CC BY
75
N.P. BGATOVA, Y.S. GAVRILOVA, R.I. YUY, M.Zh. ERGAZINA
COMPARATIVE ULTRASTRUCTURAL ANALYSIS OF HEPATOCYTES AND HEPATOCELLULAR CARCINOMA
Resume: Heterogeneity of tumor cell from ascetic liquid is revealed by values of nudear-cytoplasmic correlation and cytoplasmic organelles concentration which allowed to emphasize 5 stages of their differentiation. It was shown that when transplanting GK-29 cells in the hip of the line CVA mice, the tumor tissue develops and mainly consists of more differentiated cells, that form similarity of hepatic tubules surrounded by "sinusoids." It is noted that cytoplasm of implanted tumor cells differs from hepatocytes cytoplasm by fewer content of mitochondria, membranes of granular endoplasmic reticulum net, ribosomes, absence of glycogen accumulation, that is, probably, connected with their microenvironment.
Keywords: hepatocytes of the line CVA mice, hepatocarcenoma -29 cells, ultrastructura.
УДК 546.171+612.014,46:3.98.3
Ш.К. БАХТИЯРОВА, Б.А. ДЖУСИПБЕКОВА, Б.И. ЖАКСЫМОВ, Е.К. МАКАШЕВ
РГП «Институт физиологии человека и животных» КН МОН РК, г.Алматы, Казахский Национальный медицинский университет им С.Д. Асфендиярова, Алматы
ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ КОРМОВ НА СОСТОЯНИЕ ПРО- И АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ КРОВИ РЫБ
В экспериментах показано влияние различных кормов на продукты перекисного окисления у молоди стерляди. При приеме корма 2012г у рыб снижается уровень малонового диальдегида и диеновых конъюгат по сравнению с другими видами кормов. Ключевые слова: Осетровые рыбы, клеточный уровень, популяция, коррекция здоровья рыб, молоди стерляди, водоёмы, рыбоводная система, абиотические и биотические факторы, морфофизиологические признаки, органические и минеральные компоненты, переработки кукурузы, гемолизат, липопероксидация.
Введение. Одним из перспективных направлений аквакультуры считается товарное осетроводство, составной частью которого является производство белковой продукции, а также восполнения численности осетровых видов рыб. Осетровые рыбы в настоящее время стоят на грани полного исчезновения. Самым важным в развитии товарного осетроводства является кормление новыми видами кормов, специфические добавки, биологически активные вещества призванные способствовать откормочному процессу, плодовитости популяции, стимуляции иммунной системы рыб. Разработка специализированных кормов должна опираться на строго научно-обоснованных данных о взаимодействии компонентов в корме, с пищеварительным трактом на органном, тканевом и клеточном уровне. Изучение физиологического состояния совершенно необходимо для более полной и всесторонней функциональной характеристики осетровых, их адаптационных возможностей [1]. Поэтому исследования направленные на изучение физиологических параметров у осетровых рыб на различных стадиях развития, изучение наиболее оптимальных видов корма, в зависимости от возраста, изучение способов увеличения воспроизводства рыб является первоочередной задачей для восстановления популяции этого ценнейшего вида рыб. В последние годы все большее развитие получает индустриальное осетроводство, основанное на интенсивных методах, при которых возможно управлять качеством водной среды и кормов, режимом кормления, осуществлять контроль за физиологическим состоянием и коррекцию здоровья рыб [25]. Как объект пастбищного и товарного рыбоводства на территории Казахстана, следует, прежде всего, изучить адаптационные возможности молоди стерляди в условиях разнотипных водоёмов и рыбоводных систем при различных кормах и при действии различных биодобавок, поскольку эта возрастная группа в большей степени подвержена воздействию различных абиотических и биотических факторов. Изменчивость
морфофизиологических признаков рыб увеличивается при изменении условий содержания, корма, что позволяет изучить не только общие процессы роста и развития, но и адаптивные изменения, связанные с изменениями
окружающей среды [6]. Вышеуказанное и определило проведение исследований физиологических особенностей рыб, механизмов адаптации организма в современной экосистеме.
