CC BY
30
10.21518/2079-701X-2017-6-146-151
И.А. КОРОЛЕВА1, д.м.н., Е.Г. СЛАВИНА2, д.м.н., А.И. ЧЕРТКОВА2, к.м.н.,
В.А. НУРТДИНОВА2, Э.К. ШОУА2, М.Е. АБРАМОВ2, к.м.н., З.Г. КАДАГИДЗЕ2, д.м.н., профессор
1 Медицинский университет «Реавиз», Самара
2 Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина Минздрава России, Москва
ВЛИЯНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ-ТИМОЗИН-al НА АНГИОГЕНЕЗ
У БОЛЬНЫХ ДИССЕМИНИРОВАННОЙ МЕЛАНОМОЙ КОЖИ
В статье освещены результаты опыта клинического применения нового отечественного препарата на основе рекомбинант-ного фактора некроза опухоли-тимозин-а1 (Рефнот) у больных метастатической меланомой кожи. Рефнот вводился в дозе 100 000 МЕ подкожно 1-5 дней еженедельно, цикл 3 или 4 недели. На фоне терапии Рефнотом у 20 больных определялся уровень сосудистого эндотелиального ростового фактора (VEGF) и фактора роста фибробластов-2 (FGF-2) в сыворотке крови до начала терапии, через каждые 3 или 4 недели лечения до прогрессирования болезни. У пациентов со стабилизацией заболевания было выявлено снижение уровня VEGF и FGF. При прогрессировании уровень VEGF и FGF возрастал. Ключевые слова: меланома, Рефнот, иммунотерапия, ангиогенез, VEGF, FGF.
I.A. KOROLEVA 1, MD, E.G. SLAVINA 2, MD, A.I. CHERTKOVA 2, PhD in medicine, V.A. NURTDINOVA 2, E.K. SHOUA 2, M.E. ABRAMOV 2, PhD in medicine, Z.G. KADAGIDZE 2, MD, Prof. 1 Medical University Reaviz, Samara
2Blokhin Russian Oncologic Scientific Center of the Ministry of Health of Russia
INFLUENCE OF THE RECOMBINANT TUMOR NECROSIS FACTOR THYMOSIN-a1 ON ANGIOGENESIS IN DISSEMINATED SKIN MELANOMA PATIENTS
The article covers the results of clinical application of a domestic drug based on recombinant tumor necrosis factor-alpha-thymosin-alpha1 (Refnot) in 20 patients with metastatic skin melanoma. Refnot was administered at a dose of 100 000 IU subcutaneously 1-5 days every week, the cycle 3 or 4 weeks. During the therapy the levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) and fibroblast growth factor-2 (FGF-2) were determined in patients serum before therapy, every 3 or 4 weeks of treatment until disease progression. In patients with stabilization of the disease showed a decreasing level of VEGF and FGF. In the case of the detection of the progression level of VEGF and FGF have. Keywords: melanoma, Refnot, immunotherapy, angiogenesis, VEGF, FGF.
Меланома кожи является одной из агрессивных форм злокачественных опухолей, обладающей высокой потенцией местного роста, регионарного метастазирования, способностью к диссемина-ции по коже, множественному метастазированию. В России ежегодно меланомой кожи заболевают свыше 10 200 человек и более 3 600 человек умирают от нее. В 2015 г. в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями доля меланомы кожи у мужчин составила 1,5%, у женщин - 2,0%. По сравнению с 2011 г. эти цифры возросли на 25,0% у мужчин и 5,3% у женщин. Темп прироста стандартизованных показателей заболеваемости меланомой кожи в России с 2011 по 2015 г. составляет 10,0%, уступая раку предстательной, щитовидной, поджелудочной желез, печени и злокачественным опухолям полости рта и глотки [1]. Несмотря на появление новых методов лечения меланомы, отдаленные результаты неудовлетворительные. Основным методом лечения первичной опухоли остается хирургический. Однако у 10-15% больных меланомой кожи 1-11 стадии в течение 5 лет после радикальной операции наступает генерализация процесса [2]. Радикальность вмешатель-
ства при меланомах у больных с опухолями II-III стадии весьма условна из-за наличия субклинических метастазов. Результаты терапии диссеминированной меланомы кожи остаются неудовлетворительными. При использовании химиотерапии выживаемость больных с метастазами меланомы варьирует от 6 до 12 месяцев, а 5-летняя выживаемость составляет только 5% [3]. По данным мета-анализа 42 исследований II фазы, в которые было включено 2 100 больных диссеминированной меланомой, при проведении химиотерапии медиана выживаемости без прогрессирования составила 1,7 месяца, а медиана общей выживаемости - 6,2 месяца [4].
