CC BY
80
Так, через 1 неделю наблюдения только в группе сравнения 2 отмечено минимальное снижение индексной оценки - на 6,2±1,1% (р<0,05), тогда как в остальных группах произошел рост индекса в среднем на 13,4-37,4% (р<0,05). В дальнейшем, начиная со второй недели наблюдения, во всех группах установлено снижение индекса по отношению к исходному уровню, наиболее выраженное (в среднем на 30% при р<0,05) в обеих основных группах и наименее значительное в контрольной группе: на 7,6±0,3% (р<0,05).
Через 3 недели наблюдения темпы вектора снижения индекса сохранялись, при этом в основных группах 1 и 2 его величина приблизилась к верхней границе условной физиологической нормы (5,8±0,3 у. е. и 8,3±0,3 у. е. соответственно при р<0,05); в то же время в группах сравнения 1 и 2, а также в контрольной группе уровень снижения был менее значительный и составил соответственно 13,8±0,6 у. е., 12,5±0,5 у. е. и 14,8±0,5 у. е. при р<0,05.
В период от 1 месяца до окончания срока наблюдения через 1 год в обеих основных группах наблюдения индексная оценка по Н. Kбtzshke была в пределах условной физиологической нормы и колебалась от 4,7±0,3 у. е. до 1,7 у. е. при р<0,05. В тот же период в группе сравнения 1 уровень индексной оценки был в пределах 7,4±0,9 у. е. (р<0,05) - 11,3±0,3 у. е. (р<0,05), а в группе сравнения 2 и контрольной он был значительно выше и составлял в среднем 14,7±0,6 у. е. (р<0,05).
Вышеописанным данным соответствует также сравнительная оценка эффективности различных методов лечения хронического катарального гингивита по результатам определения индекса СР!ТЫ (рис. 2).
На приведенном графике наглядно видно, что до начала лечения больные во всех группах наблюдения нуждались в активной терапии. Далее в основных группах 1 и 2 до окончания периода наблюдения уровень индексной оценки указывал на необходимость проведения только рациональной гигиены полости рта и, соответственно, на достаточность проводимой поддерживающей терапии.
В обеих группах сравнения и контрольной группе показатель имел разнонаправленные векторы и темпы
развития и при его снижении в промежуточные сроки наблюдения от 3 недель до 3 месяцев, в последующем через 6 месяцев и 1 год наблюдения вновь возрос до уровня более 1,0 у. е., что свидетельствовало о необходимости проведения дополнительного лечения.
Таким образом, вышеприведенные сведения свидетельствуют о более высокой эффективности лечения хронического катарального гингивита с применением БТС-терапии и убихинона.
ЛИТЕРАТУРА
1. Альтшулер Г. Б., Беликов А. В., Ерофеев А. В. и др. Экспериментальное изучение (in vitro) антибактериальных свойств излучения YAG:Nd и YAG: Cr; Tm; Ho лазеров // Новое в стоматологии. -1996. - № 5.- С. 29-31.
2. Грудянов А. И., Овчинникова В. В., Дмитриева Н. А. Антимикробная и противовоспалительная терапия в пародонтологии. -М., 2004. - С. 80.
3. Дмитриева Л. А, Беспалова И. Н., Золоева З. Э. и др. В кн.: Современные аспекты клинической пародонтологии. - М.: МЕДпресс, 2001. - С. 3-63.
4. Масычев В. И., Рисованная О. Н. Исследование in vitro антибактериального действия светотерапии на патогенную флору полости рта // Институт стоматологии. - 2004. - № 3 (24). -С.86-88.
5. Перова Н. Ю., Ермошенко Л. С., Бондаренко Н. А., Нижник
В. Г., Авагимов А. Г. Индексная оценка состояния полости рта и тканей пародонта: Учебно-методическое пособие для студентов стоматологических факультетов, врачей-интернов, клинических ординаторов и врачей-стоматологов. - 2002.
