CC BY
16
оттисков и моделей, оказались больших размеров по сравнению с оригиналом. Цифровые изображения, полученные в ходе сканирования оттисков, оказались меньше цифровых оттисков, полученных после сканирования гипсовых моделей, изготовленных по данным оттискам, что объясняется прежде всего усадкой оттискных материалов и расширением гипса в конце фазы затвердевания.
Таким образом, можно сделать следующие выводы:
1. В лабораторном оптическом сканере не рекомендуется осуществлять сканирование оттисков, особенно, полученных из С-силиконового оттискного материала, что обусловлено наличием блеска оттискного материала и сложного рельефа поверхности оттиска, которые создают препятствия для прохождения пучка электромагнитных волн при сканировании оптическим лабораторным сканером.
2. Цифровые оттиски, полученные с помощью внутриротового сканера Него (Cadent, США), обладают приемлемой размерной точностью.
ЛИТЕРАТУРА
1. Вагнер В. Д. Точный оттиск - точная модель - точный протез / В. Д. Вагнер, О. В. Чекунков // Вопросы стоматологиче-
ского образования: юбилейный сборник научных трудов. - Москва - Краснодар, - 2003. - С. 128-131.
2. Ван Нурт Р. Основы стоматологического материаловедения / Ван Нурт Р. - М.: КМК-Инвест, - 2004. - 304 с.
3. Жулев Е. Н. Ортопедическая стоматология: Учебник. / Е. Н. Жулев. - М.: Медицинское информационное агентство, -2012 - 824 с.
4. Ибрагимов Т. И. Оттискные материалы в стоматологии / Т. И. Ибрагимов, Н.А Цаликова. - М.: Практическая медицина -2007. - 128 с.
5. Маркскорс Р. Несъемные стоматологические реставрации / Р. Маркскорс - М. Информационное агентство Newdent, -2007. - 368 с.
6. Ортопедическая стоматология: национальное руководство / под ред. И. Ю. Лебеденко, С. Д. Арутюнова, А. Н. Ряхов-ского. - М.:ГЭОТАР-Медиа, - 2016. - 824 с.
7. Ортопедическое лечение с применением металлокера-мических зубных протезов: учебное пособие / под ред. В.Н. Трезубова. - М.: ООО «Медицинское информационное аген-ство»; - 2007. - 200 с.
8. Розенштиль С. Ф. Ортопедическое лечение несъемными протезами / С. Ф. Розенштиль - М.: Медпресс, - 2010. - 940 с.
9. Ряховский А. Н. Точный оттиск / А. Н. Ряховский, М. А. Мурадов. - М., - 2006. - 227 с.
10. Цимбалистов А. В. Оттискные материалы и технология их применения / А. В. Цимбалистов, С. И. Козицына, Е. Д. Жидких. - Санкт-Петербург, - 2005. - 90 с.
11. Фрадеани М. Ортопедическое лечение. Систематизированный поход к достижению эстетической, биологической и функциональной интеграции реставраций. Том 2 / М. Фрадеани, Д. Бардуччи - М.: ИД «Азбука», - 2010. - 600 с.
Поступила 24.10.2016
А. В. ЗЕЛЕНСКАЯ 1, С. К. БОГУС 1, К Ф. СУЗДАЛЕВ 2, П. А. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ 1
ВЛИЯНИЕ СОЕДИНЕНИЯ SS-68 НА СОКРАТИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ
ИЗОЛИРОВАННЫХ СОСУДОВ
1 Кафедра фармакологии ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России, Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. Тел. 8(861)261-34-99. E-mail: [email protected];
2 кафедра химии природных и высокомолекулярных соединений химического факультета Южного федерального университета,Россия, 344090, г. Ростов-на-Дону, ул. Зорге, 7. Тел. 8-918-856-71-00. E-mail:[email protected]
В экспериментах на изолированных кольцевых сегментах грудного отдела аорты крысы показано, что производное индола SS-68 в концентрациях 10-5 и 10-4 М обладает способностью расслаблять гладкомышечные клетки (ГМК) посредством влияния на калиевую проводимость последних, способствуя их гиперполяризации. Это приводит к блокаде кальциевых потенциалуправляемых каналов, снижению входа кальция и расслаблению ГМК. Отсутствие влияния на этот процесс блокатора NO-синтазы 1\1и>-нитро-1_-аргинина свидетельствует об отсутствии влияния SS-68 на процессы, связанные с эндотелийзависимым расслаблением ГМК.
Ключевые слова: соединение SS-68, изолированная аорта, калиевые токи.