Во время своего развития меланома кожи проходит несколько этапов: меланома in situ, стадия радиального роста меланомы (толщина опухоли по Бреслоу ^0,75 мм), стадия вертикального роста меланомы (толщина опухоли по Бреслоу >0,75 мм) и метастатическая меланома [5]. Во время стадии радиального роста опухоль остается локализованной и хирургическое лечение может привести к излечению пациента. С появлением клеток, способных проникать в более глубокие слои кожи, опухоль переходит в стадию вертикального роста, характеризующуюся
высокой способностью к метастазированию. Для вертикальной фазы роста меланомы выявлена прямая зависимость между толщиной опухоли и числом метастазов [6].
Параллельно с прогрессированием меланома приобретает богатую сосудистую сеть, одновременно увеличивается число опухолевых клеток, экспрессирующих рецепторы ламинина, что обеспечивает их адгезию к сосудистой стенке, способствуя метастазированию [7]. Неоангиогенез меланомы коррелирует с плохим прогнозом заболевания, частотой изъязвления и частотой рецидивов [8].
ОПУХОЛЕВЫЙ АНГИОГЕНЕЗ МЕЛАНОМЫ И ОСНОВНЫЕ АНГИОГЕННЫЕ ФАКТОРЫ
Ангиогенез - многоступенчатый процесс образования новых кровеносных сосудов, который имеет место как в норме, так и при патологии, в том числе при опухолях. Существование любой злокачественной опухоли невозможно без доставки к ней кислорода и питательных веществ, поэтому опухолевый ангиогенез является одним из ключевых механизмов в ее развитии, инвазии и формировании метастазов. Этот процесс стимулируют гипоксия и ангиогенные факторы, такие как сосудистый эндо-телиальный фактор роста (vascular endothelial growth factor, VEGF), фактор роста фибробластов (fibroblast growth factor, FGF). Регуляция ангиогенеза является динамическим процессом, который можно представить как сумму позитивных и негативных сигналов, включающих множество факторов микроокружения тканей. Некоторые из них, например VEGF, высокоспецифичны для эндоте-лиальных клеток, в то время как другие, например основной фактор роста фибробластов (FGF) и металлопротеи-назы матрикса, имеют широкий диапазон действия [9].
Среди всех ангиогенных факторов семейство VEGF считается основным в новообразовании сосудов [10]. VEGF экспрессируется гладкомышечными клетками сосудов, макрофагами и опухолевыми клетками. Важным регулятором экспрессии VEGF является содержание кислорода в ткани. Повышенная экспрессия VEGF найдена в первичных опухолевых узлах легкого, щитовидной железы, почки, молочной железы, яичника, шейки матки, мочевого пузыря, желудочно-кишечного тракта, а также метастатических узлах. Белки, относящиеся к семейству VEGF, представляют собой гликопротеины, стимулирующие формирование новых кровеносных и лимфатических сосудов и увеличивающие проницаемость сосудов. Взаимодействие между VEGF и рецептором активирует остаток тирозина, находящегося в интрацитоплазматиче-ской части рецептора, и запускает различные сигнальные каскады в эндотелиальных клетках, такие как пролиферация, миграция и увеличение сосудистой проницаемости. Семейство включает в себя 6 факторов роста: VEGF-A (является наиболее изученным); VEGF-B; VEGF-C; VEGF-D; VEGF-E и плацентарный фактор роста (PLGF) [11]. Выявлена достоверная корреляция между уровнем VEGF в ткани опухоли и степенью васкуляризации опухоли [12].
