2). Его толщина слева составляет 88,1±3,07 мкм, справа - 73,5±2,88 мкм и достоверно отличается (Р < 0,05).

У американской норки поверхностный слой эпиневрия менее развит, по сравнению с его глубоким слоем (рис. 3). При многопучковом строении ствола лицевого нерва эпиневрий окружен большим количеством адипоцитов.

Рис. 1. Многопучковое строение лицевого нерва у серого пуделя слева (мезоцефа-лический тип строения черепа) (окраска - гематоксилином и эозином, х 140): 1 - глубокий слой эпиневрия, 2 - фиброзная часть периневрия, 3 - эпителиальная часть периневрия, 4 - осевые цилиндры, 5 - ядра клеток фибробластического ряда, 6 -периневральные влагалища, 7 - адипоциты, 8 - артериальный сосуд. Толщина эпиневрия слева составляет 52,0±2,33 мкм, справа - 60,0±2,52 мкм. Толщина эпиневрия ствола лицевого нерва у норки левой и правой сторон достоверно отличаются (Р < 0,05).

Периневрий представлен двумя частями - фиброзной и эпителиальной. Фиброзная часть состоит из концентрически наслоенных пластинок, прилежащих к эпиневрию. Эпителиальная часть плотно прилежит к нервным волокнам. Периневрий наиболее развит в местах прохождения кровеносных сосудов, а также на участках разветвления нервного ствола. В периневрии содержится большое число клеток фибробластического ряда и периневральных влагалищ (рис. 1), которые находятся преимущественно в эпителиальной части периневрия. Средняя толщина периневрия у собаки слева составляет 7,48±0,21мкм, справа - 7,47±0,21 мкм. Толщина периневрия ствола лицевого нерва с левой и правой сторон достоверно не отличается ( Р > 0,05).

Рис. 2. Гистологическое строение периневрия ствола лицевого нерва у серого пуделя слева (мезоцефалический тип строения черепа). Фрагмент рис. 47. (окраска -гематоксилином и эозином, х 1250):

1 - фиброзная часть периневрия, 2 - эпителиальная часть периневрия, 3 - осевые цилиндры, 4 - эндоневрий, 5 - ядра клеток фибробластического ряда.

Периневрий ствола лицевого нерва у обыкновенной лисицы имеет сходное строение с таковым собаки (рис. 3). В нем имеется значительное число периневральных влагалищ и клеток фибробластического ряда. Средняя толщина периневрия у лисицы слева составляет 6,02±0,10 мкм, справа - 6,27±0,09 мкм, а его толщина у лисицы с левой и правой сторон достоверно не отличается (Р > 0,05).

У американской норки периневрий имеет сходное строение с таковыми собаки и лисицы. Периневральные влагалища находятся преимущественно в фиброзной части периневрия (рис. 4). Средняя толщина периневрия у норки слева составляет 5,88±0,10 мкм, справа -6,67±0,10 мкм. Толщина периневральной оболочки ствола лицевого нерва у норки с левой и правой сторон достоверно не отличается (Р > 0,05).

Эндоневрий лежит между нервными волокнами ствола лицевого нерва. На степень выраженности эндоневрия влияет плотность расположения нервных волокон. В участках разветвлений ствола лицевого нерва эндоневрий утолщен (рис. 5).

Площадь поперечного сечения ствола лицевого нерва (глубокий слой эпиневрия) у собаки слева составляет 6,14±0,038 мм2, справа - 6,73±0,022 мм2. Площадь нерва с левой и правой сторон достоверно отличается (Р < 0,05).

Площадь поперечного сечения нерва (глубокий слой эпиневрия) у лисицы слева составляет 3,91±0,13 мм2, справа - 4,0±0,10 мм2. Площадь ствола лицевого нерва с левой и правой сторон отличается асиммет-ричностью (Р < 0,05).

Площадь поперечного сечения нерва (глубокий слой эпиневрия) у американской норки слева составляет 3,0±0,01мм2, справа - 2,26±0,08 мм2. Площадь ствола лицевого нерва у норки с левой и правой сторон достоверно отличается (Р < 0,05).

Рис. 3. Поперечный срез лицевого нерва у обыкновенной лисицы слева (окраска -гематоксилином и эозином, х 1250):

1 - фиброзная часть периневрия, 2 - эпителиальной часть периневрия, 3 - эндоневрий, 4 - осевые цилиндры, 5 - ядра клеток фибробластического ряда, 6 - периневральные влагалища.

Рис. 4. Поперечный срез лицевого нерва у американской норки слева (окраска -гематоксилином и эозином, х 140):

1 - эпиневрий, 2 - периневрий, 3 - нервные волокна, 4 - кровеносный сосуд, 5 - ядра клеток фибробластического ряда.

