CC BY
21
114 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
свойствами по отношению к уротелию, обладающего про- мы — бортезомибом и роль NF-kB в качестве посредника лонгированным лечебным действием и способствующего цитотоксических эффектов бортезомиба. восстановлению защитных функций стенок мочевого пузыря. Материалы и методы. Исследование проводили Материалы и методы. В эксперименте использовали на линиях меланомы человека Mel Z, Mel Mtp, Mel Ksen лечебные гидрогели, в состав которых помимо основного и Mel Rac, полученных в РОНЦ им. Н. Н. Блохина. полимера АН и ЛП дополнительно введен ГН. Оценива- Цитотоксичность оценивали посредством МТТ-теста. лось влияние полимерного состава на адгезивные свойства Для изучения механизма действия Рефнота был прове-гидрогеля на изолированных мочевых пузырях самцов ка- ден анализ транскриптома клеточных линий до и после пюшонных крыс. На стенки образцов пузырей крыс нано- обработки препаратом путем секвенирования на плат-сили гидрогель, проводили смыв, имитирующий контакт форме HiSeq 2000 в режиме одиночных прочтений дли-с биологической жидкостью, и окрашивание красителем ной 50 нукл. Анализ генных сетей проведен с примене-C.I. reactive Blu 21, способным связываться с белковой со- нием ресурса GeneMANIA и STRING. Активацию ставляющей. Отсутствие окрашивания свидетельствовало транскрипционного фактора NF-kB определяли методом о наличии защитного полимерного слоя. иммуноцитохимии, оценку проводили на клеточном Результаты. Использование гидрогелей на основе 2 био- анализаторе InCell Analyzer 6000. полимеров АН и ГН увеличивает время контакта гидроге- Результаты. Бортезомиб проявлял токсичность в отно-ля и введенных ЛП с поврежденными тканями за счет уве- шении клеточных линий ММ (IC504,3 ± 2,9 мкМ, p < 0,05). личения адгезии полимеров к уротелию и снижения Клеточная линия Mel Ksen, несущая мутацию B-RAFV600E, скорости растворения биологической жидкостью. Образова- оказалась наиболее чувствительной к действию препарата ние защитного слоя на стенке органа способствует пролон- (IC500,04 мкM, р < 0,05). Коинкубация клеточных линий гации лечебного действия (через 2 ч контакта с жидкостью с бортезомибом и Рефнотом не приводила к увеличению концентрация полимеров не менее 35,0 % от нанесенного, цитотоксичности. Транскриптомный анализ показал, при использовании только ГН концентрация 2,0 %). АН что инкубация клеток с Рефнотом вела к активации пути обеспечивает гемостатические и адгезивные свойства, TNFa с одновременной активацией NF-kB, поэтому мы а введение ГН позволяет повысить биологическую актив- исследовали качественное изменение экспрессии. Активация ность гидрогелей и способствует восстановлению защит- NF-kB происходила при концентрации Рефнота 10 ЕД/мл. ных функций стенок мочевого пузыря. Реологические При этом ее уровень зависел от времени воздействия пре-свойства гидрогеля удобны для его введения через катетер парата. У клеточной линии Mel Z (B-RAFV600E) через 6 ч с помощью преднаполненного шприца. Разработанный инкубации с Рефнотом 10 ЕД/мл уровень NF-kB повышал-состав на основе АН и ГН прошел токсикологические ис- ся в 1,6 раза по сравнению с 1-часовой (536 % vs 336 % со-пытания. Успешные клинические испытания доказали ответственно), а у линии Mel Ksen (B-RAFV600E) — в 100 раз эффективность использования гидрогеля «Колегель» с АН (586 % vs 5,2 % соответственно). Интересно, что у линий и ГН при лечении циститов. с диким типом гена B-RAF (Mel Rac и Mel Mtp), наоборот, Заключение. Полученные результаты свидетельствуют максимальная активация NF-kB отмечалась при 1-часовой о целесообразности применения рассматриваемых лечеб- ко-инкубации с бортезомибом и Рефнотом, а к 6 ч проис-ных гидрогелей для профилактики и лечения лучевых по- ходило снижение экспрессии (746 % vs 196 % — для Mel Rac, вреждений в онкоурологии. 585 % vs 246 % — для Mel Mtp). Заключение. Таким образом, комбинированное при-Ю.