CC BY
83
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ
© РАЗУВАЕВА Я.Г., НИКОЛАЕВ С.М., КАБАЧУК Н.В., НАГАСЛАЕВА О.В. - 2010
ВЛИЯНИЕ СОПЛОДИЙ ХМЕЛЯ ОБЫКНОВЕННОГО (HUMUSLUPULUS L.) НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ У БЕЛЫХ КРЫС
Я.Г. Разуваева, С.М. Николаев, Н.В. Кабачук, О.В. Нагаслаева (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор - д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)
Резюме. Введение белым крысам экстракта шишек хмеля в дозах 200 и 300 мг/кг снижает уровень тревожности, ослабляет пассивно-оборонительную реакцию и повышает ориентировочно-исследовательское поведение в тесте «открытое поле». Исследуемый экстракт в дозе 200 мг/кг стимулирует когнитивные функции у крыс, что выражается в улучшении выработки и сохранности условного рефлекса пассивного избегания.
Ключевые слова: экстракт шишек хмеля, «открытое поле», УРПИ.
INFLUENCE OF HOP STROBILES (HUMUS LUPULLUS L.) ON THE FUNCTIONAL STATE OF THE NERVOUS SYSTEM IN RATS
Ya.G. Razuvaeva, S.M. Nikolaev, N.V Kabachuk, O.V. Nagaslaeva (Institute of General and Experimental Biology of SB RAS)
Summary. The administration of the hop strobile extract in the dose of 200 and 300 mg/kg to white rats decreases the level of anxiety, relaxes the passive-defensive reaction and increases orientation and investigative behavior in the «open field» test. The given extract in the dose of 200 mg/kg stimulates cognitive functions in rats improving the development and preservation of the conditional reflex of passive avoidance.
Key words: hop strobile extract, «open field», conditional reflex of passive avoidance.
Хмель обыкновенный (Humus lupulus L.) - многолетняя двудомная травянистая лиана, произрастающая на всей территории России, кроме Крайнего Сервера и широко применяющийся в научной и народной медицине [1,2,4,6]. Соплодия хмеля в России разрешены к использованию в качестве анальгезирующего, противоязвенного, седативного и снотворного средств [1,4]. Он входит в состав таких препаратов, как уролесан, валокордин и валоседан [5], а также в состав различных сборов [4]. В Институте общей экспериментальной биологии разработан сухой экстракт шишек хмеля обыкновенного (ЭШХ), полученный путем последовательной экстракции разными типами экстрагентов.
Целью исследования явилось определение влияния ЭШХ на функциональное состояние нервной системы у белых крыс.
Материалы и методы
Исследования проведены на 50 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой тела 160-180 г. Животные были разделены на 5 групп, в каждую входило по 10 животных обоего пола в равных соотношениях. Животным I-III опытных групп в течение 5 дней до проведения экспериментов вводили внутрижелудочно ЭШХ в дозах 100, 200 и 300 мг/кг соответственно. Крысы четвертой опытной группы получали препарат сравнения - экстракт валерианы (ЭВ) в дозе 120 мг/кг, животные контрольной группы - очищенную воду в эквивалентом объеме по аналогичной схеме введения. Тестирование животных в экспериментальных установках проводили через 1 час после последнего введения исследуемых средств.
Влияние ЭШХ и ЭВ на спонтанную двигательную активность, на ориентировочно-исследовательское поведение и эмоциональность животных изучали с помощью теста «открытое поле». За поведением крыс в экспериментальной установке наблюдали в течение 3 минут [3]. Регистрировали горизонтальную активность (число пересеченных центральных и периферических квадратов), вертикальную активность (число подъемов на задние лапы), число заглядываний в отверстия (норковый рефлекс), количество животных, посетивших центральные квадраты, и латентный период захода в центральный квадрат. Эмоциональное состояние животных определяли по количеству дефекационных шариков, грумингу (число умываний). Об общей двигательной активности судили по сумме вертикального, горизонтального компонентов и норковому рефлексу [3].
