CC BY
16
ккккккккккккккккккккккккккккккккккккккккккк
Медицина и биология
ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ДОЗ СТРОФАНТИНА-К НА АКТИВНОСТЬ ЛИЗОСОМАЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ МИОКАРДА В УСЛОВИЯХ НОРМЫ И СЕРДЕЧНОЙ ДЕКОМПЕНСАЦИИ
С. М. ЛЕМКИНА, доктор медицинских наук, П. А. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ, чл.-кор. РАМН,
доктор медицинских наук,
Я. В. КОСТИН, доктор медицинских наук
Сердечная недостаточность, как известно, осложняет практически все заболевания системы кровообращения. Традиционная терапия этой патологии включает кардиотонические средства, основными среди которых по-прежнему остаются сердечные гликозиды, повышающие сократительную способность сердечной мышцы. Поскольку ослабление контрактильной функции миокарда 5 условиях декомпенсации сердечной деятельности обусловлено разрушением внутриклеточных структур сердечной мышцы лизосомальными ферментами,
априори можно предположить участие лизосомального аппарата сердца и в реализации положительного инотроп-ного и токсического эффектов глико-зидных кардиотоников. Для проверки этого предположения было исследовано влияние терапевтической и токсической доз строфантина-К на свободную и общую активность двух лизосо-мальных ферментов — уЗ-глюкозида-зы (КФ 3.2.1.21) и катепсина В (КФ 3.4.23.5), а также проведена оценка степени стабильности лизосомаль-ных мембран на фоне воздействия сердечного гликозида в условиях нормы и при экспериментально вызванной у подопытных животных недостаточности кровообращения.
Эксперименты поставлены на 99 белых беспородных крысах-самцах массой 160 — 200 г, наркотизированных тиопентал-натрием (40 мг/кг внут-рибрюшинно). Свободную активность /?-глюкозидазы и катепсина Э опреде-
ляли в свежеприготовленном гомогена-те миокарда, а общую активность оценивали в том же гомогенате после его
■
обработки неионогенным детергентом тритоном Х-100. Активность кислых гидролаз определяли спектрофото-метрически по - количеству образующихся продуктов ферментных реакций [1, 2]. Оптическую плотность опытных и контрольных проб измеряли с помощью спектрофотометра SPECORD М42/М400 (Carl Zeiss Jena) при длине волны 420 нм для /?-глюкозидазы и 280 нм для катепсина D. О состоянии лизосомальных мембран судили по процентному соотношению свободной и общей активности исследуемых кислых гидролаз. Недостаточность кровообращения у подопытных крыс воспроизводили повторным воздействием больших доз /J-адреномиметика изадрина (по 80 мг/кг подкожно в течение 5 дней с последующим взятием животных в эксперимент через 3 дня после последней инъекции препарата). Наличие #
симптомокомплекса недостаточности кровообращения у крыс подтверждали появлением типичных для этой патологии нарушений гемодинамики, электролитного баланса миокарда и анато-мо-гистологической картины внутренних органов. Результаты экспериментальных исследований обработаны общепринятыми методами вариационной статистики.
Результаты проведенных экспериментов выявили существенные различия в действии терапевтической и ток-
сической доз строфантина-К на лизо-сомальный аппарат миокарда в условиях нормы и моделированной декомпенсаций сердца. Установлено, что при экспериментальной недостаточности
кровообращения значительно повышается активность изученных лизосо-мальных ферментов и нарушается стабильность мембран ^этих органелл (оис. 1). Анализ показателей гидролаз-
сердечнои дея-
внутривенном дозы глико-
Р и с. 1. Изменение свободной активности (1), общей активности (2) и процентного соотношения свободной и общей активности (3) ли-зосомальиых ферментов при моделированной недостаточности кровообращения. I — /5-глюкози-
дазй; II — катепсин О. По оси ординат — активность фермента в процентах от контрольного (100 %) уровня.* — достоверные различия по отношению к контролю при Р - 0,05.
ной активности у интактных крыс и животных с недостаточностью кровообращения свидетельствует, что доля свободной активности /?-глюкозидазы и ка-
тепсина В, характеризующая возможность фермент-субстратного взаимодействия и степень стабильности мембран лизосом, возрастала в условиях моделированной патологии соответственно на 56,1 (Р < 0,001) и 57, 0 % (Р < 0,001) по отношению к контрольным данным. Одновременно увеличивалась и общая активность ферментов. В связи с более значительным повышением доли свободной активности изученных кислых гидролаз наблюдалось заметное увеличение по отношению к контрольным данным процентного соотношения свободной активности ферментов к их общей активности, что свидетельствовало о лабилизации лизосомальных мембран у животных с моделирован-
ной декомпенсацией тельности.
При однократном
введении терапевтической
з ид нош кардиотоника интактным животным отмечалось снижение свободной
и общей активности /?-глюкозидазы и катепсина И на 15-й и 30-й минутах опыта, что сопровождалось уменьшением фермент-субстратных взаимоотно-ений и стабилизирующим влиянием на мембраны лизосом (рис. 2). Токсическая доза строфантина-К у интактных крыс приводила к двухфазным изменениям функционального ния лизосомального аппарата сердца (см. рис. 2). Действительно, если на 15-й минуте от момента введения лекарственного вещества выявлены уменьшение возможности фермент-суб-статного взаимодействия и стабилизация лизосомальных мембран, то на 30-й минуте опыта эффект гликозидно-го кардиотоника, напротив, выражался в значительном увеличении фермент-субстратных взаимоотношений и в лабилизации мембран лизосом.
