CC BY
99
6. De Feudis F. V., Papadopoulos V., Drieu K Ginkgo biloba extracts and cancer: a research area in its infancy //Fundamental and Clin. Pharmacol. - 2003. - Vol. 17. - P.405-417.
7. Dharnidharka V.R., Nadeau K, Cannon C.L., et al. Ciprof-loxicin overdose: acute renal failure with prominent apop-totic changes // Am. J. Kidney Dis. — 1998. — Vol. 31. — P.710-712
8. Jaffe R, Ariel I., Beeri R, et al. Frequent apoptosis in human kidneys after renal hypoperfusion // Exp. Nephrol. — 1997. - Vol. 5. - P.39-43.
9. Kaushal G.P, Singh A.R., Shah S.V. Identification of gene family of caspases in rat kidney and altered expression in ischemia-reperfusion injury // Am. J. Physiol. - 1998. -
Vol. 274. - P. F581-F595.
10. Ortiz A., Justo P., Sanz A., et al. Targeting apoptosis in acute tubular injury // Biochem. Pharmacol. — 2003. — Vol. 66. — P.1589-1594.
11. Schumer M, Colombel M.C., Sawchuk T.S, et al. Morphologic, biochemical, and molecular evidence of apoptosis during the reperfusion phase after brief periods of renal ischemia //Am. J. Pathol. — 1992. — Vol. 140. — P.831-838.
12. Tian X.F., Pu X.P. 2004. Caffeic acid (CA) protects cerebellar granule neurons (CGN) from apoptosis induced by neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridnium (MPP) // J. Peking Univ. Health Sci. — 2000. — Vol. 36. — P.27-30.
© АЖУНОВА Т.А., БИКМУЛИНА Г.А., РАЗУВАЕВА Я.Г., МОНДОДОЕВ А.Г., ХОБРАКОВА В.Б., ФЕРУБКОЕ.В. - 2008
ВЛИЯНИЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА
Т.А. Ажунова, Г.А. Бикмулина, Я.Г. Разуваева, А.Г. Мондодоев, В.Б. Хобракова, Е.В. Ферубко
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов; Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр.ТАО, д.п.н., проф. С.В. Калмыков)
Резюме. Курсовое введение экстракта сабельника болотного на фоне экспериментального гломерулонефрита оказывает выраженное нефропротекторное влияние, характеризующееся уменьшением выраженности деструктивных изменении в нефронах, нормализацией показателей функционального состояния почек, липидного спектра крови, ингибированием свободнорадикальных процессов и повышением антиоксидантнои защиты организма.
Ключевые слова: экспериментальный гломерулонефрит, экстракт сабельника болотного.
Хронический гломерулонефрит - неуклонно прогрессирующее иммуноопосредованное воспалительное заболевание почек, приводящее к формированию хронической почечной недостаточности. Замедление прогрессирования хронического гломерулонефрита является одной из важнейших проблем практической нефрологии [3,5]. Особый интерес в лечении заболевании почек представляют лекарственные средства растительного происхождения, обладающие выраженной фарма-котерапевтической эффективностью и низкой токсичностью. Так, в народной и традиционной медицине для лечения заболеваний почек издавна применяются га-леновые препараты из сабельника болотного (Comarum palustre L.) в качестве мочегонного и противовоспалительного средства [8,10].
Целью настоящего исследования явилась оценка влияния сухого экстракта из корней и корневищ сабельника болотного на течение экспериментального гломе-рулонефрита.