Влияние ЭШХ и ЭВ на процессы обучения и памяти у интактных животных исследовали по выработке и сохранности условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) [3]. Во время обучения крысу помещали в освещенный отсек 2-х секционной камеры. Как правило, через некоторое время после начала сеанса обучения, называемое латентным периодом, все животные предпочитали темный отсек и проводили в нем большую часть времени. Регистрировали время перехода в темную половину установки (латентный период) и суммарное время пребывания в темном и светлом отсеках в течение 200 с наблюдения. Сразу после перехода, животных подвергали двукратному не избегаемому электрокож-ному раздражению переменным током (20-30 мА, 1с, 50 Гц), силу которого подбирали индивидуально. Латентный период и время проведения в темном отсеке регистрировали до обучения и через 1 час, 24 часа и 7 суток после выработки рефлекса.
Значимость различий между указанными параметрами среди экспериментальных групп оценивали с помощью непараметрического критерия Манна - Уитни. Различия считались существенными при р < 0,05 [7].
Результаты и обсуждение
Результаты исследований показали, что помещение белых крыс, получавших ЭШХ в дозах 200 и 300 мг/кг и ЭВ в дозе 200 мг/кг, в незнакомые условия приводило к увеличению общей двигательной активности в 1,6; 2,8 и 2,1 раза соответственно (табл. 1) по сравнению с таковым показателем у животных контрольной группы. При этом введение крысам ЭШХ в данных дозах и ЭВ значительно увеличивало количество посещений животными не только периферических, но и центральных квадратов. Латентный период захода в центральные квадраты у крыс, получавших ЭШХ в дозах 200 и 300 мг/кг и ЭВ, был ниже такового показателя у животных контрольной группы на 22, 35 и 26% соответственно. При этом 50% животных, получавших ЭШХ в дозе 300 мг/кг и ЭВ в дозе 120 мг/кг, посетили центральные квадраты, тогда как у животных контрольной группы этот показатель составил 30%. У животных, получавших ЭШХ и ЭВ, на фоне повышения горизонтальной активности наблюдалось существенное увеличение вертикальной активности и норкового рефлекса (табл. 1).
Повышение ориентировочно-исследовательской активности у белых крыс 11-1У опытных групп можно объяснить снижением у них уровня эмоциональности (табл. 1). Так, у
Таблица І
Влияние экстракта шишек хмеля и экстракта валерианы на ориентировочноисследовательское поведение и эмоциональную реакцию у белых крыс в тесте
«открытое поле»
Показатели Г руппы животных
контрольная (Н2О) опытная I (ЭШХ, 100 мг/кг) опытная II (ЭШХ, 200мг/кг) опытная III (ЭШХ, 300мг/кг) опытная IV (ЭВ)
Общая двигательная активность 15,8±3,51 13,9±2,68 23,5±4,23 36,0±6,29* 33,1±4,12*
Горизонтальная активность Количество центральных квадратов 2,0±1,23 2,0±0,72 2,6±1,03 5,3±1,54 2,5±0,82
Количество периферических квадратов 9,3±2,90 8,8±1,75 12,5±2,89 16,4±2,89 18,0±1,54*
Количество животных, посетивших центральные квадраты,% 30 30 40 50 50
Латентный период захода в центральный квадрат, сек 113,0±6,84 85,6±5,67 89,0±10,30 85,6±9,3 83,8±12,30
Вертикальная активность 3,1±0,62 3,2±0,61 4,7±0,92 7,4±1,54* 5,7±1,34*
Норковый рефлекс 1,4±0,41 - 3,3±1,03 7,1±1,44* 4,8±0,10*
Количество дефекационных шариков 3,7±0,51 2,0±0,41* 2,3±0,51* 2,2±0,38* 1,7±0,31*
Количество актов груминга 2,2±0,51 1,8±0,41 1,2±0,10 0,7±0,31* 2,0±0,41
Примечание: здесь и далее * - значения значимы по сравнению с данными у животных контрольной группы при р<0,05.