Ствол лицевого нерва собаки, обыкновенной лисицы и американской норки состоит из тонких, средних и толстых миелиновых волокон (рис. 5). Тонкие миелиновые волокна преимущественно располагаются по периферии нерва, а средние и толстые миелиновые волокна чаще занимают центральную часть нерва. На поперечных срезах выявлено, что, наряду с продольным направлением миелиновых волокон, имеются также волокна и с косой

направленностью, которые могут занимать до 30 % площади поперечника нервного ствола (рис. 5 Б).

У собаки лицевой нерв состоит преимущественно из толстых миелиновых волокон (рис. 6 А). Ствол лицевого нерва у обыкновенной лисицы преимущественно состоит из тонких миелиновых волокон (рис.6 Б). У американской норки ствол лицевого нерва

преимущественно состоит из тонких миелиновых волокон (рис. 6 В)

А

Б

Рис. 5. Распределение различных видов миелиновых волокон ствола лицевого нерва у собак и пушных зверей слева (окраска суданом черным В, х 1250):

А - среднеазиатская овчарка (мезоцефалический тип строения черепа); Б - обыкновенная лисица; В - американская норка. 1 - миелиновые нервные волокна, 2 - эндоневрий.

А

ft

Тонкие Средние Толстые

□ Справа

□ Слева

Б

80 70 60 50 40 30 20 10 0

Al

IJ 6

Тонкие

Средние Толстые

□ Слева

□ Справа

В

Рис. 6. Процентное соотношение миелиновых нервных волокон: А - собаки, Б - обыкновенной лисицы, В - американской норки.

Методом разволокнения установлено, что средний диаметр миелиновых нервных волокон ствола лицевого нерва составляет: у собаки слева - 9,17±0,23мкм, справа - 9,76±0,18 мкм, у

обыкновенной лисицы слева - 5,98±0,33 мкм, справа - 6,25±0,29 мкм, у американской норки слева - 7,19±0,20 мкм, справа 7,44±0,10 мкм (. Диаметр миелиновых нервных волокон у собаки, обыкновенной лисицы и американской норки с левой и правой сторон достоверно не отличается (Р > 0,05) (рис. 7 А, Б, В).

В миелиновых волокнах среднего и толстого диаметра хорошо выражены перехваты узла (рис. 7 - А, Б, В). Среднее расстояние межу перехватами узла у собаки слева составляет 349,8±29,0 мкм, справа - 289,2±21,1 мкм, у обыкновенной лисицы слева - 430,1±12,01 мкм, справа - 346,8±8,95 мкм, у американской норки слева - 309,8±23,04 мкм, справа - 276,1±24,3 мкм. Согласно критерию Манна - Уитни расстояние межу перехватами узла у собаки, обыкновенной лисицы и американской норки с левой и правой сторон отличаются (Р > 0,05) с недостоверной разницей (рис. 7 А, Б, В).

Расстояние между насечками миелина по мере приближения к перехватам узла увеличивается. В среднем расстояние между насечками миелина у собаки слева составляет 24,6±3,49 мкм, справа - 24,3±4,29 мкм, у обыкновенной лисицы слева - 27,3±3,30 мкм, справа - 48,2±3,53 мкм, у американской норки слева - 45,9±4,12 мкм, справа - 37,7±2,67 мкм. Расстояние между насечками миелина согласно критерию Манна - Уитни у изученных животных с левой и правой сторон отличается (Р > 0,05) с недостоверной разницей (рис. 7 А, Б, В).

У изученных нами животных безмиелиновые нервные волокна, входящие в состав лицевого нерва малочисленны и в виде отдельных пучков сопровождают миелиновые нервные волокна. Диаметр безмиелиновых нервных волокон у собаки слева составляет 2,64±0,04 мкм, справа - 2,74±0,03 мкм, у обыкновенной лисицы слева - 2,72±0,06 мкм, справа - 2,91±0,02 мкм, у американской норки слева - 0,79±0,03 мкм, справа - 1,01±0,03 мкм (табл. 10). Согласно критерию Манна - Уитни у изученных нами животных, диаметр безмиелиновых нервных волокон с левой и правой сторон отличается недостоверно (Р > 0,05) (рис. 7 А, Б, В).

Ядра нейролеммоцитов чаще имеют веретеновидную, реже овальновытянутую форму. Длина и ширина ядер нейролеммоцитов у собаки слева составляет 15,52±0,88* 4,20±0,28 мкм, справа - 18,21±1,44х4,92±0,40 мкм, у обыкновенной лисицы - 11,90±0,36х3,29±0,12 мкм, справа - 12,65±0,81*3,55±0,15 мкм, у американской норки слева - 8,81±0,28*2,42±0,13 мкм, справа - 9,53±0,43*2,58±0,14 мкм. У изученных животных площадь ядер нейролеммоцитов с левой и правой сторон обладает асимметричностью и отличается с недостоверной разницей (Р > 0,05) (рис. 7).