А. Хоченкова, Ю.С. Мачкова, О.О. Рябая, менение бортезомиба с Рефнотом вызывает активацию Е.В. Степанова, Д.А. Хоченков NF-kB; более выраженное действие было установлено ЦИТОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТА в случае линий ММ с мутацией B-RAFV600E. РЕФНОТ В КОМБИНАЦИИ С БОРТЕЗОМИБОМ Работа поддержана грантом РНФ № 14-35-00107от 17.09.2014. НА КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO Д.А. Церковский, Ю.П. Истомин ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва ВЛИЯНИЕ СОНО-ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ Введение. Препарат Рефнот (фактор некроза опухоли- С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ ФОТОЛОН тимозин а — TNFa) проявил уникальные иммуномодули- НА ИНТЕНСИВНОСТЬ МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ рующие свойства у онкологических больных. Его особенность ЭПИДЕРМОИДНОЙ КАРЦИНОМЫ ЛЕГКОГО заключается в положительном воздействии одновременно ЛЬЮИС У МЫШЕЙ ЛИНИИ C57BLACK на Т- и NK-клетки, являющиеся ведущими популяциями ГУ«РНПЦОМР им. Н.Н. Александрова», противоопухолевого иммунитета. Рефнот также блокирует агрогородок Лесной, Республика Беларусь факторы, ассоциированные с пролиферацией и метаста- Введение. Исследование антиметастатической эффек-зированием меланомных клеток. NF-kB может выступать тивности соно-фотодинамической терапии (СФДТ) явля-стимулятором опухолевого роста, блокирование активно- ется актуальным направлением исследований в экспери-сти данного белка, ассоциированной с использованием ментальной онкологии. Рефнота, может повысить эффективность лечения больных Цель исследования — изучение противоопухолевого меланомой (ММ). и антиметастатического эффектов СФДТ с фотосенсиби-Цель исследования — изучить эффективность комби- лизатором (ФС) фотолон у мышей линии C57Black с эпи-наций Рефнота с ингибитором активности 26S-протеасо- дермоидной карциномой легкого Льюис.
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 115
Материалы и методы. Исследования выполнены на 64 мышах-самках линии C57Black с перевитой подкожно опухолью. ФС фотолон (РУП «Белмедпрепараты», Республика Беларусь) вводили внутрибрюшинно в дозе 5,0 мг/кг. Ультразвуковое (сонодинамическая терапия, СДТ) воздействие осуществлялось с помощью аппарата (Phyaction U, Gymna Uniphy) в непрерывном режиме работы через 3 ч после введения фотолона с параметрами: 1,1 и 3 МГц; 1,5 Вт/см2; 5 мин. Фотооблучение (ФО) опухолей проводили непосредственно после СДТ (UPL PDT, Lemt, длина волны 660 ± 5 нм) с параметрами: 50 Дж/см2; 250 мВт; 3 мин). Животные были распределены на 6 групп: контроль (n = 14); СДТ 1,1 МГц (n = 10); СДТ 3 МГц (n = 10); ФДТ (n = 10); СДТ 1,1 МГц + ФДТ (n = 10); СДТ 3 МГц + ФДТ (n = 10). Критерии оценки противоопухолевой эффективности: объем (V), масса (M) опухоли, коэффициент абсолютного прироста опухоли (К). Критерии оценки антиметастатического эффекта: частота метастазирования, среднее число метастазов, средняя масса легких с метастазами, степень поражения легких; индекс торможения метастазирования (ИТМ). Различия считались достоверными при значении р < 0,05.
Результаты. Наибольшим противоопухолевым и антиметастатическим эффектом обладает комбинированное ультразвуковое (1,1 МГц; 1,5 Вт/см2) и лазерное воздействие (50 Дж/см2). Коэффициент К составил 8,88 ± 2,93 и был достоверно ниже, чем в контроле (78,25 ± 18,57; p = 0,002) и группе СДТ 1,1 МГц (31,31 ± 9,03; p = 0,029). Определено сокращение числа метастазов в легких в 1,9 раза по сравнению с ФО (p < 0,001), в 1,67 раза - с СДТ (p = 0,03) и в 2,6 раза — с контролем (p < 0,0001). ИТМ в группах СДТ 1,1 и 3 МГц; ФДТ; СДТ 1,1 МГц + ФДТ и СДТ 3 МГц + ФДТ составил 35,54; 42,82; 26,88; 61,51 и 41,46 % соответственно. Степень поражения легких метастазами: отсутствие изменений IV и V степени, минимальное количество с III степенью поражения в группах комбинированного лечения.
