CC BY
44
© МОНДОДОЕВ А.Г., НИКОЛАЕВ С.М., ЛЕМЗА С.В., ХИТРИХЕЕВ В.Е., НИКОЛАЕВ М.П. — 2011 УДК 615.322
ВЛИЯНИЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ COMARUM POLUSTRAE НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПОЧЕК
У БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ СУЛЕМОЙ
Александр Гаврилович Мондодоев1, Сергей Матвеевич Николаев1-2-3, Сергей Васильевич Лемза!,
Владимир Евгеньевич Хитрихеев3, Михаил Петрович Николаев1 ('Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л. Л. Убугунов; 2Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, г. Иркутск, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах; 3Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр. РАО, д.п.н.,
проф. С.В. Калмыков)
Резюме. В статье приведены данные по влиянию сухого экстракта из Comarum polustrae на функциональное состояние почек белых крыс при сулемовой нефропатии. Установлено, что растительное средство обладает выраженным нефропротекторным и антиоксидантным действием.
Ключевые слова: экстракт из Comarum polustrae, нефропатия, нефропротекторное, антиоксидантное действие.
EFFECT OF THE COMARUM POLUSTRAE EXTRACT ON THE FUNCTIONAL STATUS OF WHITE RAT KIDNEYS INTOXICATED BY HGCL2
A.G. Mondodoev 1, S.M. Nikolaev 1A3S.V. Lemza 1, V.E. Khitrikheev3, M.P. Nikolaev 1
('Institute of General and Experimental Biology SB RAS; 2Irkutsk State Institute of Postgraduate Medical Education,
Irkutsk, 3Buryat State University, Ulan-Ude)
Summary. The influence of the dry extract from Comarum polustrae L. on kidney functioning in nephropathy caused by HgCl2 was studied. It has been shown that the extract under investigation was possessed of nephroprotective and antioxidative activity.
Key words: extract from Comarum polustrae L., nephropathy, nephroprotective and antioxidative activity
С каждым годом возрастает число лиц, контактирующих с ртутью, главным образом через загрязнение биосферы выбросами промышленных предприятий, а также вследствие химизации сельского хозяйства. Известно, что основным депо для ртути являются почки при интоксикации ее соединениями. Уровень ртути в почках превышает ее количество в крови в 300 раз, причем металл задерживается в почках значительно дольше, чем в других органах. Это объясняется повышенной тропностью почечной ткани к тяжелым металлам. Благодаря наличию энзимных систем в прямом сегменте проксимального отдела нефрона органические соединения ртути переходят в неорганические, из которых примерно до 40% разлагаются с образованием чистой ртути [4]. Установлено, что ионы ртути (Н^2+) поступают в клетки проксимальных канальцев в виде их коньюгатов с цистеином^ при участии белка переносчика органических анионов — hOAT1 [14].
Токсическое действие ртути на организм человека обусловлено блокадой кальциевых каналов, сульфгидрильных, фосфатных, аминных и карбоксильных групп ферментных и структурных белков. Она является ингибитором цитох-ромоксидазы, лактатдегидрогеназы, ма-латдегидрогеназы и транспортных АТФ-аз [13]. В экспериментальной медицине «сулемовая почка» рассматривается как классический вариант некронефроза [5].
Цель настоящей работы оценить влияние сухого экстракта из корней и корневищ сабельника болотного (Сотагит ро1шШе Ь.), условно названного «Эксабол» на функциональное состояние почек при интоксикации животных сулемой.