A. V. ZELENSKAYA 1, S. K. BOGUS 1, K. F. SUZDALEV2, P. A. GALENKO-YAROSHEVSKY1
SS-68 IMPACT ON THE CONTRACTIVE ACTIVITY OF ISOLATED VESSELS
1 Chair of Pharmacology of the Kuban State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation, Russia, 350063, Krasnodar, Sedin str., 4. Tel. (8612) 262-34-99, E-mail: [email protected];
2 Chair of Chemistry of Natural and Macromolecular Compounds of the faculty of Chemistry of the South Federal University, Russia, 344099, Rostov-on-Don, Zorge str., 7. Phone 8-918-856-71-00.
E-mail:[email protected]
In the experiments on isolated circular segments of the thoracic aorta of a rat it has been proved that indole SS-66 derivative in 10-5 and 10-4 M concentrations can relax smooth muscle cells (SMS) due to its impact on the SMS potassium conduction thus facilitating their hyperpolarization. It results in the block of voltage-sensitive calcium channels, the decrease in calcium input and the SMS relaxing. Lack of the NO-synthase Nw-nitro-L-arginine blocker impact on this process indicates of the lack of the SS-68 impact on the processes connected with the endothelium-dependant SMS relaxation.
Key words: SS-68 compound, isolated aorta, potassium flows.
В предварительных исследованиях установлено, что производное индола 88-68, обладающее выраженными антиаритмическими [5-10] и анти-ангинальными [3] свойствами, способно в экспериментах на крысах, кошках и собаках дозозави-симо снижать артериальное давление [1, 2]. Кроме того, 88-68 в опытах на целостном организме и изолированных кардиомиоцитах крыс, а также изолированных бронхах морских свинок оказывает а1- и р1-адреноблокирующее и р2-адреномимети-ческое действие [4, 11].
Целью настоящей работы явилось изучение влияния 88-68 на сократительную активность изолированных сосудов.
Материалы и методы исследования
Соединение 88-68 синтезировано и наработано на кафедре химии природных и высокомолекулярных соединений химического факультета Южного федерального университета по методике, разработанной и модифицированной в рамках выполнения государственного задания Министерства образования и науки Российской Федерации № 4.129.2014/К.
Эксперименты выполнены на изолированных кольцевых сегментах грудного отдела аорты крыс-самцов линии Вистар массой 255-285 г. Животных содержали в виварии при свободном доступе к пище и воде и естественной смене светового режима. При работе с крысами соблюдались требования, сформулированные в Директивах Совета Европейского сообщества 86/609/ЕЕС об использовании животных для экспериментальных исследований. После предварительной анестезии (кетамин 45 мг/кг, ксилазин 10 мг/кг) крысы были подвергнуты эвтаназии путём декапитации с последующим обескровливанием. После этого грудная аорта была выделена и перенесена в буферный раствор Кребса следующего состава в мМ:
133 NaCl; 16,3 NaHCO3; 4,7 KCl; 1,05 MgCl2 • 6Н2О; 1,38 NaH2PO4; 2,75 CaCl2; 7,82 глюкоза, 10 N-(2-hydroxyethyl)piperazine-N'-(2-ethanesulfonic acid) -HEPES; рН 7,4, при комнатной температуре.
Аорту фиксировали на дне препаровальной чашки, заполненной раствором Кребса, и очищали от соединительной ткани и сгустков крови. Отпрепарированный участок сосуда нарезали на кольца шириной 1-2 мм под углом около 45о, поскольку стенка сосудов данного типа состоит преимущественно из кольцевых мышечных слоёв с угловой ориентацией.
Регистрацию сократительной активности изолированных сосудистых препаратов производили в изометрическом режиме при помощи емкостных датчиков напряжения (Danish Myo Technology, Aarhus, Дания), сигнал от которых через аналого-во-цифровой преобразователь записывался и обрабатывался при помощи компьютерной программы DataTrax 2 (World Precession Instrument Inc., США).
Сосудистые сегменты размещали в рабочей плексигласовой камере объёмом 1 мл с проточным термостатируемым буферным раствором, где были закреплены на стальных крючках, один из которых стационарно вмонтирован в стенку камеры, а другой соединен с датчиком изометрического напряжения (AE 801, SensoNor A/S, Norten, Nioeway). Для получения оптимальной силы сокращения сосудистые сегменты были пассивно растянуты с силой 1200-1400 мг, оставлены на 4060 мин и затем периодически многократно стимулированы буферным раствором, содержащим 60 мМ KCl (гиперкалиевый раствор) до достижения стабильных сократительных ответов. Сосудистые сегменты в камере перфузировались буферным раствором с постоянной скоростью 1,5 мл/мин при помощи 4-х канального перистальтического насоса IPS ISM 930 «Ismatec» (Германия) при температуре 37оС.