животных, получавших ЭШХ в дозах 200 и 300, отмечали уменьшение количества дефекационных шариков в среднем на 38% и количества актов груминга в 1,8 и 3,1 раза соответственно по сравнению с таковыми показателями у контрольных животных. На фоне введения препарата сравнения - ЭВ у крыс наблюдали снижение количества дефекационных шариков в 2,2 раза по сравнению с таковыми показателями у животных контрольной группы. Следовательно, введение животным ЭШХ в дозах 200 и 300 мг/кг и ЭВ вызывает у крыс ускорение процессов адаптации и снижение тревожно-оборонительной реакции.
Введение ЭШХ в дозе 100 мг/кг не оказывало значимого влияния на показатели поведения у белых крыс в тесте «открытое поле»
(табл. 1).
Для оценки влияния веществ на процессы обучения и памяти в норме и при патологии используется широкий набор моделей.
Наиболее часто применяют метод условной реакции пассивного избегания. Основным преимуществом этого метода является быстрота выработки рефлекса (обучение с одной пробы) и возможность дифференцированно воздействовать на различные фазы памяти [3].
Крысы по характерному для грызунов норковому рефлексу предпочитают большую часть времени проводить в темном отсеке камеры, чем в светлом. Курсовое введение животным ЭШХ во всех исследуемых дозах и ЭВ в дозе 120 мг/кг не оказывало влияния на данный показатель. Так, животные всех опытных групп до обучения большую часть времени проводили в темном отсеке установки (табл. 2).
При проверке выработки УРПИ установлено (табл. 2), что курсовое введение животным ЭШХ в дозах 100 и 200 мг/ кг увеличивало латентный период через 1 час после выработки рефлекса на 15 и 25% соответственно по сравнению с данными у крыс контрольной группы и сокращало общее время пребывания их в темном отсеке.
Результаты проверки сохранности рефлекса показали, что введение белым крысам ЭШХ в дозе 200 мг/кг вызывает
ЛИТЕРАТУРА
1. Дикорастущие полезные растения России / Под ред. А.Л. Буданцева, Е.Е. Лесиовской. - СПб., 2001. - 663 с.
2. Беленовская Л.М., Буданцев А.Л. Компонентный состав и биологическая активность Humus lupulus L. (Canabaceae): обзор результатов исследований последних десятилетий//
более прочную тенденцию сохранности памятного следа по сравнению с показателями у животных первой, третьей и четвертой опытных групп (табл. 2). Так, у животных второй опытной группы латентный период повышается через 24 часа и 7 суток на 29 и 71%, тогда как у крыс третьей опытной группы - на 12 и 34% соответственно по сравнению с таковым показателем у животных контрольной группы. Введение животным ЭШХ в дозе 100 мг/кг и ЭВ в дозе 200 мг/кг не оказывало влияния на сохранность УРПИ (табл. 2).
Данное влияние ЭШХ на функциональное состояние ЦНС обусловлено представленным в нем комплексом биологически активных веществ: а- и р-кислоты, халконы (ксантогумол, изоксанто-гумол, дезметилксантогумол), фла-воны, проантоцианидины и другие [2,4,6]. Установлено, что фракции соплодий, содержащие а- и р-кислоты, оказывают выраженное седативное и антидепрессивное действие [10,12]. Халконы и проан-тоцианидины обладают антиокси-дантной активностью, ингибируя окисление липопротеидов низкой плотности [8,11], при этом активность ксантогумола превосходит таковую а-токоферола и изофлавоноида гени-
стеина [9]. На сегодняшний день проантоцианидины хмеля рассматриваются как потенциальные средства для предотвращения таких заболеваний как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, атеросклероза и инсульта [12].