Материалы и методы
Исследования проведены на крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 180-210 г. Гломерулонефрит вызывали по методике J. Reynolds в модификации И.В. Мухина [6]. Лабораторным животным в 2 точки у хвоста однократно вводили смесь, состоящую из полного адъюванта Фрейнда и 50% тканевого антигена коркового слоя почки интактной крысы; через 3 недели после первого введения инъекцию указанной смеси повторяли в том же объеме. Животные опытной группы получали внутрижелудоч-но раствор сухого экстракта сабельника болотного (ЭСБ) в экспериментально-терапевтической дозе 100 мг/ кг массы 1 раз в сутки в течение 3 недель с момента последнего введения взвеси полного адъюванта Фрейнда с корковым веществом почки. Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество воды очищенной по аналогичной схеме. С целью оценки функционального состояния почек измеряли диурез и скорость клубочковой фильтрации, исследовали общий анализ мочи. В сыворотке крови определяли концентрацию креатинина, мочевины и липидный спектр на биохимическом анализаторе «DIANA» с использова-
нием готовых наборов фирмы «Cormay» (Польша). Реакцию перекисного окисления липидов определяли по содержанию малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови [1] и в гомогенате ткани [11]. Состояние антиокси-дантной системы организма оценивали по активности ка-талазы в сыворотке крови [2] и содержанию восстановленного глутатиона в крови [12].
Для патоморфологических исследований почки фиксировали в 10% нейтральном формалине и заливали в целлоидин-парафин. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, а также по Массону, ван Гизону и ШИК-реакцией [4]. Морфометрические исследования проводили с использованием компьютерной программы «Motic Image 2000». Определяли количество клеток в клубочке, площадь почечного клубочка, капилляров клубочка и мочевого пространства клубочка [7].
Значимость различий между указанными параметрами среди экспериментальных групп оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считались существенными при р<0,05 [9].
Результаты и обсуждение Результаты исследований свидетельствовали, что через 3 недели от момента последнего введения антигенного комплекса у животных контрольной группы развивается олигурический синдром с нарушением экскреторной функции почек и выраженной протеину-рией (табл. 1). Так, диурез снижался на 33%, скорость клубочковой фильтрации (СКФ) — в б раз, содержание белка в моче увеличивалось в 5 раз по сравнению с таковыми у животных интактной группы. У животных
Таблица 1
Влияние экстракта сабельника болотного на функциональное состояние почек и показатели азотистого обмена у белых крыс при экспериментальном гломерулонефрите
Показатели Группы животных
интактная контрольная опытная
Объем мочи за 3 ч, мл/100 г 1,54+0,11 1,03+0,05 2,91+0,21*
СКФ, мл/час^100г 2,7±0,08 0,44+0,02 1,16+0,09*
Белок в моче, г/л 1,02+0,32 5,10+0,38 3,30+0,04*
Креатинин, мкмоль/мл 72,1+3,91 94,2+5,04 84,6+4,32*
Мочевина, ммоль/мл 5,5+0,42 11,1+0,63 6,9+0,37*
Примечание здесь и далее: * - означает, что значения значимы по сравнению с данными у животных контрольной группы при р<0,05.
7б
контрольной группы на фоне экспериментального гломерулонефрита отмечалось развитие умеренно выраженного гиперазотемического синдрома: концентрация креатинина в сыворотке крови возрастала на 31%, мочевины — в 1,7 раза по сравнению с данными у интакт-ных крыс (табл. 1).
В острую фазу экспериментального гломерулонефрита в контроле наблюдали изменения в липидном составе крови (табл. 2): увеличивалась концентрация три-ацилглицеридов (ТГ) и липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП) в 4,0 и 2,5 раза соответственно, снижалось содержание липопротеидов высокой плот-
ности (ЛПВП) в 1,9 раза, отмечалась тенденция к увеличению содержания общего холестерина по сравнению с аналогичными показателями у животных интактной группы. Коэффициент атерогенности повышался в 3,5 раза по сравнению таковым у интактных животных. Наряду с этим, при экспериментальном гломерулонефрите у животных контрольной группы увеличивалось содержание МДЛ в сыворотке крови и почках в 3,0 и 2,5 раза, снижалась активность каталазы и содержание восстановленного глутатиона в 1,3 и 2,7 раза соответственно по сравнению с аналогичными показателями у животных интактной группы (табл. 3).
