CC BY
56
2003 ВЕСТНИК САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО УНИВЕРСИТЕТА. Сер.З. Вып:1 (№3)
ЗООЛОГИЯ
г ., ■
^ЦК 597.553.2:591.12
О. В. Зеленников *
ВЛИЯНИЕ ЗАКИСЛЕНИЯ ВОДЫ
НА РАЗВИТИЕ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ И РОСТ РУССКОГО ОСЕТРА В ПЕРИОД ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ПОЛА
В проведенном ранее исследовании на молоди радужной форели [3] было показано, что ее пребывание в условиях сублетальной кислотности (pH около 5) не замедлило темп гаметогенеза на ранних этапах развития гонад—в периоды миграции первичных половых клеток и их митотического размножения, а также в период цитологической дифференцировки. пола. Более того, формирование фонда половых клеток у подопытных самок в условиях кислотного воздействия первоначально шло явно ускоренным темпом [18]. Для того чтобы исследовать природу этого ускорения, а также провести сравнительный анализ влияния сублетальной кислотности на рыб с разной скоростью полового развития, работа была продолжена на молоди русского осетра. Относительно крупные размеры осетра в период дифференцировки пола позволили нам не только выполнить гистоморфологическое исследование гонад, но и измерить концентрацию половых стероидных гормонов в сыворотке крови.
Материал и методика
Исследование было проведено на молоди русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Brandt). Суточных личинок осетра доставили в лабораторию ихтиологии Биологического института СПбГУ с Бертюльского рыбоводного завода, расположенного в дельте Волги, в середине июня и выращивали до начала декабря при температуре 20-22° С в системе с оборотным водоснабжением (проточность 9 л/мин). В возрасте 5,5 месяцев группу произвольно разделили на контрольный (п = 82) и подопытный (п = 92) варианты. Всех рыб содержали в течение 25 суток при температуре 18,5-20° С в непроточных ваннах при pH 7,2-7,6 в контроле и 4,0-4,8 в опыте и затем в течение 30 суток вновь в системе с оборотным водоснабжением при pH около 7,5. Воду в ваннах постоянно аэрировали и заменяли 2 раза в день на 85-90%. Плотность посадки составляла 8,5-9 г/л в начале и 2,7-4 г/л в конце кислотного воздействия. Рыб кормили мороженным мотылем 8-10 раз в день. Подопытные рыбы получали корм по потребности. Контрольную молодь кормили пропорционально ее массе и количеству корма, потребленного рыбами в опыте. Суточную норму корма рассчитывали так: если подопытная группа осетров потребляла в день 546 г мотыля, то рыбам контрольного варианта, средний вес которых, например, был больше подопытных на 27%, задавали 693 г.
© О. В. Зеленников, 2003
Для подкисления воды была использована концентрированная серная кислота. Для того чтобы не допустить резких колебаний величины рН при смене воды, в ванны добавляли воду нужной кислотности, приготовленную заранее. Гидрохимические параметры воды во всех экспериментах были выдержаны в соответствии с имеющимися рекомендациями [5]: жесткость (по Са2+ и —11 мг/л, щелочность (по НСО3) — 3,1 мг/л, Са2+ —8,6 мг/л, Ре2+ + Ге3+ —
0,78-0,86 мг/л, Ог — 7,6-9,6 мг/л, N114 — 0,20-0,56 мг/л. Содержание N114 всегда измеряли перед утренней сменой воды.
Гонады подопытных и контрольных рыб фиксировали в жидкостях Буэна и Серра. После проводки по спиртам возрастающей концентрации и (при необходимости) пропитки в целлоидин-касторовом масле кусочки половых желез, выделенные из средней, наиболее расширенной части [1], заливали в парафин-воск и готовили серийные срезы толщиной 5-6 мкм, которые окрашивали железным гематоксилином по Гейденгайну.