Материалы и методы исследования. Эксперименты выполнены на 63 молоди стерляди, содержавшихся в Капчагайском научно-производственном хозяйстве с. Шалкар Алматинской области. В экспериментах были сформированы 4 группы: 1 группа - контрольные группы, содержавшихся на рационе ОТ-6. 2 группа, получавшиеся голландский корм «Coppens», 3 группа- содержались на рационе лучшего корма 2009 года и 4 группа, получавшихся новый корм 2012г. (Экспериментальные корма, выработаны ТОО «КазНИИППП»: корма 2009г. и 2012г). Комбикорма для молоди стерляди состояли из различных органических и минеральных компонентов с комплексным
использованием отходов переработки кукурузы и обогащенных молочнокислыми бактериями.(поданы на патент).
По истечении срока кормления взвешивали каждую рыбку. Кровь на исследование осуществляли пункцией хвостовой вены рыб. Кровь забирали в пробирки с гепарином (2-3 Ед/мл). После центрифугирования (10 мин при 1500 об/мин) плазму отделяли от эритроцитов. В части наблюдений получали гемолизат эритроцитов, центрифугировали при 6000 g. В полученном гемолизате эритроцитов с помощью биуретовой методики определяли концентрацию общего белка. Определяли уровень перекисного окисления липидов по содержанию промежуточных (диеновые коньюгаты) и конечных (малоновый диальдегид) продуктов пероксидации, а также каталазную активность в гемолизате эритроцитов [7-8]. Полученные результаты статистически обрабатывали с использованием программы Microsoft Excel и изменения параметров с учетом непарного критерия Фишера -Стьюдента считали достоверными при р< 0.05. Результаты исследований.
В данных экспериментах использованы различные корма. Контрольная группа принимала корм ОТ-6. 2 группа получали голландский корм» Coppens», 3 группа, содержались на рационе лучшего корма 2009 года и 4 группа получали новый корм 2012г.
Полученные данные представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Контрольные и опытные величины параметров перекисного окисление липидов при кормлении стерляди разными
Показатель ОБ г/л МДА нмоль/мл эритроцитов ДК нмоль/мл эритроцитов АК г(Н2О2)/мл эритроцитов
Контроль - ОТ-6 46,62±0,025* 0,007±0,002* 1,72±0,001* 16,31±0,05*
Голландский корм 69,73±0,004* 0,006±0,001* 1,14±0,005* 55,78±0,10*
2009 г. корм 76,67±0,001* 0,014±0,002* 1,02±0,002* 84,34±0,10*
2012 г. корм 84,96±0,002* 0,009±0,001* 0,095±0,002* 63,72±0,05*
* - р<0,001 - между группами
Из исходных данных следует, повышение уровня общего белка при кормлении рыб голландским кормом, кормом 2009 года и кормом 2012 года соответственно 49%, 64% и
82% по сравнению с контролем. Из рисунка видно, что при кормлении новым кормом 2012 года содержание общего белка увеличивается. (рисунок 1) (р<0,001).
к-контроль, 1-голландский корм, 2- 2009 г.корм, 3-2012 г.корм Рисунок 1 - Содержания общего белка у стерляди при действии кормов
Уровень перекисного окисление липидов в гемолизате эритроцитов при действии кормов судили по накоплению как промежуточных - ДК, так и конечных продуктов липопероксидации - МДА. Так отмечалось повышение уровня малонового диальдегида при действии корма 2009 года и 2012 года соответственно на 90% и на 28% и
снижение этого показателя при кормлении голландским кормом на 14% по сравнению с контролем (рисунок 2. р<0,001). Также можно отметить, что уровень продукта липопероксидации при действии корма 2012г была ниже, чем уровень продуктов липопероксидации при корме 2009г.