в стандартных условиях содержания и кормления в виварии (приказ Минздрава СССР №1179 от 10.10.1983 г.). Эксперименты на животных осуществляли в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей. Формировали группы из 6 крыс к каждому сроку наблюдения. Острую почечную недостаточность почек у животных вызывали однократным внутрибрюшинным введением раствора ртути двухлористой в дозе 2 мг/кг [8]. Животным 1й опытной группы внутрижелудочно вводили водный раствор «Эксабола» в дозе 100 мг/кг предварительно за
1 ч до инъекции сулемы, а затем 1 раз в день в течение эксперимента (6 суток). Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество воды дистиллированной по аналогичной схеме. В качестве препарата
Таблица 1
Влияние «эксабола» на содержание креатинина в сыворотке и моче крыс на фоне сулемового некронефроза
Материалы и методы
Исследования проведены на 54 белых крысах — самцах линии Wistaг с массой 200-220 г. Животные находились
Группы животных Доза Креатинин, мкмоль/л
Сыворотка Моча
1. Интактная - 92,51 ± 3,54 4314, 20 ± 603,50
1 сутки
2. Контрольная (сулема) - 504,10 ± 52,47* 2539,40 ± 359,37*
З.Опытная 1 (сулема + эксабол) 100мг/кг 299,70 ± 26,67** 3745,20 ± 111,17**
4. Опытная 2 (сулема +канефрон) 1,5 мл/кг 384,01 ± 51,76** 2565,20 ± 105,40
3 сутки
2. Контрольная (сулема) - 670,60 ± 41,35* 2847,40 ± 402,51*
З.Опытная 1 (сулема + эксабол) 100 мг/кг 303,50 ± 76,35** 5079,10 ± 336,46**
4. Опытная 2 (сулема+ канефрон) 1,5 мл/кг 545,60 ± 68,35 5248,40 ± 320,17**
6 сутки
2. Контрольная (сулема) - 408,90 ± 37,68* 5925,60 ± 548,35*
З.Опытная 1 (сулема + эксабол 100 мг/кг 239,40 ± 13,15** 7041,50 ± 146,17**
4. Опытная 2 (сулема+ канефрон) 1,5мл/кг 241,80 ± 14,38** 7846,90 ± 490,24**
Примечание: здесь и далее * — различия статистически значимы между группами интактная — контрольная, ** — различия статистически значимы между группами контрольная — опытная 1 и опытная 2 при р<0,05.
Таблица 2
Влияние «эксабола» на скорость клубочковой фильтрации на фоне сулемового некронефроза
Группы животных Доза СКФ, мкл/мин/100г
1 сутки 3 сутки 6 сутки
1. Интактная - 48,8 ±5,90
2.Контрольная (сулема) - 12,81 ± 1,44* 15,40± 1,89* 23,80±2,65*
3. Опытная 1 (сулема+эксабол) 100 мг/кг 41,62 ± 3,29** 51,80±1,10** 54,20±5,65**
4. Опытная 2 (сулема+канефрон) 1,5 мл/кг 20,72 ±1,85** 25,70±2,25** 54,30±4,49**
сравнения использовали «Канефрон» в объеме 1,5 мл/ кг, который получали животные 2й опытной группы по идентичной схеме. Определение функционального состояния почек животных проводили через 1, 3 и 6 суток после введения сулемы. С этой целью определяли: диурез с водной нагрузкой за 4 ч [1], концентрацию ионов №+ и К+ в моче методом пламенной фотометрии на приборе «Лар^-4» (Германия), содержание креатинина в сыворотке крови и моче унифицированным методом с помощью набора реактивов «Вектор +» (Россия), ско-
рость клубочковой фильтрации (СКФ) — по клиренсу эндогенного креатинина [5]. Также определяли интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) по концентрации малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови [10] и в гомогенате почек [9]. О состоянии эндогенной антиоксидантной системы судили по активности каталазы в сыворотке крови [3] и содержанию восстановленного глутатиона в крови [11].
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием и-критерия Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при р<0,05 [7].
Результаты и обсуждение
Как следует из данных, приведенных в таблице 1, однократное введение внутрибрюшинно раствора ртути двухлористой белым крысам вызывает токсическое поражение почек с развитием выраженного азотемического синдрома.
Так, через 1 сутки после инъекции сулемы в сыворотке крови животных контрольной группы резко возрастала концентрация креатинина (более чем в 5 раз) и снижалась в моче (в 1,7 раза) по сравнению с данными у крыс интактной группы. Введение интрагастрально «Эксабола» в дозе 100 мг/кг крысам 1й опытной группы на фоне сулемовой нефропатии к указанному сроку наблюдения оказывало выраженное гипоазотемическое действие, о чем свидетельствовало снижение концентрации креатинина в сыворотке на 41% и его повышение в моче на 47% по сравнению с показателями у животных контрольной группы.