Уровень развития гонад у рыб оценивали по площади их генеративной части на поперечных срезах, числу половых клеток на единицу площади генеративной части гонад, соотношению числа гониев и ооцитов на срезах, состоянию ооцитов старшей генерации. У каждой особи анализировали 6 поперечных срезов (1-й, 30-й и 60-й серийные срезы обеих гонад).
Помимо состояния гонад у контрольных и подопытных рыб измеряли также концентрацию тестостерона в крови. Как было показано ранее [16], концентрация этого полового стероид-V ного гормона существенно изменяется с началом кислотного воздействия. Для определения концентрации тестостерона у контрольных и подопытных рыб кровь брали из хвостовой вены и после ее сворачивания центрифугировали 10 мин со скоростью 8000 об/мин. Сыворотку отделяли от сгустка, замораживали и хранили при температуре —40° С. Концентрацию гормона, извлеченного из сыворотки эфирной экстракцией, определяли по общепринятой методике [6].
Результаты
Рост рыб. Контроль. Масса контрольных рыб в день начала эксперимента широко варьировала (от 30 до 146 г) и составляла в среднем 75,7±5,3 г.
Через 9 суток после помещения в непроточные ванны средняя масса контрольных осетров несколько понизилась—до 71,4±4,2 г, что было на 5,7% меньше, чем в начале эксперимента. Вероятно, снижению массы способствовало то обстоятельство, что рыб практически не кормили в течение первых трех суток опыта. Не исключена также определенная роль стресса, связанного с индивидуальным взвешиванием, сортировкой и пересадками рыб. В дальнейшем контрольные рыбы питались, и на 25-е сутки эксперимента их масса в среднем составила 87,0±3,7 г. Гибели рыб в контрольном варианте . не было.
Опыт. Средняя масса подопытных осетров в начале эксперимента соответствовала средней массе контрольных рыб —75,6±4,6 г (диапазон от 30 до 161 г). С началом кислотного воздействия рыбы практически перестали питаться. Заметно снизилась их двигательная активность, а гибель осетров за первые 8 суток опыта составила 15,2% от первоначального числа особей. Взвешивание рыб на 9-е сутки эксперимента выявило уменьшение массы их тела на 18,9% —61,3±5,2 г.
В дальнейшем подопытные рыбы не росли; их средняя масса практичёски не изменилась. Так, на 18-е сутки воздействия она' составила 60,6±3,4 г, а на 25-е сутки в момент окончания воздействия — 61,5±4,6 г, что было на 29,2% меньше, чем в этот же день в контроле, и на 18,7% меньше, чем в день начала эксперимента.
Состояние гонад. В начале эксперимента в гонадах всех исследованных рыб были хорошо выражены и топографически обособлены генеративная, жировая и стромаль-ная части половых желез, как это характерно для гонад молода осетровых рыб [2]. Фонд половых клеток у всех особей в контроле и опыте составляли исключительно гонии.
Контроль. На 8-е сутки эксперимента (в возрасте 5,5 месяцев от вылупления) у 69,5% особей осетра были отмечены характерные признаки анатомической дифферен-цировки пола. Так, в гонадах большинства будупщх самок герминативный эпителий, клетки которого имели столбчатую форму, образовывал впячивание внутрь гонады с формированиём так называемой борозды-щели, наличие которой свидетельствовало об анатомической дифференцировке гонады в направлении яичника. Отметим, ,что все эти анатомические и цитологические особенности являются универсальными у молоди разных видов осетровых рыб и ранее были многократно проиллюстрированы [2, 9]. У тех рыб, у которых еще не началась анатомическая дифференцировка яичников, пол был определен по критериям «ранней сексуализации» гонад. Как известно, у самок осетровых задолго до развития борозды-щели гонии располагаются непосредственно под герминативным эпителием, высота которого достоверно больше, чем в гонадах у будущих самцов [2].