6. Пожарицкая М. М., Симакова Т. Г., Руднева Е. В., Чипизубова И. В. Эффективность препарата коэнзим Q10 в комплексном лечении болезней пародонта // Пародонтология. - 2004. - № 2. - С. 1-14.
7. Цепов Л. М., Николаев А. И., Михеева Е. А. Диагностика, лечение и профилактика заболеваний пародонта. - М.: МЕДпресс-информ, 2008. - С. 135-247.
8. Bartold P. M., Marshall R. I., Georgiou Т., Mergado F. B. Periodontal diseases and health condition // Пародонтология. - 2003. -№ 3 (28). - С. 3.
Поступила 20.08.2010
В. Б. БРИН1, А. А. ГАБУЕВА’, К. М. КОЗЫРЕВ2, И. У. ПУХОВА2
ВЛИЯНИЕ ЯНТАРНОЙ кислоты и сульфидном МИНЕРАЛЬНОЙ ВОДЫ «РЕДАНТ-4Р» РАЗДЕЛЬНО И В ИХ СОЧЕТАНИИ
на функционально-структурное состояние почек
ПРИ МОДЕЛИ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО АМИЛОИДОЗА
нефропатического типа
кафедра нормальной физиологии и 2кафедра патологической анатомии Северо-Осетинской государственной медицинской академии,
Россия, 362019, г. Владикавказ, ул. Пушкинская, 40. E-mail: vbbrin@yandex.ru
В опытах на старых крысах (18-24 месяца) с помощью длительного (60 суток) подкожного введения яичного альбумина воспроизводили модель генерализованного амилоидоза. Показано, что параллельно воспроизведению модели внутрижелу-дочное применение янтарной кислоты, сульфидной минеральной воды и, особенно, их сочетания способно профилактиро-вать формирование структурных и функциональных признаков нефропатического типа амилоидоза у старых крыс.
Ключевые слова: амилоидоз, почки, янтарная кислота, сульфидная минеральная вода.
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010 УДК 616-003. 821:616.61.001.6
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
V. B. BRIN1, A. A. GABUEVA1, K. M. KOZYREV2,I. U. PUHOVA2
INFLUENCE OF THE AMBER ACID AND SULPHIDIC MINERAL WATER «REDANT-4R» SEPARATELY AND IN THEIR COMBINATION ON THE FUNCTIONAL-STRUCTURAL CONDITION OF KIDNEYS AT MODEL NEPHROPATHY TYPE OF GENERALIZED AMYLOIDOSES
1Department of normal physiology, 2department of pathological anatomy of the North-Osetiya state medical academy, Russia, 362019, Vladikavkaz, Pushkinskaya street, 40. E-mail: vbbrin@yandex.ru
In experiences on old rats (18-24 months) the model of generalized amyloidoses reproduced with prolonged (60 days) hypodermic injections of egg albumin. It was shown that intragastric application of an amber acid, sulphidic mineral water and, especially, their combinations in parallel reproduction of model was capable to prevent the formation of structural and functional attributes of nephropathy type of generalized amyloidoses at old rats.
Key words: amyloidoses, kidneys, an amber acid, sulphidic mineral water.
В настоящее время в связи с недостаточно изученными этиологией и патогенезом первичного ами-лоидоза, а также отсутствием эффективных мер его профилактики и терапии актуальными являются моделирование патологии и экспериментальный поиск новых средств лечения, обладающих минимальным количеством побочных эффектов. Известно разностороннее действие янтарной кислоты, представляющей собой универсальный внутриклеточный метаболит, ее солей и эфиров. Янтарная кислота, проявляя антиок-сидантные свойства [6], ингибирует индуцируемые в условиях ишемии и гипоксии процессы перекисного окисления липидов [2], участвует в синтезе АТФ, тем самым улучшая клеточное дыхание и транспортные механизмы в клетке. Внутренний прием препаратов янтарной кислоты может эффективно повышать адаптивные возможности организма [3, 6]. Ранее проведенные исследования позволяют охарактеризовать свойства янтарной кислоты и ее препаратов как геропротектора
[4], а амилоидоз у людей является патологией зрелого и старческого возраста и во многом определяет старческую деградацию.