В последующем, на 3 сутки эксперимента наблюдали дальнейшее нарастание тяжести нефропатии у животных контрольной группы. Концентрация креатинина в сыворотке повыша-
лась почти в 7 раз, по сравнению с данными ин-тактной группы. Введение испытуемого средства крысам 1 опытной группы способствовало статистически значимому снижению концентрации кре-атинина в крови (более чем в 2 раза) и повышению его содержания в моче в 1,8 раза по сравнению с данными в контроле.
В контрольной группе животных к 6 суткам наблюдения содержание креатинина в крови оставалось повышенным в 4 раза по сравнению с данными интактной группы. Введение животным испытуемого фитоэкстракта в указанной дозе способствовало дальнейшему снижению концентрации креатинина в сыворотке (в 1,7 раза ниже, по сравнению с контрольной группой), а его содержание в моче было выше показателей интактной группы, что свидетельствует о более активном купировании азоте-мического синдрома. Полученные данные позволяют сделать вывод, что «Эксабол» значительно превосходит по активности препарат сравнения.
Одним из важных показателей, характеризующих функциональное состояние почек, является скорость клубочковой фильтрации (СКФ).
Данные, приведенные в таблице 2, указывают, что токсическое поражение почек сулемой сопровождается резко выраженным снижением скорости клубочковой фильтрации; так у крыс контрольной группы СКФ на 1, 3 и 6 сутки наблюдения снижалась в 3,8, 3,2 и 2,0 раза соответственно по сравнению с данными у интактных животных.
Курсовое введение «Эксабола» крысам 1й опытной группы в экспериментально-терапевтической дозе способствовало сохранению скорости клубочковой фильтрации на уровне показателей у интактных животных во все сроки наблюдения.
Из таблицы 3 следует, что интоксикация животных сулемой сопровождается угнетением диуреза, свидетельствующим о снижении водовыделительной функции почек. Так, у животных контрольной группы объем выделяемой мочи уменьшался на 29 % через 1 сутки наблюдения по сравнению с данными у животных интактной группы. У крыс, получавших «эксабол», скорость диуреза сохранялась близкой к показателям интактной группы крыс во все сроки наблюдения. Препарат сравнения проявлял аналогичную «эксаболу» эффективность.
Интоксикация животных сулемой приводит к значительному снижению концентрации ионов натрия и в меньшей степени ионов калия в моче крыс через 1 сутки наблюдения как в контрольной, так и в опытных группах животных. В частности, концентрация ионов натрия у крыс контрольной группы снижалась почти в
Таблица 4
Влияние «эксабола» на экскрецию ионов калия и натрия с мочой у крыс на фоне сулемового некронефроза
Группы Доза Концентрация, мг/мл
К+ №+
1. Интактная - 3,52± 0,49 1,26 ± 0,10
1 сутки
2. Контрольная (сулема) - 2,66 ± 0,33 0,32 ± 0,039*
3. Опытная 1 (сулема +эксабол) 100 мг/кг 3,61 ± 0,41 0,71 ± 0,060**
4. Опытная 2 (сулема + канефрон) 1,5 мл/кг 2,55 ± 0,11 0,23 ± 0,033
3 сутки
2. Контрольная (сулема) - 2,47 ± 0,38 0,38 ± 0,065*
3. Опытная 1 (сулема +эксабол) 100 мг/кг 2,86 ± 0,52 0,87 ± 0,17**
4. Опытная 2 (сулема + канефрон) 1,5 мл/кг 1,99 ± 0,09 0,53 ± 0,065
6 сутки
2. Контрольная (сулема) - 5,1 ± 0,89 0,35 ±0,037*
3. Опытная 1 (сулема +эксабол) 100 мг/кг 4,78 ± 0,52 0,34 ± 0,045
4. Опытная 2 (сулема + канефрон) 1,5 мл/кг 5,3 ± 0,25 0,31 ±0,016
Таблица 3
Влияние «эксабола» на диурез белых крыс на фоне сулемового некронефроза
Группы Доза Диурез мл/100г/час
1 сутки 3 сутки 6 сутки
1. Интактная - 0,35 ± 0,011
2. Контрольная (сулема) - 0,25 ± 0,035* 0,36 ± 0,044 0,29 ± 0,032