В экспериментах, где это предполагалось протоколом, эндотелиальный слой разрушали при помощи 5-минутного инкубирования сосудистых препаратов в растворе Кребса, содержащим сапонин в концентрации 0,1 мг/мл. Успешное разрушение эндотелия определяли в начальной фазе эксперимента по отсутствию дилататорных реакций препаратов в ответ на аппликацию ацетилхолина в концентрации 10-6 М. Аппликацию всех использованных фармакологических агентов осуществляли при помощи перфузионной системы.
Величины средних эффективных концентраций веществ представлены как отрицательный логарифм концентрации вещества, требуемой для развития полумаксимального ответа (pD2). Расчёт этого параметра производился при помощи программы Origin 6.1 (OriginLab Corporation, США), в основе которого лежит следующая формула:
T=
100
1 + 10 Log (х0~х) Р
где T - нормализованный уровень тонуса (выраженный как проценты от начального уровня сокращения препаратов) при концентрации исследуемого вещества x (выраженного как негативный логарифм), x0 - средняя точка кривой доза-эффект (т. е. T = 50%) и p - фактор наклона кривой. Итоговые значения pD2 были получены усреднением значений pD2, рассчитанных отдельно для каждого сосудистого препарата.
Ферментативная изоляция одиночных гладкомы-шечных клеток (ГМК) аорты проводилась следующим образом: изолированные ГМК выделялись с помощью коллагеназы. После предварительной интрапе-ритонеальной анестезии (кетамин 45 мг/кг, ксилазин 10 мг/кг) животным была проведена эвтаназия путем декапитации с последующим обескровливанием.
Сегменты грудной аорты длиной 1,0-1,5 см вырезали и очищали от соединительной ткани. Затем аорта разрезалась на маленькие кусочки (2 x 2 мм), которые помещались в холодный бескальциевый раствор, содержащий (в мМ): 140 NaCl; 5,9 KCl; 2,5 MgCl2; 11,5 глюкозы; 10 HEPES (pH = 7,4), на 10-15 мин. После этого ткани переносились в аналогичный раствор с добавлением 2 мг/мл коллагеназы (тип IA), 0,5 мг/мл проназы Е и 2 мг/мл бычьего сывороточного альбумина и инкубировались на протяжении 33 мин при 37°C. Затем они были перенесены в бескальциевый раствор, где отмывались от ферментов. Клетки выделялись путем многократного пипетиро-вания и помещались в нормальный раствор Кребса. Миоциты хранились в холодильнике при + 5° C и
оставались в удовлетворительном функциональном состоянии в течение по меньшей мере 4 часов.
Для регистрации калиевых токов был использован метод фиксации потенциала (patch clamp) в модификации «целая клетка» («whole-cell perforated patch») с использованием амфотери-цина В. Ионные токи регистрировались с применением усилителя Axopatch 200B и конвертора Digidata 1200B (Axon Instruments Inc., Foster City, CA, USA), сопряженных с компьютером (программное обеспечение pClamp software, version 8, Axon Instruments Inc., USA). Мембранные токи отфильтровывались с частотой среза 2 кГц и оцифровывались с частотой 10 кГц. Референтный Ag/AgCl электрод был размещен непосредственно в камере для клеток объемом 200 мкл.
В начале каждого эксперимента электродный потенциал нивелировался до нуля. Компенсация токов утечки при регистрации трансмембранных токов не проводилась, клетки с большим током утечки исключались из опыта. Амплитуды токов выражались как пА/пФ. Мембранная емкость клеток оценивалась путем интегрирования емкостных токов, возникающих при гиперполярзирующем смещении потенциала на 10 мВ, после электронного устранения токов через емкость пипетки с помощью Clampfit software (version 8, Axon Instruments Inc., США). Все эксперименты проводились при температуре 20°C.
Микропипетки были изготовлены из боросили-катного стекла (Clark Electromedical Instruments, Pangbourne Reading, Великобритания). Они заполнялись пипеточным раствором следующего состава (в мМ): 140 KCl; 10 NaCl; 1,2 MgCl2; 2,5 CaCl2; 10 HEPES, 11,3 D-глюкозы (pH = 7,3); амфотерицин В (250 мкг/мл). Пипетки имели сопротивление 2,55,0 MОм. Внеклеточный раствор содержал (в мМ): 140 NaCl; 5,9 KCl, 1,2 MgCl2; 2,5 CaCl2; 10 HEPES, 11,3 D-глюкозы (pH = 7,4).