В будущих семенниках герминативный эпителий был уплощенным, а половые клетки, представленные, как и у самок, исключительно гониями, равномерно распределялись в пределах генеративной части гонад. Отметим, что в семенниках у отдельных особей жировая часть гонад была гипертрофирована, в результате чего ее площадь на срезах была в несколько раз больше, чем площадь генеративной и соматической частей. В противоположность этому у ряда других особей жировые участки вообще не были обособлены, что исключало возможность измерения площади жировой и стромальной частей гонад отдельно, как это было сделано в других работах [1, 2]. Гипертрофия жировых частей гонад у отдельных рыб делала мало информативным для исследования гаметогенеза такой показатель, как общая площадь гонад на срезе. Генеративная же часть в гонадах у всех особей была хорошо обособлена, что давало возможность с большой точностью измерить площадь этого отдела на поперечных срезах половых желез. Сравнивая состояние яичников и семенников в период анатомической диффе-ренцировки пола, отметим, что плотность расположения гониев на срезах генеративной части половых желез у самок и самцов была сходной — в среднем 10,0 и 11,7 клетки на 0,01 мм2 площади соответственно (таблица). Однако в связи с тем, что сама площадь срезов генеративной части гонад у самок в среднем (4,2 мм2-10~3) была в два с лишним раза больше, чем у самцов (1,9 мм2-Ю-3), общее число гониев на срезах яичников было несомненно больше, чем семенников.
На 25-е сутки опыта анатомическая дифференцировка пола в партии контрольных рыб была завершена. Яичники отличались от семенников наличием борозды-щели. У самок площадь генеративной части половых желез на поперечных срезах по сравнению с предыдущим сроком исследования увеличилась в среднем в 1,5 раза (см. таблицу). В яичниках 3 из 8 исследованных рыб, помимо оогониев, присутствовали ооциты периода ранней профазы мейоза. С появлением ооцитов общее число половых клеток на единицу площади яичников увеличилось (см. таблицу). ,
У контрольных самцов (несмотря на 20%-ное увеличение массы тела) размеры генеративной части гонад, судя по площади их поперечных срезов, достоверно не изменились. Практически прежним осталось и число гониев на единицу площади семенников (см. таблицу).
На 55-е сутки у разных особей контрольного варианта наблюдались существенные у различия по микроанатомической структуре и состоянию фонда половых клеток. Так, у самки с наименее дифференцированными гонадами фонд половых клеток был представлен исключительно гониями, а ее пол можно было определить только по анатоми-
ках присутствовали многочисленные ооциты периода ранней профазы мейоза, а у трех рыб, помимо гониев и мейоцитов, ооциты периода превителлогенеза.
Сравнивая состояние контрольных и подопытных рыб, отметим, что при сходной массе тела у подопытных самок площадь генеративной части на поперечных срезах была почти в два раза больше, чем у рыб в контроле. Кроме того, подсчеты показывают, что при сходном числе половых клеток на единицу площади в обоих вариантах (см. таблицу) относительное число гониев и ооцитов на срезах яичников у контрольных' самок было соответственно 91,5 и 8,5%, в то время как у подопытных рыб доля ооцитов была больше —69,2 и 30,8% соответственно.
Содержание тестостерона в крови. Самки. На 8-е сутки воздействия уровень тестостерона в крови у контрольных самок был сходным —0,46-0,76 нг/мл и составил в среднем 0,56 нг/мл. Лишь данные по одной особи достоверно отличались от этого среднего значения —1,55 нг/мл.
Концентрация тестостерона в крови у всех подопытных рыб варьировала в значительно более широком диапазоне — 0,36-2,49 нг/мл. В среднем она составила 1,28 нг/мл. и была достоверно выше, чем у контрольных особей (см. таблицу).
На 25-е сутки воздействия концентрация тестостерона в крови у контрольных самок по сравнению с предыдущим сроком увеличилась в три раза. У разных особей она широко варьировала—от 0,93 до 2,19 нг/мл —и в среднем составила 1,61 нг/мл. Не исключено, что увеличение концентрации тестостерона в крови было, связано с начавшейся у самок цитологической дифференцировкой пола.