В условиях моделированной декомпенсации кровообращения, в отличие от данных, установленных на здоровых животных, терапевтическая доза стро-фантина-К не приводила к достоверному снижению уже наблюдающейся при сердечной недостаточности лабилизации лизосомальных мембран, что свидетельствовало о принципиально иной динамике активности гидролитических ферментов на фоне воздействия сердечного гликозида (рис. 3). Установлено, что последний независимо от используемой дозы вызывает у подопытных животных с моделированной недостаточностью кровообращения^ двухфазные сдвиги активности изученных кислых гидролаз, причем второй этап воздействия лекарственного вещества характеризуется заметным повышением доли свободной активности ферментов и особенно отчетливо выражен при использовании токсической дозы препарата.
Таким образом, с помощью полученных данных зафиксировано усугубление уже имеющихся при декомпенсации сердечной деятельности сдви-
ь
II
Рис. 2. Влияние, терапевтической (1 мг/кг) и токсической (7,6 мг/кг) доз строфантина-К на свободную активность (1), общую активность (2) и процентное соотношение свободной и общей активности (3) /?-глюкозидазы (а) и катепсина Б(Ь) у интактных крыс. I и II — соответственно
эффекты терапевтической и токсической доз сердечного глюкозида. По оси абсцисс — время наблюдения, мин. По оси ординат — активность фермента в процентах к контрольному (100 %) уровню. 0 — достоверная разница по сравнению с контролем (Р £ 0,05).
I
Ь
%т
\
«
м
ж
м
II
&
-г-«
-1 Ж
Рис. 3. Влияние терапевтической (1 мг/кг) и токсической (7,6 мг/кг) доз строфантина-К на свободную активность (1), общую активность (2) и процентное соотношение свободной и общей активности (3) /?-глюкозидазы (а) и катепсина Б (Ь) у животных с недостаточностью кровообращения. I и II — соответственно эффекты терапевтической и токсической доз сердечного гликозида. По оси абсцисс — время наблюдения, мин. По оси ординат — активность фермента в процентах к контрольному (100 %) уровню. * — достоверная разница по сравнению с контролем (Р £ 0»05).
IW шттяя • гщррлитичсских фер-
мснтов и нарушений проницаемости лиэосрмальных мембран, которые, очевидно, являются од*к)й из причин сни-жения толерантности к токенчмости
строфздо#в&-К ври данной патологии системы кровообращения. Вызываемое теран£эт#чоск#ми дозами строфанта-вд-К понижение активности /?-глкжо^ зидазы и катещгинз Р, цо-эидимому> молено рассматривать как физирлогиче^ скос изменение лизосом миокарда, составляющее один из компонентов ме-
кардиртонического действия
сердечного эддеозяда, напротив, повы-
щешде активности кислых гидродаз под влиянием токсической дозы строфанти-на-К, вероятно, является неблагоприят-
ным фактором, обусловливающим формирование его токсического действия;
Полученные данные убедительно свидетельствуют об участии лизосо-мальной системы сердца в реализации основных эффектов строфантина-К, углубляя тем самым современные представления о биохимических механизмам развития кардиотонического и кар-диотоксического действия этого сердечного гликозида в условиях нормы и при недостаточности кровообращения, что,
в свою очередь, открывает возможные пути фармакологической регуляции основных эффектов названного лекарственного вещества с помощью целенаправленного воздействия на лизосомаль-ный аппарат миокарда.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Barret A. J. Lysosomal enzymes // Lysosomes. A laboratory handbook. J. T. Dingle (Ed.). Amsterdam; London, North — Holland Publ. Co., 1977. P. 40 — 105.
2. Patet BM Tappei A. Identify of ^glucosidase and /?-xylosidase activities in rat liver lysosomes // Biochem. Blophys. Acta. 1969. Vol. 191. P. 86 — 94.
ИЗМЕНЕНИЕ ГЕМОСТАЗА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ
Н. И. МИКУЛЯК, ассистент,
А. С. КИНЗИРСКИЙ, доктор медицинских наук,
Н. С. РУСЕЙКИН,
кандидат медицинских наук, И. & СВЕТЛИКОВА, кандидат медицинских наук, Н. Л. БРУТЦОВА, зав. лабораторией
Известно, что в ответ щ действие канцерогенного фактора любой природы или щ спрятанное возникновение опухолеэрй клетки включаются гомеопатические механизмы защиту регу-ляторного характера, в частности системы гемостаза [1, 2, 3, 51, состояние которой отражает интенсивность защитной реакции организма и может служить определенным показателем щш диагностика и прогнозировании за-вдевания.
Рак молочной железы наиболее частая форма злокачественных новообразований у женщин. Отмечается повсеместное нарастание заболеваемости этой формой опухолей. Одним из ме-
тодов лечения рака молочной железы является оперативный. Тромбозы и эмболии — частое и тяжелое осложнение хирургических вмешательств [4, б]. Патогенез внутрисосудистого свертывания крови у больных, перенесших операцию, сложный и многогранный. Эмоционально-психическое напряжение в
ожидании операции, наркоз, хирургическая травма, боль, обездвиженность в послеоперационном периоде, введение в лечебных целях ряда фармакологических средств немаловажны в ге-незе тромбообразования.
Для выявления предтромботического
состояния и коагулопатий геморрагического характера у больных раком мо-