Семейство человеческого фактора роста фибробластов (FGF) включает 22 белковые молекулы. FGF - много-
функциональные белки, играющие важнейшую роль как в эмбриогенезе, так и в жизнедеятельности взрослого организма. Они участвуют в процессах дифференцировки и пролиферации клеток различных типов, а также в регуляции клеточной миграции и выживания, регенерации тканей, в процессах ангиогенеза и нейрогенеза. Множество данных также свидетельствует о том, что нарушение сигнального пути FGF может приводить к канцерогенезу [13]. Наиболее изученными представителями описанного семейства факторов роста являются FGF-1 и FGF-2. FGF-1 играет роль в процессах ангиогенеза и ади-погенеза. FGF-2 вовлечен в регуляцию основных процессов существования клетки: пролиферацию, дифференци-ровку, выживание, клеточную адгезию, миграцию, подвижность и апоптоз. In vivo FGF-2 регулирует процессы формирования конечностей, заживления ран, ангиогене-за и процессы ремоделирования кровеносных сосудов, а также участвует в процессах канцерогенеза. FGF-2 проявляет митогенную и хемоаттрактивную активность в отношении эндотелиоцитов и клеток гладкой мускулатуры сосудов, а также активирует пролиферацию перицитов. Следует отметить, что FGF-2 также стимулирует образование активатора плазминогена и экспрессию метал-лопротеиназ, играя важную роль в процессах сосудистой стабилизации и моделирования экстрацеллюлярного матрикса [14]. Одна из важных функций FGF-2 - это стимуляция роста эндотелиальных клеток. По данным литературы, было показано, что FGF-2 индуцирует ангиогенез in vivo и регулирует образование новых сосудов и рост опухоли, ускоряется ангиогенез и рост новых кровеносных сосудов из уже существующей сосудистой сети. В ряде исследований высокий уровень экспрессии FGF2 в опухолевых клетках был ассоциирован с низкими показателями общей выживаемости [14, 15].
При использовании химиотерапии выживаемость больных с метастазами меланомы варьирует от 6 до 12 месяцев, а 5-летняя выживаемость составляет только 5%. По данным метаанализа 42 исследований II фазы, в которые было включено 2 100 больных диссеминированной меланомой, при проведении химиотерапии медиана выживаемости без прогрессирования составила 1,7 месяца, а медиана общей выживаемости - 6,2 месяца
При меланоме кожи повышенная секреция VEGF коррелирует с переходом от стадии радиального роста к стадии вертикального роста и характерна также для метастатической фазы [16]. D. Ribatti продемонстрировал, что повышение уровня VEGF-A опухоли корелирует с высоким индексом Бреслоу (>3,6 мм) [8]. Выявлена положительная связь между числом инфильтрирующих опухоль воспалительных клеток, экспрессирующих VEGF-A, и экспрессией VEGF-А в клетках метастатической меланомы [16]. Уровень меланотрансферрина, который гиперэк-спрессируется в клетках меланомы и обладает ангиоген-ным действием, коррелирует с уровнем VEGF [17].
FGF-2 гиперэкспрессируется клетками меланомы. Повышение уровня FGF-2 может быть вызвано повышенным высвобождением опухолевыми клетками металло-протеиназ матрикса. Выявлена статистически значимая корреляционная связь между частотой прогрессии меланомы и процентом FGF-2-экспрессирующих опухолевых клеток [18].
РЕФНОТ - ЦИТОКИНОВЫЙ ПРЕПАРАТ С АНТИАНГИОГЕННЫМ ДЕЙСТВИЕМ
Одним из современных направлений развития онкологии является изучение роли цитокиновых препаратов в лечении злокачественных новообразований [19]. Противоопухолевая химиотерапия оказывает токсическое воздействие на делящиеся клетки и, следовательно, поражает как опухолевые клетки, так и здоровые делящиеся клетки. При иммунотерапии эффект осуществляется посредством активации собственных механизмов защиты организма. Рефнот, рекомбинантный фактор некроза опухоли-тимозин-а1 (ФНО-Т), представляет собой уникальную гибридную молекулу двух биологически активных агентов - цитокина фактора некроза опухолей альфа (ФНО) и гормона тимозина. Как известно, Т-лимфоциты играют ключевую роль в противоопухолевом иммунитете. Они также участвуют в реакциях гуморального иммунитета, т. к. для продукции антител к большинству антигенов В-клеткам необходимо взаимодействие с Т-клетками-хелперами (это в основном CD4+ Т-лимфоциты). В противоопухолевом иммунитете существенную роль играют также лимфоциты - естественные киллеры, не относящиеся ни к Т-, ни к В-лимфоцитам. Высокий интерес уделяется обнаружению их роли в антиметастатическом действии иммунной системы при злокачественных опухолях. Проведенными многочисленными научными исследованиями были показаны уникальные иммуномодулирующие свойства Рефнот у онкологических больных. Его отличительная особенность от других известных иммуномодуляторов заключается в положительном воздействии одновременно на 2 клеточные популяции - Т- и NK-клетки, являющиеся ведущими популяциями противоопухолевого иммунитета.