У шести подопытных рыб содержание гормона в крови также широко варьировало — от 0,20 до 3,38 нг/мл у разных особей, а в среднем составило 1,16 нг/мл, т. е. было несколько меньше, чем у контрольных самок (см. таблицу). У двух осетров массой 54 и 64 г содержание тестостерона в крови — соответственно 98,4 и 60,0 нг/млнаоборот, было несоизмеримо выше, чем у всех остальных исследованных рыб, и соответствовало показателям половозрелых особей [15]. Не исключено, что такая высокая концентрация гормона может быть обусловлена кратковременным «залповым выбросом» половых стероидных гормонов в кровь в связи с началом мейотических преобразований в гонадах.
Самцы. На 8-е сутки воздействия концентрация тестостерона в крови у контроль- -ных самцов —в среднем 0,62 нг/мл —была сходной с концентрацией гормона у кон-• трольных самок. Лишь у одной особи уровень тестостерона—3,13 нг/мл— был достоверно выше среднего показателя для остальных самцов.
Содержание тестостерона в крови подопытных самцов, как и у самок, варьировало в значительно более широком диапазоне,'чем в контроле, от 0,34 до 3,95 нг/мл, а в среднем составило 1,63 нг/мл, т.е. было достоверно выше, чем у контрольных самцов (см. таблицу).
. На 25-е сутки опыта диапазон концентраций тестостерона в крови контрольных и подопытных рыб изменился незначительно. Содержание гормона в крови у рыб подопытного варианта по-прежнему было выше, чем у контрольных рыб (см. таблицу).
Анализируя полученные данные, отметим, что наблюдалась положительная корреляция между содержанием в крови тестостерона и числом половых клеток на единицу площади генеративной части гонад независимо от пола. Например, у рыб с уровнем гормона 1,905, 1,680, 1,410 нг/мл число половых клеток было 26,6; 20,5; 24,7, в то время как у рыб с минимальным уровнем тестостерона 0,075, 0,385, 0,435 нг/мл —3,3, 6,8, 9,5 клетки соответственно. В ходе регрессионного анализа всех полученных данных было выявлено, что 28% общей девиаты плотности расположения половых клеток в гонадах
обусловлено влиянием концентрации тестостерона в крови. Между этими величинами существует прямая корреляция (г = 32,9). Регрессия определена с достоверностью более 99%.
Обсуждение
Перед тем как проанализировать полученные факты, рассмотрим некоторые вопросы методики. Очевидно, что, опираясь на многочисленные литературные данные, при работе с осетром удалось точно сориентироваться в сроках анатомической и цитологической дифференцировки пола [1, 4, 7, 8]. Однако при выборе эффективно действующей величины рН пришлось ориентироваться на серию кратковременных предварительных опытов, поскольку никаких данных по влиянию высокой кислотности воды ва осетровых рыб в литературе обнаружить не удалось. Выбранный режим кислотного воздействия предположительно оказался сублетальным для подопытных рыб. Массовой гибели осетров в течение 25 суток опыта удалось избежать, но к окончанию эксперимента рыбы практически перестали двигаться. После каждой смены воды были многочисленные случаи опускания подопытных осетров на-дно ванн и потери ими пространственной ориентации. На 25-е сутки воздействия возникла реальная угроза массовой гибели подопытных рыб, и только прекращение эксперимента позволило этого избежать. Исходя из сказанного, можно сделать вывод, что молодь русского осетра в период дифференцировки пола была подвергнута едва ли не максимально жесткому кислотному, воздействию. Косвенным подтверждением этому является тот факт, что рост у подопытных рыб практически остановился, а их масса за 25 суток воздействия даже существенно уменьшилась. Это обстоятельство, несомненно, свидетельствует о значительном истощении подопытных рыб. В свою очередь, рост контрольных рыб также был искусственно задержан, поскольку им задавали корм пропорционально тому объему рациона, который потребляли плохо питающиеся подопытные рыбы. В результате масса контрольных и подопытных осетров в каждый срок исследования была вполне сравнимой. Отметим, что искусственная задержка темпа роста контрольных осетров была одНим из условий эксперимента. В нашей работе с форелью масса контрольных рыб, получавших, как и подопытные, корм с избытком, но более эффективно его использовавших, была всегда выше, чем масса подопытных рыб, и нам приходилось исследовать гаметогенез у разноразмерных особей. В единственном опыте, когда кислотное воздействие сопровождалось пищевой депривацией, а масса рыб в контроле и опыте была сходной, обнаружить влияние кислотной среды на темп развития гонад не удалось [3]. В настоящем исследовании масса единовременно зафиксированных контрольных и подопытных рыб также была близкой, однако результаты экспериментального воздействия были выявлены.