нмоль/мл
0,014 0,012 0,01 0,008 0,006 0,004 0,002 0
к-контроль, 1-голландский корм, 2- 2009 г.корм, 3-2012 г.корм Рисунок 2 -Уровень малонового диальдегида (нмоль/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов
у стерляди при действии кормов
К
1
2
3
Уровень содержание диенового конъюгата при действии голландского корма, корма 2009 г. и корма 2012 г. снизился
соответственно на 33% , на 44% и на 40%.(рисунок 3.p<0,001)
к-контроль, 1-голландский корм, 2- 2009 г.корм, 3-2012 г.корм Рисунок 3 - Изменение содержания диеновых коньюгатов (нмоль/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов у стерляди при
действии кормов
Изменение уровня каталазной активности видно на при действии всех кормов в среднем в два раза. Наиболее
рисунке 4. Так уровень каталазной активности повышается выраженные изменения при действии корма 2009г.
к-контроль, 1-голландский корм, 2- 2009 г.корм, 3-2012 г.корм Рисунок 4 - Изменение каталазной активности (г Н2О2/мл эритроцитов) в гемолизате эритроцитов у стерляди при действии
кормов
Таким образом, как показали проведенные исследования при кормлении разными кормами выявлены сдвиги. Отмечалось повышение малонового диальдегида при кормлении модифицированным кормом 2009года по сравнению с кормом 2012г. По экспериментальным данным уровень каталазной активности выше при действии корма 2009года.
Обсуждение. Уровень перекисного окисления липидов относится к одному из основных количественных показателей качества рыбного корма и определяется по содержанию в нем перекисей. При этом некоторые авторы отмечают также значительное возрастание уровня свободных жирных кислот в крови, что может служить подтверждением нашему предположению о взаимосвязи уровня гептанрастворимых липопероксидов с интенсивностью мобилизации нейтральных липидов из жировых депо и утилизации их как источника энергии.
Установленный нами факт возрастания содержания продуктов ПОЛ у стерляди не противоречит результатам, полученным другими исследователями. Как показали полученные нами данные, в процессе адаптации к среде обитания и при кормлении кормом 2009г и кормом 2012года происходит увеличение мощности антиоксидантной системы, что проявилось в возрастании уровня активности каталазы в плазме крови у молоди стерляди по сравнению с контролем. Эти данные хорошо согласуются с результатами, полученными другими исследователями [9-10]. По результатом исследовании можно судить, что из использованных кормов благоприятное действие на состояние про- и антиоксидантной систем оказывал корм 2012 года. Можно предположить, что качество корма 2012 года не уступает голландскому корму. Таким образом, корм,
использованный в 2012 году, по сравнению с таковым,
примененным в 2009 году, снижал уровень перекисного окисления липидов в гемолизате эритроцитов, о чем свидетельствует уменьшенное накопление промежуточных (диеновые коньюгаты), и конечных (малоновый
диальдегид) продуктов липопероксидации. При этом повышается уровень антиоксидантной защиты организма стерляди.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Рубан Г.И. Сибирский осетр Acipenser baerii Brandt (структура вида и экология). - М.: ГЕОС, 1999. - 236 с.
2 Алымов Ю.В., Кокоза А.А., Загребина О.Н., Блинков Б.В. Влияние различных комбикормов на морфофизиологические показатели молоди русского осетра,выраш,енной садковым методом // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 4 (часть 1). - C. 167-171.
3 Васильева JI.M. Роль центра "БИОС" в развитии отечественного осетроводства // Аквакультура осетровых рыб: достижения и перспективы развития / /Мат-лы. докл. IV мёжд. науч.-практ. конф., г. Астрахань, 13-15 марта 2006 г.- М.: ВНИРО, 2006.- С. 5-7.