Опухолевый ангиогенез является одним из ключевых механизмов в развитии меланомы, инвазии и формировании метастазов
Дополнительно представляется важным отметить, что Рефнот у онкологических больных повышает иммунологический потенциал также при исходно ненарушенных показателях иммунного статуса. Препарат обладает прямым противоопухолевым действием in vitro и in vivo на различных линиях опухолевых клеток; угнетает ангиогенез в противоположность ФНО; повышает проницаемость эндотелия сосудов; запускает процесс апоптоза опухолевых клеток, а также активирует каскад химических реакций коагуляционной системы крови, ведущий
к так называемому «геморрагическому» некрозу опухолей [20]. Показана возможность усиления противоопухолевой эффективности цитостатиков при проведении комплексной терапии с ФНО [21]. Благодаря входящему в состав ФНО-Т тимозину-а1 препарат способен оказывать стимулирующее воздействие на Т-клеточное звено иммунной системы, наиболее значимое для противоопухолевого иммунитета, а также участвует в реакциях гуморального иммунитета [20, 22].
По спектру цитотоксического и цитостатического действия на опухолевые клетки препарат соответствует ФНО человека, однако Рефнот имеет в 100 раз меньшую общую токсичность, чем ФНО, обладает способностью угнетать ангиогенез [23].
Рефнот изучался при раке молочной железы в сочетании с химиотерапией [24]. Продемонстрирована эффективность Рефнота при диссеминированной меланоме кожи [25, 26].
Цель исследования: изучение влияния Рефнота на показатели ангиогенеза (VEGF и FGF-2) у больных диссеминированной меланомой.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Методика определения VEGF и FGF-2 в сыворотке крови больных диссеминированной меланомой кожи
Уровень основного фактора роста фибробластов (FGF-2) и уровень фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) определялись в сыворотке крови больных диссеминированной меланомой кожи. Забор образцов сыворотки крови больных выполнялся до начала лечения Рефнотом, в процессе лечения и после окончания лечения (при про-грессировании болезни). Определение уровня FGF basic (FGF-2) проводилось по стандартной методике с помощью Human ELISE Kit ab 99979, фирмы ABCAM.
Определение уровня фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) проводилось по стандартной методике с помощью Human ELISE Kit ab 100662, фирмы ABCAM.
Дозы, пути введения и разведение Рефнота
Рефнот вводился в дозе 100 000 МЕ 1-5 дней, 2 дня перерыв, в течение не менее 3-4 недель - это определялось как 1 курс лечения. При отсутствии прогрессирования болезни лечение Рефнотом в монорежиме было длительным. Непосредственно перед употреблением во флакон, содержащий 100 000 МЕ, добавляли 1 мл воды для инъекций. После разведения препарат вводился подкожно в наружную поверхность плеча или бедра. Места инъекций чередовались. При отсутствии прогрес-сирования болезни проводили дополнительные курсы Рефнота. При прогрессировании болезни в дальнейшем все пациенты получили стандартную химиотерапию: Дакарбазин 250 мг/м2 в/в стр. в дни 1, 2, 3, Ломустин 80 мг/м2 внутрь, день 1, через 3 часа после Дакарбазина, Цисплатин 80 мг/м2 в/в со стандартной гипергидратацией, день 3. Противорвотная терапия стандартная. Интервал 5 недель.
Характеристика пациентов
В исследование было включено 24 пациента, оценено по маркерам ангиогенеза 20 больных.