Оценивая полученные данные, можно сделать вывод, что в условиях кислотного воздействия темп развития семенников не изменился, тогда как влияние кислотной среды на развитие яичников было очевидным. Так, в условиях кислотного воздействия у самок осетра произошла задержка процессов анатомической и цитологической дифференцировки пола. Отметим, что, исследуя влияние кислотной среды на гаметогенез у молоди форели, мы не наблюдали задержки процессов дифференцировки пола. Для; объяснения полученного противоречия при работе с форелью и осетром можно высказать два равновероятных предположения. Одно из объяснений состоит в том, что период полового созревания в целом и период дифференцировки пола в частности у осетровых рыб значительно более продолжительны, чем у молоди лососевых. Поэтому не исключено, что задержка начала процессов дифференцировки пола в условиях
кислотной среды могла происходить у обоих исследованных нами видов рыб. Однако в силу кратковременности процесса дифференцировки пола у форели мы не смогли зарегистрировать такую задержку при работе с этой рыбой, тогда как при работе с осетром мы ее наблюдали. Вместе с тем нельзя исключать возможности того, что задержка процесса дифференцировки пола в условиях кислотной среды могла опре- ' деляться особенностью именно осетровых рыб и поэтому не была выявлена у молоди лососевых.
Помимо задержки процесса дифференцировки гОнад в условиях кислотной среды, у ювенильных самок русского осетра произошло кратковременное увеличение числа гониев на единицу площади яичников, что согласуется как с данными, полученными нами ранее на молоди форели [18], так и с данными, полученными в экспериментах с другими воздействиями на молодь осетровых рыб. Например, увеличение числа гониев на единицу площади гонад было обнаружено у молоди стерляди при ее содержании в условиях пониженной температуры [2]. Факт увеличения числа гониев в яичниках у подопытных рыб можно было бы объяснить тем, что при задержке перехода этих половых клеток к ранней профазе мейоза произошло удлинение предыдущего периода— митотического размножения гониев и, как следствие, увеличение их числа. Однако такое объяснение представляется неубедительным, если учесть, что в проведенном ранее исследовании на форели у подопытных рыб в равной степени увеличилось число как гониев, так и ооцитов. В связи с этим было высказано предположение, что парадоксальное временное увеличение репродуктивного фонда'у :амок в условиях сублетальной кислотности связано с развитием у них адаптивной реакции [19]. Известно, что в начале кислотного воздействия у рыб, одновременно с активизацией синтеза кортизола [12, . 17], происходит относительно кратковременное повышение в крови уровня андрогенов, в частности тестостерона [16], что связано с развитием адаптивной реакции. Вместе с тём известна и гонадотропная активность тестостерона [14], в основном его способность активизировать оогенез у рыб в раннем возрасте [13].