Результаты патоморфологических исследований показали, что в почках животных контрольной группы наблюдаются гиперцеллюлярность и увеличение размеров клубочков (табл. 4). В результате увеличения раз-
клубочки, в которых отмечались дистрофические изменения и очаговый некроз капиллярных петель. В проксимальных канальцах наблюдались диффузные альте-ративные изменения разной степени тяжести - дистрофия (зернистая, гиалиново-капельная, гидропичес-кая), фокальный некробиоз и некроз эпителиальных клеток, слущивание их в просвет канальцев, где также обнаруживались эозинофильные цилиндры.
Курсовое введение ЭСБ крысам опытной группы приводило к улучшению показателей функционального состояния почек, заключавшееся в увеличении диуреза, скорости клубочковой фильтрации в 2,8 и 2,6 раза, Таблица 2 снижении белка в моче в 1,5 раза, концентрации креатинина и мочевины в сыворотке крови на 10 и 37% соответственно по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы. Под влиянием испытуемого средства у животных опытной группы происходила нормализация липидного состава крови по сравнению с таковым у животных контрольной группы (табл. 2). Так, содержание ТГ, ЛПНП и ЛПОНП снижалось на 23, 58 и 47% соответственно, а ЛПВП повышалось на 34%, в результате чего коэффициент атерогенности был ниже такового у животных в контрольной группе в 1,3 раза. При курсовом введении ЭСБ крысам снижалось содержание МДА в сыворотке крови и гомогенате почек в 3,0 и 1,5 раза, повышалась активность каталазы и содержание восстановленного глутатиона в 1,3 и 1,7 раза по сравнению данными у животных контрольной группы.
Микроскопическая картина была представлена увеличенными многоклеточными, относительно малокровными клубочками. Увеличение площади и гипер-клеточность клубочков были обусловлены умеренной
пролиферацией и набуха-Таблица 3 нием эндотелиальных клеток, содержанием нейтро-филов в просвете капиллярных петель, незначительной пролиферацией мезангиальных клеток. Средний размер клубочков на фоне применения ЭСБ уменьшался на 12%, общее количество клеток в клубочке - на 26% по сравнению с таковыми у животных контрольной группы
(табл. 4). В единичных капиллярах клубочков наблюдали стаз эритроцитов. Площадь мочевого пространства клубочка не отличалась от таковой у животных интакт-ной группы. Локально наблюдались дистрофические
Таблица 4
Влияние экстракта сабельника болотного на липидный состав крови у крыс при экспериментальном гломерулонефрите
Показатели Группы животных
интактная контрольная опытная
Общий холестерин, моль/л 2,38+0,12 2,41+0,19 1,59+0,19
ТГ, ммоль/л 0,49+0,04 1,9б+0,09 1,50+0,14
ЛПНП, ммоль/л 1,10+0,06 1,30+0,11 0,55+0,03*
ЛПОНП, ммоль/л 0,20+0,01 0,55+0,02 0,29+0,02*
ЛПВП, ммоль/л 1,08+0,12 0,5б+0,03 0,75+0,0б*
Коэффициент атерогенности 1,20,01 4,2+0,23 2,3+0,12*
Влияние экстракта сабельника болотного на перекисное окисление липидов и антиоксидантную систему организма белых крыс при экспериментальном гломерулонефрите
Показатели Группы животных
интактная контрольная опытная
МДА в сыворотке крови, мкмоль/л 1,1+0,04 5,3+0,2 1,7+0,08*
МДА, в ткани почек, ммоль/л 2,1+0,02 4,2+0,16 3,1+0,1*
Каталаза, мкат/л 20,6+0,6 1б,4+0,53 21,2+0,71
Восстановленный глутатион, ммоль/л 0,82+0,03 0,3+0,02 0,5+0,01
Влияние экстракта сабельника болотного на морфометрические показатели клубочков при экспериментальном гломерулонефрите
Группы животных Показатели
площадь почечной капсулы, um2 площадь почечного клубочка, um2 площадь мочевого пространства, um2 количество клеток в клубочке
Интактная 35596,5+738,17 25629,2+519,70 9967,3+365,51 4б,5+1,б3
Контрольная 39337,0+б92,12 31848,3+643,49 7487,7+321,50 б5,2+2,20
Опытная 37891,2+843,73 28154,7+571,43 9736,5+349,50 48,5+1,82
меров почечного клубочка, мочевое пространство было суженным. Гиперклеточность была обусловлена умеренной пролиферацией эндотелиальных и мезангиаль-ных клеток, инфильтрацией клубочков нейтрофилами и моноцитами, наблюдалось расширение и кровенаполнение капилляров клубочков. Единично выявлялись
изменения клеток почечных канальцев, кариолизис, слущивание эпителиоцитов в просвет канальцев и находили единичные белковые цилиндры в них.