24 пациента (8 мужчин и 16 женщин), средний возраст - 56,7 лет (от 29 до 77 лет). Все пациенты с диссеми-нированной меланомой кожи, ранее не получали по поводу диссеминированной болезни лекарственного лечения. Все пациенты имели гистологическое или цитологическое подтверждение диагноза, наличие измеряемых проявлений болезни. Все пациенты к моменту начала лечения имели удовлетворительное общее состояние (0-2 по классификации ВОЗ), нормальные гематологические и биохимические показатели крови, функцию печени и почек.
Показано, что FGF-2 индуцирует ангиогенез in vivo и регулирует образование, новых сосудов и рост опухоли, ускоряется ангиогенез и рост новых кровеносных сосудов из уже существующей сосудистой сети. В ряде, исследований высокий уровень экспрессии FGF2 в опухолевых клетках был ассоциирован с низкими показателями общей выживаемости
24 пациентам было проведено 585 введений препарата. Из 24 пациентов оценено по эффективности 20. В 13 (65%) случаях зарегистрировано прогрессирование болезни (увеличение измеряемых очагов), в 7 (35%) случаях отмечалась стабилизация болезни.
13 пациентов получили 3-4-недельные режимы введения Рефнота, в дальнейшем при обследовании у них отмечено прогрессирование болезни; 5 пациентов получили лечение Рефнотом в течение 6 недель; 1 пациент в течение 9 недель и 1 пациент в течение 12 недель. В каждом случае забор анализов крови проводился каждые 3 или 4 недели. Изучение FGF-2 и VEGF было проведено у всех пациентов до начала лечения, в процессе лечения и по окончании лечения. В 2 случаях (из 24 пациентов) не определялись показатели FGF-2 и VEGF в связи с появлением выраженной клинической симптоматики метастатического поражения головного мозга (лечение Рефнотом у них было прекращено), и в 2 случаях пациентки продолжают еще лечение (до настоящего времени).
Оценка эффективности лечения
Эффективность лечения определялась как эффективное лечение (длительное лечение) - более 4 недель, прогрессирование расценивалось при длительности терапии до 3-4 недель.
В группе из 20 оцененных пациентов эффективность лечения Рефнотом составила 35% (7 больных). Во всех случаях были отмечены длительные стабилизации болезни - до 12 недель. Полных и частичных эффектов не отмечено.
Анализы крови для определения сосудистого эндоте-лиального ростового фактора (vascuLar endothelial growth
рефнот
Рекомбинантный Фактор Некроза Опухолей а- тимозин а 1
Высокоэффективный препарат(цитокин) с низкой токсичностью для лечения онкологических заболеваний
• Оказывает прямое противоопухолевое действие
• Влияет на количество
и активность М-клеток
• Увеличивает эффективность проводимой химиотерапии
РЕФНОТ-ФАРМ
рефнот
фактор некроза опухолей - тимозинн альфа1 \ рекомбинантный
лиофилизатдля приготовления раствора для подкожного введения
5 флаконов
100000 ЕД
www.refnot.ru
Перед применением ознакомьтесь с Инструкцией ООО «Рефнот-фарм» Лицензия ФС 99-04-000711 от 16.07.2009 Консультации по применению препарата -ООО «Клиника он ко иммунологи и и цитокинотерапии» www.oncology-xxi.ru, тел 8-800-100-35-85
Регистрационный номер ЛСР-002477/09 от 27.032009 г.
factor - VEGF) и фактора роста фибробластов (FGF-2) забирались до начала терапии Рефнотом и через каждые 3 или 4 недели лечения до прогрессирования болезни. Забор анализа крови при регистрации прогрессирования болезни являлся последней точкой. Таким образом, первый и последний забор анализов крови проводился на фоне прогрессирования болезни.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В группе больных (7 пациентов), получавших лечение с эффектом, у 5 больных (в 71,4%) отмечено значительное снижение концентрации FGF-2, в 1 случае - концентрация FGF-2 снизилась незначительно. В группе пациентов (13 больных), леченных без эффекта, в большинстве случаев отмечено значительное повышение концентрации FGF-2.
Выявлена положительная связь между числом инфильтрирующих опухоль воспалительных клеток, экспрессирующих VEGF-A, и экспрессией VEGF-А в клетках метастатической меланомы. Уровень меланотрансферрина, который гиперэкспрессируется в клетках меланомы и обладает ангиогенным действием, коррелирует с уровнем VEGF
При анализе уровня VEGF в группе пациентов, получавших лечение с эффектом, показано, что уровень VEGF снижался в 76,9% случаев при сравнении с исходным уровнем и через 6 недель.