3. Опытная 1 (сулема+эксабол) 100 мг/кг 0,33 ± 0,067 0,31 ± 0,011 0,32 ± 0,035
4. Опытная 2 (сулема+ канефрон) 1,5 мл/кг 0,31 ± 0,032 0,27 ± 0,036 0,27 ± 0,017
Таблица 5
Влияние «эксабола» на содержание продуктов перекисного окисления липидов и активность каталазы крови белых крыс при сулемовом некронефрозе
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная (сулема) Опытная (сулема+ эксабол)
1 сутки
МДА в сыворотке крови, мкмоль/мл 2,10 ±0,11 3,85 ±0,538* 2,00±0,263**
Каталаза в сыворотке крови, мкат/л 4,10 ± 0,34 7,09 ± 0,63 6,56 ± 0,25
Восстановленный глутатион в крови, мкмоль/мл 0,674 ± 0,052 0,796 ±0,063 0,729 ± 0,035
3 сутки
МДА в сыворотке крови, мкмоль/мл 2,14 ± 0,18 3,64±0,068* 1,87±0,129**
МДА в гомогенате почки, мкмоль/г ткани 2,04 ± 0,15 5,89±0,599* 2,20±0,649**
Каталаза в сыворотке крови, мкат/л 8,60±0,61 8,94 ± 0,69 8,84 ± 0,74
Восстановленный глутатион в крови, мкмоль/мл 0,867± 0,081 0,748±0,088 0,638± 0,076
6 сутки
МДА в сыворотке крови, мкмоль/мл 2,23 ± 0,12 2,55 ± 0,22 2,44 ± 0,29
МДА в гомогенате почки, мкмоль/г ткани 2,61± 0,18 4,17 ± 0,24* 3,31 ± 0,72
Каталаза в сыворотке крови, мкат/л 8,60±0,61 6,42 ± 0,15* 4,92 ± 1,14
Восстановленный глутатион в крови, мкмоль/мл 0,867± 0,081 0,172±0,034* 0,302±0,034**
4 раза, тогда как у животных опытной группы, получавших испытуемое средство, натрийурез вдвое и более превышал аналогичный показатель у животных контрольной группы. Через 3 суток наблюдали дальнейшее снижение салуреза как у животных контрольной, так и опытных групп. При этом в моче крыс, получавших «Эксабол», отмечалось более чем 2х кратное повышение концентрации ионов натрия, по сравнению с животными контрольной группы (табл. 4).
Повышение экскреции калия с мочой через 6 суток наблюдали во всех группах животных, тогда как выделение натрия остается низким, и эти показатели не имеют статистически значимого различия между контрольной и опытными группами (р>0,05).
Исследование динамики концентрации продуктов перекисного окисления липидов и состояния антиоксидантной защиты (табл. 5) показало, что интоксикация животных сулемой сопровождается индукцией свободнорадикальных процессов, о чем свидетельствовали существенное повышение концентрации МДА в сыворотке крови и гомогенате почек, а также компенсаторное повышение к 1 сроку наблюдения, а затем снижение активности одного из ключевых ферментов антиоксидантной защиты — каталазы. Интоксикация животных ртутью двухлористой приводила к пятикратному снижению содержания восстановленного глутатиона в крови на 6 сутки наблюдения. Курсовое введение «Эксабола» при сулемовой нефропатии оказывало выраженное антиоксидантное действие. На это указывает статистически значимое снижение концентрации МДА в сыворотке крови и гомогенате коркового слоя почек животных 1й опытной группы во все сроки наблюдения, тогда как у крыс контрольной группы эти показатели оставались повышенными по сравнению с таковыми у интактных крыс.
Таким образом, введение лабораторным животным ртути двухлористой в указанной дозе сопровождается развитием острой почечной недостаточности сопровождающейся; азотемией, олигоурией, снижением скорости клубочковой фильтрации, нарушением электролитного баланса, что согласуется с данными [1, 13] На фоне сулемовой нефропатии у белых крыс развивается окси-дативный стресс с понижением возможностей эндогенной антиокислительной защиты. Можно предполагать, что «Эксабол» является прямым антиоксидантом, механизм действия которого заключается в нейтрализации свободных радикалов, поскольку не наблюдалось явно-
го повышения активности каталазы под его влиянием.