Заключение. Полученные данные позволяют надеяться, что СФДТ с фотолоном может найти клиническое применение при лечении ряда нозологических форм злокачественных опухолей.
Д.А. Церковский, Е.А. Маслаков, Ю.Н. Грачев, Т.П. Артемьева, Ю.П. Истомин СОНО-ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ ФОТОЛОН РЕЦИДИВНОЙ ФОРМЫ ГЛИОБЛАСТОМЫ GRADE IV (КЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙ) ГУ «РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова», агрогородок Лесной, Республика Беларусь
Введение. Соно-фотодинамическая терапия — новое направление в лечении злокачественных глиом. В доступной литературе нами не найдено публикаций о клиническом применении метода в терапии злокачественных новообразований головного мозга.
Цель исследования — оценка переносимости, безопасности и непосредственных результатов клинической апробации метода интраоперационной соно-фотодинамиче-ской терапии (иСФДТ) с фотосенсибилизатором фотолон у пациента с рецидивной формой глиобластомы Grade IV.
Описание случая. Пациент Х., 1957 г. р. В июне 2012 г. установлен диагноз: глиобластома Grade IV правой теменно-затылочной области головного мозга (морфологическое заключение: № 26801/12 от 23.07.2012). Проведенное лечение включало оперативное вмешательство (июнь 2012 г.), дистанционную лучевую терапию (суммарная очаговая доза 60Гр) и 4 курса монохимиотерапии темозоломидом. В июне 2014 г. по данным МРТ установлено прогрессирование опухолевого процесса. Пациент госпитализирован в онкологическое нейрохирургическое отделение с палатами вертебрологии. 10.07.2014 выполнена операция (субтотальная резекция рецидивной опухоли); по окончании оперативного этапа внутривенно капельно в течение 30мин введен раствор фотолона в дозе 2 мг/кг, по окончании инфузии операционная полость заполнена физиологическим раствором и осуществлено ультразвуковое воздействие (Phyaction USTH 91, GymnaUniphy N.V.) в непрерывном режиме с параметрами: 1,04 МГц; 0,7Вт/см2; 10 мин. На втором этапе проведено фотооблучение (UPL PDT, Lemt, длинна волны 660 ± 5нм) ложа удаленной опухоли с параметрами: 50 Дж/см2, 300мВт, 27мин. После выписки пациент получал монохимиотерапию Темобелом 310 мг/сут 1—7 день.
Результаты. По данным мультиспиральной компьютерной томографии через 24 ч после операции патологии не выявлено. В течение всего срока пребывания пациента в стационаре серьезных нежелательных явлений (головная боль, отек головного мозга, внутричерепное кровоизлияние, судорожный синдром, инфекционные осложнения, кожная фототоксичность) отмечено не было (CTCAE, Version 4.0). При магнитно-резонансных исследованиях через 3 и 6 мес отмечена стабилизация опухолевого процесса. Период наблюдения с момента верификации диагноза до летального исхода составил 35 мес, с момента оперативного вмешательства и иСФДТ — 11 мес.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о безопасности, хорошей переносимости и эффективности метода иСФДТ с фотолоном.
В.А. Чалей, О.И. Коняева, Н.Ю. Кульбачевская,
Н.П. Ермакова, А.А. Сергеев, К.А. Сережин, В.М. Бухман
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ
ИЗУЧЕНИЕ ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ
ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ОРМУСТИНА
ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Введение. Новый препарат класса нитрозомочевин — Ормустин, синтезирован в ИОС им. И.Я. Постовского УрО РАН. В РОНЦ им. Н.Н. Блохина Минздрава России разработана лекарственная форма Ормустин, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций, 125 мг (ЛЛФО) и доказана ее эффективность.
Цель исследования — изучение субхронической токсичности ЛЛФО на крысах, изучение местно-раздражающего действия ЛЛФО на кроликах.
Материалы и методы. Исследование проведено на 40 здоровых неинбредных беспородных крысах-самцах, полученных из разведения РОНЦ им. Н.Н. Блохина. ЛЛФО вводили в рекомендованной концентрации 15,7 мг/мл (растворитель — 5 % раствор глюкозы) внутривенно ежедневно трехкратно в 3 дозах, рассчитанных, исходя из опыта по острой
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