При анализе показателей FGF-2 у всех 20 больных до начала лечения средние показатели составили 83,05 pg/ml (ДИ 60,74-105,35; 18-195 pg/ml, n = 20). Средние показатели через 3-4 недели составляли 77,73 pg/ml (ДИ 53,69-101,77; 0-178 pg/ml, n = 19). У 12 больных с про-грессированием болезни до начала лечения средние значения FGF-2 составляли 82,61 pg/ml (ДИ 58,83106,39; 18-144 pg/ml, n = 13) через 3-4 недели средние показатели значительно увеличивались и составляли 90,69 pg/ml (ДИ 60,58-120,79; 0-178 pg/ml, n = 13). В группе 7 больных, получавших лечение длительно (стабилизация болезни от 6 до 12 недель), средние значения FGF-2 до начала лечения были высокими и составляли 83,85 pg/ml (ДИ 24,66-143,05; 21-195 pg/ml, n = 7) Как видно на рисунке, отмечена высокая активность ангиоге-неза. Уже через 3-4 недели лечения Рефнотом видно резкое снижение факторов ангиогенеза: средние показатели уже составляют 49,66 pg/ml (ДИ: 7,47-91,86; 0-98 pg/ml, n = 6), а через 6 недель средний уровень FGF-2 резко падает до 38,5 pg/ml (ДИ: 8,14-68,8, 0-78 pg/ml, n = 6). У двух больных, получавших лечение длительно, в течение 9 и 12 недель отмечено снижение показателей до 0 pg/ml и 74 pg/ml соответственно. У пациентки, получавшей лечение в течение 12 недель, уровень FGF-2 до начала лечения был 195 pg/ml и к концу 12-й недели уже составлял 0 pg/ml. Эти данные наглядно демонстрируют
антиангиогенную активность Рефнота в монотерапии у пациентов с диссеминированной меланомой кожи.
При анализе показателей VEGF у всех больных до начала лечения средние показатели составили 1342,36 pg/ml (ДИ 951,91-1732,81; 300-3550 pg/ml, n = 19). Средние показатели через 3-4 недели составляли 1494,16 pg/ml (ДИ 1070,77-1917,55; 300-3300 pg/ml, n = 18).
У 12 больных с ранним прогрессированием (3-4 недели) болезни до начала лечения средние значения VEGF составляли 1316,66 pg/ml (ДИ 800,96-1832,36; 300-3550 pg/ml, n = 12), через 3-4 недели средние показатели значительно увеличивались и составляли 1482,91 pg/ml (ДИ 936,01-2029,82; 300-3300 pg/ml, n = 12).
В группе 7 больных, получавших лечение длительно (до 12 недель), средние значения VEGF до начала лечения были высокими и составляли 1386,42 pg/ml (ДИ 581,562191,29; 800-3300 pg/ml, n = 7). Через 3-4 недели лечения Рефнотом средние показатели составляли 1516,66 pg/ml (ДИ 558,47-2474,85; 600-3200 pg/ml, n = 7), а через 6 недель средний уровень VEGF резко уменьшается до 1066,66 pg/ml (ДИ 552,90; 300-1700 pg/ml, n = 6). У двух больных, получавших лечение длительно (в течение 9 и 12 недель), отмечено значительное снижение показателей до 1200 pg/ml и 500 pg/ml соответственно. У пациентки, получавшей лечение в течение 12 недель, уровень VEGF до начала лечения был 1350 pg/ml и к концу 12-й недели уже составлял 500 pg/ml. Эти данные показывают антиангиогенную активность Рефнота в монотерапии у пациентов с диссеминированной меланомой кожи.
ВЫВОДЫ
Отмечена эффективность Рефнота в монотерапии у пациентов, ранее не получавших лекарственного лечения по поводу диссеминации болезни. Контроль болезни достигнут у 35% пациентов. Отмечена стабилизация болезни до 12+ недель.