Почти двукратное повышение содержания восстановленного глутатиона в крови у животных 1й опытной группы, по сравнению с данными в контрольной группе к третьему сроку наблюдения, позволяет сделать вывод о стимулирующем влиянии «Эксабола» на активность глутатионзависимых ферментов, которые играют важную роль в инактивации и утилизации перекиси водорода, гидропероксидов полиненасыщенных жирных кислот [2, 12]. Курсовое введение «Эксабола» животным сопровождалось нефропротекторным влиянием благодаря способности данного фитоэкстракта экранировать отрицательное действие соединений ртути. Этот эффект обусловлен комплексом биологически активных веществ, содержащихся в экстракте, прежде всего фенольной природы, оказывающих антиокси-дантное, мембраностабилизирующее действие, которое в свою очередь обеспечивает морфофункциональную сохранность клеток нефрона. Эти наблюдения имеют определенное значение, поскольку есть данные, свидетельствующие о важной роли ускорения процессов ПОЛ, при интоксикациях как фактора, способствующего развитию и поддержанию патологического процесса [13]. Благодаря указанным свойствам «Эксабола», обеспечивается его выраженное фармакотерапевтическое влияние при интоксикации животных сулемой.
ЛИТЕРАТУРА
1. Берхин Е.Б., Иванов Ю.И. Методы экспериментального исследования почек и водно-солевого обмена. — Барнаул,1972. — 123 с.
2. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньщикова Е.Б. Окислительный стресс. — М., 2001. — 343 с.
3. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Методы определения активности каталазы // Лаб. дело. — 1988. — №1. — С.16-19.
4. Малов А.М., Иванова Т.М., Петрова А.Н., Семенов Е.В. и др. Особенности диагностики и тактика ведения больных при меркуриализме // Токсикологический вестник. — 2004. — №5. — С. 8-15.
5. Наточин Ю.В. Физиология почки и вводно-солевого обмена. — СПб., 1993. — 416 с.
6. Пермяков Н.К., Зимина Л.Н. Острая почечная недостаточность. — М., 1982. — 240 с.
7. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая стати-
стика в клинических исследованиях. — М., 2006. — 263 с.
8. Соколова В.Е., Васильченко Е.А., Любарцева Л.А. Влияние препаратов из видов леспедеци на азотистый обмен у кроликов //Растит. ресурсы. — 1975. —Т.11, вып.1. — С.90-94.
9. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты //Современные методы в биохимии. — М., 1977. — С.66-68.
10. Темирбулатов Р.А., Селезнев Е.И. Метод повышения интенсивности свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение //Лабор. дело. — 1981. — №4. — С.209-211.
11. Anderson M.E. Glutathione: Biochemical and Medical Aspects. Pt. A. — N.Y., 1989. — P. 333-405.
12. Catler R.G., Rodriges H. Oxidative stress and aging. — Singapore., 2003. — Vol. 1,2. — 1523 p.
13. Kolenic J., Petrovicova J., Zimacec J., Kolenic P. Markers
of nephrotoxicity and mercury vapour exposure //Toxicology Letters. — 1996. — V. 88. — P.-60.
14. Zalups R. K., Aslamkhan A.G., Ahmad S. Human organic
anion transporter 1 mediates cellular uptake of cysteine-s coniugates of inorganic mercury // Toxicology Letters. — 2004. — V. 66. — P. 251-261.
Информация об авторах: 670013, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН, ОБАВ, e-mail: [email protected], тел. (3012) 433463.
Мондодоев Александр Гаврилович — д.м.н., ведущий научный сотрудник, Николаев Сергей Матвеевич — д.м.н., профессор, заведующий отделом,
Лемза Сергей Васильевич — к.б.н., старший научный сотрудник,
Хитрихеев Владимир Евгеньевич — д.м.н., профессор, декан.
Николаев Михаил Петрович — аспирант.
