CC BY
17
УДК 507:504.4.054
Янович Н.С., асистент, Кравщв Р.Й., д.б.н., професор, академк УААН © Лье1еський нацюнальний утеерситет еетеринарног медицины та бютехнологт
¡мет С.З. Гжицького
ВМ1СТ ПРОДУКТ1В ПЕРЕКИСНОГО ОКИСНЕННЯ Л1П1Д1В I АКТИВН1СТЬ АНТИОКСИДАНТНИХ ФЕРМЕНТ1В У ТКАНИНАХ КОРОПА ЗА Р1ЗНОГО Р1ВНЯ СЕЛЕНУ У ВОД1
Наведено дат про ем1ст продуктге ПОЛ I актиетсть антиоксидантних фермент1е е зябрах, печтц1, скелетних м'язах I штр1 деор1чок коропа при утриманн його у еод1 з тдеищеним ем1стом селену (0,011 I 0,051 мг/л проти 0,001 мг/л у контролг). Встаноелено дозозалежне зменшення ем1сту г1дроперекиЫе I малоноеого дгальдеггду та незалежне е1д дози селену тдеищення актиеност1 глутатюнпероксидази е органах I тканинах коропа при збыьшенш концентрацп селену у еод1.
Ключовi слова: короп, тканини, перекисн процеси, продукти ПОЛ, антиоксидантш ферменти, селен
Вступ. В процес аеробного метаболiзму в тканинах риб, зокрема у коропа, так само, як у вищих тварин, утворюються активш форми кисню, яю окиснюють наявш у фосфолшщах кл^инних мембран полшенасичеш жирш кислоти (ПНЖК) перекисним шляхом, що приводить до утворення продукта перекисного окиснення лшвдв (ПОЛ), котрi проявляють деструктивний вплив на клггинш мембрани i органели [1,2]. Високий вмкт продуктiв ПОЛ у м'яс тварин i риби супроводжуеться порушенням його рисунка i структури та смакових властивостей [3]. 1нтенсившсть утворення продукта ПОЛ i !х вмiст у тканинах тварин, у тому чи^ у риб, значною мiрою залежить вiд активностi антиоксидантних ферменив (супероксиддисмутази, глутатюнпероксидази, каталази), до складу яких входять мiкроелементи ^п, Си, Мп, Se). Вмiст мжроелемента у тканинах риб залежить, з одного боку, вщ вмiсту !х у кормах, а з другого - вщ вмiсту у вод^ що зумовлено поглинанням мiкроелементiв рибами через зябра i шкiру [4]. Цим зумовлена актуальшсть вивчення залежност мiж вмiстом окремих мiкроелементiв у водi i активнiстю антиоксидантних фермента у рiзних органах i тканинах коропа. У зв'язку з цим, метою дано! роботи було дослщження активност антиоксидантних фермента у зябрах, печшщ, скелетних м'язах i шкiрi коропа за рiзного вмiсту селену у вод1 Це пояснюеться тим, що селен входить до складу глутатюнпероксидази, ключового ферменту в системi антиоксидантного захисту в органiзмi риб [5]. Наявш в лiтературi окремi данi про пряму залежнiсть мiж вмiстом селену у водi i активнiстю глутатiонпероксидази в печiнцi та скелетних м'язах коропа [6] свщчать про актуальшсть таких дослщжень.
© Янович Н.е., Кравщв Р.Й., 2009
303
Матер1ал i методи. Дослщ проведений на трьох групах дворiчок лускатого коропа масою 400-500 г, по три риби в кожнш, у Львiвськiй дослiднiй станци 1нституту рибного господарства УААН. Риби Bcix груп утримувалися в окремих акварiумах об'емом 0,5 м3, як1 наповнювалися водою з рiчки Верещиця. Воду в акварiумах змiнювали раз на тиждень, регулярно проводили аерацш води. Риби 1-i' групи, як1 утримувались у водi без добавок селену, правили за контроль. Риби 2-i' i 3-i' груп протягом трьох тижшв утримувались у вод! до яко! додавали селен у виглядi селенiту натрiю. Вмiст селену у вод! в якiй утримувались риби 1-, 2- i 3-1 груп, становив вiдповiдно 0,001, 0,011 i 0,051 мг/л. У кшщ дослiду риб усiх груп тддавали декаттаци i одержанi вiд них зразки м'язiв з дорзально-крашально! частини тулуба, печiнки, зябер та шюри використовували у дослiдженнях. В органах i тканинах риб визначали вмют продуктiв ПОЛ - гiдроперекисiв лшвдв [7] i малонового дiальдегiду [8] та актившсть антиоксидантних ферментiв - супероксиддисмутази [9] i глутатiонпероксидази [10]. Одержат цифровi данi опрацьовували статистично шляхом використання комп'ютерно! програми Excel .