Отличительная особенность препарата Рефнот от других известных иммуномодуляторов заключается в положительном воздействии одновременно на 2 клеточные, популяции -Т- и NK-клетки, являющиеся ведущими популяциями противоопухолевого иммунитета
Одна из важных функций FGF-2 - это стимуляция роста эндотелиальных клеток. По данным литературы, было показано, что FGF-2 индуцирует ангиогенез in vivo и регулирует образование новых сосудов и рост опухоли, ускоряется ангиогенез и рост новых кровеносных сосудов из уже существующей сосудистой сети. FGF-2 является более мощным ангиогенным фактором, нежели фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) или фактор роста тромбоцитов (PDGF).
При тщательном анализе пациентов, получавших лечение Рефнотом с эффектом, у 5 больных (в 71,4%) отмечено значительное снижение концентрации FGF-2,
что показывает влияние Рефнота на антиангиогенез. В группе пациентов, леченных без эффекта, в большинстве случаев отмечено значительное повышение концентрации РСР-2. У пациентов до начала лечения Рефнотом отмечена высокая ангиогенная активность опухоли, что видно из повышенных значений до лечения. При тщательном анализе полученных результатов отмечено, что в группе больных, получавших лечение Рефнотом длительно, было отмечено значительное снижение концентрации РСР-2, а в некоторых случаях при длительной терапии она не определялась в сыворотке крови. Полученные данные наглядно демонстрируют влияние Рефнота на ангиогенез у пациентов с диссеминированной мелано-мой кожи.
У всех больных уровень VEGF до начала лечения в сыворотке крови был высоким и составлял 1342,36 рд/т1, увеличиваясь в большинстве случаев после 4 недель лечения. Однако, как видно из результатов, у пациентов, получавших лечение Рефнотом с эффектом, до начала лечения средние значения VEGF составляли 1316,66 рд/т1, а уже после 6 недель лечения средний уровень VEGF уменьшался до 1066,66 рд/т1. Можно предположить, что Рефнот тормозит активность VEGF при длительном применении, что видно на примере двух больных, получавших
лечение с эффектом. У них отмечено снижение показателей VEGF до 1200 рд/т1 и 500 рд/т1 соответственно. У пациентки, получавшей лечение в течение 12 недель, уровень VEGF до начала лечения был 1350 рд/т1 и к концу 12-й недели уже составлял 500 рд/т1 Эти данные демонстрируют высокую антиангиогенную активность Рефнота в монотерапии у пациентов с диссеминированной меланомой кожи.
В группе, больных, получавших лечение. Рефнотом длительно, было отмечено значительное снижение, концентрации а в некоторых случаях при длительной терапии она не. определялась в сыворотке крови
Таким образом, на основании проведенных нами исследований был показан антиангиогенный эффект Рефнота у пациентов с диссеминированной меланомой кожи.
Проведение дополнительных исследований у онкологических больных различных локализаций с использованием Рефнота открывает новые перспективы в лекарственной терапии больных со злокачественными опухолями.
ЛИТЕРАТУРА
1. Злокачественные новообразования в России в 2015 году (заболеваемость и смертность). Под ред. О.В. Каприна, В.В. Старинского, ПВ. Петровой. М.: МНИОИ им. П.А. Перцена -филиал ФПБУ «НМИРЦ» Минздрава России, 2016 г. 250 с.
2. Барчук А.С. Адъювантная терапия меланомы. 5-я Ежегодная Российская онкологическая конференция. М., 2001: 34-37.
3. Путоров С.Л. Цитокины в современном комбинированном лечении некоторых злокачественных опухолей. автореферат дис. ... доктора медицинских наук. М., 2009. 40 с.
4. Korn EL, Lui PY, Lee SJ et al. Meta-analysis of phase II cooperative group trials. J Clin Oncol., 2008, 26: 527-534.
5. Breslow A. Thickness, cross-sectional areas and depth of invasion in the prognosis of cutaneous melanoma. Annals of Surgery, 1970, 172(5): 902-908.
6. Heasley DD, Toda S, Mihm MCJr. Pathology of malignant melanoma. Surgical Clinics of North America, 1996, 76(6): 1223-1255.