В исследованиях были использованы аце-тилхолин, норадреналин, сапонин, нифедипин, Nы-нитро-L-аргинин (L-NNA), амфотерицин В, коллагеназа (тип IA), проназа Е, бычий сывороточный альбумин, HEPES (все Sigma Chemicals Co. St. Lois, MO, США).
Полученные результаты обрабатывались при помощи программ Origin 6.1 (OriginLab Corporation, США) и EXEL 5.0 (Microsoft, США). Различия считали статистически достоверными при р < 0,05.
Результаты и их обсуждение
Влияние SS-68 на сократительные электрофизиологические характеристики ГМК. SS-68
в концентрации 10"9-10-4 М вызывал дозозависи-мую дилатацию изолированных колец грудного отдела аорты крысы, предварительно сокращённых норадреналином (10-6 М). Амплитуда максимального расслабления составляла 64,15±8,70 % от величины плато норадреналиного сокращения (п = 8) при рР2 = 4,44±0,13 (п = 8) (рис. 1).
нифедипина, в концентрации 10-5 М полностью подавляла сокращение вызванное повышением внеклеточной концентрации Са2+ (рис. 2).
Рис. 1. Дилататорные реакции изолированных сегментов аорты крысы, предварительно сокращенных норадреналином (НА, 10-6 М), под действием ацетилхолина (АХ) и 88-68 в интактных сосудах, интактных сосудах в присутствии L-NNA (10-5 М) и в деэндотелизированных сосудах (эндотелий-)
* р < 0,05.
Дилататорные реакции аорты на 88-68 в присутствии селективного блокатора эндотелиальной NO-синтазы L-NNA (10-5 М) или в опытах на деэндотелизированных сосудах не отличались от контрольных значений (рис. 1). В присутствии L-NNA максимум расслабления аорты при аппликации 88-68 составлял 76,57±9,17 % (п = 4, р > 0,05), рй2 = 4,57±0,07 (п = 4, р > 0,05). В деэндотелизиро-ванных сосудистых сегментах максимум расслабления аорты при аппликации 88-68 составлял 66,02±4,88 % (п = 8, р > 0,05) при рй2 = 4,65±0,12 (п = 8, р > 0,05).
Взятый в качестве препарата сравнения аце-тилхолин в концентрации 10"9-10-5 М вызывал дозо- и эндотелийзависимую дилатацию препаратов аорты, значительно более выраженную по сравнению с эффектом 88-68 (рис. 1). Максимум расслабления в ответ на введение ацетилхолина в концентрации 10-5 М составлял 85,71±1,94 % (п = 8, р < 0,05) при рй2 = 7,17±0,15 (п = 8, р < 0,05) (рис. 1). В сегментах аорты крысы, инкубированных в номинально бескальциевом гиперкалиевом буферном растворе 88-68 в концентрации близкой к средней эффективной (10-4 М) вызывало угнетение сокращения препаратов аорты под действием СаС12 (2 • 10-3 М) на 72,84±6,64 % (п = 4, р < 0,05) (рис. 2). Последующая аппликация блокатора потенциалзависимого входа ионов Са2+,
Рис. 2. Влияние 88-68 (10-4 М, п = 4) и нифедипина (10-5 М, п = 4) на тонус изолированных сегментов аорты крысы, инкубированных в номинально бескальциевом гиперкалиевом буферном растворе и сокращенных СаС12 (2 • 10-3 М).
* р < 0,05.
Влияние 88-68 на выходящий калиевый ток в ГМК. Суммарные выходящие калиевые токи были записаны при деполяризирующем смещении мембранного потенциала длительностью 300 мс в диапазоне от -100 мВ до +70 мВ от потенциала покоя -60 мВ (протокол представлен сверху справа на рисунке 3).
Рис. 3. Образцы оригинальных записей (А) и вольт-амперные характеристики (Б) суммарного выходящего калиевого тока, зарегистрированного в ГМК аорты крыс после аппликации возрастающих концентраций 88-68 (10-6 - 10-4 М).
При аппликации 88-68 в концентрации 10-6 М значимых изменений плотности суммарного выходящего тока в ГМК крыс не было обнаружено, значения оставались на уровне интактных ГМК контрольных крыс (18,9±1,13 пА/пФ (п = 6) и 18,13±0,44 пА/пФ (п = 5), р > 0,05, соответственно). Статистически значимый прирост тока наблюдался после аппликации 88-68 в концентрации 10-5 М. В этом случае величина выходящего тока составляла 22,5±1,79 пА/пФ (п = 6, р < 0,05) (рис. 3). При увеличении концентрации в наружном буферном растворе 88-68 до 10-4 М амплитуда выходящего калиевого тока в ГМК крыс увеличилась до 24,72±1,18 пА/пФ (п = 6, р < 0,05).