© ХОБРАКОВА В.Б., НИКОЛАЕВ С.М. — 2011 УДК 615.322
ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ Т- И В-ЛИМФОЦИТОВ
Валентина Бимбаевна Хобракова1, Сергей Матвеевич Николаев12 ^Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л. Л. Убугунов; 2Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, г. Иркутск,
ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах)
Резюме. Установлена иммуномодулирующая активность комплексного растительного средства — сухого экстракта «Иммунополифит» в реакции пролиферации Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей в экспериментах in vitro. Показано, что испытуемое средство в концентрации 0,4 мкг/мл стимулирует пролиферативную активность В-лимфоцитов и не оказывает влияния на пролиферацию Т-лимфоцитов. Использование исследуемого средства в максимальной концентрации 40 мкг/мл приводит к снижению пролиферации Т-лимфоцитов.
Ключевые слова: сухой экстракт «Иммунополифит», иммуномодулятор, пролиферация, Т-лимфоцит, В-лимфоцит, митоген.
THE INFLUENCE OF THE COMPLEX PLANT REMEDY ON THE T- AND B-LYMPHOCYTE PROLIFERATIVE ACTIVITY
V.B. Khobrakova1, S.M. Nikolaev1,2,
(^Institute of General and Experimental Biology of SD RAS, Ulan-Ude;
2 Irkutsk State Institute of Postgraduate Medical Education, Irkutsk)
Summary. The immunomodulating activity of the complex plant remedy —the dry extract “Immunopolyphyt” in the reaction of proliferation of T- and В-lymphocytes obtained from mouse spleen has been established in experiments in
vitro. It has been shown that the dry extract “Immunopolyphyt” in the concentration of 0,4 mkg/ml stimulates proliferative
activity of В-lymphocytes and has no effect on the proliferation of T-lymphocytes. The use of the given remedy in maximal concentration of 40 mkg/ml reduces proliferation of T-lymphocytes.
Key words: the dry extract “Immunopolyphyt”, immunomodulator, proliferation, Т- lymphocyte, В-lymphocyte, mitogen.
Среди современных методов повышения иммунологического статуса организма важное значение имеет фармакологическая коррекция на основе применения иммуномодуляторов — веществ, способных направленно действовать на иммунную систему. Изыскание путей стимуляции и депрессии иммунной системы в целом и отдельных ее клеточных звеньев рассматривается в качестве основной задачи иммунокоррекции [8]. Иммунокорригирующими могут быть как вещества белковой природы, так и средства синтетического и природного происхождения. Преимущество лекарственных растений заключается в том, что они действуют на организм всем комплексом содержащихся в них веществ [1,2,6].
В связи с этим, проблема поиска и создания новых, эффективных, иммунокорригирующих лекарственных средств по современной технологии, позволяющей извлечь максимальное количество биологически активных веществ из растений, является актуальной. Максимальный выход биологически активных веществ из растений обеспечивается при получении из них сухих экстрактов, к преимуществу которых можно отнести стойкость при хранении, удобство при приеме больными. Сухой экстракт представляет собой легкорастворимый в воде или водно-спиртовых смесях комплекс биологически активных веществ и удобен при стандартизации. Объектом настоящего исследования
явился сухой экстракт «Иммунополифит», в состав которого входят корни солодки голой и вздутоплодника сибирского, семена льна обыкновенного, плоды лимонника китайского и шиповника иглистого, трава горца птичьего и пустырника сердечного, соцветия ноготков лекарственных.
Целью настоящего исследования явилось определение влияния сухого экстракта «Иммунополифит» на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей in vitro.
Материалы и методы
Влияние исследуемого средства на пролиферативную активность Т- и В-лимфоцитов селезенки мышей линии СВА оценивали in vitro в реакции бластной трансформации в присутствии митогенов: конканавалина А (КонА) и липополисахарида (ЛПС) по включению 3Н-тимидина с использованием сцинтилляционного счетчика [5]. Клетки селезенки мышей в концентрации 1х106 клеток/ мл вносили по 100 мкл в лунки плоскодонных культуральных микропланшет. Mитогены КонА и ЛПС вносили в лунки в концентрации 10 мкг/мл. Дополнительно вносили исследуемое средство в концентрациях 0,4; 4,0 и 40,0 мкг/мл. Клетки инкубировали в среде RPMI-1640 в течение 48 ч. при 370С в атмосфере воздуха с 5% СО2. Синтез ДНК в культуре клеток оценивали по включе-