Учитывая свойства сульфидной минеральной воды оказывать противовоспалительный эффект, ее способность ускорять восстановительные процессы, а также улучшать микроциркуляцию и тем самым уменьшать плазматическое пропитывание, логично было предположить, что сульфидная минеральная вода может способствовать торможению отдельных звеньев амилои-догенеза, тем самым ограничивая процесс накопления амилоидного субстрата. По данным Пятигорского НИИКФ, минеральная вода Р-4 Редантского месторождения является сульфидной водой средней минерализации, хлоридно-сульфидно-кальциевого состава, с повышенным содержанием ионов магния, нейтральной реакцией среды. Содержание общего сероводорода в ней составляет 158 мг/л, свободного сероводорода -108 мг/л. Отмечен положительный терапевтический эффект применения воды «Редант-4» при системных воспалительных заболеваниях как в бальнеотерапии
[5], так и при внутреннем приеме [1].
Исходя из описанных положительных многофакторных свойств янтарной кислоты и сероводородных минеральных вод, нами осуществлена попытка коррекции функционально-структурных нарушений при экспериментальном амилоидозе с использованием янтарной кислоты и сульфидной минеральной воды «Редант-4» раздельно и при их сочетании.
Цель работы - создать модель экспериментального нефропатического типа генерализованного ами-лоидоза у старых крыс с применением для этой цели нативного яичного альбумина; изучить его структурнофункциональные характеристики и оценить влияние профилактического применения янтарной кислоты, сульфидной минеральной воды, а также эффект их сочетанного применения.
Материалы и методы исследования
Объектом исследования служили старые крысы (возраст 18-24 мес., масса тела 350-400 г). Эксперименты проводились в 7 группах животных по 10 крыс в каждой:
1-я группа - контрольная (интактные крысы); 2-я группа - контрольная с минеральной водой (крысы, получавшие внутрижелудочно через зонд ежедневно минеральную воду из расчета 10 мл/кг массы тела); 3-я группа - контрольная с янтарной кислотой (крысы, получавшие янтарную кислоту внутрижелудочно через зонд из расчета 1,5 ммоль/кг массы тела); 4-я группа - амилоидная (крысы, получавшие методом подкожных инъекций нативный яичный альбумин из расчета 0,025 мл/г массы тела животного через день в течение 60 дней); 5-я группа - амилоидная, леченная янтарной кислотой (крысы, получавшие одновременно яичный альбумин подкожно через день и янтарную кислоту из расчета 1,5 ммоль/кг массы тела); 6-я группа - амилоидная, леченная минеральной водой (крысы, получавшие одновременно яичный альбумин подкожно через день и внутрижелудочно через зонд ежедневно минеральную воду из расчета 10 мл/кг массы тела); 7-я группа - амилоидная, леченная сочетанием янтарной кислоты и минеральной воды (крысы, получавшие одновременно яичный альбумин и янтарную кислоту из расчета 1,5 ммоль/кг массы тела, растворенную в минеральной воде). Полученный раствор вводили внутрижелудочно через зонд из расчета 10 мл/кг через день с первых суток моделирования.
По истечении 2 месяцев эксперимента производился сбор мочи в условиях 6-часового спонтанного диуреза. Содержание натрия и калия определяли методом пламенной фотометрии с помощью пламенного анализатора жидкостей ПАЖ-1, концентрацию кальция и белка определяли спектрофотометрически (СФ-26) с помощью набора «Кальций» ООО «Агат-Мед» (г. Москва, Россия). Клубочковую фильтрацию определяли по клиренсу эндогенного креатинина. Концентрацию белка в моче определяли спектрофотометрически.
Результаты исследования обработаны статистически с использованием критерия ^Стьюдента.