Среднее расстояние между ядрами нейролеммоцитов у собаки слева составляет 184±0,013 мкм, справа - 183±0,009 мкм, у обыкновенной лисицы слева - 239,7±12,01мкм, справа - 245,0±8,95 мкм, у американской норки слева - 83,0±8,31мкм, справа - 119,4 ±5,47 мкм. Расстояние между ядрами нейролеммоцитов у собаки, обыкновенной лисицы и американской норки с левой и правой сторон отличается не достоверно (Р > 0,05) (рис. 7 А, Б, В).

А

Б

В

5\1

1................................................................. 1 \

11 )

и %Ъ

у м

Рис. 7. Состав нервных волокон ствола лицевого нерва (окраска гематоксилином Вейгерта, * 140):

А - пудель средний (мезоцефалический тип строения черепа); Б - обыкновенная лисица; В - американская норка.

1 - миелиновое нервное волокно, 2 - перехват узла, 3 - ядро нейролеммоцита (веретенообразной формы), 4 - безмиелиновое нервное волокно, 5 - насечка миелина.

Заключение. Внутриствольное строение лицевого нерва у собаки, обыкновенной лисицы и американской норки, наряду со сходством, имеет особенности, характерные для каждого вида животного. Известно, что соединительнотканные оболочки нервов выполняют защитную функцию. Из них наибольшей толщиной обладает эпиневрий. Эта оболочка наиболее развита у американской норки. На наш взгляд, это связано с приспособительным механизмом к полуводному образу жизни этого животного. Морфометрический метод исследований показал, что у изученных животных соединительнотканные оболочки асимметричны.

Ссылки на источники:

1. Багрянская, М. Ф. Некоторые сравнительно-анатомические данные лицевого нерва / М. Ф. Багрянская // Тезисы докладов научной конференции восточной Сибири (Иркутск, 26-29 июня 1961г.). - Иркутск, 1961. - С. 24-25.

2. Багрянская, М. Ф. Некоторые сравнительно-анатомические данные в структуре лицевого нерва / М. Ф. Багрянская // Известия Воронежского государственного педагогического института. 1963. - Вып. 46. - С. 126-132.

3. Gruber, Н. Quantitative Unstersuchungen an peripheren Nerven / Н. Gruber, R. Mayr, W. Zenker // Anat. Anz., 1973. - Bd 134. - S. 427-429.

4. Трошин, В. И. Волокнистый состав некоторых черепномозговых нервов домашних животных / В. И. Трошин // Тезисы VII всесоюзной конференции по анатомов, гистологов и эмбриологов (Тбилиси, 6-13 июня 1966г.). - Тбилиси, 1966. - С. 273-274.

5. Баталин, Ю. Е. Внутриствольное строение нервов жевательных мышц пушных зверей / Ю. Е. Баталин // Экологические аспекты функциональной морфологии пушных зверей. - Омск, 1988. - С. 25-28.

6. Баталин, Ю. Е. Видовые особенности морфологического состава нервов жевательных мышц пушных зверей / Ю. Е. Баталин // Экологические аспекты эволюционной функциональной и возрастной морфологии человека и домашних животных: материалы всесоюз. конф. морфологов.- Омск, 1992.- Ч - II. - С. 12-14.

7. Роскин, Г. И. Микроскопическая техника / Г. И. Роскин. - М.:Сов. наука, 1946. - 328 с.

8. Меркулов, Г. А. Курс патологистологической техники / Г. А. Меркулов. - изд-е 5-е, испр. и доп. - Л.: Медицина, 1969. - 424 с.

9. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лили. - М.: Мир, 1969. - 645 с.

10. Миндубаев, Ю. Х. Морфология нервов внутренних органов мелкого рогатого скота и характер нервных волокон в составе этих нервов // Тезисы докладов I Белорусской конференции анатомов, гистологов и эмбриологов. - Минск, 1957. - С. 210-213.

11. Автандилов, Г. Г. Введение в количественную патологическую морфометрию / Г. Г. Автандилов. - М.: Медицина, 1980. - 216 с.

Emma Badanovа

Candidate of Veterinarian Sciences, Assistant Instructor

Omsk State Agrarian University n. a. P.A. Stolypin, Omsk

Internal Stem Structure Of Extracranial Part Of Facial Nerve In Dogs With Mesocephalic Type Of Cranium, Red Foxes And American Minks.

Abstract: Internal stem structure of facial nerve in dogs, red foxes and American minks, possess of

both similarities and differences which are peculiar for every said species. Peculiarities found are

connected with the adaptation mechanism to the semiaquatic style of life of American mink.

Keywords: facial nerve, red fox and mink, endoneurium, perineurium, epineurium, myelinated,

unmyelinated nerve fibers.