В основе нефропротективного действия исследуемого фитоэкстракта лежит способность биологически активных веществ, содержащихся в данном средстве, ока-
зывать защитное действие на функцию и структуру почек. Так, терпеноиды (а-, Р-пинены, терпинеол) обладают антисептическим, диуретическим влиянием [13]. Содержание органических кислот (р-кумаровая, феруловая) обуславливает спазмолитические свойства [14], флавоноиды (кверцетин, кемпферол) оказывают многостороннее влияние на организм: тонизирующее, капилляроукрепляющее, противовоспалительное, диуретическое [8] и выводящее натриевые соли [13]. Установлено, что содержащиеся в сабельнике болотном фла-воноиды, органические кислоты обладают антиокси-
дантным и мембраностабилизирующим действием [8].
Таким образом, курсовое введение экстракта сабельника болотного при экспериментальном гломерулонефрите оказывает выраженное нефропротекторное действие, характеризующееся уменьшением выраженности деструктивных изменений в нефронах, нормализацией показателей функционального состояния почек, липидного спектра крови, ингибированием свободнорадикальных процессов и повышением антиоксидант-ной активности организма.
INFLUENCE OF A COWBERRY DRY EXTRACT (COMARUM PALUSTRE) ON EXPERIMENTAL GLOMERULONEPHRITIS
ТА. Azhunova, G.A. Bicmulina, Ya.G. Razunaeva, A.G. Mondodoev, V.B. Chobracova, E.V Ferubco (Institute of General and Experimental Biology SD RAS, Buryat State University, Ulan-Ude)
Course introduction of a cowberry dry extract on a background of experimental glomerulonephritis renders expressed nephroprotective influence characterizing by reduction of expressiveness of destructive changes in nephrones, normalization of parameters of a kidneys functional condition and blood lipid spectrum, inhibition of free-radical processes and increase of organism antioxidative protection.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bлaдимирoв Ю.А, Aрчaкoв A.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. — М., 1972. —
115с.
2. Королюк M.A., Ивaнoвa Л.И., Мaйoрoвa, И.Г., Токтев B.E. Методы определения активности каталазы // Лаб. дело. — 1998. — № б. — С.16-19.
3. Koрякoвa Н.Н. Патогенетические механизмы ренопротек-тивного действия статинов при хроническом гломерулонефрите // Нефрология. — 2005. — Т 9, № 3. — С.55-59.
4. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред.
Д.С. Саркисова, Ю.Л. — М., 199б. — 544 с.
5. Мyхин M.B. Современные представления о дифференцированном лечении больных с хроническим гломерулонефритом // Украшский хімютерапевтический журнал . — 2000. — Т. 8, № 4. — С.55-60.
6. Мyхин KB. Коррекция дислипидопротеидемии посредством системной энзимотерапии при эксперименталь-
ном гломерулонефрите // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2002. — №4. — С.27-28.