Для гистологических исследований материал фиксировался в 10%-ном растворе нейтрального и кислого формалина, заливался в парафин по общепринятой методике, изучались срезы почек толщиной 5-6 мкм, которые окрашивались гематоксилином и эозином, конго красным. Изучение срезов проводилось в проходящем свете при помощи микроскопа «Микмед-1» под увеличением х80, х200, х400, х600.
Результаты и их обсуждение
Анализ данных показал, что в условиях спонтанного диуреза у контрольных животных при изолированном введении минеральной воды в течение 2 месяцев увеличение скорости клубочковой фильтрации вызывало достоверное увеличение диуреза относительно интак-тного контроля, при отсутствии изменений канальцевой реабсорбции воды (таблица). Изучение ионоуретиче-ской функции (рис. 1) выявило увеличение натриуреза, экскреция калия и кальция, а также степень протеину-рии достоверно от фона не отличались.
В группе контрольных животных с изолированным введением янтарной кислоты в течение 2 месяцев достоверных сдвигов спонтанного диуреза не наблю-
далось. Изучение в этих условиях электролитовыделительной функции почек выявило лишь тенденцию к увеличению экскреции электролитов. Степень проте-инурии у контрольных животных также достоверно не менялась.
В условиях спонтанного диуреза на фоне подкожного введения нативного яичного белка через 2 месяца отмечалось уменьшение объема спонтанного диуреза, что было обусловлено резким снижением скорости клубочковой фильтрации, несмотря на некоторое уменьшение канальцевой реабсорбции воды. Изучение ионо-уретической функции в условиях спонтанного диуреза выявило (рис. 1) уменьшение натриуреза ниже фоновых значений по истечении 2 месяцев эксперимента. Экскреция калия и кальция повышалась на протяжении двух месяцев. Под влиянием введения нативного яичного альбумина отмечалось прогрессивное увеличение протеинурии - почти в 3 раза на протяжении эксперимента (рис. 2).
В группе животных, получавших ежедневно внутри-желудочно минеральную воду Р-4 на фоне подкожного введения нативного яичного альбумина, через 2 месяца эксперимента отмечался рост спонтанного диуреза относительно группы с изолированным введением амилои-догена, хотя диурез оставался всё же достоверно ниже
Изменения спонтанного диуреза и основных процессов мочеобразования у крыс при экспериментальном амилоидозе (введение яичного белка) и применении янтарной кислоты и минеральной воды раздельно
и при их сочетании
Условия опыта Статистический показатель Объем диуреза (мл/час/100 г) Основны мочеоб е процессы разования
Скорость клубочковой фильтрации (мл/час/100 г) Канальцевая реабсорбция воды (%)
Фон М ± т 0,086±0,0053 21,60±0,712 99,61±0,024
Изолированное введение минеральной воды в течение 2 месяцев М ± т 0,100*)±0,0044 24,33*)±0,815 99,67±0,041
Изолированное введение янтарной кислоты в течение 2 месяцев М ± т 0,09±0,0059 23,12±0,722 99,67±0,038
Введение яичного белка в течение 2 месяцев М ± т 0,047*)±0,0066 9,05*)±0,810 99,31*)±0,044
Введение яичного белка и минеральной воды в течение 2 месяцев М ± т 0,065*)**)±0,004 12,57*)**)±0,928 99,43*)**)±0,032
Введение яичного белка и янтарной кислоты в течение 2 месяцев М ± т 0,069*)**)±0,006 15,23*)**)±0,951 99,39*)**)±0,004
Введение яичного белка, янтарной кислоты и минеральной воды в течение 2 месяцев М ± т 0,070*)**)±0,005 15,75*)**)***)±0,78 99,48*)**)****)±0,03
Примечание: *) - достоверные изменения по сравнению с фоном,
**) - достоверные изменения по сравнению с введением амилоидогена,
***) - достоверные изменения по сравнению с применением на фоне амилоидогена минеральной воды, ****) - достоверные изменения по сравнению с применением на фоне амилоидогена янтарной кислоты.