Результати i обговорення. З наведених у таблицi даних видно, що вмiст продуктiв ПОЛ i активнiсть глутатiонпероксидази в дослiджуваних органах та тканинах коропа значною мiрою залежить вiд рiвня селену у вод! Про це свiдчать значно меншi рiзницi у вмiстi гщроперекиав лiпiдiв i малонового дiальдегiду у дослщжуваних органах i тканинах, особливо в печшщ i скелетних м'язах риб 2-1 групи, нiж у риб 3-! групи, порiвняно до !х вмiсту в органах i тканинах риб 1-1 групи. Ц данi свiдчать про iнгiбуючий вплив селену на перекиснi
Таблиця
Вмпст продукт1в ПОЛ i актившсть антиоксидантних ферментiв в органах i
тканинах коропа за pi3HQi концентрацп селену у водi (M±m, n=4)
Групи Органи Гидроперекиси, Малоновий Супероксид- Глутатюн-
риб 1тканини Е480/г дlальдегlд, нмоль/г дисмутаза, у.о./мг б1лка пероксидаза, GSH/мг б1лка
1 8,01±0,28 51,90±2,94 7,80±0,14 5,53±0,18
2 Зябра 6,77±0,9* 42,10±2,06* 7,80±0,11 6,38±0,20*
3 6,10±0,10*** 33,30±2,97** 7,58±0,23 6,29±0,21*
1 5,89±0,41 10,00±0,56 2,11±0,14 2,39±0,11
2 Печшка 5,62±0,19 8,62±0,46 2,10±0,11 2,65±0,10
3 4,63±0,13* 8,13±0,14* 2,12±0,10 2,87±0,17
1 Скелетний 6,84±0,43 41,90±3,56 5,12±0,20 1,37±0,06
2 5,59±0,19 37,80±3,18 5,20±0,21 1,57±0,06
3 5,06±0,18* 30,40±2,18* 5,25±0,13 1,64±0,09*
1 5,27±0,24 33,80±2,39 11,25±0,28 5,53±0,15
2 Шшра 4,45±0,10* 26,00±1,63* 11,40±0,41 6,51±0,11**
3 4,01±0,20** 23,50±1,37** 11,60±0,17 6,58±0,13***
Примака: * - вiрогiднi рiзницi у показниках у риб дослщних груп порiвняно до риб контрольно! групи; * - P<0,05; ** - P<0,01; *** - P<0,001.
304
процеси в opraHÍ3MÍ коропа при пщвищенш його засвоення з води при збшьшенш концентрацп мжроелемента. Наявш в лiтературi даш [6] свiдчать про пряму залежшсть мiж концентрацiею селену у водi i засвоенням його коропом, проте ця залежшсть встановлена при значно бшьшш концентрацп селену у водг
Зменшення вмiсту продуктiв ПОЛ у дослщжуваних органах i тканинах коротв 2-1 i 3-1 груп, порiвняно до ix вмiсту у коротв 1-í групи, можна пояснити пщвищенням активностi селензалежно! глутатiонпероксидази, ключового ферменту в системi антиоксидантного захисту в органiзмi риб при збiльшеннi засвоення селену з води з пщвищенням в нш концентрацп мжроелемента. Ц результати узгоджуються з наявними в лiтературi даними [6] про пщвищення активностi глутатiонпероксидази в печiнцi i скелетних м'язах коропа при збшьшенш концентрацп селену у вод^ що зумовлено збшьшенням засвоення мжроелемента рибами. Проведет нами дослiдження показали, що актившсть глутатiонпероксидази в усix органах i тканинах риб 2-1 та 3-1 груп була вища, шж у риб 1-1 групи, а в зябрах i шкiрi щ рiзницi вираженi бiльшою мiрою, шж у печiнцi та скелетних м'язах (Р<0,05-0,01). Цi рiзницi заслуговують на увагу у зв'язку з тим, що саме через зябра i шюру транспортуеться селен при засвоенш його з водою. Пщвищення рiвня селену в рацюш коропа позитивно впливае на його рют та якють м'яса [11].