7. Перов Ю.Л. Морфометрическое изучение почки в норме и при патологии: возможности и ограничения // Aрхив патологии. — 1984. — Т. 4б,№ 7. — С.78-83.
8. Растительные ресурсы СССР. — Л., 1987. — 326 с.
9. Сергиенко B.И., Бoндaрeвa И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2001. — 256 с.
10. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. — М., 2000. — 97б с.
11. Сmaльнaя И.Д., Шришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью ТБК // Современные методы в биохимии. — М., 1977. — С.бб-б8.
12. Anderson T. Omeprazole drug interaction studies // Clin. Pharmacokinet. — 1991. — Vol. 21, № 38. — Р.1603.
13. Duke J.A. CRC handbook of medical herbs. Boca Raton (Fla.):CRC press, 1986. — 677 p.
14. Duke J.A., Ayensu E.S. Medicinal of plants of China. Algo-nac (Mich.): Reference publ., 1985. — Vol. 1-2. — 705 p.
© КРУПЕННИКОВА В.Г., ФЕДОСЕЕВА Г.М. - 2008
АНТОЦИАНЫ СКАБИОЗЫ ВЕНЕЧНОЙ
В.Г. Крупенникова, Г.М. Федосеева
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармакогнозии
с курсом ботаники, зав. — д.ф.н., проф. Г.М. Федосеева)
Резюме. Представлены результаты исследования антоцианов скабиозы венечной, произрастающей в Восточной Сибири. Установлено, что изучаемое растение, содержит соединения антоциановой природы. В цветках скабиозы венечной обнаружен антоциан-хризантемин (цианидин-3-моноглюкозид).
Ключевые слова: скабиоза венечная, антоцианы, хризантемин (цианидин-3-моноглюкозид).
Одними из наиболее распространенных в природе красящих веществ, придающими лепесткам цветов, плодам, листьям и стеблям окраску, являются антоциа-ны. Химическая структура антоцианов позволяет отнести их к группе природных полифенольных соединений, объединенных общим строением углеродного скелета С6-С3-С6.
Сочетание С6-С3-С6 присуще не только антоциано-вым пигментам, но и флавоноидам, катехинам и другим группам веществ, отличающимся от антоцианов цветом и физическими свойствами. Антоцианы, как и флавоноиды, обладают антиокислительной активностью, которой придают большое значение при лечении рака, атеросклероза, гипертонической болезни и других не менее распространенных и тяжелых заболеваний [3,4].
К настоящему времени из растений выделено более 70 различных антоцианов. Качественный состав анто-цианов, как правило, специфичен для конкретного вида растений и довольно стабилен [5]. Однако он зависит от особенностей и условий произрастания растения. Чаще всего встречаются следующие антоцианидины
(агликоны): цианидин, пеларгонидин, дельфинидин, пеонидин, петунидин, мальвидин.
Среди растительных источников, содержащих анто-цианы, значительный интерес представляет скабиоза венечная Scabiosa comosa Fischer ex Roemer et Schultes. из семейства ворсянковых Dipsacaceae. Это многолетнее травянистое растение высотой 25-50 см. Корень многоглавый, стебли прямые, маловетвистые. Прикорневые листья простые, ланцетные, цельные или перистые; стеблевые — сидячие или короткочерешковые, перистораздельные с линейными долями. Соцветие головка. Цветки сине-фиолетовые.
Среди растений тибетской медицины, произрастающих в Забайкалье, соцветия скабиозы венечной под названием уд-бал-он-бо использовались в качестве заменителя голубого лотоса Nymphaea stellata Willd. Надземная часть растения в тибетской медицине применяется как рвотное, жаропонижающее, при болезнях мочевого пузыря, в составе сложных рецептов при болезнях сердца, сепсисе, при болезни желудка, гастроэнтеритах, пневмонии; наружно (полоскание) — при анги-