Измерение концентрации тестостерона в крови у молоди осетра показало, что она достоверно выше, во-первых, у подопытных рыб как самок, так и самцов, с началом кислотного воздействия, во-вторых, у контрольных самок с началом у них цитологической дифференцировки пола. Эти данные косвенно указывают на возможную гонадотроп-ную активность тестостерона в раннем возрасте. В связи с этим и учитывая сведения, имеющиеся в литературе, можно предположить, что повышенная концентрация тестостерона в крови у подопытных самок в начальный период кислотного воздействия и увеличение у них фонда половых клеток связаны друг с другом функциональной зависимостью. При этом в состоянии семенников у подопытных рыб не было отмечено видимых изменений, хотя уровень тестостерона в крови у них также повысился по сравнению с контрольными самцами. Тот факт, что обусловленное кислотным воздействием увеличение концентрации тестостерона в крови способствовало увеличению фонда гониев только у самок, объясняется более быстрым у них темпом гаметогенеза в раннем возрасте, более ранней, чем у самцов, Дифференцировкой пола и соответственно более высокой гормонокомпетенцией гонад.
За весь период кислотного воздействия у самок русского осетра не увеличились объем генеративной части гонад, судя по площади этого отдела на поперечных срезах яичников, а также объем фонда половых клеток. Так, на 25-й день опыта площадь генеративной части на срезах яичников у подопытных самок была примерно в два с половиной раза меньше, чем у контрольных рыб. Вместе с тем число половых клеток на единицу площади у рыб в^контроле и опыте было практически одинаковым. Поскольку
средняя величина диаметра клеток в обоих случаях была сходной, а площадь срезов яичников у контрольных рыб была больше,. то отсюда следует, что число половых клеток на срез (а вероятно, и во всей гонаде) у контрольных рыб было примерно в два с половиной раза больше, чем у подопытных самок.
После перевода рыб в воду с обычным pH все негативные последствия кислотного воздействия были компенсированы. При этом гонадо- и гаметогенез у подопытных самок шел явно более ускоренным темпом. Так, через месяц после окончания кислотного воздействия и площадь срезов генеративной части яичников, и соответственно общее число половых клеток в гонадах у подопытных самок было существенно больше, чем у контрольных рыб.
Суммируя полученные в работе данные и сведения, имеющиеся в литературе, можно прийти к заключению, что кислотное воздействие неизбежно приводит к уменьшению числа половых клеток у ювенильных самок рыб. Однако после прекращения воздействия число половых клеток, как мы видим, может восстановиться, а может и не восстановиться вплоть до полового созревания [3]. При этом кислотная среда действует на темп развития яичников сходно с тем, как действуют и многие другие стрес-сорные факторы. Например, голодание молоди стерляди, гонады которой находились в индифферентном состоянии, в течение 22 суток привело к замедлению процессов гамето- и гонадогенеза, компенсированному в дальнейшем [2]. В другом исследовании рентгеновское облучение личинок мозамбикской тиляпии, у которых гонады в момент воздействия также находились в индифферентном состоянии, привело впоследствии к ускорению темпа их полового созревания и увеличению плодовитости [10]. В противоположность этому такая же доза рентгеновского облучения самок тиляпии, у которых в яичниках уже присутствовали ооциты, вызвала замедление темпа их полового созревания [11], что, в свою очередь, совпадает с данными, полученными ранее на радужной форели при кислотном воздействии [3]
Статья рекомендована проф. Л. С. Краюшкиной. Summary
Zelennikov О. V. The effect of acidification on reproduction system development of Russian sturgeon during sex differentiation.
Juvenile (5,5 months old) Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedtii Brandt) have been exposed to pH levels of 4,0-4,8 for 25 days. Acid environment initiated, the retardation of sexual differentiation in juvenile sturgeon and inhibited ovary development in females. After the end of treatment the pace of ovary development was restored.
Литература
1. Ахундов M. M., Федоров К. Е. Ранний гамето- и гонадогенез осетровых рыб. 1. О критериях сравнительной оценки развития половых желез молоди на примере русского осетра Acipenser gueldenstadti // Вопросы ихтиологии. 1990. Т. 30, вып. 6. С. 963-973. 2. Ахундов М. М.