Таким образом, 88-68 в экспериментах на кольцевых сегментах грудного отдела аорты крысы обладает способностью расслаблять ГМК посредством влияния на калиевую проводимость последних,способствуя их гиперполяризации, что приводит к блокаде кальциевых потенциалуправ-лемых каналов, снижению входа кальция и расслаблению ГМК. Отсутствие влияния на этот процесс блокатора NO-синтазы свидетельствует об отсутствии действия 88-68 на процессы, связанные с эндотелийзависимым расслаблением ГМК.
ЛИТЕРАТУРА
1. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А. Влияние производного индола 88-68 на коронарное кровообращение и сократительную активность сердца и общую гемодинамику в условиях интактного миокарда // Новые технологии, - 2012. -№ 4. - С. 252-255.
2. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А. Влияние производного индола 88-68 на объемную скорость коронарного кровотока, сердечную деятельность и гемодинамику в условиях
ишемизированного миокарда // Новые технологии, - 2012. -№ 4. - С. 260-265.
3. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А. Исследование ан-тиангинальных свойств производного индола 88-68 // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 265-269.
4. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Духанин А. С., Шимановский Н. Л. Влияние производного индола 88-68, обладающего антиаритмическим и антиангинальными свойствами, на а1-, Р1- и Р2-адренорецепторы // Новые технологии, - 2012. -№ 4. - С. 232-236.
5. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суздалев К. Ф. Антиаритмическая активность производного индола 88-68 при желудочковых и предсердных формах нарушений ритма сердца // Новые технологии. - 2012. - № 4. - С. 274-283.
6. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суздалев К. Ф. Антиаритмические свойства производного индола 88-68 в условиях хлоридбариевой и хлоридцезиевой моделей аритмий // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 269-271.
7. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суздалев К. Ф. Антиаритмические свойства производного индола 88-68 в условиях адреналиновой и строфантиновой моделей аритмий // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 271-274.
8. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суздалев К. Ф. Антиаритмическая активность производного индола 88-68 в условиях нарушений ритма сердца центрального происхождения // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 280-283.
9. Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суздалев К. Ф. Острая токсичность и антиаритмические свойства производного индола 88-68 в условиях аконитиновой и хлоридкальциевой моделей аритмий // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 236-239.
10. Сухов А. Г., Матухно А. Е., Синицына В. Ю., и др. Влияние производного индола 88-68 на биоэлектрическую активность соматосенсорной коры и нарушения ритма сердца, вызванные микроаппликацией карбахола на корковые структуры головного мозга // Новые технологии, - 2012. - № 4. - С. 313-318.
11. Уваров А. В., Богус С. К., Галенко-Ярошевский П. А., Суз-далев К. Ф. Влияние производного индола 88-68 на гладкомы-шечные клетки изолированной трахеи морских свинок // Кубанский научный медицинский вестник. - 2015, № 3 (152). С. 150-153.
Поступила 15.07.2016
Р. А. ЗОРИН, М. М. ЛАПКИН, В. А. ЖАДНОВ, Н. А. КУЛИКОВА
ОСОБЕННОСТИ ПСИХОЛОГИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК У ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И БОЛЬНЫХ ЭПИЛЕПСИЕЙ С РАЗЛИЧНОЙ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТЬЮ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России Кафедра неврологии, нейрохирургии и медицинской генетики, кафедра нормальной физиологии с курсом психофизиологии, 390000, Россия, Рязань, ул. Высоковольтная, д. 9. Тел. 89105055276.
E-mail: [email protected]
В статье представлены результаты изучения мотивов поведения, тревоги, депрессии, агрессивности и нейро-динамических личностных показателей 72-х практически здоровых лиц и 148-и больных эпилепсией с различной результативностью деятельности при моделировании целенаправленной деятельности при помощи теста Шуль-те-Горбова. Оценены различия данных показателей в группах больных эпилепсией с высокой и низкой результативностью деятельности; проанализированы характеристики качества жизни у больных эпилепсией. Обнаруженная высокая тревожность и уровень агрессии с низким уровнем социальной адаптации у больных эпилепсией может определять направленность мобилизованных психофизиологических ресурсов на реализацию альтернативных социальным регрессивных биологических моделей поведения, что ассоциировано с большей частотой приступов.