7. Mahabeleshwar GH, Byzova TV. Angiogenesis in melanoma. Seminars in Oncology, 2007, 34(6): 555-565.
8. Ribatti D, Nico B, Floris C et aL Microvascular density, vascular endothelial growth factor immuno-reactivity in tumor cells, vessel diameter and intussusceptive microvascular growth in primary melanoma. Oncology Reports, 2005, 14(1): 81-84.
9. Ferrara N. Vascular Endothelial Growth Factor as a target for anticancer therapy. Oncologist, 2004, 9: 2-10.
10. Ferrara N. VEGF-A: a critical regulator of blood vessel growth. Eur Cytokine Netw, 2009, 20(4): 158-63.
11. Potente M, Gerhardt H, and Carmeliet P. Basic and therapeutic aspects of angiogenesis. Cell, 2011, 146(6): 873-87.
12. Toi M, Inada K, Suzuki H et al. Tumor angiogenesis in breast cancer: its importance as a prognostic indicator and the association with vascular endothelial growth factor expression. Breast Cancer Res Treat, 1995, 36(2): 193-204.
13. Katoh M, Nakagama H. FGF receptors: cancer biology and therapeutics. Med Res Rev, 2014, 34(2): 280-300.
14. Beenken A, Mohammadi M. The FGF family: biology, pathophysiology and therapy. Nat Rev Drug Discov, 2009, 8(3): 235-253.
15. Donnem T, Al-Shibli K, Al-Saad S et al. Prognostic impact of fibroblast growth factor 2 in non-small cell lung cancer: coexpression with VEGFR-3 and PDGF-B predicts poor survival. J Thorac Oncol, 2009, 4(5): 578-585.
16. Salven P, Heikkila P, Joensuu H. Enhanced expression of vascular endothelial growth factor in metastatic melanoma. British Journal of Cancer, 1997, 76(7): 930-934.
17. Sala R, Jefferies WA, Walker BB et al. The human melanoma associated protein mel-anotransferrin promotes endothelial cell migration and angiogenesis in vivo. European Journal of Cell Biology, 2002, 18(7): 599-607.
18. Ribatti D, Vacca A, Ria R et al. Neovascularisation, expression of fibroblast growth factor-2, and mast cells with tryptase activity increase simultaneously with pathological progression in human malignant melanoma. European Journal of Cancer, 2003, 39(5): 666-674.
19. Платинский Л.В., Брюзгин В.В., Подистов Ю.И. Возможности иммунотерапии в онкологиче-
ской практике. Российский биотерапевтический журнал, 2008, 4(8): 86.
20. Шмелёв В.А., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Рефнот. Рекомбинантный Фактор Некроза Опухолей-Тимозин-а1, препарат с низкой системной токсичностью для лечения онкологических заболеваний. М.: Рефнот-Фарм, 2010.
21. Сысоева Г.М., Даниленко Е.Д., Гамалей С.Г., Батенева А.В. Противоопухолевые свойства композиционного препарата фактора некроза опухоли альфа с производными гемато-порфирина. Сибирский онкологический журнал, 2010, 6: 36-41.
22. Личиницер М.Р. и др. Отчет РАМН Российского Онкологического Научного Центра им. Н.Н. Блохина «Влияние Рефнота на иммунитет у онкологических больных» 2011. URL.: http:oncoLogy-xxi.ru/report (дата обращения: 07/06/2014 г.).
23. Насонов Е.Л. Фактор некроза опухоли-а -новая мишень для противовоспалительной терапии ревматоидного артрита. Клиническая фармакология и терапия, 2001, 1: 64-70.
24. Владимирова Л.Ю., Подзорова Н.А., Непомнящая Е.М. и др. Результаты неоадъ-ювантной химиотерапии рака молочной железы в сочетании с перитуморальным применением фактора некроза опухоли-тимозин-а1. Эффективная фармакотерапия. Онкология, гематология и радиология, 2016, 3: 6-10.
25. Славина Е.Г, Черткова А.И., Заботина Т.Н. и др. Рефнот - новый отечественный иммуномоду-лятор для лечения меланомы. Российский аллергологический журнал, 2012, 5: 248-249.
26. Славина Е.Г, Черткова А.И., Абрамов М.Е. и др. Рефнот - новый иммуномодулятор в онкологии. Российский биотерапевтический журнал, 2016, 15(1): 100-101.