Таким образом, полученные в ходе тестирования в «открытом поле» данные (увеличение вертикальной, горизонтальной активности и норкового рефлекса, снижение количества дефекаций и актов груминга), позволяют заключить, что введение крысам ЭШХ в дозах 200 и 300 мг/кг снижает у них уровень тревожности, ослабляет пассивно-оборонительную реакцию и повышает ориентировочно-исследовательское поведение. Данное влияние сопоставимо с эффектом экстракта валерианы. Введение ЭШХ в дозе 200 мг/кг стимулирует когнитивные функций у крыс, что выражается в улучшении выработки условного рефлекса и сохранности памятного следа в отдаленные после обучения сроки в тесте УРПИ.
Растительные ресурсы. - 2008. - Т.44. Вып.2. - С.132-154.
3. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Методические указания по изучению транквилизирующего (анксиолитического действия фармакологических веществ) // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2005. - С.253-263.
Таблица 2
Влияние экстракта шишек хмеля и экстракта валерианы на процессы обучения и памяти у интактных крыс
№ п/п Группы животных До обучения Через 1 час Через 24 часа Через 7 суток
Латентный период, с
1. Контрольная(Н.О) 8,1±0,4 145,5±17,5 140,0±19,4 91,0±19,6
2. Опытная I (ЭШХ, 100 мг/кг) 7,0±0,5 168,5±18,0 133,3±17,5 105,4±20,4
3. Опытная II (ЭШХ, 200 мг/кг) 7,6±0,4 182,2±16,5* 180,0±18,6* 156,0±20,4*
4. Опытная III (ЭШХ,300 мг/кг) 7,1±0,4 156,6±20,4 162,2±19,1 122,4±14,9
5. Опытная IV (ЭВ) 7,5±0,4 134,0±20,4 132,8±20,4 109,0±20,4
Время пребывания в темной камере, с
1. Контрольная(Н2О) 189,8±1,7 54,5±17,5 60,0±19,4 108,5±19,6
2. Опытная I (ЭШХ, 100 мг/кг) 187,6±3,4 31,5±18,0 66,6±16,5 77,9±20,4
3. Опытная II (ЭШХ, 200 мг/кг) 190,1±1,7 6,66±1,2* 20,0±18,6* 44,0±20,4*
4. Опытная III (ЭШХ,300 мг/кг) 191,4±1,1 38,8±18,5 32,7±15,9 67,2±20,4
5. Опытная IV (ЭВ) 190,5±0,9 70,0±18,5 61,3±20,4 89,3±20,4
11б
4. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учебное пособие / Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой.
- СПб., 2004. - 765 с.
5. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М., 2008.
- 1206 с.
6. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. - Т.1. - СПб.; М., 2008. - 421 с.
7. Сергиенко В.И., Бондаренко И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. - М., 2006. - 256 с.
8. DiazM.N., Frei B., Vita J.A., Keaney J.F.Jr. Antioxidants and atherosclerotic heart disease // N. Engl. J. Med. - 1997. - Vol. 337.
- P.408-416.
9. Miranda C.L., Stevens J.F., Ivanov V., et al. Antioxidant and
prooxidant actions of prenylated and nonprenylated chalcones and flavanones in vitro // J. Agric. Food Chem. - 2000 - Vol. 48. № 9 - P.3876-3884.
10. Schiller H., Forster A., VonhoffC., et al. Sedating effects of Humulus lupulus L. extracts // Phytomed. - 2006. - Vol. 13. №
8. - P.535-541.
11. Stevens J.F., Miranda C.L., Wolters K.R., et al. Identification and in vitro biological activities of hop proanthocyani-dins: Inhibition of nNOS activity and scavening of reactive nitrogen species // J. Agric. Food Chem. - 2002. - Vol. 50. № 12. - P.3435-3443.
12. Zanoli P., Zavatti M., Rivasi M., et al. Evidense that beta-acids fraction of hops reduced centralGABAergic neurotransmission // J. Ethnopharmacol. - 2007. - Vol. 109. № 1. - P.87-92.