Загалом, одержат результати свiдчать про iнгiбуючий вплив селену при збшьшенш його концентрацп у водi на перекисш процеси в органiзмi коропа, внаслiдок збшьшення його засвоення, i стимуляцiю синтезу селенвмюно! глутатiонпероксидази та про органно-тканинш особливостi цього впливу.
Висновки. При утриманш дволiток коропа у водi з пщвищеною концентрацiею селену (0,11 i 0,51 мг/л проти 0,001 у контрол^ протягом 3-х тижшв у зябрах, печшщ, скелетних м'язах i шкiрi виявлено менший вмiст продукта ПОЛ i вищу активнiсть глутатюнпероксидази, шж у коропiв контрольно1 групи.
Л1тература
1. Winston G.W. Oxidant and antioxidant in aquatic animals / G.W. Wsnston // Comp. Biochem. Physiol. C.- 1991.- V. 100.- №1-2.- P. 173-176.
2. Martines-Alvares R.M. Antioxidant defenses in fish: biotic and abiotic factors / R.M. Martines-Alvares, A.E. Morales, A. Sanz // Rev. Fish Biol. Fish.-2005.- V. 15, №1.- P. 75-88.
3. Morrisey P.A. Vitamin E and meat quality / P.A. Morrisey, D.J. Buckley, P.J.A. Sheepy et al. // Brit. Poultry Sci.- 1994.- V. 53.- P. 289-295.
4. Остроумова Н.И. Биологические основы кормления рыб / Н.И. Остроумова // Санкт-Петербург, "ИП Комплекс", 2001.- 372 с.
5. Flohé L. Glutathione peroxidase: a selenoenzyme / L. Flohé, W. Günzler, H.H. Schock // FEBS Lett. -1973. -Vol.32. -P.132-134.
305
6. Мерва А.В. Стан антиоксидантно! системи в opraHi3Mi коропа за pi3Horo piBra селену у водi i рацюш / А.В. Мерва // Автореф. дис...канд. бюл. наук.- Львiв, 2009.- 22 с.
7. Способ определения гидроперекисей липидов в биологических тканях // Авторское свидетельство SU 1084681 A.- 1984.
8. Коробейникова С.Н. Модификация выделения продуктов перекисного окисления липидов в реакции с ТБК / С.Н. Коробейникова // Лабор. дело.-1989.- №7.- С. 8-9.
9. Дубинина Е.Е. Активность и коферментный спектр супероксиддисмутазы эритроцитов / Е.Е. Дубинина, Л.Е. Сальникова, Л.Р. Ефимова // Лаб. дело.- 1983.- №210.- С. 30-33.
10. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах / В.М. Моин // Лаб. дело.-1986, №212.- С.724-727.
11. Грициняк I.I. Бюлопчш особливост та фактори тдвищення продуктивност коротв любшських внутршньопородних титв, !х помкей та гiбpидiв / I.I. Грициняк // Автореф. дис... докт. с.-г. наук.- Кшв, 2008. - 39 с.
Summary
LIPIDS PEROXIDATION CONTENT AND ANTIOXIDANT ENZYMES ACTIVITY IN CARP TISSUES UNDER DIFFERENT SELENIUM CONCENTRATION IN WATER Yanovich N.E., Kravciv R.Y.
Data concerning lipids peroxidation content and antioxidants enzymes activity in gills, liver, skeletal muscles and skin of two-years old carp at high selenium concentration in water (0,011 and 0,051 mg/l against 0,001 mg/l in control) are presented. Depended of selenium concentration decreasing of hydroperoxides and malondialdehyde content and independent increasing of glutathione peroxidase activity in carps organs and tissues was revealed.
Стаття надшшла до редакцИ 27.04.2009
306