4 Гамыгин Е.А. Корма и кормление рыбы // Рыб. хоз-во. Сер. Рыбохоз. использ. внутр. водоемов.- М.: ОИ ЦНИИТЭИРХ, 1987. - Вып. 1.- С.1-82.
5 Иванов А.А., Головин П.П., Романова Н.Н., Корабельникова О.В. Оценка физиологического состояния ленского осетра при выращивании в условиях индустриальных хозяйств // Известия ТСХА. - 2008. - № 4. - С. 81-85.
6 Корабельникова О. Физиолого-биохимические показатели осетровых рыб (Acipenseridae Bonaparte) при выращивании в индустриальных хозяйствах: дисс....канд.биол.наук: 03.00.10.-М., 2009.-149с.
7 Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. - М., 1975. - 168 с.
8 Бабенко Г.А., Гойнацкий М.Н. Определение активности каталазы в эритроцитах и сыворотке йодометрическим методом // Лаб.дело. - 1976. - № 3. - С.157-158.
9 Мовчан Н.О. Токсическое влияние соединений ртути на молодь осетровых рыб при использовании сухих комбикормов: дисс..канд. биол. Наук. - Астрахань: 2001. - 129 с.
10 Корабельникова О. Физиолого-биохимические показатели осетровых рыб (Acipenseridae Bonaparte) при выращивании в индустриальных хозяйствах: дисс....канд.биол.наук: - М.: 2009. - 149 с.
ЭР ТУРЛ1 ТАFАМДЬЩ вНШДЕРДЩ БАЛЬЩ КДНЫНЫЦ АНТИОКСИДАНТТЬЩ ЖУЙЕСШЕ ЖЭНЕ ПРО- ЖАFДАЙЫНА ЭСЕР1
Туйш: Журпзшген гылыми экспериментальдык жумыстарда балыктарды тамактандыруга арналган эртурл1 тагамдардык ешмдердщ жас беюре тукымдас балыктардыц аскын тотыгу ешмдерше эсер1 зерттелген. Баска тагамдык ешмдерге Караганда 2012 жылдардагы бершген тагамдардыц эсершен балыктарда малондык диальдегид жэне диенд1 конъюгат денгейлер1 темендеп кеткен.
Туйщд свздер: Беюре тукымдас балык, жасушалык децгей, популяция, балык денсаулыгын тузету, балыкасырау жуйей, абиоттык жэне биоттык факторлар, морфофизиологиялык белплер, органикалык жэне минералдык компоненттер, жугер1 ецдеу, гемолизат, липопероксидация.
SH. K. BAKHTIYAROVA, B. A. DZHUSIPBEKOVA, B. I. ZHAKSYMOV, E.K. MAKASHEV
RGP "Institute of Human Physiology and Animals" of KN of MAUN RK, Almaty, Kazakh National medical university to them
S. D. Asfendiyarova, Almaty
INFLUENCE OF VARIOUS FORAGES ON THE CONDITION OF MISSILE DEFENCE PRO- AND - ANTIOXIDANT
SYSTEM OF BLOOD OF FISHES
Resume: In experiments influence of various forages on products of perekisny oxidation is shown at thresh sterlets. At reception of a forage of 2012 at fishes the level of a low-new dialdegid and the diyenovykh of conjugates in comparison with other types of forages decreases. Keywords: Sturgeon fishes, cellular level, population, correction of health of fishes, thresh sterlets, reservoirs, fish-breeding system, abiotic and biotic factors, morfofiziologichesky signs, organic and mineral components, processings of corn, haemolysate, lipoperoksidation.
Ш.К. БАХТИЯРОВА, Б.А. ДЖУСИПБЕКОВА, Б.И. ЖАКСЫМОВ, Е.К. МАКАШЕВ
Ц¥БГМЦР «Адам жэне жануарлар физиологиясы институты», Алматы ц, С.Ж. Асфендияров атындагы Цазац ¥лттыцмедициналыцуниверситету Алматы ц.