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
Экскреция электролитов
12 ■
11 ■
10 -
9 ■
8 -
7 -
6 ■
5 ■
4
0,21
0,20
0,19
0,18 Ш
0,17
0,16
0,15 Ш
I I фон
I I фон + мин. вода фон + янт. к-та яич. белок У///Х яич. белок + мин. вода 144441 яич. белок + янт. к-та
яич. белок + мин. вода + янт. к-та
N8 К Са
Рис. 1. Изменение экскреции электролитов с мочой под влиянием янтарной кислоты и минеральной воды при экспериментальном амилоидозе, вызванном введением яичного белка Степень протеинурии
40
30
20
10
фон
фон + мин. вода фон + янт. к-та яич.белок ^^3 яич. белок + мин. вода ■чхх! яич. белок + янт. к-та ^^3 яич. белок + мин. вода + янт. к-та
Рис. 2. Уменьшение величины протеинурии под влиянием янтарной кислоты при экспериментальном амилоидозе
Рис. 3. Амилоидоз почек, вызванный подкожным введением нативного яичного альбумина из расчета 0,025 мг/кг массы тела животного.
Окраска конго красным (х200)
Рис. 4. Профилактическое применение янтарной кислоты и минеральной воды при экспериментальном амилоидозе. Окраска конго красным (х200)
0
фоновых значений. Рост диуреза происходил за счет Профилактическое применение сероводородной прироста скорости клубочковой фильтрации, несмотря минеральной воды Р-4 Редантского месторождения
на увеличение канальцевой реабсорбции воды. выявило увеличение экскреции натрия через 2 месяца
эксперимента по сравнению с амилоидной группой животных. Экскреция калия после 2 месяцев уменьшалась относительно той же группы, но была все же выше интактного контроля. Применение минеральной воды препятствовало росту экскреции кальция, по истечении срока эксперимента экскреция катиона достоверно не отличалась от данных интактного контроля. Применение минеральной воды привело к значительному снижению содержания белка в моче по сравнению с опытными животными.
В группе опытных животных с одновременным введением нативного яичного белка и янтарной кислоты отмечалось повышение скорости клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции воды, при этом диурез достоверно увеличивался относительно амилоидной группы, оставаясь всё же ниже интактного контроля. Рост скорости клубочковой фильтрации носил более выраженный характер по сравнению с амилоидной, леченной минеральной водой группой животных, восстановление канальцевой реабсорбции в обеих леченых группах происходило в равной степени. Изучение ионоуретической функции в группе животных с применением янтарной кислоты на фоне введения амилоидогена выявило увеличение натриуреза относительно амилоидной группы животных. Профилактическое применение янтарной кислоты препятствовало росту экскреции калия, экскреция же кальция при одновременном введении амилоидогена и янтарной кислоты оказывалась выше как группы опытных животных с моделью амилоидоза, так и интактного контроля. Под влиянием янтарной кислоты происходило прогрессивное уменьшение степени протеинурии. Уровень протеинурии по истечении 2 месяцев был достоверно ниже, чем при профилактическом применении сульфидной минеральной воды.
В группе животных, получавших внутрижелудочно янтарную кислоту в сочетании с минеральной водой «Ре-дант-4Р» на фоне подкожного введения нативного яичного альбумина (таблица), в течение эксперимента отмечался рост спонтанного диуреза относительно группы с изолированным введением амилоидогена, хотя диурез оставался всё же достоверно ниже фоновых значений. Достоверных отличий диуреза в группе животных с сочетанным применением лечебных препаратов по сравнению с изолированным введением на фоне амилоидо-гена как янтарной кислоты, так и минеральной воды не выявлялось. Рост диуреза происходил за счет прироста скорости клубочковой фильтрации, несмотря на увеличение канальцевой реабсорбции воды. Было отмечено более выраженное корригирующее влияние сочетанного применения янтарной кислоты и минеральной воды на канальцевую реабсорбцию по сравнению с введением на фоне амилоидогена только янтарной кислоты. Прирост же СКФ был достоверно выше в группе с сочетанным применением минеральной воды и янтарной кислоты по сравнению с группой животных, леченных только минеральной водой.