J Влияние экологических факторов на ранний гамето- и гонадогенез осетровых рыб: Автореф. канд. дис. Баку, 1991. 18 с. 3. Зеленников О. В. Влияние кислотной среды на становление
|и развитие воспроизводительной системы рыб в раннем онтогенезе // Тез. докл. на Первом конгрессе ихтиологов России. Астрахань, 1997. С. 218-219. 4. Зубова С. 9. Влияние рентгеновского облучения на половые железы и общее состояние молоди стерляди (Acipenser ruthenus L.) // Радиация и проблемы размножения и роста рыб. J1., 1978. С. 37-53. 5. Милъштпейн В. В. Осетроводство. М., 1982. 6. Морозов В. И., Чайковская В. С., Приятпкин С. А. и др. Радиоиммунологический анализ стероидов. Научно-практические аспекты // Физиол. журнал. 1988.
T. 74. С. 1049-1077. 7. Персов Г. M. Дифференцировка пола у ptrfi- JL, 1975. 8. Романов А. А., Зубова С. А., Пиекунова Л. В. Развитие гонад и соотношение non» г заводской молоди осетра // Рыбное хозяйство. 1984. № 2. С. 27-29. 9. Федоров К. Е. Гормошньные аспекты регуляции раннего гамето- и гонадогенеза рыб // Труды БиНИИ РАН. 1997- Т. 44. С. 100-116. 10. Чми-левский Д. А. Влияние лучей Рентгена на оогенез тиляпии. 1. Облучение личинок в возрасте о суток // Труды БиНИИ РАН. 1§78. С. 21—36. 11. Чмилевский Д. А. Влияние рентгеновских лучей на оогенез тиляпии Tilapia mossambica Peters. 3. Облучение личинок в возрасте 20 суток // Онтогенез. 1985. Т. 16, №4. С. 416-420. 12. Brown J. A., Edwards D., Whitehead С. Cortisol and thyroid hormone responses to acid stress in the brown trout Salmo trutta L. // J. Fish Biol. 1989. Vol. 35, N 1. P. 73-84. 13. Crim L. W., Evans D. M. Influence of testosteron and/or luteinizing hormone releasing hormone analogue on procexious sexual development in the juvenile rainbow trout // Biol. Reprod. 1983. Vol. 29. P. 137-142. 14. Gillen J. T., Goos I.J. T. The brain-pituitary-gonadal axis in the rainbow trout Salmo gairdneri. 3. Abscence of an inhibiting action of testosterone on gonadotrophs releas in juveniles // Gen. Сотр. Endocrinol. 1984. Vol. 56. P. 457465. 15. Peïissero C., Menn F.L., Burzawa G. F. Witellogenesis and steroid levels in the Siberian sturgeon acipenser baeri bred in fish farm // Gen. Сотр. Endocrinology. 1989. Vol. 74, N 2. P. 253. 16. Sangalang G. В., Freeman H. S., Uthe J. F., Sperry L. S. Effects of Diet or Liming on Steroid Hormone Metabolism and Reproduction in Atlantic Salmo (Salmo Salar) Held in an Acidic River /1 Can. J. Fich. Aq. Sci. 1990. Vol. 47. P. 2422-2430. 17. Whitehead C., Brown J. A. Endocrine responses of brown trout, Salmo trutta L., to acid, aluminium and lime dosing in a Welsh hill stream // J. Fish Biol. 1989. Vol. 35, N 1. P. 59-71. 18. Zelennikov О. V. The effect of acidifikation on the oogenesis of rainbow trout during sex différenciation // J. Fish Biology. 1997. Vol. 50. P. 18-21. 19. Zelennikov О. V., Mosyagina M. V., Fedorov К. E. Oogenesis inhibition, plasma steroid levels, and morphometric changes in the hypophysis in Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedti Brandt) exposed to low environmental pH // Aquatic Toxicology. 1999. Vol. 46, N 1. P. 33-42.
Статья поступила в редакцию 7 октября 2002 г.