Информация об авторах: Тел.: (3012)433713 E-mail: [email protected]; Разуваева Янина Геннадьевна - к.б.н., научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН; Николаев Сергей Матвеевич - д.м.н., профессор, заведующий Отделом биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН; Кабачук Наталья Викторовна - аспирант лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН; Нагаслаева Ольга Васильевна - к.фарм.н., младший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований ИОЭБ СО РАН
СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ
© ПЬЯННИКОВ В.В., АХМЕДОВ В.А., БЕРЕЗНИКОВ А.В., ВАСЬКИНА Т.В. - 2010
ВЛИЯНИЕ АДЕМЕТИОНИНА НА РЕЗУЛЬТАТЫ АНТИФИБРОЗНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТАХ
В.В. Пьянников, В.А. Ахмедов, А.В. Березников, Т.В. Васькина (Омская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.И. Новиков, кафедра факультетской терапии, зав. - д.м.н., проф. В.А. Остапенко)
Резюме. Было обследовано 30 больных с изолированным хроническим вирусным гепатитом С и 30 больных с ХГС+ХГВ. Каждая из групп была разделена на две равные подгруппы. Больные первой подгруппы получали терапию по стандартной схеме с применением интерферона и рибавирина, а больным второй подгруппы еще в дополнение к проводимой терапии перорально назначали препарат адеметионин по 400 мг 2 раза в день (гептрал). В группе больных ХГС+ХГВ на фоне включения в схему адеметионина было получено значимое снижение показателей АлАТ, ЩФ, ГГТП, тимоловой пробы (р<0,05). Также значимо улучшались показатели косого внешнего размера правой доли печени по данным УЗИ (р<0,05) и среднего коэффициента эластичности паренхимы печени по данным кратковременной эластографии. Таким образом, включение адеметионина в схему терапии при сочетании ХГС и ХГВ приводит к значительному замедлению темпов формирования ФП и поэтому представляется целесообразным в качестве комплексной антифиброзной терапии.
Ключевые слова: хронический вирусный гепатит С, фиброзирование печени, адеметионин.
THE INFLUENCE OF ANTIFIBROTIC TREATMENT WITH ADEMETHIONINE ON FIBROTIC PROCESS IN CHRONIC VIRAL HEPATITIS
V.V. Pyuannikov, V.A. Akhmedov, A.V. Bereznikov, T.V. Vaskina (Omsk State Medical Academy)
Summary. 30 patients with isolated viral hepatitis C and 30 ones with combination of viral hepatitis C+B have been investigated. The patients were divided into 2 groups with 15 patients in each group. The first group received ordinary antiviral treatment with combination of interferon and ribavirin. The second group in addition to usual antiviral treatment received ademethionine (Heptral). In the group of patients with combination of viral hepatitis C+B, who received Heptral, the significant decrease of Alt, GGT, timol probe has been observed (p<0,05). In addition the decrease of liver size (p<0,05) and elastic liver coefficient, that reflected fibrotic processes, have been defined. Combination of usual antiviral treatment with ademethionine of viral hepatitis C+B leads to significant decrease of fibrotic processes in hepatic tissue.
Key words: viral hepatitis C, liver fibrosis, ademethionine.
Хронический гепатит (ХГС) отличается длительным субклиническим или малосимптомным течением, что существенно затрудняет его диагностику. Минимальные клинические проявления не исключают обнаружения при морфологическом исследовании ткани печени умеренной и высокой активности патологического процесса. У 20-40% больных ХГС происходит формирование цирроза печени (ЦП), причем в течение длительного времени цирроз остается компенсированным и, как правило, нераспознанным [7]. Темпы формирования ЦП имеют экспоненциальное значение, то есть с увеличением сроков возрастает скорость накопления
внеклеточного матрикса в паренхиме печени детерминирующего прогрессирование фиброза печени (ФП).
В связи с этим актуальной представляется необходимость проведения специфической антифиброзной терапии больным с ХГС. В настоящее время существуют данные об эффективности адеметионина (Гептрал, АЬЬой, ША) при ФП, ассоциированном с алкогольной болезнью печени у человека [4]. Однако при вирусных гепатитах в доступных литературных источниках влияние адеметионина на ФП не изучалось.
Цель исследования. Оценить влияние адеметионина в