Профилактическое применение янтарной кислоты и сульфидной минеральной воды выявило увеличение натриуреза относительно группы с моделью амилои-доза, но данные оставались ниже фоновых значений. Экскреция калия по истечении 2 месяцев уменьшалась относительно амилоидной группы животных, оставаясь всё же достоверно выше данных интактного контроля. Сочетанное введение янтарной кислоты и минеральной воды на фоне введения амилоидогена препятствовало росту экскреции кальция с мочой, и через
2 месяца эксперимента экскреция катиона достоверно от фона не отличалась.
Применение янтарной кислоты в сочетании с минеральной водой «Редант-4» выявило значительное снижение содержания белка в моче за 2 месяца по сравнению с опытными животными (рис. 2). Степень протеинурии при этом оказалась достоверно ниже, чем при изолированном применении на фоне амилоидоге-на как янтарной кислоты, так и минеральной воды.
Гистологическое исследование почек крыс, у которых воспроизводили модель амилоидоза (рис. 3), выявило дистрофию и очаговый некроз эпителия проксимальных и дистальных канальцев, разрыхление их базальной мембраны.
Наблюдались полнокровие, очаговые кровоизлияния, ярко выраженное плазматическое пропитывание сосудов системы микроциркуляции; отек, фибриноидное набухание и очаговый некроз базальных мембран мальпигиевых клубочков и их капсул с серозно-фибринозным экссудатом в просвете капсул. Выявлялась выраженная конгофилия медуллярных и кортикальных стромально-сосудистых структур, проявлявшаяся в мальпигиевых клубочках, капсуле Шумлянского-Боуме-на, базальных мембранах канальцев.
Гистологическое исследование почек у животных с профилактическим раздельным применением янтарной кислоты или минеральной воды выявило снижение признаков конгофилии кортикальных и медуллярных сосудов, уменьшение отложения амилоида в канальцах и клубочках почек, снижение признаков паренхиматозной дистрофии канальцев. Наиболее выраженным был протективный эффект сочетанного использования янтарной кислоты и минеральной воды (рис. 4). В этой серии экспериментов выявлялось отчетливое уменьшение плазматического пропитывания стенок капилляров клубочка и интеркапиллярного отека.
Таким образом, прием янтарной кислоты в сочетании с сульфидной минеральной водой «Редант-4Р» оказывает определенное профилактическое влияние на развитие нефропатической формы амилоидоза, выраженное в большей степени, чем при изолированном применении на фоне амилоидогена янтарной кислоты или минеральной воды.
ЛИТЕРАТУРА
1. Амбалова С. А., Хетагурова З. В., Осипова Л. В. и др. Внутренний прием сульфидной воды Р4 в комплексном лечении больных ревматоидным артритом // В сб. «Лечебное использование курортных факторов Северной Осетии». - Краснодар, 1989. - С. 14—21.
2. Гусев Е. И., Скворцова В. И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001. - 328 с.
3. Седункин В. А., Клигуненко Е. Н. Нейропротекция в интенсивной терапии диабетического кетоацидоза // Медицина неотложных состояний. - Киев: издательский дом «Заславский», 2006. -№ 4-5. - С. 46-58.
4. Фролькис В. В., МурадянХ. К. Экспериментальные пути продления жизни. - Л.: Наука, 1988. - 248 с.
5. Хетагурова З. В., Амбалова С. А. Сульфидная бальнеотерапия в комплексном лечении больных ревматоидным артритом // Вопр. курортол., физиотер. и лечебн. физ-ры. - 1985. - № 3. -
С. 63-65.
6. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве / Под ред. М. Н. Кондрашовой, Ю. Г. Каминского, Е. И. Маевского. - Пущино: ИТЭБФ РАН, 1997. - 300 с.
Поступила 20.09.2010
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
